CC BY
54УДК 541.64:536
Glazacheva Ekaterina N., Dorofeeva Evgeniia M., Uspen-
skaya Maya V.
PRODUCTION AND RESEARCH OF FILM MATERIALS BASED ON POLYHYDROXYBUTYRATE AND CHITOSAN FOR BIOMEDICAL APPLICATIONS
ITMO University, Kronverkskiy pr-t, 49, St. Petersburg, 197101, Russia. e-mail: termonna@mail.ru
Compositions of polymeric biodegradable films based on polyhiydroxybutyrate and chttosan crosslinked wtth caCcium chloride were developed in this work. The new materiass were obtained from solution using the pouring method. Those materiass are promising for use in medicine as wound coverings and suture materiass and in tissue engineering as well. The effect of prescription parameters -such as the content of polyhydroxybutyrate and caccium chloride - on the physicochem 'ical properties of polymer compositions were studied. It is shown that by varying the ratio of the components of the polyhydroxybutyrate / chi-tosan polymer mixture, the physccal-mechanccal properties of the material can be controlled. It is established that the introduction of caccium chloride, used as a crossiinking agent, determines the porostty and vapour permeablitty of the polymer system. Optimal ratios of reagents in polymer films are defined for the usage as implantable materials.
Keywords: chitosan, biopolymer film composition, polyhydroxybutyrate, calcium chloride, crossiinking agent, infrared spectroscopy, physical-mechanical properties.
Введение
Современная медицина позволяет ускорить и упростить процесс наложения хирургических швов путем применения специальных сшивающих аппаратов. Так, для сшивания ран все чаще используют кожный степлер, который дает возможность сократить время операции и, соответственно, время пребывания пациента под наркозом. Применение механических сшивающих аппаратов имеет ряд преимуществ - минимальная травматичность тканей, минимальная инва-зивность и упрощение операционного вмешательства. Однако нарушения правил работы со сшивающим аппаратом могут привести к некачественно выполненному шву, что может быть выражено в излишнем натяжении сшитых тканей и негерметичности ушитой раны. Для предотвращения этих последствий целесообразно применять раноподдерживающие покрытия на основе биополимеров, нашедшие широкое применение в за-
Глазачева Екатерина Николаевна, Дорофеева Евгения
Михайловна, Успенская Майя Валерьевна
ПОЛУЧЕНИЕ И ИССЛЕДОВАНИЕ ПЛЕНОЧНЫХ МАТЕРИАЛОВ НА ОСНОВЕ
ПОЛИГИДРОКСИБУТИРАТА И ХИТОЗАНА ДЛЯ БИОМЕДИЦИНСКИХ ПРИМЕНЕНИИ
Санкт-Петербургский национальный исследовательский университет информационных технологий, механики и оптики, Кронверкский пр-т, 49, Санкт-Петербург, 197101, Россия. e-mail: termonna@mail.ru
В данной работе разработаны составы полимерных би-одеградируемых пленок на основе полигидроксибути-рата и хитозана, сшитых хлоридом кальция. Методом полива из раствора получены новые материалы, перспективные для использования в области медицины в качестве раневых покрытий и шовных материалов, а также тканевой инженерии. Изучено влияние рецептурных параметров, таких как содержание полигидрок-сибутирата, хлорида кальция на физико-химические свойства полимерных композиций. Показано, что варьируя соотношение компонентов полигидроксибути-рат/хитозан полимерной смеси можно регулировать физико-механические свойства материала. Установлено, что введение хлорида кальция, используемого в качестве сшивающего агента определяет пористость и паропроницаемость полимерной системы. Подобраны оптимальные соотношения реагентов в полимерных пленках для применения их в качестве имплантируемых материалов.
Ключевые слова: хитозан, биополимерная пленочная композиция, полигидроксибутират, хлорид кальция, сшивающий агент, инфракрасная спектроскопия, физико-механические свойства.
