CC BY
29
сердца (в т.ч. инфаркта миокарда), церебрального ише-мического инсульта, атеросклероза магистральных сосудов, тромбоза артерий и вен, хронической сердечной недостаточности и ухудшает прогноз при этих патологиях. Сократимость миокарда представляет базисную характеристику насосной функции сердца, и ее определение при патологии представляет значительный интерес. В литературе неоднократно описывается снижение сократительной активности миокарда на фоне СД2, однако последние исследования in vivo на ишемизированном миокарде экспериментальной модели вносят сомнения в неопровержимость этого утверждения.
Цель. Изучить сократительную активность изолированных фрагментов миокарда пациентов с ишеми-ческой болезнью сердца при её моновариантном развитии и ассоциации с сахарным диабетом 2-го типа.
Материал и методы. В исследование вошли 35 пациентов мужского пола (средний возраст 50,6± 2,4 лет) с подтвержденным диагнозом - хроническая ишемическая болезнь сердца (III-IV ФК по NYHA), стенокардия напряжения II-IV ФК, с мультисосудистым поражением коронарных артерий. Всем пациентам проводилась операция аортокоронарного шунтирования и они дали согласие на участие в исследовании. Критериями включения в основную группу было наличие верифицированного СД 2-го типа. Эту группу составили 21 пациент с СД2, стаж диабета составлял 1-3 года. Значение гликированного гемоглобина в группе составляло 7,6%. У 14 пациентов на основе клинико-лабораторных исследований не было диагностировано нарушение углеводного обмена, эти пациенты составили группу сравнения. Для исследования сократительной активности (изометрический режим) были использованы мышечные полоски из ушка правого предсердия, иссекаемого при подклю-
чении аппарата искуственного кровообращения. Диаметр мышечных полосок составил 0,5-0,7 мм. Исследуемые образцы, помещенные в оксигенированный раствор Кребса-Хензеляйта на установке Standard system for musde investigator SH Heidelberg Germany при 36,5°С стимулировали при базовой частоте 0,5 Гц. В качестве тестового воздействия на мышцы использовали тест «Post-rest». При его выполнении кратковременно, на 4-60 сек., прекращали электрическую стимуляцию мышц.
Результаты. При моновариантном развитии ИБС сила инотропного ответа на выполнении теста «Postrest» оставалась практически на уровне базовых значений. При этом увеличение длительности периода покоя не влияло на амплитуду инотропного ответа. У пациентов с ИБС, отягощенной СД, сокращение мышечных полосок после выполнения теста «Post-rest» превышало базовые значения инотропной активности. Кроме того, наблюдалась отчетливая зависимость увеличения амплитуды инотропного ответа от длительности периода покоя. Так, после 4 секундного периода покоя, потенциация инотропного ответа составляла 17%, а после 60 секундного периода покоя была статистически значимо(р<0,05) выше и составляла уже 62%.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что при сочетанном развитии ИБС и СД2 на ранних стадиях развития патологии проявляется кардиопротективный эффект этих заболеваний. Улучшение сократимости проявляется в потенциа-ции инотропного ответа миокарда после периодов покоя, что является положительным свойством,ха-рактеризующим сократительный резерв миокарда. В предыдущих исследованиях была показана корреляция данного эффекта с сохранением уровня каль-ций-транспортирующих белков саркоплазматического ретикулума кардиомиоцитов.
ПОВЫШЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ТРОПОНИНА-1 В СЛЮНЕ ПАЦИЕНТОВ С ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА КОРРЕЛИРУЕТ СО СТАДИЕЙ РАЗВИТИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ
В.А. БУНИН \ К.Л. КОЗЛОВ \ Н.С. ЛИНЬКОВА Е.М. ПАЛЬЦЕВА 3 1Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии, Санкт-Петербург, Россия 2Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия 3Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского, Москва, Россия
Введение. Тропонины являются специфичными маркерами повреждения миокарда и предикторами развития сердечно-сосудистой патологии. В работе Kaess В.М. et а1. (2017) было показано, что в европейской популяции лиц среднего и пожилого возраста экспрессия тропонина-1 в ткани миокарда возрастает при атеросклерозе в сочетании с ишемической болезнью сердца (ИБС) в 99% случаев. При этом уровень экспрессии тропонина-1 зависит от пола и возраста пациентов. В настоящее время для диагностики и оценки эффективности лечения сердечно-сосудистой патологии предлагается использовать периферические ткани. В связи с этим целью работы стало изучение концентрации тропонина-1 в слюне лиц пожи-
лого возраста с ИБС на различных стадиях развития этого заболевания.
Материалы и методы исследования. Материал слюны у здоровых доноров (без сердечно-сосудистой патологии, 34 человека) и пациентов с ИБС 1-й (17 человек), 2-й (20 человек) и 3-й стадией ИБС (15 человек) был получен в Клинике сердечно-сосудистой хирургии Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова (Санкт-Петербург) от лиц пожилого возраста (68±2,3 года). Пациенты дали письменное согласие на участие в исследовании. Пробу слюны в количестве 5 мл забирали в утренние часы. За 1 час до забора материала пациенты не принимали пищу и не проводили гигиену полости рта. Непосредственно перед
процедурной все обследуемые полоскали ротовую полость питьевой водой. Определение концентрации тропонина-1 в слюне осуществляли методом имму-ноферментного анализа (BioTek Instruments, модель ELx808), с использованием наборов Troponin-1 - EIA kit (DRG International Inc., Springfield New Jersey, USA), включающего материалы для прямого определения тропонина в слюне человека. Статистическая обработка экспериментальных данных включала в себя подсчет среднего арифметического, стандартного отклонения и доверительного интервала для каждой выборки и проводилась в программе «Statistica 6.0». Критический уровень достоверности нулевой гипотезы (об отсутствии различий) принимали равным 0,05.
