CC BY
27
Вятский медицинский вестник, №1, 2005
тиды, мочевина, креатинин, а также активность ферментов трансаминирования - АСТ и АЛТ. В состоянии покоя достоверных отличий между группами не выявлено, в то время как после велоэргометрии значения исследуемых показателей превышали у испытуемых 2-ой группы на 6,260,6 % аналогичные показатели у испытуемых 1-ой группы, что свидетельствует о большей степени активации у них катаболизма белков. Полученные данные свидетельствуют о разном вкладе белкового обмена в процесс адаптации к мышечной деятельности в зависимости от исходного функционального состояния.
СОСТОЯНИЕ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ И АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ПРИ ИММОБИЛИЗАЦИОННОМ ДИСТРЕСС-СИНДРОМЕ Еликов А.В., Караваев С.А.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра биохимии
Научный руководитель - д.м.н., проф. П.И. Цапок Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок
Мышечная деятельность является необходимым компонентом существования организма. Резкое снижение двигательной активности - гиподинамия, является фактором, сопутствующим многим заболеваниям и преболезненным состояниям человека. Нередко гиподинамия существенно осложняет течение основного патологического процесса. Объектом нашего исследования служила плазма крови 50 белых крыс-самцов с различным сроком полной иммобилизации по разработанной нами методике (А.В. Еликов, 2002). Животных выводили из эксперимента соответственно на 1-й, 2-й, 3-й, 4-й, 5-й день путем декапитации в состоянии эфирного наркоза. В полученной плазме исследовали продукты начальных, промежуточных и конечных этапов перекисного окисления липидов (ПОЛ), состояние антиоксидантной активности (АОА) и антирадикальной активности (АРА). Параллельно определяли показатели, характеризующие липидный, углеводный и белковый обмен. Установлена активация процессов ПОЛ, что сопровождалось значительным увеличением интенсивности хемилюминесценции, а также накоплением конечных и промежуточных продуктов ПОЛ в плазме крови, на фоне снижения АОА и АРА в процессе иммобилизации. Вышеуказанные изменения, по нашему мнению, связаны с развитием дистресс-синдрома, являющегося следствием ограничения мышечной деятельности. Полученные данные позволяют рекомендовать включение антиоксидантов в комплексную терапию лиц, вынужденно находящихся в состоянии гиподинамии.
ПРИМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ, ПОЛУЧЕННЫХ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИМ МЕТОДОМ, В ЗАДАЧАХ ДЕТОКСИКАЦИИ Журавлева О.В.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии. Научный руководитель - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин Заведующий кафедрой - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин
В настоящее время проблема детоксикации пациентов при различных видах патологий стоит особо остро и актуально. Существующие методы детоксикации не всегда адекватны и подчас не соответствуют ургентности ситуации. В силу выше сказанного задача разработки и синтез эффективных детоксикантов является чрезвычайно актуальной. Целью настоящей работы явилось изучение коллоидных растворов различных омыляемых липидов в качестве исходного сырья для синтеза детоксикантов биотехнологическими методами. Материалы и методы. Использовали дисперсные суспензии омыляемых липидов различного происхождения. В качестве эмульгирующих агентов использовали мыла, синтезированное на основе тех же самых липидов, в качестве токсиканта всюду использовали этанол. Полученные мелкодисперсные суспензии липида, эмульгатора и токси-канта-олеата вводили в перитониум подопытных мышей; после некоторой экспозиции осуществляли их забой, а содержимое перитониума стабилизировали этанолом для
длительного хранения в условиях холодильника (+4,+8 С). Оценка детоксикационного эффекта проводилось путем подсчета жизнеспособных клеток лимфоидной системы (от доноров) по их гибели и последующего эозинового окрашивания и микроскопирования. В результате получены рекомендации представляющие интерес для практического здравоохранения.
ИЗМЕНЕНИЕ АКТИВНОСТИ НЕКОТОРЫХ ФЕРМЕНТОВ В СЛЮНЕ У НОРМАЛЬНЫХ ЛЮДЕЙ Заболотнева Ю. А.
ВолГМУ, кафедра теоретической и клинической биохимии Научный руководитель - к.х.н. В.Е. Веровский Зав. кафедрой - д.м.н., проф. О.В. Островский
В последнее время сильно возросло внимание исследователей к изучению состава и свойств слюны человека. В связи с бурным развитием новых методов лабораторной диагностики и растущим интересом к уникальным свойствам слюны и диагностическими возможностями, связанными с ней открываются перспективы использования этой биологической жидкости в качестве нового неинвазивного метода прогнозирования развития сахарного диабета у пациентов. В качестве объекта исследования в слюне изучалась динамика активности ферментов гликолиза, глюконеогенеза, пентозофосфатного пути - малатдегидрогеназы, лактатде-гидрогеназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы. Предполагалось, что изменение гормонального фона (инсу-лин/глюкагон) сказывается на активности этих ферментов. Исследования проводились на образцах слюны людей обоего пола в возрасте 18-20 лет. Активность лактатдегид-рогеназы, малатдегидрогеназы и глюкозо-6-фосфатде-гидрогеназ определялась спектрофотометрическим методом кинетически при 340 нм (максимум поглощения восстановленных коферментов) и температуре 37°С при насыщающих концентрациях субстратов (5ммоль/л) и коферментов (0,25 ммоль/л). Объемы пробы - 100мкл (лактатде-гидрогеназа и малатдегидрогеназа) и 500 мкл (глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа). Активность глюкозо-6-фосфатде-гидрогеназы определялась в присутствии 5 ммоль/л МдС12. В каждой серии экспериментов регистрировались значения активности ферментов до и через 15, 30, 60, 120 и 180 минут после нагрузки 200 мл 25% раствора глюкозы. В ходе исследования установлено, что изменения активности исследованных ферментов во времени после нагрузки глюкозой у всех пациентов носили однотипный характер. Активность лактатдегидрогеназы через 15-30 минут после нагрузки глюкозой достоверно снижается до 65-70% от исходного уровня.
