CC BY
98
УДК 618.3:577.213/215:577.164.171 (470.621) ББК 57.162.1 (2Рос.Ады) П 50
Мамий Дана Даудовна
Учащаяся Республиканской естественно-математической школы при Адыгейском государственном университете, Майкоп, e-mail: lab_genetic@mail.ru
Татаркова Елена Анатольевна
Аспирант кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, Майкоп, e-mail: lab_genetic@mail.ru
Тугуз Аминат Рамазановна
Доктор биологических наук, зав. иммуногенетической лабораторией НИИ комплексных проблем Адыгейского государственного университета, Майкоп, тел. (8772) 593941, e-mail: lab_genetic@mail.ru Цикуниб Анджела Ахмедовна
Врач-акушер-гинеколог Майкопской городской клинической больницы, зав. акушерским отделением патологии беременности № 2 (малых сроков), Майкоп, e-mail: lab_genetic@mail.ru
Сахтарьек Зарема Нальбиевна
Врач генетик, зав. медико-генетической консультацией консультативно-диагностической поликлиники Майкопской городской клинической больницы, Майкоп, e-mail: lab_genetic@mail.ru
Полиморфизмы генов фолатного цикла, ассоциированные с угрозой раннего прерывания беременности у жительниц Республики Адыгея
(Рецензирована)
Аннотация. Актуальность исследования обусловлена поиском прогностически значимых критериев угрозы ранних репродуктивных потерь у жительниц Республики Адыгея при анализе частотного распределения полиморфизмов генов фолатного цикла MTHFR 677 C>T, rs1801133; MTHFR 1298 A>C, rs1801131; MTR 2756 A>G, rs1805087; MTRR 66 A>G, rs1801394; SLC19A1 80 G>A, rs1051266. В обследуемую группу (n=48) включены пациентки репродуктивного возраста (средний возраст 28,2±4,6 лет) из разных этнических групп с угрозой прерывания беременности в срок до 13 недель. Контрольная группа (доноры, n=51) представлена неродственными здоровыми жительницами Республики Адыгея репродуктивного возраста (средний возраст 28,4±5,97 лет). Статистически значимых различий SNP генов MTHFR, MTR, MTRR, SLC19A1 в общей группе жительниц Республики Адыгея и среди женщин-адыгеек выявлено не было. У русских жительниц Республики Адыгея с повышенным риском (OR=4,11; 95% CI=1,39—12,18; P=0,02) прерывания беременности в первом триместре ассоциирован гетерозиготный генотип A80G гена SLC19A1.
Ключевые слова: SNP, гены фолатного цикла, MTHFR, MTR, MTRR, SLC19A1, угроза прерывания беременности на ранних сроках, репродуктивные потери.
Mamiy Dana Daudovna
Student of the Republican Natural Science-Mathematical School, Maikop, e-mail: lab_genetic@mail.ru
Tatarkova Elena Anatolyevna
Post-graduate student of Botany Department of Natural Science Faculty, Adyghe State University, Maikop, email: lab_genetic@mail.ru
Tuguz Aminat Ramazanovna
Doctor of Biology, Head ofImmunogenetic Laboratory ofResearch Institute of Complex Problems, Adyghe State University, Maikop, ph. (8772) 593941, e-mail: lab_genetic@mail.ru Tsikunib Angela Akhmedovna
Doctor-Obstetrician-Gynecologist of the Maikop City Clinical Hospital, Head of Obstetric Department of Pathology of Pregnancy No. 2 (small terms), Maikop, e-mail: lab_genetic@mail.ru
Sakhtaryek Zarema Nalbievna
Doctor Genetics, Head of the Medical Genetic Consultation of the Consultative and Diagnostic Polyclinic of the Maikop City Clinical Hospital, Maikop, e-mail: lab_genetic@mail.ru
Polymorphisms of genes of folate cycle associated with the threat of early termination of pregnancy at women from Republic of Adyghea
Abstract. The research urgency is caused by the search for prognostically significant criteria of the threat of early reproductive losses at residents of the Republic of Adyghea in the analysis of the frequency distribution of polymorphisms of genes of the folate cycle MTHFR 677 C>T, rs1801133; MTHFR 1298 A>C, rs1801131; MTR 2756 A>G, rs1805087; MTRR 66 A>G, rs1801394; SLC19A1 80 G>A, rs1051266. The examined group (n=48) included patients of reproductive age (average age 28,2±4,6 years) from different ethnic groups with the threat of termination of approximately 13 week pregnancy. The control group (donors, n=51) is represented by an unrelated healthy women of
reproductive age from the Republic of Adyghea (average age was 28,4±5,97 years). No statistically significant differences in SNP genes MTHFR, MTR, MTRR, SLC19A1 in the General group of women from the Republic of Adyghea and among the Adyghe women have been identified. Russian women from the Republic of Adyghea with increased risk (OR=4,11; 95% CI=1,39—12,18; P=0,02) of termination of pregnancy in the first trimester showed association with heterozygous genotype SLC19A1 of A80G gene.
Keywords: SNP, genes of the folate cycle, MTHFR, MTR, MTRR, SLC19A1, the threat of termination of early pregnancy, reproductive losses.
1. Введение
Генная сеть невынашивания беременности (НБ) включает полиморфные варианты SNP (Single nucleotide polymorphisms - единичных нуклеотидных замен) более 40 генов, которые могут быть использованы в качестве молекулярно-генетических предикторов развития осложнений и ранних (в первом триместре) репродуктивных потерь (РП). Фолатный цикл представляет собой сложный процесс с участием каскада ферментативных процессов, многочисленных генов и путей, компоненты которого действуют как субстрат или кофактор таких биологических реакций, как метаболизм аминокислот, синтез ДНК, трансметилирование, транссульфирование и др. [1-5].
