Повышение неспецифической резистентности кроликов на фоне применения пробиотических штаммов лактобацилл Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

ЭФФЕКТИВНОЕ № 7 сентябрь

животноводство 2019

4

87

|.24411/9999-007А-2019-1057 , , 1.92:612.017.1

''Овчарова А.Н.; ¿старшийВаучный сотрудникРйандидаТщиологичесКиХнаук, лабораториИйммУнобиотех-нологии и микробиологии " " ' ~

Софронова О.В., научный сотрудник, кандидат технических наук, лаборатории иммунобиотехнологии и С микробиологии

Полякова Л.Л., младший научный сотрудник, лаборатории иммунобиотехнологии и микробиологии

Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания животных -филиал ФГБНУ «Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста»

£

ч

Ш

*

< ■

ПОВЫШЕНИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ КРОЛИКОВ НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ЛАКТОБАЦИЛЛ

Аннотация. Для коррекции и профилактики нарушений микрофлоры широко используются микробные препараты - пробиотики, оказывающие положительное воздействие на состав кишечной микрофлоры, иммунную систему животных. Особую роль в становление нормальной микрофлоры играют лактобациллы. В 2009 г. в лаборатории биотехнологии микроорганизмов ВНИИФБиП была составлена ассоциация из четырёх штаммов лактобацилл: Lactobacillus casei LBR 1/90 (ВКМ B-2780D), Lactobacillus paracasei LBR 5/90 (ВКМ B-2781D), Lactobacillus rhamnosus LBR 33/90 (ВКПМ В-11277), Lactobacillus rhamnosus LBR 44/90 (ВКПМ В-11278), выделенных из пищеварительного тракта телят, получившая название тетралактобактерин (ТЛБ). Входящие в состав пробиотика штаммы непатогенны, обладают широким спектром антагонистической активности против бактерий родов Staphylococcus, Streptococcus, Escherichia и Salmonella.

Ключевые слова: Кролики, пробиотики, неспецифическая резистентность, Lactobacillus.

Введение.

Для коррекции и профилактики нарушений микрофлоры широко используются микробные препараты — пробиотики, оказывающие положительное воздействие на состав кишечной микрофлоры, иммунную систему животных [1]. Установлено, что количественные изменения нормальной микрофлоры животных наступают уже в первые часы после введения пробиотических штаммов. Через две недели наблюдается подавление развития условно патогенных этеробактерий, возрастание количества нормальной кишечной палочки, энтерококков бифидобактерий и лактобацилл. Отмечаются изменения

Annotation. For the correction and prevention of microflora disorders are widely used microbial preparations - probiotics, which have a positive effect on the composition of the intestinal microflora, the immune system of animals. Lactobacilli play a special role in the formation of normal microflora. In 2009. in the laboratory of biotechnology of microorganisms vniifbip was made Association of four strains of lactobacilli: Lactobacillus casei LBR 1/90 (VCM-2780D), Lactobacillus paracasei LBR 5/90 (VCM-2781D), Lactobacillus rhamnosus LBR 33/90 (VCM-11277), Lactobacillus rhamnosus LBR 44/90 (VCM-11278), isolated from the digestive tract of Calves, called tetralactobacterin (TLB). The strains included in probiotics are non-pathogenic and have a wide range of antagonistic activity against bacteria of the genera Staphylococcus, Streptococcus, Escherichia and Salmonella. The aim of this work was to study the effect of tetrasaccharide on nonspecific immunity and physiological parameters of rabbits.

Keywords: Rabbits, probiotics, nonspecific resistance, Lactobacillus.

цитокинового профиля и морфологические изменения в органах пищеварительной (толстый отдел кишечника, печень) и иммунной (селезенка) систем организма экспериментальных животных [2,9].

