Научная статья на тему 'Показатели антиоксидантной защиты крови как критерии совершенствования гемотрансфузионной терапии послеоперационного перитонита'

Показатели антиоксидантной защиты крови как критерии совершенствования гемотрансфузионной терапии послеоперационного перитонита Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
90
24
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗА / КАТАЛАЗА / церулоплазмин / антиоксидантная защита / послеоперационный перитонит / гемотрансфузия / биолан / Superoxide dismutase / Catalase / Ceruloplasmin / antioxidant protection / postoperative peritonitis / haemotransfusion / Biolan

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Рябикина Елена Витальевна, Микашинович Зоя Ивановна, Калмыкова Юлия Александровна

Изучены параметры антиоксидантного статуса больных с послеоперационным перитонитом, которым осуществляли трансфузию гемокомпонентов, заготовленных от доноров, получавших биолан. Обнаружено повышение активностей эритроцитарной супероксиддисмутазы и плазменной каталазы, а также восстановление сбалансированности показателей внутриклеточной и внеклеточной антиоксидантной защиты у больных, что свидетельствует о позитивном влиянии биолана на качество донорской крови.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Рябикина Елена Витальевна, Микашинович Зоя Ивановна, Калмыкова Юлия Александровна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

There have been investigated the parametres of antioxidant status of patients with a postoperative peritonitis which were carried out a transfusion of the haemocomponents prepared from the donors taking biolan. It has been revealed the increase of erythrocytic superoxide dismutase and plasma catalase activities, and also a restoration of equation of indicators endocellular and extracellular antioxidant protection at patients and this testifies to positive influence of biolan on the quality of donor blood.

Текст научной работы на тему «Показатели антиоксидантной защиты крови как критерии совершенствования гемотрансфузионной терапии послеоперационного перитонита»

УДК 615.38:616.381-002

ПОКАЗАТЕЛИ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ КРОВИ КАК КРИТЕРИИ СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ГЕМОТРАНСФУЗИОННОЙ ТЕРАПИИ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОГО ПЕРИТОНИТА

© 2011 г. Е.В. Рябикина, З.И. Микашинович, Ю.А. Калмыкова

Ростовский государственный медицинский университет, Rostov State Medical University,

пер. Нахичеванский, 29, г. Ростов-на-Дону, 344022, 29 Nakhichevanskiy Lane, Rostov-on-Don, 344022,

okt@rostgmu.ru okt@rostgmu.ru

Изучены параметры антиоксидантного статуса больных с послеоперационным перитонитом, которым осуществляли трансфузию гемокомпонентов, заготовленных от доноров, получавших биолан. Обнаружено повышение активностей эритроцитарной супероксиддис-мутазы и плазменной каталазы, а также восстановление сбалансированности показателей внутриклеточной и внеклеточной антиокси-дантной защиты у больных, что свидетельствует о позитивном влиянии биолана на качество донорской крови.

Ключевые слова: супероксиддисмутаза, каталаза, церулоплазмин, антиоксидантная защита, послеоперационный перитонит, гемотрансфузия, биолан.

There have been investigated the parametres of antioxidant status of patients with a postoperative peritonitis which were carried out a transfusion of the haemocomponents prepared from the donors taking biolan. It has been revealed the increase of erythrocytic superoxide dismutase and plasma catalase activities, and also a restoration of equation of indicators endocellular and extracellular antioxidant protection at patients and this testifies to positive influence of biolan on the quality of donor blood.

Keywords: superoxide dismutase, catalase, ceruloplasmin, antioxidant protection, postoperative peritonitis, haemotransfusion, biolan.

Развитие окислительного стресса (ОС), сопровождающееся интенсификацией свободнорадикальных процессов и снижением естественной антиоксидантной защиты (АОЗ) организма, является важным патогенетическим звеном послеоперационных критических состояний, в том числе перитонита [1—4]. Однако не только дисбаланс антиокидантной и прооксидантной систем, но и нарушение соотношения сопряженных ферментативных компонентов АОЗ может приводить к усилению ОС за счет дополнительной генерации активных форм кислорода (АФК). В связи с этим особого внимания заслуживают способы лечения, направленные на сбалансирование антиоксидантного статуса больных с послеоперационным перитонитом.