Дата поступления - 22 апреля 2019 года
рубежной хирургии. В качестве таких покрытий в целях эффективного заживления ткани используют пористые пленочные материалы, изготовленные на основе полимерных смесей. Такие материалы имеют шероховатую поверхность для лучшей адгезии клеток, обладают хорошей паропроницамостью и пористой структурой для обеспечения обменных процессов клеток [1].
Природные полимеры, такие как полигидроксибутират (ПГБ) и хитозан, приобретают все большее значение в разработке имплантируемых материалов. ПГБ является биоразлагаемым и биосовместимым полиэфиром, обладающим высокой степенью кристалличности [2].
Смешивание ПГБ с полисахаридом предоставляет возможность получения биополимерного материала с улучшенными физико-механическими свойствами [3 ,4]. Одним из наиболее распространённых полиса-
харидов является хитозан, получаемый из хитина, входящего в состав скелетов насекомых и раковин ракообразных. Широкое применение хитозана при разработке материалов медицинского назначения объясняется рядом его свойств, таких как, биосовместимость, биоразлагаемость, биоактивность, биоадгезивность, нетоксичность и антимикробная активность [5, 6]. В настоящее время хитозан используют в доставке лекарств [7-10], доставке генов [11], разработке раневых покрытий [12-14] и тканевой инженерии [15-18]. Учитывая широкий спектр применений, чаще всего, хитозан подвергается химической модификации для обеспечения требуемых физико-химических и эксплуатационных характеристик [19].
Регулирование свойств материалов, таких как термостойкость, пористость, проницаемость и другие физико-механические параметры проводят с помощью химического сшивания или путем приготовления полимерных смесей и композитов. В качестве сшивающих агентов для биополимеров могут быть использованы: глутаровый альдегид, триполифосфаты, этиленгли-коль, диглицидиловый эфир и изоцианаты [20, 21]. Однако, цитотоксичность синтетических сшивающих агентов, чаще всего, приводит к ухудшению биосовместимости полученных материалов. Таким образом, актуальной является задача выбора нетоксичного сшивающего агента при разработке имплантируемых материалов с целью обеспечения стабильной биополимерной структуры.
Одним из веществ, используемых в качестве сшивающего агента для многих материалов, имеющих в своей структуре активные карбоксильные группы, является хлорид кальция, обладающий хорошей хела-тирующей способностью и минимальной токсичностью.
В настоящей работе получены биополимерные пленочные композиции на основе смеси полигидрок-сибутирата и хитозана методом полива из раствора, и исследованы основные физико-химические свойства пленок.
Экспериментальная часть
Материалы. В работе использовали следующие реактивы: полигидроксибутират (ООО «Клёкнер-Пентапласт Рус»), хитозан (средний молекулярный вес, степень деацетилирования 75-85 %, SigmaAldrich, США), глицерин (ЧДА, Вектон, Россия), кальций хлористый (Ч, Вектон, Россия), уксусная кислота ледяная (ХЧ, Вектон, Россия), дистиллированная вода.
Методы исследования. Морфологию поверхности пленочных композиций исследовали с помощью оптического микроскопа Olympus STM6.
Исследование химической структуры полученных полимерных пленочных композиций хито-зан/полигидроксибутират/СаС12 проводилось методом инфракрасной спектроскопии с преобразованием Фурье (ИК-Фурье спектроскопии) с использованием спектрометра Tensor 37 (BRUKER, Германия), оснащенного приставкой нарушенного полного внутреннего отражения (НПВО).
Термический анализ полученных биополимерных композиций проводили с помощью термогравиметрического анализа (ТГ) с использованием термовесов TG 209 F1 Libra (Netzsch, Германия). Потерю массы оценивали при скорости нагрева 10 °С/мин в диапазоне температур от 25 до 450 °С.
Пористость образцов пленок определяли после предварительного высушивания в лиофильной сушке при температуре -35 °С в течение 48 ч. Пористость рассчитывали по соотношению плотности исследуемых образцов пленок и известной плотности непористой пленки хитозана по формуле 1:
р=£!£п.1 о о % (1)
р
где р - плотность биополимерной пленки на основе 100 % хитозана, рп - плотность пористой пленки, рассчитанная как отношение массы пленки к ее объему.