Особую роль в становление нормальной микрофлоры играют лактобациллы. Они обладают выраженной антагонистической активностью в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также в отношении других видов и даже родственных штаммов лактобацилл [1], Лактобациллы оказывают выраженное иммуностимулирующее и противоопухолевое воздействие. Они принимают участие в регулирова-

88 ЛШ Кролиководство

www.agroyug.ru

нии оптимальных уровней метаболических процессов, ингибируют адгезию, пенетрацию и размножение патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, обладают широким спектром антимикробных механизмов, продуцируют активные вещества белковой и небелковой природы [3]. Иммуномодулирующий эффект лакто-бацилл осуществляется посредством влияния на созревание и функционирование иммуннокомпетентных органов, увеличение фагоцитарной активности макрофагов и нейтрофилов, стимуляции синтеза интерферо-нов и цитокинов [4,5]

Среди биологически активных веществ, секретируе-мых лактобактериями, большую роль играют ферменты. Так, например, гидролазы, обеспечивают клетки низкомолекулярными продуктами распада компонентов питания, которые являются основными или дополнительными факторами роста, необходимыми для полноценного развития популяций молочнокислых бактерий и кроме того могут быть использованы организмом-хозяином [6—8].

В связи с вышеизложенным возникает необходимость разработки новых пробиотических препаратов с целью нормализации микрофлоры кишечника, повышение неспецифической резистентности организма.

В 2009 г. в лаборатории биотехнологии микроорганизмов ВНИИФБиП была составлена ассоциация из четырёх штаммов лактобацилл: Lactobacillus casei LBR1/90 (ВКМ В-2780D), Lactobacillus paracasei LBR5/90 (ВКМ В-2781D), Lactobacillus rhamnosus LBR33/90 (ВКПМ В-11277), Lactobacillus rhamnosus LBR44/90 (ВКПМ В-11278), выделенных из пищеварительного тракта телят, получившая название тетралактобактерин (ТЛБ). Входящие в состав пробиотика штаммы непатогенны, обладают широким спектром антагонистической активности против бактерий родов Staphylococcus, Streptococcus, Escherichia и Salmonella, показывают высокую адге-зивность и устойчивы к ряду антибиотиков, устойчивы к неблагоприятным факторам ЖКТ, сбраживают широкий спектр углеводов, отвечают требованиям, предъявляемым к микроорганизмам-пробиотикам [7].

Целью данной работы явилось изучение влияния тетралактобактерина на неспецифический иммунитет и физиологические показатели кроликов.

Материалы и методы: Эксперимент был проведен на кроликах калифорнийской породы. Из 3-месячных животных были сформированы две группы, опытная группа в дополнение к основному рациону (ОР) получала лиофлизированный препарат тетралактобактерин, содержащий 1х1010 КОЕ. жизнеспособных клеток. животные контрольной группы получали основной рацион. Препарат в количестве 30 мг на голову разводили в 1 мл дистиллированной воды и выпаивали из пипетки по 1 мл каждому кролику ежедневно в течение 21 дня, кроликам контрольной группы выпаивали дистиллировнную воду в том же объеме.

Продолжительность опыта составила 1 месяц, в течение которого ежедневно осуществляли контроль за общим состоянием животных, в начале и конце опыта проводили взвешивание и учитывали потребление кормов.

Скармливание молодняку кроликов на протяжении 1 месяца препарата тетралактобактерин не оказало неблагоприятного воздействия на функционирование у них пищеварительной, сердечно-сосудистой и мочеполовой систем. Заболеваний и падежа животных во всех группах не было.

Гематологические исследования показали, что основные параметры крови животных контрольной и опытной групп после трехнедельного скармливания препаратов находились в пределах физиологической нормы. Количество эритроцитов в крови животных опытной группы было ниже, чем в контроле, однако, содержание гемоглобина было одинаковым. В лейкоцитарной форму-

Таблица 1.

