CC BY
41
УДК 636: 612.664+619:61819
Получение нативного препарата цитоплазматического антигена Staph. aureus и испытание его лечебной эффективности при субклиническом мастите лактирующих коров
Л.А.Черепахина, к.в.н., ФГОУВПО ОрелГАУ
Насущной проблемой в борьбе со стафилококковыми инфекциями является создание препаратов, способных противостоять как токсическому, так и микробному фактору патогенности стафилококков. Так в настоящее время получены препараты (стафилококковый анатоксин, ферменты стафилококка), которые испытаны в качестве лечебных средств при маститах коров кокковой этиологии. [1, 2, 4, 5]. Однако токсины и ферменты стафилококков, как известно, не являются единственными факторами патогенности данного инфекционного агента. Поэтому исследователи интенсив о изучают а тиге ые свойства бактериаль ых структур возбудителя с целью выяснения их участия в стимуляции и регуляции специфической резисте т ости к стафилококковой инфекции и возможного их использова ия для изготовле ия как лечеб ых, так и имму опрепаратов.
Михайлова Н.А. и др.,(1984) Прохоров В .Я., (1990) сообщили, что цитоплазматический антиген (ЦПА) золотистого стафилококка, как атив ый, так и адсор-бирова ый, являются слабореактоге ыми, имму о-генными и клинически эффективными препаратами, и могут быть использова ы в медици ской практике в качестве самостоятель ых средств, а также при ко ст-руировании комплексных иммунопрепаратов. При этом Прохоров В.Я., (1990) установил, что у больных с посттравматическими повреждениями профилактическое применение адсорбированного ЦПА способствовало заживлению ран первичным натяжением, а иммунизация нативным ЦПА быстрее купировала нагнои-тельный процесс и стимулировала эпителизацию.
Учитывая вышесказанное, провели испытание двух способов получения ЦПА золотистого стафилококка, выделе ого из секрета выме и коров с субкли-ническим состоянием молочной железы и идентифи-цирова ого как патоге мастита.
Материалы и методы исследования
Первый метод получения ЦПА Staph. aureus был аналогичен методу, предложенному Прохоровым В.Я., (1990).
Второй метод получения препарата был предложен ами и отличался от первого тем, что меха ическую дези теграцию микроб ых тел заме или химической, основываясь на том, что, как указывает Самуйленко
А.Я. и др., (2000), химические методы дезинтеграции микробных тел являются более экономичными, так как не используют труднодоступные приборы - дезинтеграторы.
В качестве химического дезинтегратора использовали Ципролет, который добавляли к полученной микробной суспензии и вели термостатирование при 37°С в тече ие шести суток.
Результаты и их обсуждение
Стерильные серии нативного ЦПА, полученные первым и вторым методами содержали, соответстве н-но, 0,05 г/мл и 0,04 г/мл белка (при определении методом Кьельдаля).
Таким образом, химическая дезинтеграция микробных тел Staph. aureus Ципролетом оказалась менее эффективной для получения нативного ЦПА.
Получе ые препараты (как первым, так и вторым методом) испытали на реактогенность на белых мышах массой 14-16 г. Для этого пяти животным подкожно в объеме 0,5 мл вводили вышеуказанные препараты, затем за ними наблюдали в течение 10 дней. Контроль-ым мышам и ъецировали подкож о в том же объеме стерильный физиологический раствор.
Было установлено, что за весь период наблюдения как опытные, так и контрольные мыши оставались здоровыми, а на месте введе ния препаратов реакции не было. Следователь о, препараты оказались ареактоге ы.
При яв во в има ие большее количество белка в препарате ЦПА, получе ого первым методом, испытали его терапевтическую эффективность при скрытом мастите лактирующих коров.
Были сформирова ы две группы живот ых по 5 живот ых в каждой (опыт ая и ко троль ая) из лак-тирующих коров с субкли ическим маститом од ой четверти выме и. Ко троль ых живот ых лечили мас-тисаном А (по инструкции к препарату), а опытных -предложенным нами методом. А именно, после полного сдаивания пораженной скрытым маститом четверти вымени в нее вводили 20 мл стерильного физиологического раствора, затем через 20 мин его сдаивали и вводили 20 мл испытуемого препарата. Лечение животных проводили 3 дня подряд после вечерней дойки. Во время лече ия побоч ого действия препарата (отек выме и, повыше ие мест ой температуры, изме е ие характера секрета) отмечено не было.
До лечения животных и через 10 дней от последнего введе ия препаратов из четвертей выме и коров в асептических условиях отбирали секрет а бактериологическое исследова ие.
В группе ко троль ых живот ых в секрете выме и излече ых четвертей выме и патоге ы мастита отсутствовали, лечебный эффект составлял 100% (табл.1). В группе опытных коров из пяти животных удалось вылечить четверых, то есть лечеб ый эффект испытуемого метода составил 80%. При этом в секрете всех излеченных четвертей вымени Staph. aureus также отсутствовал.
ВЫ1ВОДЫ1
1. Больший «урожай» нативного препарата цитоплазматического а тиге а Staph. aureus получе при механической дезинтеграции микробных тел.
2. Лечеб ая и са ирующая эффектив ость (в от-оше ии золотистого стафилококка) ЦПА Staph. aureus
при и субкли ическом мастите лактирующих коров составили, соответстве о, 80 и 100%.
Таблица 1 - Терапевтическая эффективность ЦПА Staph. aureus при субкли ическом мастите лактирую-
Примечание: «+» — тест положительный; «-» — тест отрицательн ыш
Литература
2. Гаврилин, A.C. Разработка ферментного препарата для лечения больных маститом ко-ров/А.С.Гаврилин//Автореф. кандидата вет. наук.- Мо-сква.-2002.-23с.
