CC BY
21
УДК 615.38:616.381-002
ПОКАЗАТЕЛИ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ КРОВИ КАК КРИТЕРИИ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ГЕМОТРАНСФУЗИОННОЙ ТЕРАПИИ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА
© 2011 г. Е.В. Рябикина, З.И. Микашинович, Ю.А. Калмыкова
Ростовский государственный медицинский университет, Rostov State Medical University,
пер. Нахичеванский, 29, г. Ростов-на-Дону, 344022, 29 Nakhichevanskiy Lane, Rostov-on-Don, 344022,
okt@rostgmu.ru okt@rostgmu.ru
Изучены параметры антиоксидантного статуса больных с послеоперационным перитонитом, которым осуществляли трансфузию гемокомпонентов, заготовленных от доноров, получавших биолан. Обнаружено повышение активностей эритроцитарной супероксиддис-мутазы и плазменной каталазы, а также восстановление сбалансированности показателей внутриклеточной и внеклеточной антиокси-дантной защиты у больных, что свидетельствует о позитивном влиянии биолана на качество донорской крови.
Ключевые слова: супероксиддисмутаза, каталаза, церулоплазмин, антиоксидантная защита, послеоперационный перитонит, гемотрансфузия, биолан.
There have been investigated the parametres of antioxidant status of patients with a postoperative peritonitis which were carried out a transfusion of the haemocomponents prepared from the donors taking biolan. It has been revealed the increase of erythrocytic superoxide dismutase and plasma catalase activities, and also a restoration of equation of indicators endocellular and extracellular antioxidant protection at patients and this testifies to positive influence of biolan on the quality of donor blood.
Keywords: superoxide dismutase, catalase, ceruloplasmin, antioxidant protection, postoperative peritonitis, haemotransfusion, biolan.
Развитие окислительного стресса (ОС), сопровождающееся интенсификацией свободнорадикальных процессов и снижением естественной антиоксидантной защиты (АОЗ) организма, является важным патогенетическим звеном послеоперационных критических состояний, в том числе перитонита [1—4]. Однако не только дисбаланс антиокидантной и прооксидантной систем, но и нарушение соотношения сопряженных ферментативных компонентов АОЗ может приводить к усилению ОС за счет дополнительной генерации активных форм кислорода (АФК). В связи с этим особого внимания заслуживают способы лечения, направленные на сбалансирование антиоксидантного статуса больных с послеоперационным перитонитом.
В комплексной терапии критических состояний важную роль играет гемотрансфузия, эффективность которой зависит от качества донорской крови. Одним из путей повышения качества переливаемых гемоком-понентов может быть предварительное введение донорам адаптогенов, способных влиять на антиокси-дантно-прооксидантный гомеостаз крови и защитно-компенсаторные возможности организма. К таким препаратам относится адаптоген нового поколения -биолан (регистрационное удостоверение № 001774. Р.639.06.2000), представляющий собой набор лиофили-зированных аминокислот и олигопептидов, обладающих антирадикальными, мембраностабилизирующими свойствами, с антистрессорным и нормализующим клеточный гомеостаз действием.
Целью данного исследования явилась оценка состояния внутриклеточной и внеклеточной систем АОЗ крови больных с послеоперационным перитонитом, которым осуществляли трансфузию гемокомпонен-тов, заготовленных от доноров, получавших биолан.
Материалы и методы исследования
Обследовано 75 доноров в возрасте от 24 до 48 лет (42 мужчины и 33 женщины) отделения переливания крови РостГМУ, из них 48 чел., от которых были заготовлены компоненты крови без предварительной подготовки к кроводаче, и 27 чел., получавших биолан интраназально в дозе 3 мг 3 раза в день в течение 3 дней до гемоэксфузии. Обследование доноров, заготовка и хранение свежезамороженной плазмы (СЗП) осуществляли в соответствии с приказами МЗ РФ № 364 от 14.09.2001 и № 193 от 07.05.2003. Под наблюдением находились также 28 мужчин от 34 до 71 года и 14 женщин от 46 до 68 лет с послеоперационным перитонитом, получавших стационарное лечение в палате интенсивной терапии отделения анестезиологии и реанимации РостГМУ. В протоколах лечения использовлись Стандарты при болезнях органов пищеварения, утвержденные приказом Управления здравоохранения администрации г. Ростова-на-Дону № 08 от 22.01.2004. У всех пациентов развился синдром диссе-минированного внутрисосудистого свертывания разной степени тяжести, что было показанием для переливания СЗП. Больные распределены на две группы: 1-я -22 пациента, которым вводили СЗП, заготовленную стандартным способом, и 2-я - 20 пациентов, которым переливали СЗП доноров, получавших биолан.