Ключевой молекулой, обуславливающей патофизиологическое проявление аллельных вариантов генов фолатного цикла (MTHFR, MTHFR, MTR, MTRR, SLC19A1), является не-метилированный гомоцистеин, токсичный для материнского организма и клеток плода. Ги-пергомоцистеинемия может зависеть от многих факторов, включая возраст, пол, диету, гормональный фон, наличие хронического воспаления, воздействие неблагоприятных средовых влияний (курение), но в основном от SNP генов фолатного цикла [6, 7]. Полиморфные варианты генов фолатов могут приводить к изменению активности ферментов и к избыточному накоплению гомоцистеина в крови [1, 2, 6].
Метилентетрагидрофолатредуктаза, кодируемая геном MTHFR, определяет баланс производных фолиевой кислоты и гомоцистеина/метионина. Ген MTHFR имеет несколько аллельных вариантов (rs4846052, rs1801131, rs6541003, rs2066462, rs1801133 и rs2274976). Однако с патологией беременности часто связывают миссенс-мутацию (C677T; rs1801133) и транзицию (А1298С; rs1801131). Замены цитозина на тимин в 677 позиции молекулы ДНК ((677 С—*Т) и, соответственно, аланина на валин в каталитическом домене фермента (p.Ala222Val) изменяют свойства белкового продукта. А1298С (1298 A—C) полиморфизм, представляющий собой транзициюаденина (A) на цитозин (С) в 1298 позиции участка ДНК гена MTHFR, приводит к замене остатка глутаминовой кислоты на аланин в регуляторном домене фермента (p.Glu429Ala). Обе замены в гене MTHFR обуславливают гиперцистеине-мию и гипометилирование ДНК - одну из причин развития осложнений и репродуктивных потерь в первом триместре беременности [2, 8-12].
Замена аденина на гуанин (А—G) в 2756 позиции гена В12-зависимой метионин-синтазы (MTR A2756G; rs1805087) и, соответственно, Asp—Gly в 919 аминокислотной последовательности белка MTR, может быть ассоциирована с генетической предрасположенностью к невынашиванию беременности (Корея, 2013 г.) и акушерской патологией - нарушению развития нервной трубки (расщелина позвоночника), хромосомным аномалиям (синдром Дауна), изолированным расщелинам губы и неба у плода. SNP гена метионин-синтазы-редуктазы 66 A—G (MTRR A66G; rs1801394) с заменой аминокислоты изолейцин на метио-нин (Ile22Met) изменяет биохимические свойства фермента, который в конечном итоге приводит к аналогичным патологиям [2, 8-16].
Фолиевая кислота попадает в клетки кишечника с помощью специальных транспортеров - PCFT (SLC46A1) и RFC1 (SLC19A1), который обменивает анионы восстановленных фолатов на гидроксильные группы. Нокаутированные по данному гену мыши погибают в раннем эмбриональном периоде. На внутриклеточную концентрацию фолатов влияет полиморфный вариант 80 A—G промоторной области гена SLC19A1 (G80A; rs1051266), который приводит к замене гистина на аргинин (p.His27Arg) и вызывает нарушение экспрессии белкового продукта, провоцируя ряд патологических эффектов. Синтезированный протеин
RFC1 координирует транспорт фолатов внутрь клетки как с помощью мембранных рецепторов, так и при участии молекул-переносчиков [9-11, 14, 17].
В международных базах данных (МБД) NCBI, HuGe Navigator, Ensembl в Индии, Испании, Восточной Азии, Китае, России, Германии, Турции и др. полиморфизмы генов фолатного цикла распределены неравномерно и сведения об их ассоциации с РП весьма противоречивы [10, 11, 14]. Поэтому для выбора генетических маркеров репродуктивных осложнений необходимо учитывать региональные популяционные различия, особенно для такого многонационального субъекта Российской Федерации, как Республика Адыгея (РА), в котором аналогичные исследования ранее не проводились.
Цель работы - анализ распределения частот SNP генов фолатного цикла MTHFR 677 C>T (Ala222Val), MTHFR 1298 A>C (Glu429Ala), MTR 2756 A>G (Asp919Gly), MTRR 66 A>G (Ile22Met), SLC 19A180 G>A (His27Arg) у жительниц Республика Адыгея и ассоциации с угрозой прерывания беременности на ранних сроках.
2. Материалы и методы
В обследуемую группу (n=48) включены пациентки репродуктивного возраста (18-41 лет, средний возраст 28,2±4,6 лет) акушерского отделения № 2 патологии малых сроков беременности ГБУЗ РА «Майкопская городская клиническая больница» с верифицированным диагнозом угрозы прерывания беременности в срок до 13 недель. В анамнезе обследованных женщин - ранние репродуктивные потери (прерывание по типу неразвивающейся беременности или самопроизвольного аборта). Контрольная группа (доноры, n=51) представлена неродственными здоровыми жительницами РА репродуктивного возраста (18-45 лет, средний возраст 28,4±5,97 лет), имеющих здоровых детей, в анамнезе которых отсутствуют проявления и наследственная отягощенность по исследуемой патологии, а также медицинские аборты и внематочная беременность.
ДНК обследованных доноров и женщин с угрозой ранних репродуктивных потерь выделена с помощью реактивов «Проба ГС-Генетика» (ООО «ДНК-Технология», Москва) с последующим определением концентрации и чистоты образцов ДНК на спектрофотометре NanoDrop 2000с "Thermo Scentific (USA). SNP-типирование полиморфных вариантов генов MTHFR 677 C>T, MTHFR 1298 A>C, MTR 2756 A>G, MTRR 66 A>G в образцах ДНК жительниц РА (г. Майкоп) проведено методом ПЦР в режиме "Real-Time" на тест-системах ООО «ДНК-Технология» (Москва). Для типирования полиморфизмов гена SLC19A1 80 G>A использован метод ПЦР с аллель специфичными праймерами и электрофоретической детекцией результатов на тест-системах НПФ «Литех» (Москва).