Гематологические показатели и показател и неспецифической резистентности крови кроликов

Показатели Опыт Контроль

Гемоглобин, г/л 127,25±3,12 127,00±1,78

Количество лейкоцитов, тыс/ мкл 6,80±0,14 7,84±0,53

Количество эритроцитов, млн/мкл 7,41±0,22* 8,53±0,32

Базофилы 1,6 1,1

Эозинофилы 1,5 1,8

Псевдоэозинофилы:

юные - -

палочкоядерные 0,8 0,3

сегментоядерные 13,5 13,6

Лимфоциты 80,5 81,0

Моноциты 2,1 2,2

Фагоцитарная активность,% 69,4±3,69** 47,1±1,29

Фагоцитарный индекс 5,06±0,16* 3,93±0,15

Бактерицидная активность сыворотки крови,% 56,4±2,09** 37,8±3,2

Лизоцимная активность сыворотки крови, мкг/мкл 45,7±0,64 43,9±0,98

Примечание: *- р<0,05, ** — р<0,01

Таблица 2.

Масса внутренних органов кроликов (M+m, n=4)

Показатели Группы животных

Опыт Контроль

Сердце, г 8,33±0,45** 6,46±0,40

Лёгкие, г 12,53±0,49 11,78±0,89

Печень, г 92,83±10,61 76,9±4,39

Почки, г 19,23±1,43* 14,96±0,63

Селезёнка, г 1,45±0,09 1,33±0,17

Таблица 3.

Биохимические показатели крови кроликов (M+m, n=4)

показатели Группы животных

Опыт Контроль

Альбумин, г/л 41,04±2,21 35,91±4,01

Общий белок, г/л 67,40±2,78* 59,90±5,14

Мочевина, ммоль/л 7,86±0,78 9,31±0,51

Креатинин, мкмоль/л 155,87±7,14 164,66±6,03

Глюкоза, моль/л 10,67±1,11 10,28±1,12

ле у кроликов опытной и контрольной групп существенных различий не наблюдалось, все параметры находились в пределах физиологической нормы.

Результаты и обсуждения. Наблюдалась стимуляция неспецифического иммунитета. У крольчат опытной группы в сравнении с контролем фагоцитарная активность достоверно ^<0,01) возрастала — 69,4 против 47,1% в контроле. Бактерицидная активность достоверно возрастала ^<0,01) у кроликов, получавших ТЛБ — 69,4% против 37,8% в контроле.

Содержание лизоцима в сыворотке крови (табл. 1) у животных как контрольной, так и опытной групп практически не изменялось.

При исследовании мочи у кроликов всех групп в ней не было обнаружено сахара и крови, но как у контроль-

ЭФФЕКТИВНОЕ № 7 сентябрь

животноводство 2019

4

89

щ

БИНОВАК®IDD

ных, так и у опытных животных моча содержала небольшие количества белка. Моча имела жёлтый цвет и рН — в контрольной груп-пе—8,0, в опытных группах — 8,5, эти параметры свидетельствуют о нормальной функции мочевой системы как у контрольных, так и у животных, получавших препарат.

Патологоанатомические исследования внутренних органов кроликов.

При проведении послеубойного осмотра тушек и внутренних органов кроликов в них не было обнаружено видимых патологических изменений (табл. 2).

Легкие—упругие, трахея и бронхи — чистые, отечности, абсцессов и кровоизлияний нет. Масса сердца у кроликов опытной группы достоверно больше, чем у контрольной группы, перикард, эпикард и эндокард без инфильтратов и кровоизлияний.

Печень и селезенка: края острые, паренхима вишневого цвета, очагов некроза и абсцессов нет. Желчный пузырь в норме.

Серозные оболочки желудка, тонкого и толстого отделов кишечника гладкие и блестящие. Слизистые оболочки серовато-розовые, без геморагий и очагов воспаления.

Почки у кроликов опытных групп достоверно увеличены (Р<0,01) по сравнению с контролем, но не имеют признаков воспаления и кровоизлияний. Для установления причины этого явления необходимо было бы провести морфологические исследования.

