CC BY
17
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
гоприятной тенденцией с более выраженным темпом среднегодового прироста трендовых показателей при ОКИУЭ. По соотношению кривой сглаженных показателей заболеваемости и линии прямолинейного тренда в развитии ОКИНЭ и ОКИУЭ выделялись одинаковые по продолжительности циклические колебания, ограниченные 1997—2007 гг., с периодом подъема в 1997—2001 гг. и снижения в 2002—2007 гг. При этом 2008—2010 гг. символизировали собой начало фазы подъема нового цикла. Во все наблюдаемые периоды показатели заболеваемости ОКИНЭ (125,26±6,61%ооо; 114,0+6,4%ооо и 235,3+4,7%ооо соответственно) значительно уступали таковым при ОКИУЭ (217,7±8,7%оос; 272,1 + 10,0%оос и 372,3+5,9%ооо соответственно). Сходная ситуация в соотношении этих показателей в указанные периоды наблюдалась как у детей, так и у лиц старше 15 лет (взрослые). При этом заболеваемость детского населения по анализируемым группам инфекций закономерно превосходила ее интенсивность у взрослых. В случае ОКИУЭ наблюдаемое превышение формировалось на более высоких уровнях, чем при ОКИНЭ. В этой группе кишечных инфекций заболеваемость по исследуемым когортам населения достигла максимальных величин в 2008—2010 гг. (235,3±4,8%ооо и 177,5+4,5%осо). В случае ОКИУЭ наибольшие показатели среди детей и взрослых регистрировались уже в 2002-2007 гг. (1054,8+50,9%сос и 135,8+7,7%ооо), которые стабилизировались на данном уровне в последние годы (1014,6+23,8%ооо и 150,8±4,1%ооо). Эти данные явились объективным обоснованием проведения по материалам 2008-2010 гг. сравнительной оценки проявлений ОКИУЭ и ОКИНЭ. В эти годы на ОКИНЭ приходилось 38,7% от общего числа заболевших ОКИ и 61,3% на ОКИУЭ, интенсивность которой (372,3+5,9%осо) существенно превосходила заболеваемость населения острыми кишечными ин-фекцияминевыясненнойэтиологии(235,4,8±4,8%соо). При этом дети и взрослые характеризовались различными соотношениями показателей заболеваемости этими инфекциями. Взрослые по заболеваемости ОКИУЭ (150,8+4,1%ооо) и, особенно удельному весу заболевших (34,6%), заметно уступали аналогичным показателям, обусловленным ОКИНЭ (177,5+4,5%ооо и 64,5%). У детей, напротив, отмечалось противоположное, чем у взрослых соотношение этих показателей (1014,9+23,8%ооо и 65,4%; 575,5+19,5%ооо и 35,5%). При этом наибольшие уровни заболеваемости среди детского населения по исследуемым группам кишечных инфекций регистрировались у детей 1-2 лет, среди которых интенсивность проявления ОКИУЭ (4956,5+168,2%осо) в 4 раза превышала ее уровень при ОКИНЭ (1245,8+85,6%ооо). На долю этой возрастной группы приходилось более 2/3 (68,8%) от всех заболевших ОКИУЭ, и более половины (51%) ОКИНЭ. Подобное соотношение показателей, но при существенно более низких уровнях по данным группам кишечных инфекций, регистрировалось так же и в возрастных группах детей 3-6 и, особенно 7-14 лет (1270,9+54,7%ооо и 352,5+22,1%ооо; 543,9+35,9%соо и 262, 2+19,0%соо). Полное соответствие с этими показателями указанные когорты детей обнаруживали и по удельному весу заболевших как ОКИУЭ (30,7 и 14,7%), так и ОКИНЭ (26,4 и 21,9%).
Приведенные данные свидетельствуют о формировании на исследуемой территории, как и в целом по РФ, выраженного неблагополучия по ОКИ, обусловленного неблагоприятной тенденцией как при
ОКИУЭ, так и при ОКИНЭ. Наблюдаемое явление с о -провождается интенсивным вовлечением в этот процесс детского населения, а среди них детей раннего возраста, на долю которых от числа всех заболевших детей ОКИУЭ и ОКИНЭ приходится соответственно 68,8% и 51,6%, что свидетельствует о недостаточной эффективности проводимых мероприятий. Особую озабоченность вызывает группа ОКИНЭ, рост заболеваемости которыми, очевидно, как и на других тер -риториях РФ, в большей степени обусловлен возбудителями вирусной природы (рота-, норво-, астро-, адено- и др. вирусы), диагностика которых, в соответствии с приказом Роспотребнадзора от 17.03.08 г. № 88 «О мерах по совершенствованию мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных заболеваний», должна являться приоритетной задачей лабораторной службы здравоохранения.
ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НОВЫХ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ В ЛАБОРАТОРИЯХ ТЕРРИТОРИАЛЬНОГО И РЕГИОНАЛЬНОГО УРОВНЕЙ
И.Н. Шарова1, Т.Ю. Красовская1, Н.Е. Терешкина1, И.В. Терехова1, В.В. Кабин2, Б.Л. Агапов2, Л.А. Верхотурова2, В.А. Лещук2, А.И. Губенко2, В.П. Булычев2, Е.В. Вокалова2, В.В. Кутырев1
'ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», г. Саратов; 2ФКУЗ «Астраханская ПЧС», г. Астрахань
Стандартизация диагностической деятельности в соответствии с трехуровневой структурой организации лабораторной диагностики опасных инфекционных болезней предусматривает выбор оптимальных методов и диагностических препаратов для проведения исследований в лабораториях каждого из уровней. Одним из условий обеспечения работ в лабораториях территориального и регионального уровней является использование диагностикумов, обладающих высокой эффективностью и информативностью, возможностью получать результаты исследования в максимально короткие сроки и не требующих дорогостоящего оборудования.
Специалистами ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб», совместно с сотрудниками ФКУЗ «Астраханская ПЧС» и ее отделений, на базе мобильной лаборатории была проведена оценка специфической эффективности экспериментальных ИФА-тест-систем, разработанных ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» (им-муноферментной для выявления антител к чумному микробу, дот-иммуноферментной для детекции туляремийного микроба моноклональной) и новых препаратов на основе иммунохроматографии (ИХ-тестов для лабораторной диагностики чумы и туляремии, производства ФБУН ГНЦ ПМБ г. Оболенск) при исследовании различного биологического материала. Изучены возможность их применения в полевых условиях, а также место в схеме лабораторной диагностики для лабораторий территориального и регионального уровней (при работе лабораторий противоэпидемических отрядов и отделений). Иммунодиагностическими методами (ИФА, ИХ) для выявления антител к возбудителю чумы протестировано 257 проб смывов грудной полости мелких млекопитающих, а для выявления антигенов возбудителей туляремии и чумы методами дот-иммуноанализа и ИХ — 274 пробы суспензий органов животных и суспензий клещей.
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
Исследования показали, что благодаря удобству и безопасности использования, быстроте получения ответа, простоте постановки и учета результатов реакции, все препараты могут быть рекомендованы для проведения лабораторной диагностики чумы и туляремии, как на этапе индикации, так и на этапе первичной идентификации в лабораториях территориального и регионального уровней, а также в ходе эпизоотологического мониторинга природно-очаговых и других опасных инфекционных болезней при работе противоэпидемических отрядов, в том числе с использованием мобильных лабораторий.
КРИВЫЕ РОСТА БАКТЕРИЙ В ПРОГНОЗИРОВАНИИ РАЗВИТИЯ ОППОРТУНИСТИЧЕСКИХ ИНФЕКЦИЙ
Е.Н. Шахбазова1, Н.И. Галиуллин1, Ф.И. Нигимова1, Л.Н. Килина1, Е.Ю. Котляр1, Е.Н. Жадько1, И.М. Чепурная2
ГАУЗ РЦПБ СПИД и ИЗ МЗ РТ, г. Казань; 2Представительство Эрба Лахема в РФ, Москва
Внедрение автоматизации и компьютерных программ в повседневную клиническую микробиологическую практику позволяет значительно расширить исследовательские возможности лаборатории, в том числе позволяет более детально изучить вопрос взаимоотношения организма с собственной микрофлорой, которая необходима для формирования самой иммунной системы и которая при определенных условиях может выйти из-под ее контроля и вызвать генерализованную инфекцию. В связи с этим актуальной является оценка неспецифических факторов защиты у больных ВИЧ-инфекцией, когда имеет место истощение иммунной системы и, как следствие, вероятно развитие оппортунистических инфекций.
Бактерицидная активность сыворотки (БАСК) — свойство сыворотки вызывать гибель контактирующих с ней бактерий, интегральный показатель, падение значения которого свидетельствует о глубоких нарушениях иммунитета.
