CC BY
61
тельности. Животных облучали однократно в течение 1 и 2 мин и троекратно в течение трех суток (по 2 мин один раз в сутки). Оценку состояния метаболической активности нейтрофилов проводили по результатам постановки спонтанного и стимулированного теста с нитросиним тетразолием (НСТ-тест). В ходе реакции НСТ поглощается нейтрофилами и под влиянием их дегидрогеназной системы бесцветный НСТ восстанавливается в темно-фиолетовые гранулы диформазана, которые визуально определяются путем микроскопирования.
Результаты. Установлено, что некогерентное импульсное излучение при воздействии на организм подопытных животных способствовало возрастанию кислородзависимого метаболизма нейтрофилов при всех выбранных режимах. Наиболее наглядно это показывает возросший коэффициент позитивно реагирующих клеток как при спонтанном, так и при активированном варианте НСТ-теста. Возрастание было статистически значимо и составило 15-28 % для спонтанного и 7-14 % для активированного
НСТ-теста по сравнению с группой животных, не подвергавшихся воздействию. Наиболее существенными были изменения при трехкратной обработке некогерентным импульсным излучением в течение двух минут, установлено статистически значимое возрастание позитивно реагирующих клеток спонтанного варианта НСТ-теста с 72,0 ± 5,2 % до 92,0 ± 3,61 % (р<0,005) по сравнению с группой животных с перевиваемым слизистым раком печени, не подвергавшихся воздействию. Вероятно, в случае физико-химической стимуляции фагоцитов происходит прайминг клеток и формирование «кислородного взрыва», что обеспечивает активацию NADPH-азы и, следовательно, образование активных форм кислорода.
Выводы. Трехкратное воздействие некогерентным высокоэнергетическим импульсным излучением в течение двух минут наиболее выраженно стимулирует образование активных форм нейтрофилами периферической крови животных с альвеолярным слизистым раком печени.
полиморфизм генов эксцизионной РЕПАРАЦИИ ДНК XRCC1 С194Т И XPD A751C ПРИ РАКЕ ЛЕГКОГО
И.А. КУЗНЕЦОВА, А.И. ДМИТРИЕВА, С.С. РАКИТИН, В.В. НОВИЦКИЙ
ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Томск
Актуальность. Система репарации ДНК - одна из важных систем, функционирование которой в норме обеспечивает восстановление повреждений в структуре ДНК. Изучение полиморфизма генов системы репарации ДНК может дать существенную информацию для формирования групп с повышенным риском развития рака легкого.
Цель исследования. Изучить полиморфизм генов системы эксцизионной репарации ДНК как фактора генетической предрасположенности к раку легкому. Выявить распределение полиморфных вариантов генов репарации XRCC С194Т и ХРБ А751С у больных раком лёгкого и у здоровых лиц.
Материал и методы. Работа основана на результатах обследования 65 больных раком
легкого (средний возраст - 54 ± 8 лет), состоящих на диспансерном учете в ОГУЗ «Томский областной онкологический диспансер», и 100 здоровых доноров (средний возраст - 52 ± 6 лет). Диагноз рака легкого в каждом наблюдении был подтвержден морфологическим, рентгенологическим и эндоскопическим обследованием. Выделение ДНК из лейкоцитов венозной крови проводили методом осаждения ДНК на сорбенте («ДНК Сорб-АМ», ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора г. Москва). Типирование образцов по полиморфизмам двух генов системы репарации XRCC1 194 и XPD 751 проводили путем полимеразной цепной реакцией (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» с использованием двух пар олигонуклеотидных праймеров,
специфичных к участку гена XRCC1 С194Т (£ 5’-ggt-aag-ctg-tac-ctg-tca-ctc; г: 5’-gac-cca-gga-atc-tga-gcc) и гена ХРБ А751С (£ 5’tca-aac-atc-ctg-tcc-cta-ct; г: 5’ctg-ccg-att-aaa-ggc-tgt-gga).