Результаты исследования. В слюне у людей пожилого возраста без сердечно-сосудистой патологии
среднее количество тропонина-1 составило 0,67 нг/мл. У лиц с 1-й и 2-й стадией развития ИБС средняя концентрация тропонина-1 достоверно возрастала соответственно в 2 и 3,4 раза (до 1,37 и 2,28 нг/мл). У лиц с 3-й стадией ИБС средняя концентрация тропонина-1 повышалась в 5,1 раза (до 3,42 нг/мл).
Заключение. В исследованиях Klichowska-Palonka М. et а1. (2015) в слюне пациентов с ИБС отмечено повышенное содержание тропонина, что подтверждает проведенное нами исследование. Выявленная нами корреляция концентрации тропонина-1 в слюне пациентов с ИБС со стадией развития заболевания указывает на прогрессирование патологического процесса и в сочетании с другими методами диагностики может применяться для оценки эффективности лечения ИБС у лиц пожилого возраста.
УРОВЕНЬ ЦИТОКИНА MCP-1 В ПЕРИФЕРИЧЕСКИХ ТКАНЯХ КАК МАРКЕР ПРОГРЕССИРОВАНИЯ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СЕРДЦА
У ЛИЦ ПОЖИЛОГО ВОЗРАСТА
В.А. БУНИН 1, Н.С. ЛИНЬКОВА Е.М. ПАЛЬЦЕВА 3, К.Л. КОЗЛОВ 1 1Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии, Санкт-Петербург, Россия 2Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Санкт-Петербург, Россия 3Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского, Москва, Россия
Введение. MCP-1 (monocyte chemoattractant protein 1) — цитокин, который относится к группе CC-хемокинов (Р-хемокинов). MCP-1 является важнейшим фактором хемотаксиса моноцитов в очаг воспаления. MCP-1 широко вовлекается в нормофи-зиологические (ангиогенез) и патофизиологические процессы в организме, участвуя в развитии атеросклероза и ишемической болезни сердца (ИБС). Концентрация MCP-1 в плазме крови в норме составляет 0,228—0,475 нг/мл. Источником синтеза MCP-1 служит широкий спектр клеток: фибробласты, моноциты и макрофаги, эндотелиоциты, лейомиоциты, кардио-рабдомиоциты, кортикальные эпителиоциты почки, кератиноциты, эпителиоциты линии HEP-2, интести-нальные эпителиоциты, остеобласты, адипоциты печени, хондроциты, меланоциты, мезотелиоциты, клетки стромы костного мозга, астроциты. Таким образом, исследование концентрации белка MCP-1 в слюне и эпителиальных клетках может являться одним из предикторов развития сердечно-сосудистой патологии.
Цель работы. Изучить экспрессию цитокина МСР-1 в буккальном эпителии и концентрацию этого протеина в слюне у лиц пожилого возраста с ИБС.
Материалы и методы исследования. Материал слюны и буккального эпителия у здоровых доноров (без сердечно-сосудистой патологии, 34 человека) и пациентов с 1-й (17 человек) и 3-й стадиями ИБС (15 человек) был получен в Клинике сердечно-сосудистой хирургии Военно-медицинской академии им. С.М. Кирова (Санкт-Петербург). Весь материал был получен от лиц пожилого возраста (67±2,4 года). Пациенты дали письменное согласие на участие в исследовании. Слюну (5 мл) и буккальный эпителий забирали в период с 10 до 12 час утра. За 1 час до забора мате-
риала пациенты не принимали пищу и не проводили гигиену полости рта. Непосредственно перед процедурной все обследуемые полоскали ротовую полость питьевой водой. Определение концентрации МСР-1 в слюне осуществляли методом иммуноферментного анализа (BioTek Instruments, модель ELx808), с использованием набора (HS)-MCP-1 EIA kit (DRG International Inc., Springfield New Jersey, USA), включающего материалы для прямого определения цитокина MCP-1 в слюне человека. Иммунофлуоресцентную микроскопию буккального эпителия проводили с использованием первичных антител к MCP-1 (1:150, Novocastra), вторичных антител и набора для иммунофлуорес-центной визуализации щелочной фосфатазы Vector Red. Изучение препаратов проводили в конфокальном микроскопе Olympus FluoView FV1000. Далее осуществляли морфометрический анализ изображений в программе «Видеотест-Морфология 5.2» по показателю относительной площади экспрессии.
Результаты исследования. В слюне у людей пожилого возраста без сердечно-сосудистой патологии среднее количество MCP-1 составило 0,37 нг/мл. У лиц с 1-й и 3-й стадией ИБС этот показатель достоверно возрастал соответственно в 2,7 раза (до 1,15 нг/мл) и в 6 раз (до и 2,21 нг/мл). В буккальном эпителии у лиц пожилого возраста средняя относительная площадь экспрессии MCP-1 составила 0,65%. У пожилых пациентов с 1-й и 3-й стадией ИБС этот показатель достоверно возрастал соответственно в 1,6 раза (до 1,07%) и в 1,8 раза (до 1,15%).
Заключение. Концентрация MCP-1 в слюне и экспрессия этой сигнальной молекулы в буккальном эпителии у лиц пожилого возраста увеличивается при прогрессировании ИБС. Таким образом, экспрессия
