Вестник защиты растений, ,3, 2006 47
УДК 632.937.15(581)
ПОИСК СПОРО-КРИСТАЛЛООБРАЗУЮЩИХ БАКТЕРИЙ В АФГАНСКОМ БАДАХШАНЕ
Т.Булбулшоев
Памирская НИС по сельскому хозяйству, Хорог, Таджикистан
Эффективность применения кристал-лообразующих бацилл для борьбы с вредными насекомыми зависит, прежде всего, от патогенных свойств используемого для этой цели штамма-продуцента.
Хорошо известна гетерогенность бактерии Bacillus thuringiensis (Лескова, 1975), поэтому возникает необходимость регулярной смены производственных штаммов. Для разработки новых биопрепаратов также необходимо вести постоянный отбор штаммов кристаллообра-зующих бацилл с высокими инсектицидными свойствами. Основным источником для получения новых штаммов Вас. thuringiensis являются насекомые (Лескова, 1975). Наиболее часто отмечается выделение кристаллообразующих бацилл из единично пораженных патогенных особей в популяции насекомых (Булбул-шоев, 1981, 1989; Ивинскене, Булбулшо-ев, 1990). Об эпизоотиях насекомых, вызванных кристаллогенными бактериями, имеются ограниченные сведения (Бул-булшоев и др., 1994; Павлюшин, Бул-булшоев, 2001).
Следует подчеркнуть, что ограниченный ассортимент препаратов Вас. thuringiensis связан с недостаточно активным поиском энтомопатогенных кри-сталлообразующих бацилл. Поиск и выявление местных штаммов этой группы бактерий в Афганском Бадахшане, где биопрепараты группы Вас. thuringiensis никогда не применялись в сельском хозяйстве и где поиски их не проводились, представлял как теоретический, так и практический интерес. Учитывая особые климатические условия региона, можно было лишь предположить, что здесь эти бациллы могут встречаться, но насколько широко, необходимо было исследовать.
Важны эти исследования и для выявления природных очагов резерваций эн-томопатогенных кристаллообразующих
бацилл с тем, чтобы иметь возможность обновлять промышленные штаммы, предназначаемые для получения биопрепаратов на основе высокоактивных штаммов Вас. thuringiensis. Следует учесть, что микрофлора насекомых в Афганском Бадахшане до настоящего времени не изучалась. Известно, что под воздействием интенсивной инсоляции в этих местах наблюдается высокий летальный эффект в отношении микроорганизмов. Очевидно, выживают лишь те споровые бактерии, которые адаптировались к действию интенсивной инсоляции (Булбулшоев, 1981).
Предполагалось, что энтомопатоген-ные штаммы в таких условиях могут обладать признаками, отличающими их от европейских штаммов. В частности, они могут быть более устойчивыми к интенсивной инсоляции. Такие свойства имеют значение для использования их при наработке микробных препаратов для защиты растений от вредных насекомых в высокогорных регионах.
Исследования включали три основных этапа:
1) поиск больных и погибших насекомых среди их местных популяций,
2) микроскопические исследования больных и погибших насекомых,
3) выявление споро-кристаллообразу-ющих бактерий.
В 2005 г. проведены маршрутные обследования садов и естественных лесных насаждений, расположенных по долинам реки Пяндж на высоте от 1800 до 2200 м над уровнем моря. Основными объектами наблюдений были гусеницы златогузки, горностаевые моли, зеленая листовертка, яблонная плодожорка, совки и майский хрущ. Плотность гусениц златогузки достигала 20-30 особей на 0.5 погонных метра ветвей. В некоторых садах ветви плодовых деревьев были полностью ого-
лены, а гусеницы были вынуждены перейти к питанию несвойственным для них кормом - на орехоплодные породы и различные кустарники.
В популяциях златогузки наблюдалась массовая гибель гусениц. Погибшие гусеницы были мягкие, имели черный цвет, из некоторых вытекала жидкость с неприятным запахом. Основной причиной гибели златогузки послужило отсутствие подходящего корма. В то же время голодание насекомых следует отнести к стрессовым факторам, при которых может проявиться действие латентной, скрытной инфекции.
