CC BY
20
белых крысах-самцах массой 250-300 г, которым на протяжении 10 дней ежедневно интрагастрально вводили водку и сладкие настойки в дозах 10 и 20 г/кг массы тела по разработанной нами методике (И.Е. Голубев, П.И. Цапок, 2003). В ходе эксперимента ежедневно проводили изучение поведенческих реакций и оценку клинического состояния животных. На десятые сутки животных декапитировали под кратковременным эфирным наркозом. Интенсивность процессов ЛПО и АОЗ изучали в плазме и эритроцитах крови методом хемилюминесценции (ХЛ) и по содержанию продуктов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБКап). В сыворотке крови определяли содержание общего белка и тотальных липидов, холестерола (ХС) и его фракций, активность церулоплазмина, Y-глутамилтранспептидазы (ГГТП), аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинами-нотрансферазы (АЛТ). Клиническое наблюдение за белыми крысами, подвергнутыми алкоголизации, выявило кратковременное угнетение поведенческих реакций. При изучении биохимических показателей плазмы крови установлено, что длительное введение алкогольных напитков приводило к гиперферментемии гепатоспецифических энзимов; сывороточная активность ГГТП повышалась в среднем на 70%, а АЛТ — на 49% по сравнению с контрольной группой. Наряду с этим выявлено снижение интенсивности процессов ЛПО, что выражалось снижением ТБКап, уменьшением величины максимальной фотовспышки ХЛ на 50%, и свето-суммы ХЛ на 20-25%. Выявлено также достоверное снижение уровня церулоплазмина и общего ХС (на 40%), что, возможно, направлено на поддержание системы АОЗ. Изменения вышеприведенных показателей в эритроцитах были выражены слабее и носили разнонаправленный характер. Таким образом, данный биохимический метод изучения процессов ЛПО и состояния АОЗ организма может быть использован для оценки качества винно-водочных изделий. Полученные результаты расширяют понимание механизмов антиатерогенной роли этанола и подчеркивают его участие в регуляции оксидантно-антиоксидантного баланса.
РЕГУЛЯЦИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИХ СИСТЕМ КРОВИ НОВОРОЖДЕННЫХ ДЕТЕЙ С ГИПОКСИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ЦНС
Гунбина Т.Е., Никифорова Ю.С., Ожегова Д.С., Кузьмина М.Ю. Сибирский государственный медицинский университет, кафедра биохимии и молекулярной биологии Научные руководители - д. б. н., проф. Г.А. Суханова, д.м.н. Е.И. Кондратьева Зав. кафедрой - д.м.н., проф. В.Ю. Серебров
Калликреин-кининовая (ККС) и ренин-ангиотензиновая системы (РАС) являются ключевыми протеолитическими системами крови, участвующими в регуляции тонуса сосудов, их роль в развитии гипоксического поражения ЦНС не изучена, но известно, что сосуды мозга наиболее чувствительны к воздействию кининов. Контроль над этими системами осуществляют ингибиторы протеиназ. Изучение активности ККС и РАС необходимо для оценки нарушений гемодинамики при гипоксически - ишемической энцефалопатии (ГИЭ). Цель работы: изучить состояния калликреин-кининовой, ренин-ангиотензиновой систем и протеиназных ингибиторов крови при гипоксической энцефалопатии у новорожденных детей. Изучали активность калликреина (КК), калликреиногена (ККГ), АПФ, си- протеиназного ингибитора (агПИ) и а2-макроглобулина (а2-МГ) крови на 5-7 сутки у 20 новорожденных 1,11 степени недоношенности с гИэ - 1, 2 группы соответственно и 10 доношенных новорожденных с ГИЭ - контроль. Активность КК, ККГ; АПФ; сн-ПИ и а2-МГ в контроле составила 223,35±17,04,255,63±23,07 мЕ/мл; 59,84±6,66 мкмоль/лмин; 43,27 ± 5,25 и 2,04 ± 0,38 ИЕ/мл, соответственно. В 1 группе наблюдалась активация ККС, о чем свидетельствовало повышение активности КК и ККГ в 1,3 и 1,6 раз , а2-МГ в 1,4 раза и снижение активности АПФ в 2,2 раза соответственно по сравнению с контролем. Во 2 группе наблюдалось увеличение активности АПФ в 1,4 раза (р<0,05) по сравнению с контролем, активность КК, ККГ, ои-Пи и а2-МГ достоверно не отличалась от контрольных значений. Таким образом, у новорожденных детей при I степени недоношенности происходит более выраженная актива-
ция ККС и снижение активности АПФ, чем при II степени недоношенности, что свидетельствует о значительных нарушениях регуляции систем протеолиза при тяжелых формах энцефалопатии.
ИЗМЕНЕНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ЩЕЛОЧНОЙ ФОСФАТАЗЫ В ПРИСУТСТВИИ ХЛОРИДА ТРИМЕТИЛОЛОВА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА Додохова М.А., Гончарова Е.И.
Ростовский государственный медицинский университет, кафедра общей и клинической биохимии №2 Научные руководители - доц. Л.М.Пустовалова, проф. Е..Р. Милаева
Зав. кафедрой - доц. Л.М. Пустовалова
Цель работы состояла в изучении влияния триметилолово-хлорида на изменение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови человека. Известно, что, оловоорганиче-ские соединения, являясь суперэкотоксикантами, могут оказывать отрицательное воздействие на деятельность многих ферментов, угнетая их активность. В плане проводимых нами исследований влияния органических производных тяжелых металлов на активность ферментов печени и крови живых организмов, представлялось интересным рассмотреть характер изменения ферментативной активности щелочной фосфатазы в присутствии токсиканта - хлорида триметилолова. Активность щелочной фосфатазы определяли по стандартной методике на негемолизированной свежеприготовленной сыворотке крови практически здоровых людей спектрофотометрически в щелочной среде при длине волны 405 нм. Установлено ингибирующее влияние триметилоловохлорида на ферментативную активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови, возрастающее с повышением концентрации оловоорганического соединения и времени экспозиции. На основании зависимости относительной активности фермента (Аотн) от концентрации ингибитора (Синг) определена его критическая концентрация (1С50), способствующая падению активности фермента на 50%, которая составляет 1С50 = 40 ммоль/л и может явиться количественным критерием токсичности ингибитора в отношении данного фермента. В условиях нашего эксперимента зарегистрировано снижение активности фермента от 25 до 60% при введении токсиканта. Зависимость Аотн от Синг, построенная в полулогарифмических координатах (Аотн - 1дСинг), описывается прямой (коэффициент корреляции - 0,99), по тангенсу угла наклона которой оценена чувствительность фермента к изменению концентрации токсиканта. Полученные результаты сопоставлены с данными по влиянию триметилоловохлорида на активность трансаминаз (аспартат- и аланинами-нотрансферазы). Обсуждается возможный механизм ин-гибирующего действия оловоорганических соединений на каталитическую активность ферментов.
ПОКАЗАТЕЛИ МЕТАБОЛИЗМА ПРОТЕИНОВ ПРИ ВЫПОЛНЕНИИ ДОЗИРОВАННОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ РАЗНОАДАПТИРОВАННЫХ ЛИЦ Егорова А.С.