Критерии исключения в выборках: беременность, наступившая в результате вспомогательных репродуктивных технологий; тяжелая соматическая патология и хронические заболевания женщины в стадии декомпенсации (заболевания печени, почек, эндокринных желез, сердечно-сосудистой системы с нарушением их функций); мертворождения; хромосомные аномалии и ВПР плода.
Соответствие распределений генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди-Вайнберга и сравнении частот аллельных вариантов/генотипов проводили с использованием критерия X с поправкой Йетса, OR (odds-ration) - отношения шансов, 95% доверительного интервала (95% CI) при уровне значимости Р<0,05.
3. Результаты и обсуждения
Патологические эффекты единичных нуклеотидных замен в генах фолатного цикла, определяющие взаимодействие материнского организма и плода, могут проявляться на разных этапах течения беременности, начиная с ранних сроков, и обуславливать репродуктивные потери [1, 8, 10, 11].
При соответствии распределения пяти исследованных SNP генов фолатного цикла равновесию Харди-Вайнберга, по частотам аллельных вариантов и генотипов в общих группах доноров и женщин с угрозой ранних репродуктивных потерь не выявлено статистически
значимых различий (Р>0,05) (табл. 1).
Таблица 1
Частоты БКР генов фолатного цикла в контрольной группе и у женщин с угрозой прерывания беременности на ранних сроках
Полиморфизмы Генотипы/ Аллели Больные («=421 412 413, 43, 485) Доноры (и=471 452 473, 45, 515) 2 X Р OR
Знач. 95% CI
* 1 S МО С677С 0,548 0,426 1,86 0,39 1,63 0,71-3,78
С677Т 0,405 0,468 0,77 0,33-1,79
Т677Т 0,048 0,106 0,42 0,08-2,29
С677 0,750 0,660 1,73 0,19 1,55 0,81-2,97
677Т 0,250 0,340 0,65 0,34-1,24
(* 2 Ж С^ р <N A1298A 0,341 0,444 0,97 0,62 0,65 0,27-1,55
A1298C 0,561 0,467 1,46 0,62-3,42
C1298C 0,098 0,089 1,11 0,26-4,75
A1298 0,622 0,678 0,59 0,44 0,78 0,42-1,47
1298C 0,378 0,322 1,28 0,68-2,40
СО Ё 8 Н S <N < А2756А 0,585 0,574 2,49 0,29 1,05 0,45-2,44
A2756G 0,366 0,426 0,78 0,33-1,84
G2756G 0,049 0,000 6,01 0,28-128,96
А2756 0,768 0,787 0,09 0,76 0,90 0,44-1,83
2756G 0,232 0,213 1,12 0,55-2,27
8 4 Е 1,0 с VO S < А66А 0,140 0,133 2,41 0,3 1,05 0,31-3,56
A66G 0,651 0,511 1,79 0,76-4,21
G66G 0,209 0,356 0,48 0,18-1,25
А66 0,465 0,389 1,04 0,31 1,37 0,75-2,49
66G 0,535 0,611 0,73 0,40-1,33
SLC19A1 G80A5 G80G 0,229 0,412 4,25 0,12 0,42 0,18-1,02
A80G 0,688 0,490 2,29 1,01-5,20
А80А 0,083 0,098 0,84 0,21-3,32
G80 0,573 0,657 1,47 0,22 0,70 0,39-1,25
80А 0,427 0,343 1,43 0,80-2,54
Полученные для жительниц РА результаты по С677Т полиморфизмам гена МТЫБЯ согласуются с мировыми данными. [10, 11, 14]. Так, в ретроспективных этногенетических исследованиях, проведенных в географически удаленных регионах мира - Турции (2014 г.), Египте (2011 г.), Бразилии (2014, 2015 гг.), Чехии (2015 г.), Индии (2013 г.), Шри-Ланке (2012 г.), Южной Корее (2011 г.) - при масштабном скрининге пациенток с гестационными осложнениями, частоты С677Т аллельных вариантов гена МТЫБЯ достоверно не отличаются от здоровых женщин [18-25]. Более того, в Польше у женщин с привычными реподуктивны-ми потерями (двумя выкидышами на ранних сроках, п=313) также не установлено ассоциации с С677Т полиморфизмом гена МТЫБЯ, но при этом частота мутантной аллели в контроле превышала показатели для группы с ПНБ (8,4% против 11,1%; Р=0,58) [26].
Несмотря на приведенные выше данные (табл. 1) об отсутствии строгой ассоциации 677Т аллели гена МТЫБЯ с риском прерывания беременности, в ряде исследований приводятся статистически значимые различия в частотах 8КРгв1801133 у женщин с гестационными осложнениями и без них: Т (0Я=2,20; 95% С1=1,323-3,9658; Р=0,003); генотип С/Т (ОЯ=1,96; 95% С1=1,03-3,73; Р=0,04); генотип Т677Т (ОЯ=6,3; 95% С1=1,21; Р=0,02) [27]. В другом исследовании популяции северо-индийских женщин (300 доноров, 200 больных) вариант генотипа МТОТЯ С677Т (ОЯ=2,54; 95% С1=1,23-5,24; Р=0,014) и 1298С (ОЯ=2,23; 95% С1=1,09-4,52; Р=0,028) показал существенную связь с повторяющимися ранними выкидышами [28].
По трем остальным БОТ (ге1801131; ге1801394; ге1805087), не ассоциированным у жительниц РА с ранними репродуктивными потерями, в МБД приводятся противоречивые сведения о связи аллельных вариантов с невынашиванием беременности. Отсутствие связи ме-
жду полиморфизмом A1298C гена MTHFR и НБ подтверждено двумя крупномасштабными мета-анализами (2013 и 2014 гг.) для египетских, иранских женщин, жительниц Бразилии, Шри-Ланки, Чехии и других стран, включающих более тысячи женщин [29, 30]. Но у североиндийских женщин, даже при отсутствии достоверных отличий в распределении частот С677Т, A1298C аллелей гена MTHFR в группах доноров и женщин с ПНБ, тем не менее выявлена связь патологии с гипергомоцистеинемией [31]. Для Каталонии, Средиземноморского региона Испании показано отсутствие различий как в частотах C677T аллелей гена MTHFR, так и сывороточных уровней гомоцистеина [32]. Наличие и отсутствие ассоциации аллелей гена с гомоцистеинемией может быть обусловлено межгенными взаимодействиями [33].