Были собраны больные и погибшие гусеницы и куколки видов, которые являются массовыми вредителями древес-но-кустарниковых растений на обследованной территории. Сбор больных и погибших насекомых проводили по известным методикам (Евлахова, Швецова, 1961). Из собранных гусениц было приготовлено более 490 мазков. Мазки после окрашивания карболовым фуксином исследовались под микроскопом с масляной иммерсией (х1350). Результаты микроскопических исследований (табл.) показали, что 62.9% насекомых были поражены споро-кристаллообразующими бактериями. В мазках было обнаружено множество спор, кристаллов и вегетативных клеток.
При изучении бактериальной флоры златогузки мы не ставили целью накоп-
Вестник защиты растений, ,3, 2006 ление данных по всему многообразию видов бактерий, присущих этому вредителю. Главное внимание было сосредоточено на исследовании споровой группы бактерии, так как известно, что представители этой группы микроорганизмов являются наиболее перспективными и эффективными в борьбе с вредными насекомыми.
Исследованию подвергались кишечник и гемолимфа здоровых, больных и погибших личинок. Описаны наличие спор, кристаллов и вегетативных клеток и форма кристаллов.
Проведенный поиск энтомопатогенных споро-кристаллообразуюших бактерий показал возможность выделения этих бацилл в изучаемом районе от села Чос-нуда до села Выяра. Детальное изучение микрофлоры больных и погибших насекомых показало, что в природных популяциях вредителей обнаруживаются штаммы с различными патогенными свойствами, что позволяет отбирать их для практических целей со следующими свойствами: а) высокая инсектицидная активность и б) образование эндо- и экзотоксина определенного качества.
Наши исследования показали, что кристаллообразующие бактерии циркулируют в популяциях восприимчивых насекомых, являясь постоянными компонентами смешанной инфекции, а пора-женность насекомых достигает 73% (табл.).
Встречаемость споро-кристаллообразующих бактерий у насекомых, собранных в Афганском
Бадахшане в 2005 г.
Место Собрано гусениц всего, шт. Из них погибших, шт. В т.ч. гусениц со споро-кристаллообразующими бактериями шт. %
Дехмургон 131 91 48 52.7
Башор 120 90 50 55.5
Саричашма 150 80 46 57.5
Дишор 145 45 26 57.7
Шидуд 121 91 51 56.0
Ниводак 103 43 28 65.1
Чоснуд 90 60 44 73.3
Всего
860
490
293
62.9
Установлено также, что даже в усло- сохраняются в трупе насекомого, что виях интенсивной инсоляции патогенные важно для поддержания патогена в при-кристаллообразующиегенные бактерии роде.
Вестник защиты растений, ,3, 2006
Литература
Булбулшоев Т. Влияние инсоляции на жизнеспособность спор Вас. thuringiensis в условиях западного Памира. /Изв. АН Тадж. ССР. Отд. биол. наук. Душанбе, 83, 2, 1981, с.37-62.
Булбулшоев Т. Патогенные свойства кри-сталлообразующих бацилл, выделенных из насекомых западного Памира. /Изв. АН Тадж. ССР. Отдел. биол. наук. Душанбе, 115, 2, 1989, с.21-23.
Булбулшоев Т., Антонова И.А, Оганова М.В. Биологические свойства кристаллообра-зующих бацилл, выделенных при эпизоотии златогузки в Ванче. Докл. АН РТ, ХХХ, Душанбе, в. V!! 9-10, 1994, с.58-66.
Евлахова А.А., Швецова О.И. Методические указания по учету, сбору и пересылке
49
заболеваниями.
насекомых, пораженных ВИЗР, Л., 1961, 26 с.
Ивинскене В. Л., Булбулшоев Т. Выделение новых штаммов Вас. thuringiensis в высокогорных районах западного Памира. 11 Симпозиум стран-членов СЭВ по микробным препаратам, 15-19 окт. 1990, с.37-47.
Лескова А.Я. Патогенные свойства Bacillus thuringiensis в условиях эффективного использования их для борьбы с вредными насекомыми. Автореф. докт. дисс. Л., 1975, 28 с.
Павлюшин В.А., Булбулшоев Т. Поиск и отбор штаммов Bacillus thuringiensis с высокой энтомоцидностью. /Тр. междунар. конфер. "Развитие горных регионов Центральной Азии в XXI веке". Хорог, 2001, с.109-110.
Работа выполнена согласно договору о сотрудничестве между ВИЗР и Памирским биологическим институтом АН Республики Таджикистан