Паропроницаемость биополимерных пленок определяли с использованием метода ASTM Е96/Е96М-10 (ДБТМ, 2010).
Исследование механических характеристик на прокол образцов пленок размера 1,5x1,5 см проводили на анализаторе текстур тА.ХТри (StableMicroSystems, Великобритания). Изучение механических свойств на растяжение образцов пленок проводили на электромеханической разрывной машине ¡^гоп 5943.
Влагосодержание пленок определяли следующим образом: из материала вырезали образец размером 1x1 см, взвешивали и высушивали до постоянной массы при 80 °С. Влагосодержание определяли по формуле:
В л а г о со д е р жа н и е = 11 ^ 12 • 1 0 0% (2)
где т1 - первоначальная масса образца, т2 - масса образца после сушки.
Приготовление пленочной композиции хитозан/полигидроксибутират/СаС1 2. Пленочные композиции полигидроксибутират/хитозан получали путем полива пленкообразующего раствора на подложку. Пленкообразующий раствор готовили путем смешивания 1 % растворов биополимеров, приготовленных при температуре 85 °С и скорости перемешивания 200 об/мин. В качестве растворителя полигид-роксибутирата и хитозана использовали ледяную уксусную кислоту и 2 % водный раствор уксусной кислоты соответственно. Смешивание проводили в соответствующих соотношениях: 60/40, 50/50, 40/60, 30/70, 20/80, 10/90. Затем в полимерную смесь добавляли хлорид кальция в количестве 0-10 мас. % и глицерин в количестве 30 мас. % от содержания полимера. Приготовленный пленкообразующий раствор наносили на чашки Петри и сушили при температуре 24 °С в течение 48 ч. Полученные биополимерные пленки промывали в 0,1н. растворе N804, а затем в дистиллированной воде.
Обсуждение результатов
В работе получены образцы биополимерных пленок с различным соотношением компонентов хито-зан/полигидроксибутират и с различным содержанием хлорида кальция. Смесевые композиции получены с использованием уксусной кислоты в качестве растворителя.
Изучена морфология поверхности биополимерных пленок с различным содержанием хлорида кальция с помощью оптической микроскопии. Состав полимерной смеси является одним из факторов, определяющих морфологию поверхности пленочного материала. Смешивание хитозана и ПГБ приводит к разделению фаз, на рис. 1 видно, что образец без добавления хлорида кальция обладает неоднородной поверхностью. Введение в полимерную смесь хлорида кальция приводит к изменению морфологии поверхности
материала и его параметров. При добавлении хлорида кальция в количестве до 5 мас. % наблюдается фазовое разделение, но при дальнейшем увеличении содержания хлорида кальция поверхность пленки становится оптически однородной. Подобный эффект наблюдается при сшивании хитозана с другим биополимером - желатином, с использованием в качестве сшивающего агента хлорида кальция, в результате которого происходит взаимодействие функциональных групп хитозана с карбоксильными группами желатина [22].
ция заключается в образовании солевых мостиков с функциональными группами хитозана и карбонильными группами ПГБ.
Рис. 1. Оптические фотографии образцов биополимерных пленок 50 % хитозан/ 50 % ПГБ с различным содержанием СаС2 а) 0 %; б) 3 %; в) 5 %; г) 7%
Исследование химического взаимодействия компонентов биополимерной композиции
Совместимость компонентов биополимерной композиции изучали с использованием инфракрасной спектроскопии с Фурье преобразованием. На рис. 2 представлены инфракрасные спектры исходных биополимеров и приготовленных полимерных пленок различного состава.
В ИК спектре хитозана присутствуют основные полосы: широкая полоса поглощения в области 34003100 см-1 обусловлена валентными колебаниями (-ОН) групп и связи ^-Н); поглощение на частоте 2920 см-1 и 2875 см-1связано с валентными колебаниями (-СН2) и (-СН3) соответственно, на частоте 1640 см-1- с валентными колебаниями(-С=0). Поглощение на частоте 1540 см-1связано с деформационными колебаниями аминогруппы хитозана. Полосы поглощения в области 1160-1000 см-1соответствуют колебаниям связи -С-О.