ОСОБЕННОСТИ ЛИПИДНОГО ОБМЕНА В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УРОВНЯ АДАПТАЦИОННОГО ПОТЕНЦИАЛА ПРИ ДОЗИРОВАННОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКЕ Караваева А.В., Штина И.Г., Ветошкин К.В., Ожиганова Е.В. Кировская государственная медицинская академия, Вятское НОУ «Вектор», кафедра биохимии Научные руководители - д.м.н., проф. П.И. Цапок, к.м.н. А.В. Еликов
Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок
Исследования липидного обмена имеют важную прогностическую ценность как для оценки адаптации к мышечной деятельности, так и состояния сердечно-сосудистой системы. Нами проведено исследование показателей липидного обмена у 30 разноадаптированных студентов-добровольцев, мужчин в возрасте от 18 до 25 лет. Величину адаптационного потенциала (АП) определяли по методике Р.М. Баевского и др. (1987). Физическая нагрузка дозировалась в виде велоэргометрии. В зависимости от уровня АП испытуемые делились на 2 группы: 1-я - удовлетворительная адаптация, 2-я - напряжение механизмов адаптации. Забор крови проводили из локтевой вены до и после физической нагрузки. В сыворотке крови определяли общий хо-лестерол (Хс) и его фракции, общие липиды (ОЛ), р-липопротеины, триацилглицеролы (ТАГ), проводили расчет индекса атерогенности (ИА). Анализ полученных данных свидетельствует о более высоких значениях некоторых ис-
следуемых интермедиатов у лиц 2-ой группы. После работы на биостенде увеличился уровень ОЛ и ТАГ в обеих группах, на фоне снижения ХС за счет обеих его фракций. После велоэргометрии ИА уменьшился в обеих группах (на 38,6 % и 43,5%) соответственно. Полученные данные свидетельствуют о благоприятном влиянии умеренной мышечной деятельности на обмен липидов и могут быть использованы для биохимического контроля лиц, занимающихся лечебной физкультурой.
ВЛИЯНИЕ ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ ОБСТАНОВКИ В МЕСТЕ ПРОИЗРАСТАНИЯ И СРОКА ХРАНЕНИЯ НА СОДЕРЖАНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ПЛОДАХ РЯБИНЫ Князева Е.Н.
Кировская государственная медицинская академия, Вятское НОУ «Вектор», кафедра биохимии Научный руководитель - к.м.н. А.В. Еликов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок
Плоды рябины обыкновенной широко применяются в медицине и пищевой промышленности, как в составе сборов, так и в виде основного компонента. В зависимости от технологии, ягоды применяются как в свежесобранном, так и в сушеном виде, после более или менее длительного срока хранения. Аскорбиновая кислота является важным водорастворимым витамином, обуславливающим лечебные свойства ягод рябины, поэтому ее количество в плодах служит одним из критериев для оценки качества продукта. Целью нашей работы было оценить характер влияния экологической обстановки в месте сбора плодов рябины, а также длительности сроков хранения на содержание в них витамина С. Сбор плодов проводили в лесном массиве за пределами городской черты (экологически чистая местность), в городском парке, непосредственно вблизи дороги с интенсивным транспортным потоком и предприятия с промышленными выбросами. Определение содержания аскорбиновой кислоты проводили в свежесобранных ягодах, а также в процессе хранения спустя 3 - 6 месяцев. Установлено достоверное снижение содержания аскорбиновой кислоты в плодах рябины в местности с неблагоприятной экологической обстановкой. В процессе хранения содержание витамина С снижалось равномерно во всех исследуемых образцах. Таким образом, можно сделать вывод о том, что вещества входящие в состав промышленных выбросов в первую очередь нарушают процесс синтеза аскорбиновой кислоты в растениях. Полученные данные можно использовать, как для контроля за экологической обстановкой, так и при оценке качества продукции.
ФОТОЭЛЕКТРОКОЛ ОРИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРОГЕННОСТИ ИНЪЕКЦИОННОЙ ВОДЫ
Кузиева З., Убайдуллаев К.А.