Полиморфизмы A2756G MTR и A66G MTRR при эмбриональной хромосомной анеуп-лоидии, возникающей на фоне гипометилирования ДНК и нерасхождения хромосом, не связаны с повышением риска самопроизвольного аборта (Южная Корея) [25]. В двух международных мета-анализах (2013 г.) подтверждена связь носительства A66G аллельного варианта гена метионин-синтазы-редуктазы (MTRR) матери и синдрома Дауна у потомства [34, 35].В исследованиях Демченко (Екатеринбург, 2015 г) выявлена ассоциация 66 A>G полиморфизма гена MTRR с повторными случаями неразвивающейся беременности и самопроизвольного аборта в первом триместре гестации (OR=2,44; 95% CI=1,06-5,64; Р=0,035), тогда как для других SNP генов фолатного цикла такой связи не обнаружено [36].
Популяционный анализ частотного распределения SNP генов фолатного цикла в этнических группах женщин Республики Адыгея с угрозой раннего прерывания беременности представлен в таблицах 2, 3.
Таблица 2
Частоты БКР генов фолатного цикла в этнической группе русских женщин
Полиморфизмы Генотипы/ Аллели Больные (и=231, 232 233, 244, 315) Доноры (и=301 292 303, 27, 335) 2 X Р OR
Знач. 95% CI
* 1 S МО su С677С 0,565 0,500 0,37 0,83 1,30 0,44-3,87
С677Т 0,348 0,367 0,92 0,30-2,87
Т677Т 0,087 0,133 0,62 0,10-3,72
С677 0,739 0,683 0,39 0,53 1,31 0,56-3,08
677Т 0,261 0,317 0,76 0,32-1,79
Pi 2 ЙЙ С* A1298A 0,348 0,483 1,20 0,55 0,57 0,19-1,76
A1298C 0,565 0,414 1,84 0,61-5,57
C1298C 0,087 0,103 0,83 0,13-5,41
A1298 0,630 0,690 0,40 0,53 0,77 0,34-1,74
1298C 0,370 0,310 1,30 0,58-2,95
СО Ê 8 H 5 f- Ä IN < А2756А 0,652 0,567 2,04 0,36 1,43 0,47-4,40
A2756G 0,304 0,433 0,57 0,18-1,80
G2756G 0,043 0,000 4,07 0,16-104,53
А2756 0,804 0,783 0,07 0,79 1,14 0,44-2,95
2756G 0,196 0,217 0,88 0,34-2,28
ЙЪ ГЦ VO □ VO А66А 0,125 0,148 1,11 0,57 0,82 0,16-4,11
A66G 0,625 0,481 1,79 0,59-5,50
G66G 0,250 0,370 0,57 0,17-1,90
А66 0,438 0,389 0,25 0,62 1,22 0,55-2,69
66G 0,563 0,611 0,82 0,37-1,80
SLC19A1 G80A5 G80G 0,129 0,424 7,72 0,02* 0,20 0,06-0,71
A80G 0,774 0,455 4,11 1,39-12,18
А80А 0,097 0,121 0,78 0,16-3,79
G80 0,516 0,652 2,42 0,12 0,57 0,28-1,16
80А 0,484 0,348 1,75 0,86-3,57
Примечание: * - достоверность различий при
Из пяти исследованных генов фолатного цикла, включая основной фолатный транспортер SLC19A1 (RFC1 - reduced folate carrier), в популяции русских женщин с угрозой раннего прерывания беременности ассоциирован только гетерозиготный G80A генотип гена
БЬС19А1. В клетках и тканях млекопитающих продукт гена БЬС19Л1, расположенный на апикальной стороне плацентарных ворсинок, активно переносит восстановленные фолаты (например, 5-метилтетерагидрофолат), и его экспрессия в плаценте повышается в процессе развития плода [37].
Таблица 3
Частоты SNP генов фолатного цикла в популяции женщин-адыгеек
Полиморфизмы Генотипы/ Аллели Больные (и=15\ 132, 83, 144, 145) Доноры (и=121 102 113, 104, 125) 2 X Р OR
Знач. 95% CI
cd - Е £ S ЧО С677С 0,533 0,333 2,03 0,36 2,29 0,47-11,00
С677Т 0,467 0,583 0,63 0,14-2,89
Т677Т 0,000 0,083 0,25 0,01-6,64
С677 0,767 0,625 1,28 0,26 1,97 0,60-6,43
677Т 0,233 0,375 0,51 0,16-1,66
(* 2 Ж С^ р <N A1298A 0,385 0,300 1,13 0,57 1,46 0,25-8,43
A1298C 0,538 0,700 0,50 0,09-2,84
C1298C 0,077 0,000 2,52 0,09-68,61
A1298 0,654 0,650 0,00 0,98 1,02 0,30-3,46
1298C 0,346 0,350 0,98 0,29-3,34
СО Ё 8 Н 5 f-< А2756А 0,250 0,636 3,50 0,17 0,19 0,47-4,40
А2756G 0,625 0,364 2,92 0,18-1,80
G2756G 0,125 0,000 4,60 0,16-04,53
А2756 0,563 0,818 2,94 0,09 0,29 0,44-2,95
2756G 0,438 0,182 3,50 0,34-2,28
й 4 Е 1,0 □ VO А66А 0,143 0,100 0,89 0,64 1,50 0,16-4,11
А66G 0,714 0,600 1,67 0,59-5,50
G66G 0,143 0,300 0,39 0,17-1,90
А66 0,500 0,400 0,47 0,49 1,50 0,55-2,69
66G 0,500 0,600 0,67 0,37-1,80
SLC19A1 G80A5 G80G 0,429 0,500 0,93 0,63 0,75 0,06-0,71
А80G 0,500 0,500 1,00 1,39-12,18
А80А 0,071 0,000 2,78 0,16-3,79
G80 0,679 0,750 0,32 0,57 0,70 0,28-1,16
80А 0,321 0,250 1,42 0,86-3,57
В отличие от русских женщин, у адыгеек не выявлено ассоциации ни с одним из полиморфизмов генов фолатного цикла, включая белок-переносчик. Таким образом, использование маркерных SNP генов фолатного цикла предполагает учитывать этническую принадлежность обследуемых женщин.