В комплексной терапии критических состояний важную роль играет гемотрансфузия, эффективность которой зависит от качества донорской крови. Одним из путей повышения качества переливаемых гемоком-понентов может быть предварительное введение донорам адаптогенов, способных влиять на антиокси-дантно-прооксидантный гомеостаз крови и защитно-компенсаторные возможности организма. К таким препаратам относится адаптоген нового поколения -биолан (регистрационное удостоверение № 001774. Р.639.06.2000), представляющий собой набор лиофили-зированных аминокислот и олигопептидов, обладающих антирадикальными, мембраностабилизирующими свойствами, с антистрессорным и нормализующим клеточный гомеостаз действием.

Целью данного исследования явилась оценка состояния внутриклеточной и внеклеточной систем АОЗ крови больных с послеоперационным перитонитом, которым осуществляли трансфузию гемокомпонен-тов, заготовленных от доноров, получавших биолан.

Материалы и методы исследования

Обследовано 75 доноров в возрасте от 24 до 48 лет (42 мужчины и 33 женщины) отделения переливания крови РостГМУ, из них 48 чел., от которых были заготовлены компоненты крови без предварительной подготовки к кроводаче, и 27 чел., получавших биолан интраназально в дозе 3 мг 3 раза в день в течение 3 дней до гемоэксфузии. Обследование доноров, заготовка и хранение свежезамороженной плазмы (СЗП) осуществляли в соответствии с приказами МЗ РФ № 364 от 14.09.2001 и № 193 от 07.05.2003. Под наблюдением находились также 28 мужчин от 34 до 71 года и 14 женщин от 46 до 68 лет с послеоперационным перитонитом, получавших стационарное лечение в палате интенсивной терапии отделения анестезиологии и реанимации РостГМУ. В протоколах лечения использовлись Стандарты при болезнях органов пищеварения, утвержденные приказом Управления здравоохранения администрации г. Ростова-на-Дону № 08 от 22.01.2004. У всех пациентов развился синдром диссе-минированного внутрисосудистого свертывания разной степени тяжести, что было показанием для переливания СЗП. Больные распределены на две группы: 1-я -22 пациента, которым вводили СЗП, заготовленную стандартным способом, и 2-я - 20 пациентов, которым переливали СЗП доноров, получавших биолан.

Забор венозной крови, стабилизированной гепарином, осуществляли у доноров до начала приёма биола-на и после его окончания, у больных - до переливания СЗП и через 3 сут. Материалом для исследования служили эритроциты и плазма крови. После удаления плазмы и клеток белой крови эритроциты трижды отмывали 0,154 М раствором №С1 и подвергали гипото-

ническому лизису дистиллированной водой. В гемоли-зате эритроцитов с разведением 1:10 определяли активность супероксиддисмутазы (СОД, КФ 1.15.1.1) по торможению автоокисления адреналина при рН 10,2 [5]. В гемолизате с разведением 1:200 определяли активность каталазы (КТ, КФ1.11.1.6) по торможению образования пероксидов аммония [6] и общую перок-сидазную активность по реакции окисления индиго-кармина перекисью водорода [7, 8], в плазме крови -содержание церулоплазмина (ЦП) по реакции окисления п-фенилендиамина [9] и активность каталазы [6]. На основании определения величин СОД, КТ и ЦП вычисляли коэффициенты, характеризующие дисбаланс в системах внутриклеточной и внеклеточной АОЗ: Кэритроцитов для оценки соотношения СОД, % к КТ, и Кшимы для оценки соотношения ЦП, % к КТ. Результаты исследований обработаны статистически с использованием ^критерия Стьюдента.