Забор венозной крови, стабилизированной гепарином, осуществляли у доноров до начала приёма биола-на и после его окончания, у больных - до переливания СЗП и через 3 сут. Материалом для исследования служили эритроциты и плазма крови. После удаления плазмы и клеток белой крови эритроциты трижды отмывали 0,154 М раствором №С1 и подвергали гипото-
ническому лизису дистиллированной водой. В гемоли-зате эритроцитов с разведением 1:10 определяли активность супероксиддисмутазы (СОД, КФ 1.15.1.1) по торможению автоокисления адреналина при рН 10,2 [5]. В гемолизате с разведением 1:200 определяли активность каталазы (КТ, КФ1.11.1.6) по торможению образования пероксидов аммония [6] и общую перок-сидазную активность по реакции окисления индиго-кармина перекисью водорода [7, 8], в плазме крови -содержание церулоплазмина (ЦП) по реакции окисления п-фенилендиамина [9] и активность каталазы [6]. На основании определения величин СОД, КТ и ЦП вычисляли коэффициенты, характеризующие дисбаланс в системах внутриклеточной и внеклеточной АОЗ: Кэритроцитов для оценки соотношения СОД, % к КТ, и Кшимы для оценки соотношения ЦП, % к КТ. Результаты исследований обработаны статистически с использованием ^критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение
При изучении действия биолана на антиоксидант-ный статус крови доноров выявлено увеличение активности каталазы в эритроцитах и плазме крови на 34 (р<0,01) и 54 % (р<0,05) и возрастание общей пе-роксидазной активности на 36 % (р<0,001) по сравнению с исходными показателями. Наиболее выраженный эффект биолана наблюдался у лиц с изначально низкой ферментативной активностью. Активность СОД и содержание ЦП увеличились статистически не достоверно (0,1>р>0,05) на 15,3 и 7,5 %. Исходя из полученных результатов, можно заключить, что повышение антиоксидантного статуса крови доноров в основном происходит за счёт интенсификации нерадикального восстановления перекиси водорода в ходе каталазной и пероксидазной реакций [9]. Следует также отметить однонаправленный позитивный характер влияния биолана на антиоксидантные показатели как эритроцитов, так и плазмы крови доноров. Увеличение буферной ёмкости систем АОЗ крови доноров нашло отражение в дальнейших клинических исследованиях, проведенных в процессе лечения больных-реципиентов с послеоперационным перитонитом [10] (таблица).
Как видно из таблицы, в обеих группах больных до переливания СЗП зарегистрированы достоверные изменения: снижение активности эритротроцитарных СОД и КТ на 23 и 16-18 %, повышение содержания ЦП - на 28-33 %; отмечена тенденция к снижению активности плазменной каталазы. Такой сдвиг анти-оксидантного гомеостаза в сторону подавления АОЗ эритроцитов наряду с неконтролируемой генерацией АФК сопровождается окислительной модификацией липидов и белков [2, 3], что указывает на формирование ОС в условиях нарушения микроциркуляции, ги-поксических и интоксикационных расстройств, характерных для данной патологии.
При анализе уровня ЦП следует брать во внимание его двойственную роль как плазменного антиоксидан-та, обладающего супероксидустраняющей способностью, так и прооксиданта, участвующего в окислении сульфгидрильных групп белков с образованием перекиси водорода [11]. Повышение содержания ЦП, трактуемое как интерлейкин-6-зависимое проявление
острофазного ответа, может быть компенсаторной реакцией на интенсификацию липопереокисления и расход эндогенных антиоксидантов.
Показатели состяния антиоксидантной системы крови у больных с послеоперационным перитонитом (М±т)
Показатель Здоровые (контроль) Больные перитонитом
1-я группа 2-я группа
а б а б
СОД, усл.ед./мл эритроцитов 163,5±3,89 125,9±6,91* 135,6±5,86* 126,5±2,81* 159,1±4,69#
4 КТ, ЕД10 /мл эритр. 24,0±1,05 19,6±0,47* 22,1±2,48 20,2±0,69* 23,8±0,4
Кэритроцитов 1,0 0,94 0,90 0,92 0,98
КТ, ЕД/мл плазмы 38,1±2,54 30,15±3,31 27,8±3,04* 33,5±3,39 43,0±3,97#
ЦП, мг/мл плазмы 23,5±1,14 31,3±1,63* 30,5±1,40* 30,0±0,70* 30,06±1,21*
Кщпазмы 1 1,68 1,78 1,45 1,15
* - достоверность различия р<0,05 при сравнении с контролем; # - достоверность различия р<0,01 при сравнении показателей 1-й и 2-й групп; а, б - показатели до и после переливания СЗП.