Ташкентский фармацевтический институт, кафедра фармацевтической химии
Зав. кафедрой - проф. А.А. Тулаганов
Цель: Разработка физического метода определения пиро-генности инъекционной воды. Задачи: На основе восстановительных свойств эндотоксинов выделяемых микроорганизмами определение пирогенности инъекционной воды фотоэлектроколориметрическим методом анализа. Материалы и методы: Согласно фармакопейной статьи каждая серия инъекционной воды должна подвергаться на испытание пирогенности. Существуют два фармакопейных метода определения пирогенности на кроликах и с томощью так называемого ЛАЛ-теста. Для определения пирогенности на кроликах испытуемый раствор проверяют на 3 кроликах. Если у 1 или 2 кроликов температура повысилась более чем на 0,6°С, испытание повторяют дополнительно на 5 кроликах. В основе ЛАЛ - тест метода лежат процессе физико-химического взаимодействия эндотоксинов с лизатом клеток крови мечехвостов, в результате которого происходит образование геля различной плотности. Методика определения: 10 мл испытуемой воды для инъекции нагревают до кипения (для улетучивания летучих восстановителей), прибавляют 0,1 мл 0,01 м раствора перманганата ка-
лия и 0,2 мл разбавленного раствора серной кислоты и кипятят еще 10 минут. Смесь закрывают пробкой, охлаждают определяют оптическую плотность раствора на фотоэлек-троколориметра на кювете толщиной 10 мл при синее - зеленном светофильтре. В качестве раствора сравнения используют инъекционную воду - D. Параллельно определяют оптическую плотность, инъекционной апирогенной воды при тех же условиях -D0. Выводы: 1. Предлагается фото-электроколориметрический метод определения пирогенности инъекционной воды. 2. Метод основан на окисления бактериальных эндотоксинов раствором перманганата калия в кислой среде.
МОДЕЛИРОВАНИЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ 1 -(2'ГИДРОКСИЭТИЛ) -2-МЕТИЛ-5 НИТРОИМИДАЗОЛА НА КИНЕТИКУ ФОЛДИНГА ФЕРМЕНТОВ И НА СОСТОЯНИЕ СЕТКИ ВОДОРОДНЫХ СВЯЗЕЙ ВОДЫ
Мавлюдова А.Ш., Попыхова Э.Б.
Саратовский Государственный Университет, кафедра биохимии и биофизики
Научный руководитель - проф. П.Е. Кузнецов Зав. кафедрой - доц. Г.В. Мельников
1-(2'гидроксиэтил)-2-метил-5нитроимидазол (МЗ) - это синтетический противобактериальный препарат, широко используемый современной медициной. Также, известно о способности МЗ оказывать протекторное действие на клетки теплокровных. Вероятно, это связано со способностью МЗ изменять состояние сетки Н-связей воды вблизи клеточных мембран и макромолекул. Снижение подвижности приповерхностной воды с помощью МЗ может использоваться в регуляции фолдинга белков. Цель и задачи работы. Экспериментально изучить влияние МЗ в концентрационном интервале 10"1-10"1 % на скорость фолдинга ферментов (каталаза дрожжей, лизоцим куриного яйца), а также с помощью молекулярно-динамических расчетов определить влияние МЗ на собственное водное микроокружение. Материалы и методы. В эксперименте использовали каталазу дрожжей (Serva), лизоцим куриного яйца (Serva), мочевину ХЧ (Экрос), МЗ экстрагировали из таблетированной лекарственной формы "Трихопол", молекулярно-динамические расчеты проводили с помощью программы "HyperChem". Результаты и обсуждение. Изучение влияния МЗ на кинетику фолдинга ферментов осуществлялось флуоресцентным методом. Видно, что МЗ в концентрационном интервале 10" 5-10-7% значительно снижает скорость фолдинга. Вероятно, это связано с влиянием МЗ на состояние сетки Н-связей воды. Прямое влияние МЗ на белки можно исключить, т.к. его концентрация во много раз меньше концентрации белков. Молекулярно-динамические расчеты показывают, что распределение молекул воды по кластерам в растворах МЗ, глюкозы, гидрозоле ультрадисперсных алмазов и в чистой воде не изменяется. Видно, что МЗ, в отличие от других веществ, существенно изменяет состояние сетки Н-связей воды. Выводы. Показано, что МЗ снижает скорость фолдинга лизоцима и каталазы. Вероятным молекулярным механизмом подобного действия МЗ является перестройка сетки Н-связей воды, что подтверждается молекулярно-динамическими расчетами. Таким образом, МЗ можно использовать для регулирования скорости фолдинга ферментов.
ГИДРОЗОЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ ГЕКСОЦИАНОФЕРРАТА ЖЕЛЕЗА - УНИВЕРСАЛЬНЫЕ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКУМЫ ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ РАЗЛИЧНЫХ НОЗОЛОГИЙ Мальщукова А.А.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей химии
Научный руководитель - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин Зав. кафедрой - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин
Целью настоящей работы явилось изучение реакции гидрозольной агглютинации с различными объектами. Материалы: гексоцианоферрат железа Fe4 [Fe(CN)6b - ультрадисперсные частицы неорганической природы, на поверхности
