CC BY
6УДК 632.7:634.1/7+632.937.15(575.32)
КРИСТАЛЛООБРАЗУЩИЕ БАЦИЛЛЫ, ВЫДЕЛЕННЫЕ ИЗ ВРЕДИТЕЛЕЙ ПЛОДОВЫХ КУЛЬТУР В ГОРНО-БАДАХШАНСКОЙ АВТОНОМНОЙ ОБЛАСТИ
Т. Булбулшоев
НИС по сельскому хозяйству, Хорог, Таджикистан
При отборе высоковирулентных штаммов кристаллоформных бацилл для борьбы с вредителями сада большое значение должно придаваться их способности быстро поражать вредителей. Иными словами, вирулентность возбудителя является решающим условием эффективности микробиологического метода. Падение вирулентности исходных штаммов энтомопатогенных бактерий, используемых в практических целях, приводит к резкому снижению качества бактериальных препаратов. В связи с этим необходимо уделять внимание постоянному отбору новых активных форм из природы. Известно, что вирулентность разных штаммов того же вида различна по отношению к разным группам насекомых (Булбулшоев, 1989,1994,2002; Гафурова, Талалаева, 1971; Лескова, 1975; Методические..., 1987; Щвецова, 1959).
При исследовании бактериальной флоры златогузки были выделены сапрофитные и энтомопатогенные бактерии. По этой причине изучение патогенных свойств бактерий, вызывающих гибель златогузки в естественных условь-ях, имеет большое значение.
Цель настоящего исследования -уточнение распространения кристалооб-разующих бактерий в районах массового размножения вредителя, в садах, лесах и диких зарослях Горно-Бадахшанской автономной области, а также испытание в лабораторных условьях патогенности некоторых штаммов по отношению к группе вредителей.
В 2002-2003 гг. согласно договору о научно-техническом сотрудничестве между Всероссийским институтом защиты растений РАСХН (Санкт-Петербург, Россия) и Памирским биологическим институтом Академии Наук Республики Таджикистан от 17 ноября 2001 г. прово-
дили маршрутные обследования садов, лесов и диких зарослей ущелий Шохда-ры, Гунта и Рушана. В ходе обследования была отмечена гибель гусениц златогузки старшего возраста на плодовых культурах и дикорастущих растениях. Больные и погибшие гусеницы имели симптомы бактериоза.
Сбор больных и погибших гусениц и куколок златогузки проводили в садах с массовым размножением вредителя по известным методикам (Евлахова, Швецова, 1953,1965). Было проведено микроскопическое исследование собранного материала, выделение и отбор высоковирулентных культур Bac. thuringiensis var. gallerriae (Методические..., 1987). Исследованию подвергались кишечник, гемолимфа здоровых, больных и погибших личинок златогузки, из которых выделено в чистую культуру 7 кристалообразующих бацилл.
У вновь выделенных культур исследовали морфологические, культуральные и патогенные свойства. Культуры выращивались при температуре 25-27°С. Наличие и форму пароспоровых включений установили путем просмотра мазков из заспорованной культуры под микроскопом с масляной иммерсией (х1350).
Все выделенные штаммы обладают относительной однородностью морфоло-го-культуральных признаков. Пароспо-ровые тела имеют форму неправильного ромба с одной или двумя заостренными вершинами, форма спор овальная (табл.).
Во всех вариантах количество подопытных насекомых составляло по 90 особей. Повторность трехкратная. Использовалась водная суспензия штамма (10-суточная культура на МПА), титр суспензии испытываемых штаммов для личинок златогузки, яблонной моли и капустной белянки составлял 200 млн
Вестник защиты растений, 1, 2007 клеток в 1 мл. Кормом для личинок златогузки и яблонной моли явились листья яблони - для личинок капустной белянки - листья капусты.