3. Демидова, Л.Д. Ветеринарно-санитарные аспекты борьбы с маститом коров и повышение санитарного качества молока / Л.Д.Демидова // Автореф. доктора вет. наук.-Москва.-1997.-49с.
4. Михайлова, H.A. Использование протектив-ных антигенов в качестве компонента ассоциированного препарата против условно-патогенных инфекций /H.A. Михайлова; В.Я.Прохоров; О.В. Кунягина // Ак-туаль ые вопросы бактериологии и приклад ой иммунологии.- Тбилиси.- 1984.-С.46-47
5. Поздеев, А.В. Совершенствование технологии получения стафилококковой анатоксин-вакцины и испытание ее эффективности при мастите у коров / А.В. Поздеев // Автореф.кандидата вет. наук.-Курск. - 1999. - 18с.
6. Проскурин, Ю.Н. Биопрепараты при мастите коров / Ю.Н. Проскурин // Аграрная наука.-1998.-№7.-С.31-32
7. Прохоров, В.Я. Соматические антигены золотистого стафилококка как ос ова созда ия и усовершенствования специфических иммунопрепаратов /
В.Я. Прохоров // Автореф. доктора мед. наук.-Москва.-1990.-43с.
УДК 633.2/.4.003(470.321)
Современные резервы увеличения производства кормов
В.В. Коломейченко, член-корреспондент РАСХН, ФГОУВПО ОрелГАУ
В настоящее время в Российской Федерации площадь сельхозугодий составляет 9% от общей мировой величины. В то же время у нас только 2,5% населения от общей численности на Земле. Поэтому в нашей стране имеются все возможности, чтобы не только хорошо кормить самих себя, но и продавать продукты питания другим странам. Однако в последние годы доля импорта продовольствия из-за рубежа постоя о возрастает, и в 2005 году о а уже составила 33% (в основном мяс ные и молочные продукты). Специалисты считают, что продовольстве ая езависимость любой стра ы может быть только тогда, когда в общем объеме потребления продуктов питания импорт составляет не более 20%. Ос нов ная причина такого положения в нашей стране заключается в том, что за счет малограмотных социально-экономических реформ сельское хозяйство было отброшено назад на несколько десятилетий. Это привело к з ачитель ому уме ьше ию посев ых площадей основных полевых культур и валовых сборов (табл. 1, 2, 3). Так, общая посевная площадь в Российской Федерации уменьшилась с 124,2 млн. га в 1971-1975 гг. до 81,4 млн. га в 2001-2005 гг., т.е. более чем на 40 млн. га, в том числе зерновых - с 74,9 до 44,7 (на 30,2 млн. га) и кормовых культур - с 37,8 до 25,6 (на 12,2 млн. га).
Урожай ость зер овых культур за эти годы возросла с 12,9 ц/га до 18,8 ц/га (в 1,5 раза), сахарной свеклы - с 142 до 241 ц/га (в 1,7 раза). Урожайность картофеля и овощей почти е изме илась, а подсол еч ика даже ем ого с и-зилась - с 11,4 до 9,9 ц/га (табл. 2). Хотя за этот период удалось повысить урожай ость екоторых культур, о производство продуктов расте иеводства все рав о оче ь силь о сократилось (табл. 3).
Так, валовые сборы зерна снизились с 101,4 млн. т в 1971-1980 гг. до 72,1 млн. т в 1996-2005 гг. и сахарной свеклы с 23,1 млн. т до 16,3 млн. т. Меньше всего сократились валовые сборы картофеля - с 44,0 мл . т до 35,0 мл . т, а производство подсол еч ика и овощей даже немного увеличилось (табл.3).
В 2005 г. из общего валового сбора основных продуктов расте иеводства а долю сельскохозяйстве ых организаций приходилось: зерно - 80,2%; сахарная свекла -87,8%; семена подсолнечника - 72,5%; картофель - 6,3% и овощи - 14,0%. Крестья ские (фермерские) хозяйства занимали следующее положение: зер но - 18,3%; сахарная свекла - 10,4%; семе а подсол еч ика - 26,6%; картофель
- 2,1% и овощи - 5,7%. Производство основных продуктов растениеводства хозяйствами населения составляло: зер но
- 1,5%; сахар ная свекла - 1,8%; семе на подсолнечника -0,9%; картофель - 91,6% и овощи - 80,3%. Кроме того, на них также приходится значительная часть животноводческой продукции: 51,8% - молоко и мясо; 25,2%
- производство яиц. Самые низкие показатели по валовым сборам продуктов растениеводства в нашей стране были в 1996-2000 гг., а в 2001-2005 гг. уже отмечался небольшой рост. Чтобы закрепить и повысить достигнутые результаты, требуется целенаправленная работа во всех хозяйствах различ ых форм собстве ости.
щих коров
№ п/п Пора- женная четверть вымени коровы До лечения После лечения
бмт Проба отстаи ва ия Пато- ген масти- та БМТ с 2% мастиди ом Проба отстаи ва ия Пато- ген масти- та
Контрольная г руппа
1. 1 + + Staph. aureus E. coli - - -
2. 3 + + Staph. aureus - - -
3. 2 + + E. coli - - -
4. 1 + + Staph. aureus - - -
5. 4 + + Strept. agalact. E. coli - - -
Опытная группа
1. 2 + + Staph. aureus Bac. subtilis - - -
2. 1 + + Staph. aureus - - -
3. 4 + + Staph. aureus Bac. subtilis + + Bac. subtilis
4. 2 + + Staph. aureus - - -
5. 1 + + Staph. aureus - - -