Биохимические исследования сыворотки крови кроликов

В сыворотке крови подопытных животных были определены общий белок, альбумин, креатинин, мочевина и глюкоза (табл. 3).

По количеству общего белка в сыворотке крови кроликов всех групп наблюдалось соответствие физиологическим нормам [8]. Количество альбумина варьировало в пределах физиологической нормы, которая составляет в сыворотке крови кроликов от 37,9 до 50,6 г/л.

Из углеводов основным источником энергии в организме является глюкоза. Физиологическая норма у кроликов 4,16—5,27 ммоль/л. У подопытных животных содержание глюкозы было выше физиологической нормы, по-видимому, это связано с присутствием в рационе значительного количества сена, как источника трудно-переваримых углеводов.

Показатели креатинина мало отличались у кроликов опытных и контрольной групп. Показатели мочевины были достоверно ниже во 2-й и 3-й опытных группах по сравнению с контролем.

Заключение.

Таким образом, применение пробиотических препаратов на основе лактобацилл оказывает значительное влияние на факторы неспецифической резистентности лабораторных животных.

ЛИТЕРАТУРА

1. Глушанова Н. А. Биологические свойства лактобацилл // Бюллетень сибирской медицины. 2003. № 4. С. 50 — 58.

2. Козловский Ю.Е., Хомякова Т.И., Козловская Г.В., Магомедова А.Д., Пу-стовалов С.А., Чертович Н. Ф. Некоторые аспекты взаимодействия пробиотических бактерий с организмом экспериментальных животных Кролиководство и звероводство. 2018. № 1. С. 28—32.

3. Бондаренко В.М., Чупринина Р.П., Аладышева Ж.И., Мацулевич Т.В. Пробиотики и механизмы их терапевтического эффекта/У Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология, 2004, 3, 83 — 87.

4. Тераевич А.С., Закрепина Е.Н. Влияние пробиотиков на клеточный и гуморальный иммунитет Электронный научный журнал. 2016. № 7 (10). С. 23 — 27.

5. Галочкин В.А., Остренко К.С., Галочкина В.П. Взаимосвязь нервной, иммунной, эндокринной систем и факторов питания в регуляции резистентности и продуктивности животных // Сельскохозяйственная биология. — 2018. № 4. — С. 673 — 686.

6. Рябая Н.Е., Самарцев А.А. Ферментативная активность бифидо- и лак-тобактерий, входящих в состав пробиотиков. Материалы Междунар. науч. — практ. конф. 25 — 28 мая 2005 г., Минск-Нарочь / Сост. и общ. ред. А.Н. Евтушенкова. — Мн.: РИВШ, 2005.с.218 — 219.

7. Остренко, К.С., Галочкина В.П., Колоскова Е.М., Галочкин В.А. Органические соли лития — эффективные антистрессовые препараты нового поколения// Проблемы биологии продуктивных животных. — 2017. — № 2. — С. 5 — 28.

8. Зинченко Е. В., Панин А. Н., Панин В. А. Практические аспекты применения пробиотиков // Ветеринарный консультант. 2003. № 3. С. 12 — 14.

9. Ефремов А.П., Мартынов П.Н. Интерьерные различия крольчат разного возраста fundamental research ФГБОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина» № 5, 2012.

» ПРОФИЛАКТИКА И ЛЕЧЕНИЕ ДЕРМАТИТА ПАЛЬЦЕВ, МЕЖПАЛЬЦЕВОГО СВОДА И КОЖНОГО НЕКР0БАКТЕРИ03А

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОЛОКА И МЯСА 6EJОГРАНИЧЕНА ПРЕВОСХОДНАЯ ПЕРЕНОСИМОСТЬ ПРЕПАРАТА

PA JPAbOTAHO В ГЕРМАНИИ

ООО «БиоМедЕетСервнс» а <4951 220-82-46. & (985> 511 -67-05 SiiiaH; bm vsiibmvs. ги, www.bmvs.nj