Эволюционная значимость фолатного транспортера у людей подтверждается его экстремальным полиморфизмом, обусловленным вариабельным сочетанием проксимальных эк-зонных и фланкирующих интронных областей гена SLC19A1 в разных этнических группах. Следует отметить, что 80A (rs1051266) аллельный вариант 2 экзона типируется во всех этнических группах, у кавказцев - с частотой 0,473 [38]. Частота 80 А аллели в общей группе обследованных жительниц Республики Адыгея составляет 0,427; в этнической группе адыгеек - 0,321, у русских женщин - 0,484, что практически не отличается от показателей для населения Европы. Гомозиготный нормальный генотип G80G у европейцев обнаруживается с частотой 0,290, гетерозиготный G80A - 0,473, а мутантный гомозиготный вариант A80A -0,237, тогда как у всех обследованных женщин РА снижена частота гомозиготного A80A генотипа (табл. 1-3).
В большинстве работ обсуждаются проблемы ассоциации G80A аллельных вариантов и генотипов гена SLC19A1 с привычным невынашиванием беременности [39, 40] и аномалиями развития плода - дефектами нервной трубки, пороками сердца, снижением уровня фолие-вой кислоты в сыворотке крови и эритроцитах [38, 41-44]. В работе О.Н. Кулиш (2012 г.) в популяции женщин Южного региона Украины выявлено, что течение беременностей, ассоциированных с ВДНТ (врожденными дефектами нервной трубки), может осложняться угрозой прерывания (35,7%), задержкой развития плода (14,3%), железодефицитной анемией
(40,5%). При этом гомозиготный А80А генотип гена SLC19A1 является фактором риска формирования врожденных дефектов нервной трубки плода, носительство которого реализуется сниженным уровнем фолиевой кислоты сыворотки крови [43].
Таким образом, единичные нуклеотидные замены в генах фолатного цикла, обуславливающие нарушение метаболизма фолатов, вызывают осложнения течения беременности (угрозу прерывания, отслойку плаценты, преэклампсию, ПНБ, задержку роста плода и др.), которые негативно сказываются на уровне рождаемости [5-8, 10-14, 45, 46]. Типирование патологических аллелей генов цикла фолиевой кислоты с учетом этнической принадлежности обследуемых женщин является одним из наиболее эффективных подходов в первичной профилактике нарушений гестации. Проведение заблаговременной медикаментозной коррекции с назначением препаратов фолиевой кислоты, витаминов группы В, омега-3 полиненасыщенных жирных кислот у носительниц мутантных SNP снижает уровни свободного гомоци-стеина, что особенно важно для предупреждения рисков прерывания беременности на ранних сроках [6, 43].
Выводы
1. С угрозой прерывания беременности в первом триместре у русских жительниц Республики Адыгея ассоциирован гетерозиготный генотип A80G гена SLC19A1 (OR=4,11; 95% CI=1,39-12,18; P=0,02).
2. Статистически значимых различий SNP генов MTHFR, MTR, MTRR, SLC19A1 в общей группе жительниц Республики Адыгея и среди женщин-адыгеек не выявлено.
Примечания:
1. Беспалова О.Н. Генетические факторы риска невынашивания беременности: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. СПб., 2009. 40 с.
2. Полиморфизм генов фолатного обмена и болезни человека / А.С. Добролюбов, М.А. Липин, А.В. Поляков, И.Н. Фетисова // Вестник новых медицинских технологий. 2006. Т. XIII, № 4. С. 71-73.
3. Folate: metabolism, genes, polymorphisms and associated diseases / F.H. Nazki [et al.] // Gene. 2011. P. 11-20.
4. The association of idiopathic recurrent early pregnancy loss with polymorphisms in folic acid metabolism-related genes / Y. Cao [et al.] // Genes & Nutrition. 2014. No. 9. P. 402.
5. Лифанов А.Д. Ассоциация полиморфизмов генов MTHFR, MTR и MTRR с развитием гипергомоцистеи-немии у спортсменов // Ученые записки университета им. П.Ф. Лесгафта. 2013. № 8. С. 98-101.
6. Выбор оптимальной панели исследования одиночных нуклеотидных полиморфизмов перед ЭКО / А.В. Иванов, А.Г. Ткачук, Э.В. Комличенко, Ю.Н. Федотов // Акушерство и гинекология Санкт-Петербурга. 2016. № 1. С. 56-69.
7. Кох Н. В. Фолатный цикл: обзор и практические рекомендации по интерпретации генетических тестов / Н. В. Кох, А.А. Слепухина, Г.И. Лифшиц // Медицинская генетика. 2015. № 11. С. 3-8.
8. Алиева Т.Д. Изучение роли ассоциации полиморфизмов генов фолатного цикла и хромосомного полиморфизма у матери в формировании репродуктивных потерь // Вюник проблем бюлогп i медицини. 2013. Т. 1, № 104. С. 78-84.
9. Бескоровайная Т.С. Влияние аллелей полиморфных генов системы HLA II класса, фолатного обмена, гемостаза и детоксикации на репродукцию человека: автореф. дис. ... канд. мед. наук. М., 2005. 92 с.
10. [Электронный ресурс]. URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ (дата обращения 15.01.2018).
11. [Электронный ресурс]. URL: http://www.ensembl.org/index.html (дата обращения 15.01.2018).