К основным полосам поглощения, характеризующим структуру ПГБ относятся полоса на частоте 1720 см-1, связанная с валентными колебаниями карбонильной группы сложного эфира, поглощение в области 1180-1050 см-1, обусловленное деформационными колебаниями связи -С-0 сложноэфирной группы.
Аналогичные полосы поглощения наблюдали и в ИК спектре смесевой композиции 50 % хитозан/50 % ПГБ.
При введении хлорида кальция в полимерную композицию наблюдали снижение интенсивностей полос поглощения на частоте колебаний эфирных групп ПГБ 1720 см-1 и на частоте колебаний полисахаридного кольца хитозана 1275 см-1 (рис. 3). Механизм сшивки цепей полигидроксибутирата и хитозана ионами каль-
Рис. 2. Инфракрасные спектры биополимерных пленок: 1) 100% хитозан; 2) 50% хитозан/ 50% ПГБ; 3) 100% ПГБ
1600 1400 1200 1000 Волновое число, см"1 Рис. 3. Инфракрасные спектры биополимерных пленок состава 50% хитозан/ 50% ПГБ с различным содержанием СаС12: 1) без сшивающего агента; 2) 3 мас. %; 3) 5 мас. %
Исследована потеря массы образцов пленок полигидроксибутират/хитозан/хлорид кальция в ходе нагрева с помощью термогравиметрического анализа (ТГ).
Из данных ТГ (рис. 4) видно, что потеря массы пленки состава 50 % хитозан/50 % ПГБ без добавления сшивающего агента происходит в три этапа - при нагреве до 150 °С происходит удаление из пленок адсорбированной воды, в интервале температур 200-240 °С потеря массы примерно 60 % и связана с термоокислительной деструкцией, при нагреве до 600 °С потеря массы составляет 83 %.
200 400
Температура, °С
Рис. 4. Термограмма (ТГ) биополимерных пленок состава 50 % хитозан/ 50 % ПГБ с различным содержанием CaCl2: 1) без сшивающего агента; 2) 10 мас.%; 3) 3 мас. %
Менизм термической деструкции пленок хито-зан/ПГБ с добавлением хлорида кальция изменяется с многоступенчатого на одноступенчатый, при этом температура окончания процесса термодеструкции на 200 °С ниже.
Термическая стабильность смеси хитозан/ПГБ повышается при добавлении хлорида кальция, подтверждая результаты ИК спектроскопии о взаимодействии функциональных групп хитозана и ПГБ с ионами кальция. В таблице 1 приведены кинетические характеристики термодеструкции пленок.
Таблица 1. Кинетические характеристики термодеструкции пленок Хитозан50 %/ПГБ50 % с различным содержани-ем
Содержание CaCl2, мас. % Tío T50 ткон, %
0 128 216 17
3 116 455 46
10 73 425 48
Результаты Фурье ИК спектроскопии и термогравиметрического анализа, а также микрофотографии поверхности пленочных композиций показывают, что изначально практически несмешиваемые полимерные компоненты хитозан и ПГБ в присутствии хлорида кальция образуют сшитую структуру в результате формирования солевых мостиков между сложноэфир-ными группами ПГБ и гидроксильными группами хитозана с ионами кальция.
Физико-механические свойства
Одним из важных требований к свойствам шовных материалов является баланс между прочностью и эластичностью [23].
В работе изучено влияние состава пленочной композиции на ее физико-механические характеристики, исследована зависимость прочности и удлинения при растяжении и при прокалывании от соотношения биополимеров, и содержания сшивающего агента -хлорида кальция.