Кировская государственная медицинская академия, Вятское НОУ «Вектор», кафедра биохимии Научный руководитель - к.м.н. А.В. Еликов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок
Известно, что даже умеренная мышечная деятельность вызывает отчетливые изменения в метаболизме белков. Целью нашей работы было изучить обмен протеинов при выполнении физической нагрузки у разноадаптированных лиц. Объектом исследования служила сыворотка крови 30 студентов-добровольцев мужского пола в возрасте от 18 до 25 лет. Величину адаптационного потенциала (АП) определяли по методике Р.М. Баевского и др. (1987). Испытуемые делились на 2 группы: 1-я - удовлетворительная адаптация, 2-я - напряжение механизмов адаптации. Забор крови проводили из локтевой вены до и после физической нагрузки, которая дозировалась в виде велоэрго-метрии. В сыворотке крови исследовали показатели обмена протеинов: общий белок, среднемолекулярные пеп-
Вятский медицинский вестник, №1, 2005
тиды, мочевина, креатинин, а также активность ферментов трансаминирования - АСТ и АЛТ. В состоянии покоя достоверных отличий между группами не выявлено, в то время как после велоэргометрии значения исследуемых показателей превышали у испытуемых 2-ой группы на 6,260,6 % аналогичные показатели у испытуемых 1-ой группы, что свидетельствует о большей степени активации у них катаболизма белков. Полученные данные свидетельствуют о разном вкладе белкового обмена в процесс адаптации к мышечной деятельности в зависимости от исходного функционального состояния.
СОСТОЯНИЕ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ И АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ПРИ ИММОБИЛИЗАЦИОННОМ ДИСТРЕСС-СИНДРОМЕ Еликов А.В., Караваев С.А.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра биохимии
Научный руководитель - д.м.н., проф. П.И. Цапок Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок
Мышечная деятельность является необходимым компонентом существования организма. Резкое снижение двигательной активности - гиподинамия, является фактором, сопутствующим многим заболеваниям и преболезненным состояниям человека. Нередко гиподинамия существенно осложняет течение основного патологического процесса. Объектом нашего исследования служила плазма крови 50 белых крыс-самцов с различным сроком полной иммобилизации по разработанной нами методике (А.В. Еликов, 2002). Животных выводили из эксперимента соответственно на 1-й, 2-й, 3-й, 4-й, 5-й день путем декапитации в состоянии эфирного наркоза. В полученной плазме исследовали продукты начальных, промежуточных и конечных этапов перекисного окисления липидов (ПОЛ), состояние антиоксидантной активности (АОА) и антирадикальной активности (АРА). Параллельно определяли показатели, характеризующие липидный, углеводный и белковый обмен. Установлена активация процессов ПОЛ, что сопровождалось значительным увеличением интенсивности хемилюминесценции, а также накоплением конечных и промежуточных продуктов ПОЛ в плазме крови, на фоне снижения АОА и АРА в процессе иммобилизации. Вышеуказанные изменения, по нашему мнению, связаны с развитием дистресс-синдрома, являющегося следствием ограничения мышечной деятельности. Полученные данные позволяют рекомендовать включение антиоксидантов в комплексную терапию лиц, вынужденно находящихся в состоянии гиподинамии.
ПРИМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ, ПОЛУЧЕННЫХ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИМ МЕТОДОМ, В ЗАДАЧАХ ДЕТОКСИКАЦИИ Журавлева О.В.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии. Научный руководитель - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин Заведующий кафедрой - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин
В настоящее время проблема детоксикации пациентов при различных видах патологий стоит особо остро и актуально. Существующие методы детоксикации не всегда адекватны и подчас не соответствуют ургентности ситуации. В силу выше сказанного задача разработки и синтез эффективных детоксикантов является чрезвычайно актуальной. Целью настоящей работы явилось изучение коллоидных растворов различных омыляемых липидов в качестве исходного сырья для синтеза детоксикантов биотехнологическими методами. Материалы и методы. Использовали дисперсные суспензии омыляемых липидов различного происхождения. В качестве эмульгирующих агентов использовали мыла, синтезированное на основе тех же самых липидов, в качестве токсиканта всюду использовали этанол. Полученные мелкодисперсные суспензии липида, эмульгатора и токси-канта-олеата вводили в перитониум подопытных мышей; после некоторой экспозиции осуществляли их забой, а содержимое перитониума стабилизировали этанолом для
длительного хранения в условиях холодильника (+4,+8 С). Оценка детоксикационного эффекта проводилось путем подсчета жизнеспособных клеток лимфоидной системы (от доноров) по их гибели и последующего эозинового окрашивания и микроскопирования. В результате получены рекомендации представляющие интерес для практического здравоохранения.
ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ НЕКОТОРЫХ ФЕРМЕНТОВ В СЛЮНЕ У НОРМАЛЬНЫХ ЛЮДЕЙ Заболотнева Ю. А.
ВолГМУ, кафедра теоретической и клинической биохимии Научный руководитель - к.х.н. В.Е. Веровский Зав. кафедрой - д.м.н., проф. О.В. Островский
В последнее время сильно возросло внимание исследователей к изучению состава и свойств слюны человека. В связи с бурным развитием новых методов лабораторной диагностики и растущим интересом к уникальным свойствам слюны и диагностическими возможностями, связанными с ней открываются перспективы использования этой биологической жидкости в качестве нового неинвазивного метода прогнозирования развития сахарного диабета у пациентов. В качестве объекта исследования в слюне изучалась динамика активности ферментов гликолиза, глюконеогенеза, пентозофосфатного пути - малатдегидрогеназы, лактатде-гидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Предполагалось, что изменение гормонального фона (инсу-лин/глюкагон) сказывается на активности этих ферментов. Исследования проводились на образцах слюны людей обоего пола в возрасте 18-20 лет. Активность лактатдегид-рогеназы, малатдегидрогеназы и глюкозо-6-фосфатде-гидрогеназ определялась спектрофотометрическим методом кинетически при 340 нм (максимум поглощения восстановленных коферментов) и температуре 37°С при насыщающих концентрациях субстратов (5ммоль/л) и коферментов (0,25 ммоль/л). Объемы пробы - 100мкл (лактатде-гидрогеназа и малатдегидрогеназа) и 500 мкл (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа). Активность глюкозо-6-фосфатде-гидрогеназы определялась в присутствии 5 ммоль/л МдС12. В каждой серии экспериментов регистрировались значения активности ферментов до и через 15, 30, 60, 120 и 180 минут после нагрузки 200 мл 25% раствора глюкозы. В ходе исследования установлено, что изменения активности исследованных ферментов во времени после нагрузки глюкозой у всех пациентов носили однотипный характер. Активность лактатдегидрогеназы через 15-30 минут после нагрузки глюкозой достоверно снижается до 65-70% от исходного уровня.
ОСОБЕННОСТИ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УРОВНЯ АДАПТАЦИОННОГО ПОТЕНЦИАЛА ПРИ ДОЗИРОВАННОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКЕ Караваева А.В., Штина И.Г., Ветошкин К.В., Ожиганова Е.В. Кировская государственная медицинская академия, Вятское НОУ «Вектор», кафедра биохимии Научные руководители - д.м.н., проф. П.И. Цапок, к.м.н. А.В. Еликов
Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок
Исследования липидного обмена имеют важную прогностическую ценность как для оценки адаптации к мышечной деятельности, так и состояния сердечно-сосудистой системы. Нами проведено исследование показателей липидного обмена у 30 разноадаптированных студентов-добровольцев, мужчин в возрасте от 18 до 25 лет. Величину адаптационного потенциала (АП) определяли по методике Р.М. Баевского и др. (1987). Физическая нагрузка дозировалась в виде велоэргометрии. В зависимости от уровня АП испытуемые делились на 2 группы: 1-я - удовлетворительная адаптация, 2-я - напряжение механизмов адаптации. Забор крови проводили из локтевой вены до и после физической нагрузки. В сыворотке крови определяли общий хо-лестерол (Хс) и его фракции, общие липиды (ОЛ), р-липопротеины, триацилглицеролы (ТАГ), проводили расчет индекса атерогенности (ИА). Анализ полученных данных свидетельствует о более высоких значениях некоторых ис-