Таблица. Вирулентность кристаллообра-зующих бацилл для разных видов насекомых
Штам- Гибель насеко-
Вид мых на 10-й
день опыта, %
809 Златогузка 64.2 0.4
Яблонная моль 85.2 0.7
Капустная белянка 86.4 0.9
845 Златогузка 63.1 1.2
Яблонная моль 87.5 0.9
Капустная белянка 88.4 1.1
812 Златогузка 62.3 1.3
Яблонная моль 89.4 0.7
Капустная белянка 85.4 1.5
850 Златогузка 57.9 0.6
Яблонная моль 69.1 1.5
Капустная белянка 82.4 1.1
871 Златогузка 49.7 0.5
Яблонная моль 61.2 1.2
Капустная белянка 71.3 0.7
879 Златогузка 30.4 1.1
Яблонная моль 40.0 0.8
Капустная белянка 37.5 1.3
892 Златогузка 36.7 1.4
Яблонная моль 50.0 0.9
Капустная белянка 49.5 1.2
Эталон Златогузка 88.9 0.5
штамм Яблонная моль 93.4 0.5
202 Капустная белянка 97.8 1.1
Заражение проводили орально, путем скармливания корма, инфицированного бактериальными суспензиями испытываемых штаммов. Инфицированный корм давался однократно. В контроле корм смачи-
вался родниковой водой. Опыты по заражению учитывали на 3,5,7 и 10-е сутки. Лабораторные опыты проводили в садках, для чего использовали поллитровые стеклянные банки. Контролем служил штамм 202, полученный из Всероссийского НИИ сельскохозяйственной микробиологии (С.Петербург). Результаты опытов показали, что для гусениц златогузки наиболее токсичным оказались штаммы 809 и 845, от которых на 10-й день после инфицирования погибало 63-64% особей (табл.). Штаммы 871 и 892 оказались слаботоксичными для гусениц златогузки, гибель гусениц составила 30.4-36.7%. Гусеницы яблонной моли от действия штаммов 809, 845, 812 и 850 погибли на 85.2, 82.5, 89.4 и 79.1% соответственно; от штаммов 850, 871 и 879 несколько меньше - 69.1, 61.2 и 50.3%. Наиболее слабо токсичным для гусениц яблонной моли оказался штамм 879, от которого на 10 - день опыта гибель гусениц составляло 40.5%.
Гусеницы капустной белянки от действия штаммов 809, 845, 812 и 850 на 10 день опыта погибли на 86.2, 88.4, 85.4 и 82.4%; от штамма 879 - на 71.3%. Штаммы 879 и 892 были слабо токсичными - погибло 37.5 и 49.5% гусениц соответственно.
Больные гусеницы становились малоподвижными, их гибель растягивалась до 20 дней. Погибшие гусеницы через 50-72 часов приобретали темную окраску, были неестественно вытянуты, содержимое кишечника разжижалось из-за развившегося бактериоза. Кожные покровы легко разрывались при малейшем контакте.
1. Насекомые, пораженные кристал-лообразущими бактериями, постоянно встречаются в популяциях златогузки.
2. Выделение кристаллообразущих бактерий из больных и погибших гусениц говорит о том, что эти бактерии переходят от симбиотического образа жизни у здоровых гусениц к паразитическому у ослабленных и больных насекомых.
3. Из кишечника больных и погибших гусениц златогузки было выделено 7 штаммов кристалообразующих бактерий.
4. Исследования патогенных свойств спорокристаллоносных бактерий, выделенных из златогузки, показали, что испытанные штаммы бактерий вызывали гибель гусениц златогузки, яблонной моли и капустной белянки в пределах от 37.5% до 89.4%.
5. Крисллообразущие бациллы, сходные по морфолого-культуральным признакам, значительно различаются между собой по вирулентности, что указывает на возможность отбора штаммов из естественных условий.
Литература
Angus T.A. The use of methyl cellulose laboratory test of bacterial pathogens of insects. /Canada. Entomal, 5, 1954, p.206-212.
Булбулшоев Т. Патогенные свойства кри-сталлобразующих бацилл, выделенных из насекомых Западного Памира. /Изв. АН Тадж ССР, отдел. биол. наук., 2 (115), 1989, с.21-23, 101-102.
Булбулшоев Т., Антонова И.А., Оганова М.В. Биологические свойства кристаллообра-зущих бацилл, выделенных при эпизотии златогузки в Ванче. /Изв. АН РТ, отдел. биол. и мед. наук., 9-10, 1994, с.58-66.
Булбулшоев Т. Поиск и выделение местных штаммов энтомопатогенных кристалооб-разующих бацилл. /Биологические ресурсы Памира. Душанбе, 2002, с.97-101.
Гафурова В.Л., Талалаева Г.Б. Патогенные свойства кристаллофорной бациллы из яб-
лонной плодожорки. /Изв. АН Тадж ССР. Отдел. биол. наук., 1 (42), 1971, с 96-98.
Евлахова А.А., Швецова О.И. Наставление по изучению болезней насекомых и применению микробиологического метода защиты растений. М., Л., 1953, с.33.
Евлахова А.А., Швецова О.И. Болезни вредных насекомых. М., Колос, 1965.
Лескова А.Я. Патогенные свойства Bac. thuringiensis Berliner и эффективное использование их для борьбы с вредными насекомыми. Автореф. докт. дисс. Л., 1975.
Методические рекомендации, выделение и отбор высоковирулентных культур Bac. thu-ringiensis var. gallerae. Л., 1987.
Щвецова О.И. Биологические особенности некоторых энтомопатогенных споровых бактерий в связи с образующими ими включениями растений. Киев, 1959, с.192.