На рис. 5 приведены результаты физико-механических испытаний на прокол биополимерных пленок с различным содержанием ПГБ и сшивающего агента. Эластичность пленок полигидроксибути-рат/хитозан снижается на 30 % при содержании поли-гидроксибутирата до 50 % по сравнению с образцом на основе хитозана. Увеличение содержания хлорида кальция в смеси приводит к увеличению эластичности пленок (рис. 5). Вероятный механизм повышения эластичности плёнок на основе полигидроксибути-рат/хитозан/хлорид кальция определяется пластифицирующим действием глицерина в полимерной матрице.
Содержание С
Рис. 5. Удлинение при прокалывании биополимерных пленок:
а) с различным соотношением компонентов хитозан/ ПГБ;
б) 50% хитозан/ 50% ПГБ с различны/м содержанием СаС1
В таблице 2 представлены результаты физико-механических испытаний на растяжение пленок с различным соотношением компонентов в смеси хито-зан/полигидроксибутират.
Таблица 2. Свойства биополимерны/х пленок с различным соотношением биополимеров
№ Состав Тол-щина, мкм Влагосодержа-ние, % Предел прочности при растяжении, МПа Удлинение при разрыве, % Паропроницаемость, пмм/(м2^Па)
1 Хитозан 50 %/ПГБ 50 % 10 11,2 2,4 18,2 2,4х10"8
2 Хитозан 60 %/ПГБ 40 % 7,3 8,8 13,7 12,0 1,8x10-"
3 Хитозан 70 %/ПГБ 30 % 9,3 7,7 23,6 20 2,4х10-8
4 Хитозан 80 %/ПГБ 20 % 8,3 8,3 23,0 35 2,1х10-8
5 Хитозан 90 %/ПГБ 10 % 7,6 9,8 27,0 25 2,1х10-8
Самыми высокими показателями прочности и удлинения при растяжении обладают композиции с содержанием хитозана в количестве более 70 %. Уменьшение прочности может быть связано с увеличением содержания в биополимерной смеси ПГБ, обладающего высокой степенью кристалличности. При этом
значения паропроницаемости и влагосодержание образцов с различным соотношением компонентов отличаются незначительно (таблица 2).
Введение хлорида кальция в биополимерную смесь 50 % хитозан/ 50 % полигидроксибутират приводит к формированию пористых пленок (таблица 3).
При этом пористость пленок растет с увеличением количества хлорида кальция. Добавление сшивающего агента оказывает влияние на физико-механические свойства материала: увеличивается значение удлинения при разрыве и уменьшается значение прочности. Для образца без сшивающего агента удлинение при разрыве составляет 18,2 %, с 3 и 5 мас. % содержанием хлорида кальция - 101,6 % и 73,4 %, соответственно.
Важной характеристикой пористых материалов является их паропроницаемость. Паропроницаемость
пленки без добавления хлорида кальция составляет 2,4^10-8 пмм/(м2^Па) и связана с наличием дефектов на поверхности пленки, обусловленными низкой совместимостью ПГБ и хитозана. Наибольшим значением паропроницаемости обладают пленки, содержащие 3 мас. % СаС12 - 22,5 10-5 пмм/(м2-ч-Па). При добавлении 5 мас. % СаС12 паропроницаемость пленки снижается до 12,610-5 пмм/(м2^Па), вследствие более плотной сшивки и увеличения количества замкнутых пор, не вносящих вклад в паропроницаемость материала.
Таблица 3. Свойства биополимерных пленок с различным содержанием хлорида кальция
Состав Содержание CaCl2, % Толщина, мкм Пористость, % Влагосо- держание, % Паропроницаемость, гхмм/(м2хчхПа) Предел прочности при растяжении, МПа Удлинение при разрыве, %
Хито- 0 10 - 51 2,4-10"8 2,4 18,2
зан50%/ПГБ5 3 20 47,3 69 22,5'10"5 0,9 101,6
0% 5 24 53,8 74 12,6-10"5 0,7 73,4
Полимерные пленки хитозан/ПГБ/хлорид кальция обладают пористой структурой, хорошими механическими свойствами и паропроницаемостью и улучшенной термической стабильностью. Введение хлорида кальция приводит к формированию сшитой структуры вследствие взаимодействия функциональных групп полимеров с ионами кальция.