References:
1. Bespalova O.N. Genetic risk factors for miscarriage: Diss abstract for the Dr. of Medicine degree. SPb., 2009. 40 pp.
2. Polymorphism of folate metabolism genes and human diseases / A.S. Dobrolyubov, M.A. Lipin, A.V. Polyakov, I.N. Fetisova // Bulletin of new medical technologies. 2006. Vol. XIII, No. 4. P. 71-73.
3. Folate: metabolism, genes, polymorphisms and associated diseases / F.H. Nazki [et al.] // Gene. 2011. P. 11-20.
4. The association of idiopathic recurrent early pregnancy loss with polymorphisms in folic acid metabolism-related genes / Y. Cao [et al.] // Genes & Nutrition. 2014. No. 9. P. 402.
5. Lifanov A.D. Association of polymorphisms of MTHFR, MTR and MTRR genes with the development of hyperho-mocysteinemia in athletes // Proceedings of the University of P.F. Lesgaft. 2013. No. 8. P. 98-101.
6. Selection of the optimal panel for the study of single nucleo-tide polymorphisms before IVF / A.V. Ivanov, A.G. Tkachuk, E.V. Komlichenko, Yu.N. Fedotov // Obstetrics and Gynecology of St. Petersburg. 2016. No. 1. P. 56-69.
7. Kokh N.V. A folate cycle: a review and practical recommendations on the interpretation of genetic tests / N.V. Kokh, A.A. Slepukhin, G.I. Lifshits // Medical Genetics. 2015. No.11. P. 3-8.
8. Alieva T.D. Study of the role of the association of polymorphisms of a folate cycle genes and chromosomal polymorphism in the mother in the formation of reproductive losses // Bulletin of Problems of Biology and Medicine. 2013. Vol. 1, No. 104. P. 78-84.
9. Beskorovainaya T.S. Influence of alleles of polymorphic genes of the HLA class II system, folate metabolism, hemo-stasis and detoxification on human reproduction: Diss. abstract for the Cand. of Medicine degree. M., 2005. 92 pp.
10. [Electronic resource]. URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/ (date of access: 15.01.2018).
11. [Electronic resource]. URL: http://www.ensembl.org/index.html (date of access: 15.01.2018).
12. Генетическое разнообразие и структура неравновесия по сцеплению гена MTHFR в популяциях Северной Евразии / Е.А. Трифонова [и др.] // Acta Naturae. 2012. Т. 4, № 1. С. 55-71.
13. Ковалевская Т.С., Вассерман Н.Н. Генетические аспекты невынашивания беременности // Медицинская генетика. 2003. Т. 2, № 11. С. 480-484.
14. [Электронный ресурс]. URL: https://www.cdc.gov/ (дата обращения: 15.01.2018).
15. Association of methionine synthase and thymidylate synthase genetic polymorphisms with idiopathic recurrent pregnancy loss / J.H. Kim [et al.] // Fertil Steril. 2013. P. 1674-1680.
16. Association of methionine synthase reductase gene polymorphism with unexplained recurrent spontaneous abortion / Q.N. Guo [et al] // Zhonghua Fu Chan KeZaZh. 2012. No. 47 (10). Р. 742-746.
17. Solute Carrier Family 19, member 1 (SLC19A1) polymorphisms (-43T>C, 80G>A and 696C>T) and haplotypes in idiopathic recurrent spontaneous abortion in a Korean population / H. Rah [et al.] // Reprod Sci. 2012. No. 19 (5). P. 513-519.
18. Prevalence of thromogenic gene mutations in women with recurrent miscarriage: a retrospective study of 1,507 patients / A. Incebiyik [et al.] // Obstet. Gynecol. Sci. 2014. No. 57 (6). Р. 513-517.
19. Lack of association between thrombophilic gene variants and recurrent pregnancy loss / C.G. Dutra [et al.] // Hum. Fertil (Camb). 2014. No. 17 (2). Р. 99-105.
20. Thrombophilic mutations and polymorphisms, alone or in combination, and recurrent spontaneous abortion / F.L. Lino [et al.] // Clin. Appl. Thromb. Hemost. 2015. No. 21 (4). Р. 365-372.
21. Association of MTHFR genetic variants C677T and A1298C on predisposition to spontaneous abortion in Slavonic population. / J.A. Hubacek [et al.] // Clin. Chim. Acta. 2015. No. 440. Р. 104-107.
22. The association between inherited thrombophilia and recurrent pregnancy loss in Turkish women / U. Isaoglu [et al.] // Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2014. No. 41 (2). Р. 177-181.
23. Inherited thrombophilia with recurrent pregnancy loss in Turkish women - a real phenomenon? / G. Yildiz [et al.] // Ginekol. Pol. 2012. No. 83 (8). Р. 598-603.
24. Methylenetetrahydrofolatereductase gene polymorphisms in Egyptian women with unexplained recurrent pregnancy loss / A. Settin [et al.] // Genet. Test Mol Biomarkers. 2011. No. 15 (12). Р. 887-892.
25. Association between MTHFR 1298A>C polymorphism and spontaneous abortion with fetal chromosomal aneuploidy / S.Y. Kim [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. 2011. No. 66(4). Р. 252-258.
26. The role of 1691G>A (Leiden) mutation in Factor V gene, 20210G>A in prothrombin gene and 677C>T in MTHFR gene in etiology of early pregnancy loss / R. Slezak [et al.] // Ginekol. Pol. 2011. No. 82 (6). P. 446-450.
27. MTHFR C677T polymorphism and recurrent early pregnancy loss risk in north Indian population / R.R. Nair [et al.] // Reprod. Sci. 2012. No. 19 (2). Р. 210-215.
28. Polymorphisms in MTHFR, MTHFD and PAI-1 and recurrent miscarriage among North Indian women / F. Parveen [et al.] // Arch. Gynecol. Obstet. 2013. No. 288 (5). Р. 1171-1177.