В представленной работе кинетику размножения бактерий изучали на планшетном фотометре «iEMS-MF» (Labsystems, Финляндия). Полученные данные обрабатывали с помощью программного обеспечения «Микроб-Автомат». Изучены сыворотки крови 94 пациентов с ВИЧ-инфекцией, находящихся на различных стадиях заболевания. Кроме того, у 50% пациентов из различных локусов (дыхательные пути, кишечник) были выделены штаммы St.aureus и E. coli, по отношению к которым определяли также БАСК, поскольку эти бактерии являлись наиболее частой причиной микробного дисбаланса в нестерильных локусах пациентов. По мере развития ВИЧ-инфекции у больных происходит постепенное снижение БАСК по отношению к музейным культурам микроорганизмов. По St. aureus на Шстадии болезни показатели БАСК не имели достоверных различий с контрольной группой (p > 0,05). На ГУстадии показатели БАСК достоверно снижается (р < 0,001), с 27% на III стадии до 16,7% на ГУВ стадии, по E. coli достоверное подавление защитной функции сыворотки наблюдалось у больных только на ГУ стадии ВИЧ-инфекции (p < 0,001).
При исследовании взаимодействия штаммов, выделенных от пациентов, с аутологичными сыворо-токами у 42% пациентов, находящихся на III стадии заболевания с нормальным уровнем CD4 клеток, получены следующие результаты: St.aureus — 0—10%
(p < 0,001); E. coli — 0-40% (p < 0,001). Уже на III стадии заболевания БАСК подавляется, и микроорганизм, являясь составной частью микрофлоры, может использовать сыворотку в качестве питательной среды и вызвать развитие оппортунистических инфекций с генерализацией процесса.
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ И ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РОДСТВА ИЗМЕНЕННЫХ ВАРИАНТОВ ХОЛЕРНОГО ВИБРИОНА БИОВАРА ЭЛЬ ТОР, ВЫДЕЛЕННЫХ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ А.В. Шашкова, Т.А. Кульшань, С.П. Заднова, Н.И. Смирнова
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», г. Саратов
Проведен молекулярно-генетический анализ 48 клинических штаммов Vibrio cholerae, выделенных при эпидемических вспышках или спорадических заболеваниях на разных территориях РФ в период с 1970 по 2010 гг. Установлено, что 22 штамма (1970— 1990 гг.) относились к типичным штаммам V. cholerae биовара Эль Тор, которые несли в геноме профага вирулентности СТХ ген ctxB3, а 26 изолятов принадлежали к измененным вариантам, у которых присутствовал ген ctxB классического типа (ctxB1 или ctxB7). При этом 18 изолятов измененных вариантов имели в геноме СТХ два аллеля гена rstR (rstRClass и rstREltor), а 8 — только аллель rstREltor. Методом ДНК-ДНК гибридизации установлено, что 90% изученных штаммов содержали две копии профага СТХ . При секвенировании промоторной области оперона ctxAB обнаружена его гетерогенность — 69% штаммов включали, как и типичные штаммы биовара Эль Тор, четыре копии гептаповторов TTTTGAT, 23% — 3 копии и 8% — 5 копий. Сравнительный анализ генного состава острова пандемичности VSP-1 измененных вариантов биовара Эль Тор не выявил различий по составу тестированных генов. В тоже время обнаружено 6 штаммов (2004—2010 гг.), несущих протяженную делецию в центральной части острова пандемичности VSP-2, что, возможно, способствует большей выживаемости данных изолятов в организме хозяина. Изучение генетического родства 23 штаммов измененных вариантов методом MLVA позволило разделить их на два молекулярных типа. К первому типу относились штаммы, завезенные в период с 1993 по 1994 г., ко второму — с 1997 по 2010 гг. При этом второй тип делился на 3 группы штаммов — выделенные в 1997 г., в 2001 г. и штаммы 2004—2010 гг., несущие делетированный остров пандемичности VSP-2. Таким образом, в результате проведенной работы установлена генетическая гетерогенность измененных вариантов V. cholerae биовара Эль Тор, завезенных на территорию РФ. Наиболее распространенными были штаммы, содержащие две разные копии профага CTX — классического типа и гибридной. Характерным генетическим признаком измененных вариантов, выделенных в 2004—2010 гг., является наличие протяженной делеции в геноме VSP-2. Молекулярное типирование измененных вариантов V. cholerae биовара Эль Тор показало, что штаммы, выделенные от больных в одни и те же годы, независимо от территории, относятся к одному молекулярному типу и, следовательно, имеют клональ-ное или близкородственное происхождение.