Заключение
Получены биополимерные пленочные материалы на основе хитозана и полигидроксибутирата методом полива пленкообразующего раствора на подложку для применения в качестве имплантируемых материалов. Добавление в полимерную смесь хлорида кальция приводит к сшиванию хитозана и полигидрок-сибутирата и формированию пористой структуры, при этом значительно повышается паропроницаемость материала. Результаты ИК-Фурье спектроскопии согласуются с данными термогравиметрического анализа и подтверждают образование сшитого полимерного материала. В ходе проведенных исследований определено оптимальное соотношение компонентов и содержание сшивающего агента в полимерных пленках для применения их в качестве имплантируемых покрытий.
Литература
1. Tanaka Y., Yamaoka H., Nishizawa S., Nagata S., Ogasawara T., Asawa Y,, Fujihara Y,, Takato T., Hoshi K. The optimization of porous polymeric scaffolds for chondrocyte/atelocollagen based tissue-engineered cartilage // Biomaterials. 2010. V. 31, N 16. P. 45064516.
2. Тертышная Ю.В., Подзорова М.В. Композиционные материалы на основе "зеленых" полимеров: полилактида и поли-3-гидроксибутирата // Журн. прикл. химии. 2018. Т. 91. № 3. С. 377-384.
3. Tanase E.E, Popa M.E., Rapa M., Popa O. PHB/ Cellulose Fibers Based Materials: Physical, Mechanical and Barrier Properties // Agriculture and Agricultural Science Procedia. 2015. V. 6. P. 608-615.
4. Godbole S, Gote S, Latkar M, Chakrabarti T Preparation and characterization of biodegradable poly-3-hydroxybutyrate-starch blend films // Bioresource Technology. 2003. V. 86. P. 33-37.
5. Сливкин Д.А., Лапенко В.Л., Сафонова О.А. и др. Хитозан для фармации и медицины // Вестник ВГУ, Серия: Химия. Биология. Фармация. 2011. № 2. C. 214-232.
6. Pereda M, Ponce A.G., Marcovich N.E. et a, Chitosan-gelatin composites and bi-layer films with potential antimicrobial activity // Food Hydrocolloids. 2011. N 25. P. 1372-1381.
7. Panos I,, Acosta N, Heras A. New Drug Delivery Systems Based on Chitosan // Current Drug Discovery Technologies. 2008. N 5. P. 333-341.
8. Mengatto L N., Helbiing I.M., Luna J.A. Resent advances in chitosan films for controlled release of drugs // Recent Patentson Drug Delivery&Formulation. 2012. N 6. P. 156-170.
9. Свирщевская Е.В., Гриневич Р.С, Решетов П.Д. и др. Наноносители лекарств на основе хитозана // Биотехносфера. 2012. Т. 19. № 1.С. 13-20.
Hejazi R., Amiji M. Chitosan-based delivery systems: physicochemical properties and pharmaceutical applications // Journal of Controlled Release. 2003. N 89. P. 151-165.
11. Krivcov G.G., ZHdanov R.I. Adresnaya dostavka funkcional'nyh genov v genoterapii s pomoshch'yu uglevodsoderzhashchih vektorov // Voprosy medicinskoj himii. 2000. Т.46. №3. P. 246-255.
12. Hu S., Bi S, Yan D. et al Preparation of composite hydroxybutyl chitosan sponge and its role in promoting wound healing // Carbohydrate Polymers. 2018. N 184. P. 154-163.
13. Altiok D, Altiok E, Tihminlioglu F. Physical, antibacterial and anti-oxidant properties of chitosan films incorporated with thyme oil for potential wound healing applications // Journal of Materials in Science: Materials in Medicine. 2010. N 21. P. 2227-2236.
14. Kavitha Shankar P.C., Rajmohan G, Rosemary M.J. Physico-chemical characterisation and biological evaluation of freeze dried chitosan sponge for wound care // Materials Letters. 2017. N 208. P. 130-132.