Результаты и обсуждение

При изучении действия биолана на антиоксидант-ный статус крови доноров выявлено увеличение активности каталазы в эритроцитах и плазме крови на 34 (р<0,01) и 54 % (р<0,05) и возрастание общей пе-роксидазной активности на 36 % (р<0,001) по сравнению с исходными показателями. Наиболее выраженный эффект биолана наблюдался у лиц с изначально низкой ферментативной активностью. Активность СОД и содержание ЦП увеличились статистически не достоверно (0,1>р>0,05) на 15,3 и 7,5 %. Исходя из полученных результатов, можно заключить, что повышение антиоксидантного статуса крови доноров в основном происходит за счёт интенсификации нерадикального восстановления перекиси водорода в ходе каталазной и пероксидазной реакций [9]. Следует также отметить однонаправленный позитивный характер влияния биолана на антиоксидантные показатели как эритроцитов, так и плазмы крови доноров. Увеличение буферной ёмкости систем АОЗ крови доноров нашло отражение в дальнейших клинических исследованиях, проведенных в процессе лечения больных-реципиентов с послеоперационным перитонитом [10] (таблица).

Как видно из таблицы, в обеих группах больных до переливания СЗП зарегистрированы достоверные изменения: снижение активности эритротроцитарных СОД и КТ на 23 и 16-18 %, повышение содержания ЦП - на 28-33 %; отмечена тенденция к снижению активности плазменной каталазы. Такой сдвиг анти-оксидантного гомеостаза в сторону подавления АОЗ эритроцитов наряду с неконтролируемой генерацией АФК сопровождается окислительной модификацией липидов и белков [2, 3], что указывает на формирование ОС в условиях нарушения микроциркуляции, ги-поксических и интоксикационных расстройств, характерных для данной патологии.

При анализе уровня ЦП следует брать во внимание его двойственную роль как плазменного антиоксидан-та, обладающего супероксидустраняющей способностью, так и прооксиданта, участвующего в окислении сульфгидрильных групп белков с образованием перекиси водорода [11]. Повышение содержания ЦП, трактуемое как интерлейкин-6-зависимое проявление

острофазного ответа, может быть компенсаторной реакцией на интенсификацию липопереокисления и расход эндогенных антиоксидантов.

Показатели состяния антиоксидантной системы крови у больных с послеоперационным перитонитом (М±т)

Показатель Здоровые (контроль) Больные перитонитом

1-я группа 2-я группа

а б а б

СОД, усл.ед./мл эритроцитов 163,5±3,89 125,9±6,91* 135,6±5,86* 126,5±2,81* 159,1±4,69#

4 КТ, ЕД10 /мл эритр. 24,0±1,05 19,6±0,47* 22,1±2,48 20,2±0,69* 23,8±0,4

Кэритроцитов 1,0 0,94 0,90 0,92 0,98

КТ, ЕД/мл плазмы 38,1±2,54 30,15±3,31 27,8±3,04* 33,5±3,39 43,0±3,97#

ЦП, мг/мл плазмы 23,5±1,14 31,3±1,63* 30,5±1,40* 30,0±0,70* 30,06±1,21*

Кщпазмы 1 1,68 1,78 1,45 1,15

* - достоверность различия р<0,05 при сравнении с контролем; # - достоверность различия р<0,01 при сравнении показателей 1-й и 2-й групп; а, б - показатели до и после переливания СЗП.

Важное значение для развития ОС у больных перитонитом имеет изменение соотношений как между эритроцитарными ферментами СОД и КТ, так и анти-оксидантными показателями плазмы крови ЦП и КТ до 0,92-0,94 и 1,45-1,68. Через 3 сут после переливания СЗП в 1-й группе больных активность СОД оставалась достоверно сниженной, во 2-й возросла до контрольных величин. Активность каталазы в эритроцитах больных обеих групп практически нормализовалась. Однако соотношение между сопряженными ферментами СОД/КТ приблизилось к 1 (норма) только у больных 2-й группы, составив 0,98 против 0,90.

