Пластичность молекулярного фенотипа клеток эпителиальных опухолей человека при адаптации к росту в культуре Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



82 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

клеточных линий на среде, содержащей бортезомиб, в те- в 6 раз (0,7 против 4,8) по сравнению с клетками HCC1937. чение 90 дней сопровождалась повышением 1С50 бортезо- Не выявлено высоких показателей экспрессии виментина миба, а также повышением интенсивности экспрессии в клетках MCF-7 и T-47D: уровень составил 8 и 20 %, ин-гена LRP в 2 клеточных линиях ММ человека. тенсивность — 1,1 и 1,3, индекс — 0,2 и 0,4. В клетках Заключение. Совокупность сведений об отрицательном SCOV-3 и HBL-100 показатели экспрессии оказались в раз-влиянии высокой экспрессии гена LRP на ОВ больных ной степени высокими: уровень — 51 и 75 %, интенсив-с ММ на бортезомибсодержащем лечении и повышении ность — 3,6 и 6,8, индекс — 1,9 и 5,1. интенсивности экспрессии гена LRP при формировании Заключение. При использовании виментина в качест-резистентности к бортезомибу позволяет сделать предпо- ве маркера ЭМП показано, что фенотип опухоли в орга-ложение о влиянии высокой интенсивности экспрессии низме не всегда предопределяет фенотип опухолевых кле-гена LRP на развитие устойчивости опухолевых плазмоци- ток, адаптированных к росту in vitro. Полученные тов к бортезомибу. результаты согласуются с данными литературы о пластичности молекулярного фенотипа опухолевых клеток и де-М.Р. Четыркина1, С.А. Калюжный2, Т.А. Богуш2, монстрируют необходимость контроля «сохранности» М.А. Ястребова1, А.М. Щербаков2, И.А. Мамичев2, эпителиального фенотипа клеточных культур при разного А.А. Каменский1 рода исследованиях эпителиальных клеток. пластичность молекулярного фенотипа Работа поддержана грантами РФФИ клЕток эпителиальных оПУХолЕй человека № 18-015-00422, 16-04-00347. при адаптации к росту в культуре 1МГУим. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; Г.З. Чкадуа, О.С. Бурова, В.А. Мисюрин, А.А. Вартанян, 2ФГБУ«НМИЦонкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава А.А. Солодовник, Т. Т. Кондратьева, М.А. Барышникова России, Москва, Россия клЕТки мЕлАномы MEL A052 как источник введение. Важнейшей характеристикой опухолевых оПУХолЕвыХ АнТиГЕнов для СоЗдАниЯ клеток, связанной с агрессивностью течения заболевания дЕндритноклЕточных вакцин и эффективностью химиотерапии, является эпителиально- ФГБУ «НМИЦонкологии им Н.Н. Блохина» Минздрава мезенхимальный переход (ЭМП). При исследовании рака России, Москва, Россия яичников (РЯ) мы показали ассоциацию ЭМП при гене- введение. Диссеминированная меланома кожи явля-рализации процесса по брюшине и ростом опухолевых ется высокоагрессивным заболеванием с низкой 5-летней клеток в асцитической жидкости по сравнению с первич- выживаемостью. После удаления метастазов вакцинотера-ной солидной опухолью. Учитывая, что источником кле- пия дендритными клетками в адъювантном режиме дает точных культур, широко используемых в исследованиях, возможность пациентам с III и IV стадией меланомы до-являются не только солидные опухоли, но и экстрацеллю- стигать стойкой многолетней ремиссии. лярные жидкости, представляется важной оценка «сохран- Цель исследования. Получение клеточной линии, ко-ности» эпителиального фенотипа при адаптации клеток торая может служить источником опухолевых антигенов к росту in vitro. для создания дендритноклеточных противоопухолевых Цель исследования. Количественно оценить уровень, вакцин. интенсивность и интегральный индекс экспрессии важ- материалы и методы. В работе были использованы ме-нейшего маркера ЭМП — виментина в клетках культур, тоды культивирования клеток, проточная цитофлуориме-полученных из эпителиальных опухолей, различающихся трия, RT-PCR, морфологическое исследование, метод по форме роста в организме. стандартной цитогенетики. материалы и методы. Исследованы клеточные линии, результаты. Клетки Mel A052 получали стандартными полученные из плевральной жидкости (MCF-7, T-47D), мо- методами из опухолевого материала метастаза в лимфати-лозива (HBL-100), солидного узла (BT-474, HCC1937) боль- ческий узел пациентки с IV стадией меланомы. После дис-ных раком молочной железы и асцитической жидкости социации клетки культивировали при 37 °С в атмосфере (SCOV-3) пациентки с РЯ. Проведен иммунофлуоресцент- 5 % СО2 в среде RPMI-1640 с 2 % сывороткой крови чело-ный анализ, ассоциированный с проточной цитофлуориме- века. Клеточная линия Mel A052 имела полусуспензион-трией. Использованы первичные антитела к виментину ный характер роста. Цитологическое исследование пока-(SP20, BIOCARE) и вторичные — конъюгированные с краси- зало, что линия Mel A052 представлена клетками телем DyLight650 (Abcam). Критерием Колмогорова—Смир- с выраженным полиморфизмом, наряду с округлыми ненова определены уровень экспрессии — число специфиче- правильной полигональной формы встречаются клетки ски флуоресцирующих клеток в % по отношению звездчатой и веретенообразной формы с длинными отрост-к контролю; интенсивность (усл. ед.) — отношение средней ками. Исследование экспрессии поверхностных антигенов специфической интенсивности флуоресценции к аналогич- выявило полное отсутствие главного комплекса гистосов-ному показателю в контроле; интегральный индекс — произ- местимости I и II классов. Более 90 % клеток экспресси-ведение доли клеток, экспрессирующих виментин, и интен- ровали CD54 — молекулы адгезии, и CD117 или c-kit, сивности. что предполагает высокозлокачественный фенотип клеток результаты. В клетках BT-474 уровень экспрессии был Mel A052. В клетках Mel A052 мы наблюдали практически ниже более чем в 2 раза (29 % против 71 %), интенсив- нулевую экспрессию 8 самых распространенных раково-ность — в 3 раза (2,1 против 6,4), а индекс — более чем тестикулярных генов. В 100 % клеток обнаружена

Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