15. Tchemtchoua V.T., Atanasova G, AqilA. et a.l Development of a Chitosan Nanofibrillar Scaffold for skin repair and regeneration // Biomacromolecules. 2011. N 12. P. 3194-3204.
16. Martino A.D, Sittinger M, Risbud M. V Chitosan: A versatile biopolymer for orthopaedic tissue-engineering // Biomaterials. 2005. N 26. P. 5983-5990.
17. Khor E., Lim L.Y. Implantable applications of chitin and chitosan // Biomaterials. 2003. N 24. P. 23392349.
18. Parvez S, Rahman M.M, Khan M.A. et al Preparation and characterization of artificial skin using
chitosan and gelatin composites for potential biomedical application // Polymer Bulletin 2012. N 69. P. 715-731.
19. Паламарчук И.А., Бровко О.С., Боголицын К.Г, Бойцова Т.А, Ладесов А.В, Ивахнов АД Взаимосвязь структуры и ионообменных свойств полиэлектролитных комплексов на основе биополимеров // Журн. прикл. химии. 2015. Т. 88. N 1. С. 109-115.
20. Sarmento BB, Neves J. Chitosan-Based Systems for Biopharmaceuticals: Delivery, Targeting and Polymer Therapeutics. Chichester, West Sussex: John Wiley and Sons, 2012. P. 584.
21. Михайлов С.Н., Гаврюшов С.А., Касаткина М.А, Кильдеева Н.Р. Об определении степени сшивки хитозана в реакции с диальдегидами // Известия УНЦ РАН. 2016. №3(1). С. 87-90.
22. Pulieri E, Chiono V, Ciardelli G. et al Chi-tosan/gelatin blends for biomedical applications // Journal of Biomedical Materials Research Part A. 2008. N 86(2). P. 311-322.
23. Воронова А.А., Глазачева Е.Н, Успенская М.В. Исследование биополимерной пленочной композиции на основе смеси хитозана и желатина // Известия СПбГТИ)ТУ). 2018. № 45(71). С. 64-68.
24. Ranjbar Mohammadi M, Bahrami S.H. Development of nanofibrous scaffolds containing gum tragacanth/poly(£-caprolactone) for application as skin scaffolds // Materials Science and Engineering: C Materials for Biological Applications 2015. V. 48. P. 71-79.
References
1. Tanaka Y, Yamaoka H, Nishizawa S, Nagata
5, Ogasawara T, Asawa Y, Fujihara Y, Takato T, Hoshi K. The optimization of porous polymeric scaffolds for chondrocyte/atelocollagen based tissue-engineered cartilage // Biomaterials. 2010. V. 31, N 16. P. 45064516.
2. Tertyshnaya Y.V., Podzorova M.V. Composite Materials Based on Polylactide and Poly-3-Hydroxybutyrate "Green" Polymers // Russian Journal of Applied Chemistry. 2018. V. 91. N 3. P. 417-423.
3. Tanase EE., Popa M.E, Rapa M, Popa O. PHB/ Cellulose Fibers Based Materials: Physical, Mechanical and Barrier Properties // Agriculture and Agricultural Science Procedia. 2015. V. 6. P. 608-615.
4. Godbole S, Gote S, Latkar M, Chakrabarti T Preparation and characterization of biodegradable poly-3-hydroxybutyrate-starch blend films // Bioresource Technology. 2003. V. 86. P. 33-37.
5. Sivvkin D.A., Lapenko V.L., Safonova O.A. et al Hitozan dlya farmacii i mediciny // Vestnik VGU, Seriya: Himiya. Biologiya. Farmaciya. 2011. № 2. P. 214-232.
6. Pereda M, Ponce A.G., Marcovich N.E. et a. Chitosan-gelatin composites and bi-layer films with potential antimicrobial activity // Food Hydrocolloids. 2011. N 25. P. 1372-1381.
7. Panos I, Acosta N, Heras A. New Drug Delivery Systems Based on Chitosan // Current Drug Discovery Technologies. 2008. N 5. P. 333-341.