В плазме крови через 3 сут после переливания СЗП активность каталазы в 1-й группе снизилась на 27 % по сравнению с контролем, а во 2-й возросла до контрольной величины. Содержание ЦП оставалось повышенным у больных 1 и 2-й групп на 29,8 и 27,9 %. Соотношение между плазменными антиоксидантами ЦП/КТ через 3 сут приблизилось к норме только во 2-й группе, составив 1,15 против 1,78. При сравнении биохимических параметров между группами больных выявлено следующее: наиболее информативными, отражающими опосредованное влияние биолана на антиок-сидантный статус крови являются показатели активности эритроцитарной СОД и плазменной каталазы, величины которых выше во 2-й группе на 17,3 и 54,7 %. Значительное увеличение активности каталазы в плазме крови больных 2-й группы, совпадающее с таковым у доноров, получавших биолан, свидетельствует об антиперекисном эффекте данного адаптогена.

Из вышеиздоженного можно сделать следующие выводы:

1. Послеоперационный перитонит характеризуется угнетением активности эритроцитарных ферментов первой линии АОЗ и повышением содержания ЦП в плазме крови.

2. Проявлением ОС у таких больных является нарушение соотношения между показателями внутриклеточной и внеклеточной АОЗ.

3. В результате подготовки доноров к кроводаче при помощи адаптогена биолан происходит повышение антиоксидантного статуса крови за счет увеличения активности ферментов, метаболизирующих перекись водорода.

4. Применение СЗП, заготовленной от доноров, получавших биолан, способствует повышению супер-оксиддисмутазной активности эритроцитов и каталаз-ной активности плазмы крови больных с послеоперационным перитонитом.

5. Объективным фактором, демонстрирующим позитивное влияние биолана на состояние внутриклеточной и внеклеточной АОЗ у больных с послеоперационным перитонитом, является восстановление сбалансированности СОД/КТ в эритроцитах и ЦП/КТ в плазме крови после проведения трансфузионной терапии.

6. Целесообразно использование таких параметров АОЗ, как СОД, КТ, ЦП и их соотношений, в качестве надёжных критериев совершенствования гемотранс-фузионной терапии послеоперационного перитонита.

Литература

1. Окислительный стресс и эндогенная интоксикация у

больных в критических состояниях / Г.А. Рябов [и др.]

// Вестн. интенс. терапии. 2002. № 4. С. 4-7.

2. Пасечник И.Н. Окислительный стресс и критические

состояния у хирургических больных // Вестн. интенс.

терапии. 2004. № 3. С. 27-30.

Поступила в редакцию_

3. Динамика показателей антиоксидантного и оксидантно-

го статуса при перитоните в ранний послеоперационный период / Н.Ю. Келина [и др.] // Вестн. интенс. терапии. 2004. № 3. С. 45-50.

4. Яковлев А.Ю. Коррекция метаболизма больных перито-

нитом - к вопросу о средствах и тактике применения антигипоксантов // Вестн. интенс. терапии. 2007. № 1. С. 91-95.

5. Mistra H.P., Fridovich I. The role of superoxide anion in the

autooxidation of epinephrine and simple assay for superoxide dismutase // J. Biol. Chem. 1972. Vol. 247, № 10. P. 3170-3175.

6. Метод определения активности каталазы / М.А. Коро-

люк [и др.] // Лаб. дело. 1988. № 1. С. 16-18.

7. Попов Т., Нейковска Л. Метод определения пероксидаз-

ной активности крови // Гигиена и санитария. 1971. № 10. С. 89-91.

8. Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клиниче-

ской химии. Минск, 1982. 366 с.

9. Действие биолана на систему антиоксидантной зашиты

доноров / Е.В. Рябикина [и др.] // Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека: c6. тр. 4-й нац. науч.-практ. конф. с междунар. участием. Смоленск, 26-30 сентября 2005 г. Смоленск, 2005. С. 87-88.

10. Рябикина Е.В. Совершенствование интенсивной ком-

плексной терапии больных с послеоперационным перитонитом: автореф. дис. ... канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2009.

11. Шевченко О.П., Орлова О.В. Клинико-диагностическое

значение церулоплазмина (лекция) // Клин. лаб. диагностика. 2006. № 7. С. 23-33.

9 июля 2010 г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.