CC BY
13
76 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
Внутриклеточную локализацию белков р53 и p21 исследо- результаты. Получена гибридома IgG1 изотипа, ставали методом флуоресцентной микроскопии. Способность бильно продуцирующая МКА к белку GAGE. Полученные комплексов платины вызывать апоптоз исследовали мето- МКА 4G1-D2 специфически реагировали с белковыми дом проточной цитофлуориметрии после окрашивания лизатами клеточных линий меланом Mel Il, Mel Ibr и ли-клеток FITC-меченным аннексином V и йодистым пропи- нией эритромиелоидного лейкоза К562, экспрессирующи-дием, а также по состоянию белка PARP методом иммуно- ми ген GAGE. Методом иммуноцитохимии выявлена также блоттинга. Для ингибирования эффекторных каспаз ис- специфическая цитоплазматическая реакция у линии пользовали Z-VEID-FMK (ингибитор каспазы-6) К562. C клетками крови здоровых доноров и линии легоч-и Z-DEVD-FMK (ингибитор каспазы-3 и -7). ных фибробластов WI-38, в которых отсутствует экспрес-результаты. Все исследуемые комплексы платины сия гена GAGE, специфической реакции антител не выяв-в концентрации IC50 вызывают накопление в ядре белка лено. р53 через 12 ч и белка р21 через 24 ч после введения соеди- Заключение. Полученные МКА могут быть исполь-нений. Результаты проточной цитофлуориметрии показа- зованы для широкого спектра научно-исследовательских ли, что исследуемые комплексы платины вызывают оста- и медицинских целей, в том числе для изучения функ-новку клеточного цикла в ранней S-фазе и индукцию циональных свойств белка и для иммунодиагностики процесса апоптоза. Исследуемые соединения вызывают опухолей. каспазозависимую деградацию белка PARP, которая блокируется ингибиторами каспаз-3, -7 -6. В то же время даже Е.Н. Фишер, Г.В. Раменская, В.В. Смирнов при использовании ингибиторов каспаз наблюдается ча- ПЕПтиды как ПротивооПУХолЕвыЕ стичная деградация белка PARP. лекарственные Средства Заключение. Аминонитроксильные комплексы плати- ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава ны (IV) в концентрации IC50 вызывают р53-зависимую, России (Сеченовский Университет), Москва, Россия каспаза-3-независимую индукцию апоптоза в опухолевых Наряду с сердечно-сосудистыми заболеваниями онко-клетках MCF-7. логия является основной причиной смертности во многих странах мира. Из-за резистентности к лекарственным сред-Ю.П. Финашутина, Н.В. Голубцова, М.А. Барышникова, ствам и отсутствия избирательности действия существуют Н.А. Лыжко, В.А. Мисюрин, А.В. Мисюрин, З.С. Шпрах потребности в создании новых терапевтических препара-ПолУчЕниЕ моноКлонАлЬнЫХ АнтитЕл тов. Пептидные препараты относятся к новым и перспек-4G1-D2 К рАКово-тЕСтиКУлярномУ тивным подходам к лечению онкологических заболеваний. БЕлКУ GAGE Обнаружение пептидных/белковых рецепторов и пепти-ФГБУ«НМИЦонкологии им. Н.Н. Блохина» дов, влияющих на опухоль, позволит создать более эффек-Минздрава России, Москва, Россия тивные и селективные противоопухолевые препараты. введение. Применение моноклональных антител Короткие пептидные средства имеют ряд преимуществ (МКА) широко распространено в онкологии для изучения по сравнению с другими лекарственными препаратами опухолевых антигенов, иммунодиагностики и иммуноте- (ЛП). По сравнению с рекомбинантными белками и анти-рапии опухолей. В качестве потенциальных антигенов телами пептиды обладают меньшей иммуногенностью, для иммунотерапии широкого спектра онкологических более высокой активностью, проникновением в органы заболеваний можно рассматривать, например, белки или опухоли, а по сравнению с малыми органическими GAGE, относящиеся к группе раково-тестикулярных ан- молекулами обладают более высокой эффективностью тигенов. Они экспрессируются в различных типах опухо- и селективностью. лей, но не экспрессируются в нормальных тканях, и вызы- Одним из классических примеров назначения пепти-вают иммунный ответ. Для оценки прогностических дов в качестве противоопухолевых препаратов является и терапевтических свойств антигенов семейства GAGE использование агонистов гонадотропин-рилизинг гормона необходима проверка их экспрессии в опухолевых клетках (аГнРГ), аналоги которого (гозерелин, трипторелин, бусе-на уровне белка с помощью высокоспецифичных МКА релин) являются ведущими препаратами в гормональной к GAGE. терапии рака предстательной железы. Учитывая длитель-Цель исследования. Получить МКА, специфичные ность лечения при данном заболевании, целесообразно к раково-тестикулярному антигену GAGE. выпускать ЛП в виде пролонгированных лекарственных материалы и методы. Мышей линии BALB/С в возра- форм (подкожные капсулы, имплантаты). Длительное выс-сте 3,5 мес 5-кратно иммунизировали (внутрибрюшинно) вобождение имплантируемых препаратов способствует с интервалом 2 нед очищенным рекомбинантным белком улучшению гонадной десенсибилизации, а также повыше-GAGE1. Слияние проводили на 3-й день после последней нию удобства за счет сокращения частоты дозирования. иммунизации с использованием клеток мышиной миело- Помимо назначения пептидов при гормонально-зави-мы NS-1, при помощи раствора полиэтиленгликоля симой опухоли, возможно также их применение при гор-ПЭГ/ДМСО (Sigma). Отбор продуцирующих клонов про- мональных заболеваниях. Примером является синтети-водили методом непрямого ИФА и иммуноблоттинга. ческий аналог соматостатина октреотид, который Фракцию иммуноглобулинов из асцитной жидкости очи- применяется как при опухолях гастропанкреатической щали с помощью аффинной хроматографии. Экспрессию эндокринной системы, так и для лечения акромегалии. гена GAGE в клетках определяли с помощью ОТ-ПЦР. Производство терапевтических пептидов на сегодняшний
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