Результаты. Анализ С194Т полиморфизма гена XRCC1 показал, что у больных раком легкого и у здоровых лиц частота встречаемости вариантных генотипов (С/С, С/Т, Т/Т-генотипов) оказалась практически одинаковой - 90 % и 88,89 %; 9 % и 9,52 %; 1 % и 1,59 % соответственно (х2=0,126, р=0,939). Частота С-аллеля у больных раком легкого составила 93,65 %, у здоровых лиц - 94,5 %, Т-аллеля - 6,35 % и 5,5 % соответственно (р=0,939, %2=0,006). При анализе А751С-полиморфизма гена ХРБ выявлено, что
частота А/С-генотипа у больных раком легкого превышала таковую у здоровых лиц, - 33,8 % и 13 % (0Я=8,09, С195% 3,19-20,88). Это дало возможность предположить, что А/С-генотип выполняет предрасполагающую функцию к возникновению рака легкого. Частота С-аллеля у больных раком легкого оказалась выше, чем у здоровых лиц - 55,3 % и 7,5 % соответственно. OR рака легкого для носителей С-аллеля составил 15,3 (С195% 9,41-40,44).
Выводы. Полученные результаты свидетельствуют об актуальности дальнейших исследований по оценке значимости полиморфизмов исследованных генов как фактора риска рака легкого.
полиморфизм A1026G И 03690 ГЕНА CDKN1A/P21 И Р53 ПРИ РАКЕ ЛЕГКОГО
И.А. КУЗНЕЦОВА, А.И. ДМИТРИЕВА, С.С. РАКИТИН, В.В. НОВИЦКИЙ
ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Томск
Актуальность. В настоящее время не вызывает сомнений, что онкогенез заключается в патологических изменениях на молекулярном и клеточном уровне. Причинами предрасположенности к злокачественным новообразованиям и опухолевой прогрессии являются не только соматические мутации, но и аллельный полиморфизм.
Цель исследования. Изучить полиморфизм генов регуляции клеточного цикла CDKN1A/ р21 (A1026G и G369C) и р53 (72^/С)при раке легкого.
Материал и методы. Было обследовано 65 больных раком легкого (средний возраст - 54 ± 8 лет) и 100 здоровых доноров (средний возраст - 52 ± 6 лет). Диагноз рака легкого был подтвержден морфологически, эндоскопически и рентгенологически. Генотипирование проводили методом ПЦР/ПДРФ-анализа с использованием олигонуклеотидных праймеров: 1026 АЮ (ге2395655) £ 5'-cat-ttc-ttt-gct-gca-tga-tct-gag-tt-3' ,г: 5'-ccc-tac-act-cac-ctg-aac-aga-agg-3'; 369 G/C (ге4135239) £ 5'-gat-ttg-tgg-ctc-act-tcg-tgg-gg-3', г: 5'-gct-cct-ggc-tgc-cca-gcg-t-5; для р53 £ 5’-А§-ccg-tcc-caa-gca-atg-gat-ga-3’, г: 5’-tct-ggg-aag-
gga-cag-aag-atg-ac-3’ («Лаборатория Медиген», Россия).
Результаты. Анализ 72-О/С- полиморфизма гена р53 позволил установить незначительное увеличение частоты вариантного О72С-генотипа гена р53 у больных раком легкого по сравнению с таковой у здоровых (38 % и 32 % соответственно; р=0,695). Нами были проанализированы два полиморфизма гена СОКША/р21: 1026 А/О и 369 О/С- в 5/-промоторе гена. При анализе 1026-АО-полиморфизма гена р21 было установлено двукратное снижение частоты АО-генотипа у больных раком легкого по сравнению с таковой у здоровых лиц (38 % и 77 % соответственно; 0Я=0,72, С195% 0,081-3,95). Частота АА-генотипа гена р21 у больных раком легкого и здоровых составила 50 % и 19 % соответственно (ОЯ=5,35, С195% 2,45-11,80), для ОО-генотипа гена р21 - 10% и 4 % соответственно (ОЯ=5,39, С195% 1,27-24,29). Это дало нам возможность предположить, что АО-генотип выполняет протективную, а АА-генотип - предрасполагающую роль к возникновению рака легкого. Частота А-аллеля у больных раком легкого оказалась выше, чем у здоровых лиц (70 % и 57,5 % соответственно). ОЯ рака лег-