29. Methylenetetrahydrofolatereductase gene A1298C polymorphism and susceptibility to recurrent pregnancy loss: a meta-analysis / V. Rai [et al.] // Cell. Mol. Biol. (Noisy-le-grand). 2014. No. 60 (2). Р. 27-34.
30. Association study between methylenetetrahydrofolater-eductase polymorphisms and unexplained recurrent pregnancy loss: a meta-analysis / Y. Cao [et al.] // Gene. 2013. No. 514 (2). Р. 105-111.
31. MTHFR C677T polymorphism, folate, vitamin B12 and homocysteine in recurrent pregnancy losses: a case control study among North Indian women / M. Puri [et al.] // J. Perinat. Med. 2013. No. 41 (5). Р. 549-554.
32. Plasma homocysteine and vitamin B12 serum levels, red
12. The genetic diversity and structure of linkage dis equilibrium of the MTHFR gene linkage in populations of Northern Eurasia / E.A. Trifonova [et al.] // Acta Naturae. 2012. Vol. 4, No. 1. P. 55-71.
13. Kovalevskaya T.S., Vasserman N.N. Genetic aspects of spontaneous miscarriages // Medical Genetics. 2003. Vol. 2, No. 11. P. 480-484.
14. [Electronic resource]. URL: https://www.cdc.gov/ (date of access: January 15, 2013).
15. Association of methionine synthase and thymidylate syn-thase genetic polymorphisms with idiopathic recurrent pregnancy loss / J.H. Kim [et al.] // Fertil Steril. 2013. P. 1674-1680.
16. Association of methionine synthase reductase gene polymorphism with unexplained recurrent spontaneous abortion / Q.N. Guo [et al] // Zhonghua Fu Chan KeZaZh. 2012. No. 47 (10). P. 742-746.
17. Solute Carrier Family 19, member 1 (SLC19A1) polymorphisms (-43T>C, 80G>A and 696C>T) and haplotypes in idiopathic recurrent spontaneous abortion in a Korean population / H. Rah [et al.] // Reprod Sci. 2012. No. 19 (5). P. 513-519.
18. Prevalence of thromogenic gene mutations in women with recurrent miscarriage: a retrospective study of 1,507 patients / A. Incebiyik [et al.] // Obstet. Gynecol. Sci. 2014. No. 57 (6). P. 513-517.
19. Lack of association between thrombophilic gene variants and recurrent pregnancy loss / C.G. Dutra [et al.] // Hum. Fertil (Camb). 2014. No. 17 (2). P. 99-105.
20. Thrombophilic mutations and polymorphisms, alone or in combination, and recurrent spontaneous abortion / F.L. Lino [et al.] // Clin. Appl. Thromb. Hemost. 2015. No. 21 (4). P. 365-372.
21. Association of MTHFR genetic variants C677T and A1298C on predisposition to spontaneous abortion in Slavonic population. / J.A. Hubacek [et al.] // Clin. Chim. Acta. 2015. No. 440. P. 104-107.
22. The association between inherited thrombophilia and recurrent pregnancy loss in Turkish women / U. Isaoglu [et al.] // Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2014. No. 41 (2). P. 177-181.
23. Inherited thrombophilia with recurrent pregnancy loss in Turkish women - a real phenomenon? / G. Yildiz [et al.] // Ginekol. Pol. 2012. No. 83 (8). P. 598-603.
24. Methylenetetrahydrofolatereductase gene polymorphisms in Egyptian women with unexplained recurrent pregnancy loss / A. Settin [et al.] // Genet. Test Mol Biomarkers. 2011. No. 15 (12). P. 887-892.
25. Association between MTHFR 1298A>C polymorphism and spontaneous abortion with fetal chromosomal aneuploidy / S.Y. Kim [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. 2011. No. 66(4). P. 252-258.
26. The role of 1691G>A (Leiden) mutation in Factor V gene, 20210G>A in prothrombin gene and 677C>T in MTHFR gene in etiology of early pregnancy loss / R. Slezak [et al.] // Ginekol. Pol. 2011. No. 82 (6). P. 446-450.
27. MTHFR C677T polymorphism and recurrent early pregnancy loss risk in north Indian population / R.R. Nair [et al.] // Reprod. Sci. 2012. No. 19 (2). P. 210-215.
28. Polymorphisms in MTHFR, MTHFD and PAI-1 and recurrent miscarriage among North Indian women / F. Parveen [et al.] // Arch. Gynecol. Obstet. 2013. No. 288 (5). P. 1171-1177.
29. Methylenetetrahydrofolatereductase gene A1298C polymorphism and susceptibility to recurrent pregnancy loss: a meta-analysis / V. Rai [et al.] // Cell. Mol. Biol. (Noisy-le-grand). 2014. No. 60 (2). P. 27-34.
30. Association study between methylenetetrahydrofolatereduc-tase polymorphisms and unexplained recurrent pregnancy loss: a meta-analysis / Y. Cao [et al.] // Gene. 2013.
No. 514 (2). P. 105-111.
31. MTHFR C677T polymorphism, folate, vitamin B12 and homocysteine in recurrent pregnancy losses: a case control study among North Indian women / M. Puri [et al.] // J. Perinat. Med. 2013. No. 41 (5). P. 549-554.
32. Plasma homocysteine and vitamin B12 serum levels, red
blood cell folate concentrations, C677T methylenetetrahy-drofolatereductase gene mutation and risk of recurrent miscarriage: a case-control study in Spain / M. Creus [et al.] // Clin. Chem. Lab. Med. 2013. No. 51 (3). Р. 693-699.
33. Газиева И.А. Иммунопатогенетические механизмы формирования плацентарной недостаточности и ранних репродуктивных потерь: дис. ... д-ра биол. наук. Екатеринбург, 2014. 319 с.
34. Maternal gene polymorphisms involved in folate metabolism and the risk of having a Down syndrome offspring: a meta-analysis / M. Yang [et al.] // Mutagenesis. 2013. No. 28 (6). Р. 661-671.