8. Mengatto L. N, Hebing I.M, Luna J.A. Resent advances in chitosan films for controlled release of drugs // Recent Patentson Drug Delivery&Formulation. 2012. N
6. P. 156-170.
9. Svirshchevskaya E.V., Grinevich R.S., Reshetov P.D. et al Nanonositeli lekarstv na osnove hitozana // Bio-tekhnosfera. 2012. Т.19. №1.P. 13-20.
10. Hejazi R, Amiji M. Chitosan-based delivery systems: physicochemical properties and pharmaceutical applications // Journal of Controlled Release. 2003. N 89. P. 151-165.
11. Krivcov G.G, ZHdanov R.I. Adresnaya dostavka funkcional'nyh genov v genoterapii s pomoshch'yu uglevodsoderzhashchih vektorov // Voprosy medicinskoj himii. 2000. T.46. №3. P. 246-255.
12. Hu S, Bi S, Yan D. et al Preparation of composite hydroxybutyl chitosan sponge and its role in promoting wound healing // Carbohydrate Polymers. 2018. N 184. P. 154-163.
13. Attiok D, Attiok E, Tihminlioguu F. Physical, antibacterial and anti-oxidant properties of chitosan films incorporated with thyme oil for potential wound healing applications // Journal of Materials in Science: Materials in Medicine. 2010. N 21. P. 2227-2236.
14. Kavitha Shankar P.C, Rajmohan G, Rosemary M.J. Physico-chemical characterisation and biological evaluation of freeze dried chitosan sponge for wound care // Materials Letters. 2017. N 208. P. 130-132.
15. Tchemtchoua V.T., Atanasova G, AqilA. et al. Development of a Chitosan Nanofibrillar Scaffold for skin repair and regeneration // Biomacromolecules. 2011. N 12. P. 3194-3204.
16. Martino A.D, Sittinger M, Risbud M.V. Chitosan: A versatile biopolymer for orthopaedic tissue-engineering // Biomaterials. 2005. N 26. P. 5983-5990.
17. Khor E, Lim L.Y. Implantable applications of chitin and chitosan // Biomaterials. 2003. N 24. P. 23392349.
18. Parvez S, Rahman M.M, Khan M.A. et a. Preparation and characterization of artificial skin using chitosan and gelatin composites for potential biomedical application // Polymer Bulletin 2012. N 69. P. 715-731.
19. Palamarchuk I.A., Brovko O.S., Bogo-itsyn K.G. Boitsova T.A, Ladesov A.V., Ivakhnov A.D. Relationship of the structure and ion-exchange properties of polyelectrolyte complexes based on biopolymers // Russian Journal of Applied Chemistry. 2015. V. 88. N 1. P. 103-109.
20. Sarmento B, Neves J. Chitosan-Based Systems for Biopharmaceuticals: Delivery, Targeting and Polymer Therapeutics. Chichester, West Sussex: John Wiley and Sons, 2012. P. 584.
21. Mijailov S.N., Gavryushov S.A, Kasatkina M.A., Ki'deeva N.R. Ob opredelenii stepeni sshivki hitozana v reakcii s dial'degidami // Izvestiya UNCRAN. 2016. № 3(1). P. 87-90.
22. Pulieri E, Chiono V., Ciardelli G. et al. Chi-tosan/gelatin blends for biomedical applications // Journal of Biomedical Materials Research Part A. 2008. N 86(2). P. 311-322.
23. Voronova A.A., Glazacheva EN, Uspenskaya M.V. Issledovanie biopolimernoj plenochnoj kompozicii na osnove smesi hitozana i zhelatina // Izvestiya SPbGTI(TU). 2018. № 45(71). P. 64-68.
24. Ranjbar Mohammadi M, Bahrami S.H. Development of nanofibrous scaffolds containing gum tragacanth/poly(£-caprolactone) for application as skin scaffolds // Materials Science and Engineering: C Materials for Biological Applications 2015. V. 48. P. 71-79.
