CC BY
41
Павлова А. А., Соколова Ю. В., Павлова И. Е., Бубнова Л. Н., Бессмельцев С. С.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург.
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ У ЖИТЕЛЕЙ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО РЕГИОНА РОССИИ
Цитокины — большая группа гормоноподобных белков, пептидов или гликопротеинов, которые продуцируются клетками иммунной системы и являются сигнальными молекулами. Они опосредуют и регулируют иммунный ответ, процессы воспаления и кроветворения. Цитокины могут действовать на клетки аутокринно, паракринно или эндокринно. Гены цитокинов
и их рецепторов полиморфны, одиночные нуклеотидные полиморфные варианты (SNP-single nucleotide polymophism) в промоторной области гена могут влиять на скорость секреции цитокина, а также на его биологическую активность. Базовый уровень продукции цитокина во многом зависит от аллельного варианта регуляторных участков промоторных зон, является кон-
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ,, том IX, № 2, 2013
ституционно присущим и относительно стабильным у каждого человека на протяжении жизни. Известно, что уровень цитокинов и их рецепторов непосредственно связан с развитием различных злокачественных новообразований у человека. Например, цитокины играют важную роль в патогенезе такой злокачественной неоплазии, как множественная миелома (ММ). Присутствие IL-6 и его рецепторов в плазме крови связывают с прогрессированием и более агрессивным течением ММ, т. к. он является ростовым и антиапопто-тическим фактором для миеломных клеток и их предшественников, влияя на дифференцировку и пролиферацию. Этот цитокин вместе с IL-1P, TNF-a и IL-11 — стимулируют остеокласты, вызывая резорбцию костной ткани. IL-10 — один из важнейших цитокинов, участвующих в терминальной дифференцировке В-клеток в плазматические клетки, также является фактором роста злокачественных клеток и стимулирует их пролиферацию (примерно у половины больных ММ). При этом практически отсутствуют данные в отечественной литературе, отражающие взаимосвязь между аллельными вариантами генов ци-токинов и развитием, течением, а также ответом на проводимую терапию при ММ. Для изучения такой взаимосвязи на первом этапе необходимо изучить распределение аллельных вариантов генов цитокинов в популяции здоровых лиц того региона, где предполагается дальнейшее изучение упомянутой зависимости.
Нами были обследованы 40 доноров крови (16 мужчин и 24 женщины), проживающих в г. Санкт-Петербурге, считающих себя и своих родителей русскими и не связанных кровным родством. Исследовался однонуклеотидный полиморфизм промоторного региона генов цитокинов и их рецепторов: IL-1a-889T/C; IL-1P-511T/C; IL-1P +3962T/C; IL-1R pst 1970 C/T; IL-1RA mspa1 11100T/C; IL-4Ra +1902G/A; IL-12 -1188C/A; IFNy utr 5644A/T; TGF- P1 codon 10C/T; TGF-P1 codon 25G/C; TNF-a -308G/ A; TNF-a -238G/A; IL-2 -330T/G; IL-2 +166G/T;
IL-4 -1098T/G; IL-4 -590T/C; IL-4 -33T/C; IL-6 -174G/C; IL-6 nt565G/A; IL-10 -1082G/A; IL-10 -819C/T; IL-10 -592C/A. Геномную ДНК выделяли из ядросодержащих клеток периферической крови с помощью коммерческого набора BOX 500 (PRONRANS); генотипирование проводили посредством PCR-SSP с использованием коммерческого набора Cytokine genotyping Kit (Invitrogen), визуализация продуктов амплификации осуществлялась посредством электрофореза в горизонтальном агарозном геле. В общей группе обследованных здоровых лиц установлены следующие частоты SNP: IL-1a -889 (50,0% TC; 47,5% CC; 2,5% TT); IL-1P -511 (52,5% TC; 37,5% CC; 10,0% TT); IL-1P +3962 (30,5% TC; 56,5% CC; 13,0% TT); IL-1R pst 1970 (32,5% TC; 35,0% CC; 32,5% TT); IL-1RA mspa1 11100 (50,0% TC; 22,5% CC; 27,5% TT;); IL-4Ra +1902 (32,5% GA; 67,5% AA); IL-12 -1188 (29,5% AC; 5,0% CC; 65,5% AA); IFNy utr 5644 (62,5% TA; 17,5% AA; 20,0% TT); TGF-P1 codon 10 (62,5% TC; 12,5% CC; 25,0% TT); TGF-P1 codon 25 (7,5% GC; 82,5% GG; 10,0% CG); TNF-a -308 (15,0% GA; 85,0% GG); TNF-a -238 (7,5% GA; 92,5% GG); IL-2 -330 (35,5% TG; 52,5% TT; 15,0% GG); IL-2 +166 (42,5% TG; 12,5% TT; 45,0% GG); IL-4 -1098 (20,0% TG; 80,0% TT); IL-4 -590 (52,5% TC; 5,0% TT; 42,5% CC); IL-4 -33 (37,5% TC; 10,0% TT; 52,5% CC); IL-6 -174 (70,0% GC; 12,5% GG; 17,5% CC); IL-6 nt565 (80,0% GA; 12,5% GG; 7,5% AA); IL-10 -1082 (52,5% GA; 17,5% GG; 30,0% AA); IL-10 -819 (47,5% TC; 40,0% CC; 12,5% TT); IL-10 -592 (46,5% AC; 41,0% CC; 12,5% AA). Нами не было выявлено различий между мужчинами и женщинами в частоте встречаемости изученных SNP цитокинов и их рецепторов. Полученные данные могут служить как для дальнейших иммуногенетических популяционных исследований, так и в качестве группы сравнения для определения роли генов цитокинов в развитии и течении множественной миеломы.