35. Genetic variants in the folate pathway and the risk of neural tube defects: a meta-analysis of the published literature / T. Zhang [et al.] // PLoS One. 2013. Vol. 8, Iss. 4. P. e59570.
36. Демченко Н.С. Оценка роли полиморфизма генов фолатного цикла и ангиогенеза при неразвивающейся беременности: автореф. дис. ... канд. мед. наук. Екатеринбург, 2015. 23 с.
37. Placental folate transport during pregnancy / S. Yasuda [et al.] // Biosci Biotechnol. Biochem. 2008. No. 72 (9). P. 2277-2284.
38. [Электронный ресурс]. URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2956130/ (дата обращения: 10.01.2018).
39. An association study of the SLC19A1 gene polymor-phisms/haplotypes with idiopathic recurrent pregnancy loss in an Iranian Population / S. Mohtaram [et al.] // Genet. Test Mol. Biomarkers. 2016. No. 20. P. 235-240.
40. Polymorphisms of genes involved in the folate metabolic pathway impact the occurrence of unexplained recurrent pregnancy loss / L. Luo [et al.] // Reprod. Sci. 2015. No. 22 (7). P. 845-851.
41. The reduced folate carrier (SLC19A1) c.80G>A polymorphism is associated with red cell folate concentrations among women / A. Stanislawska-Sachad [et al.] // Ann. Hum. Genet. 2009. No. 73. P. 484-491.
42. Вайнер А.С., Жечев Д.А. Метаболизм фолатов и врожденные аномалии развития // Мать и дитя в Кузбассе. 2011. № 2. С. 3-10.
43. Кулиш О.Н. Роль 80G/A полиморфизма гена, кодирующего транспортер восстановленных фолатов (RFC1), в развитии врожденных дефектов невральной трубки плода: материалы VII Междунар. Пироговской науч. мед. конф. студентов и молодых ученых // Вестник РГМУ. 2012. № 1. 548 с.
44. Bueno O., Molloy A.M. Common Polymorphisms That Affect Folate Transport or Metabolism Modify the Effect of the MTHFR 677C>T Polymorphism on Folate Status // J. Nutr. 2016. No. 146 (1). P. 1-8.
45. Семенова Т.В., Милютина Ю.П., Арутюнян А.В. Нарушение фолатного обмена при табакокурении во время беременности // Журнал акушерства и женских болезней. 2013. Т. LXII, № 2. С. 34-42.
46. Фетисова И.Н., Перетятко Л.Н., Дюжев Ж.А. Полиморфизмы генов фолатного цикла в семьях с привычным невынашиванием беременности, пороками развития плода и анэмбрионией // Вестник РУДН. Сер. Медицина. 2009. № 6. С. 11-18.
blood cell folate concentrations, C677T methylenetetrahy-drofolatereductase gene mutation and risk of recurrent miscarriage: a case-control study in Spain / M. Creus [et al.] // Clin. Chem. Lab. Med. 2013. No. 51 (3). P. 693-699.
33. Gazieva I.A. Immunopathogenetic mechanisms of formation of placental insufficiency and early reproductive losses: Diss. for the Dr. of Biol. degree. Ekaterinburg, 2014. 319 pp.
34. Maternal gene polymorphisms involved in folate metabolism and the risk of having a Down syndrome offspring: a meta-analysis / M. Yang [et al.] // Mutagenesis. 2013. No. 28 (6). P. 661-671.
35. Genetic variants in the folate pathway and the risk of neural tube defects: a meta-analysis of the published literature / T. Zhang [et al.] // PLoS One. 2013. Vol. 8, Iss. 4. P. e59570.
36. Demchenko N.S. Evaluation of the role of polymorphism of the folate cycle genes and angiogenesis in case of non-developing pregnancy: Diss. abstract for the Cand. of Medicine degree. Ekaterinburg, 2015. 23 pp.
37. Placental folate transport during pregnancy / S. Yasuda [et al.] // Biosci Biotechnol. Biochem. 2008. No. 72 (9). P. 2277-2284.
38. [Electronic resourse]. URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2956130/ (Date of access: 10.01.2018).
39. An association study of the SLC19A1 gene polymor-phisms/haplotypes with idiopathic recurrent pregnancy loss in an Iranian Population / S. Mohtaram [et al.] // Genet. Test Mol. Biomarkers. 2016. No. 20. P. 235-240.
40. Polymorphisms of genes involved in the folate metabolic pathway impact the occurrence of unexplained recurrent pregnancy loss / L. Luo [et al.] // Reprod. Sci. 2015. No. 22 (7). P. 845-851.
41. The reduced folate carrier (SLC19A1) c.80G>A polymorphism is associated with red cell folate concentrations among women / A. Stanislawska-Sachad [et al.] // Ann. Hum. Genet. 2009. No. 73. P. 484-491.
42. Vainer A.S., Zhechev D.A. Folate metabolism and congenital anomalies // Mother and Child in Kuzbass. 2011. No. 2. P. 3-10.
43. Kulish O.N. The role of 80G/A polymorphism of the gene encoding the carriers of reduced folates (RFC1) in the development of congenital defects of the fetal neural tube: materials of the VII International Pirogov's scient. med. conf. of students and young scientists // Bulletin of RSMU.
2012. No. 1. 548 pp.
44. Bueno O., Molloy A.M. Common Polymorphisms That Affect Folate Transport or Metabolism Modify the Effect of the MTHFR 677C>T Polymorphism on Folate Status // J. Nutr. 2016. No. 146 (1). P. 1-8.
45. Semyonova T.V., Milyutina Yu.P., Arutyunyan A.V. Violation of folate metabolism in tobacco smoking during pregnancy // Journal of Obstetrics and Women's Diseases.
2013. Vol. LXII, No. 2. P. 34-42.
46. Fetisova I.N., Peretyatko L.N., Dyuzhev Zh.A. Polymorphisms of folate cycle genes in families with habitual miscarriages, malformations of the fetus and anembryonia // Bulletin of the RUDN. Ser. Medicine. 2009. No. 6. P. 11-18.