Важное значение для развития ОС у больных перитонитом имеет изменение соотношений как между эритроцитарными ферментами СОД и КТ, так и анти-оксидантными показателями плазмы крови ЦП и КТ до 0,92-0,94 и 1,45-1,68. Через 3 сут после переливания СЗП в 1-й группе больных активность СОД оставалась достоверно сниженной, во 2-й возросла до контрольных величин. Активность каталазы в эритроцитах больных обеих групп практически нормализовалась. Однако соотношение между сопряженными ферментами СОД/КТ приблизилось к 1 (норма) только у больных 2-й группы, составив 0,98 против 0,90.
В плазме крови через 3 сут после переливания СЗП активность каталазы в 1-й группе снизилась на 27 % по сравнению с контролем, а во 2-й возросла до контрольной величины. Содержание ЦП оставалось повышенным у больных 1 и 2-й групп на 29,8 и 27,9 %. Соотношение между плазменными антиоксидантами ЦП/КТ через 3 сут приблизилось к норме только во 2-й группе, составив 1,15 против 1,78. При сравнении биохимических параметров между группами больных выявлено следующее: наиболее информативными, отражающими опосредованное влияние биолана на антиок-сидантный статус крови являются показатели активности эритроцитарной СОД и плазменной каталазы, величины которых выше во 2-й группе на 17,3 и 54,7 %. Значительное увеличение активности каталазы в плазме крови больных 2-й группы, совпадающее с таковым у доноров, получавших биолан, свидетельствует об антиперекисном эффекте данного адаптогена.
Из вышеиздоженного можно сделать следующие выводы:
1. Послеоперационный перитонит характеризуется угнетением активности эритроцитарных ферментов первой линии АОЗ и повышением содержания ЦП в плазме крови.
2. Проявлением ОС у таких больных является нарушение соотношения между показателями внутриклеточной и внеклеточной АОЗ.
3. В результате подготовки доноров к кроводаче при помощи адаптогена биолан происходит повышение антиоксидантного статуса крови за счет увеличения активности ферментов, метаболизирующих перекись водорода.
4. Применение СЗП, заготовленной от доноров, получавших биолан, способствует повышению супер-оксиддисмутазной активности эритроцитов и каталаз-ной активности плазмы крови больных с послеоперационным перитонитом.
5. Объективным фактором, демонстрирующим позитивное влияние биолана на состояние внутриклеточной и внеклеточной АОЗ у больных с послеоперационным перитонитом, является восстановление сбалансированности СОД/КТ в эритроцитах и ЦП/КТ в плазме крови после проведения трансфузионной терапии.
6. Целесообразно использование таких параметров АОЗ, как СОД, КТ, ЦП и их соотношений, в качестве надёжных критериев совершенствования гемотранс-фузионной терапии послеоперационного перитонита.
Литература
1. Окислительный стресс и эндогенная интоксикация у
больных в критических состояниях / Г.А. Рябов [и др.]
// Вестн. интенс. терапии. 2002. № 4. С. 4-7.
2. Пасечник И.Н. Окислительный стресс и критические
состояния у хирургических больных // Вестн. интенс.
терапии. 2004. № 3. С. 27-30.
Поступила в редакцию_
3. Динамика показателей антиоксидантного и оксидантно-
го статуса при перитоните в ранний послеоперационный период / Н.Ю. Келина [и др.] // Вестн. интенс. терапии. 2004. № 3. С. 45-50.
4. Яковлев А.Ю. Коррекция метаболизма больных перито-
нитом - к вопросу о средствах и тактике применения антигипоксантов // Вестн. интенс. терапии. 2007. № 1. С. 91-95.
5. Mistra H.P., Fridovich I. The role of superoxide anion in the
autooxidation of epinephrine and simple assay for superoxide dismutase // J. Biol. Chem. 1972. Vol. 247, № 10. P. 3170-3175.
6. Метод определения активности каталазы / М.А. Коро-
люк [и др.] // Лаб. дело. 1988. № 1. С. 16-18.
7. Попов Т., Нейковска Л. Метод определения пероксидаз-
ной активности крови // Гигиена и санитария. 1971. № 10. С. 89-91.
8. Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клиниче-
ской химии. Минск, 1982. 366 с.
9. Действие биолана на систему антиоксидантной зашиты
доноров / Е.В. Рябикина [и др.] // Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека: c6. тр. 4-й нац. науч.-практ. конф. с междунар. участием. Смоленск, 26-30 сентября 2005 г. Смоленск, 2005. С. 87-88.
10. Рябикина Е.В. Совершенствование интенсивной ком-
плексной терапии больных с послеоперационным перитонитом: автореф. дис. ... канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2009.
11. Шевченко О.П., Орлова О.В. Клинико-диагностическое
значение церулоплазмина (лекция) // Клин. лаб. диагностика. 2006. № 7. С. 23-33.
9 июля 2010 г.
