Научная статья на тему 'ПАССИВНЫЙ ИММУНИТЕТ У НОВОРОЖДЕННЫХ ЖЕРЕБЯТ: ИНДИКАТОРЫ И КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ'

ПАССИВНЫЙ ИММУНИТЕТ У НОВОРОЖДЕННЫХ ЖЕРЕБЯТ: ИНДИКАТОРЫ И КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
5
0
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Ветеринарный врач
ВАК
Область наук
Ключевые слова
новорожденные жеребята / пассивный иммунитет / нарушение передачи пассивного иммунитета / иммуноглобулины / диагностические тесты / индикаторы / критерии оценки / newborn foals / passive immunity / failure of transfer passive immunity / immunoglobulins / diagnostic tests / indicators / criterion of evaluation

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Федоров Юрий Николаевич, Богомолова Олеся Анатольевна, Царькова Кристина Николаевна, Конкина Софья Владимировна

Нарушение передачи пассивного иммунитета является наиболее распространенным иммунодефицитом у лошадей, который ассоциируется с повышенным риском возникновения инфекционных болезней и смертностью. Новорожденные жеребята рождаются без циркулирующих иммуноглобулинов, поскольку диффузная эпителиохориальная плацента кобыл препятствует передаче антител в период беременности. Это обстоятельство является критическим для получения новорожденными жеребятами иммуноглобулинов из молозива кобыл для защиты от инфекционных болезней в течение первых нескольких месяцев жизни. Жеребята всецело зависят от материнских иммуноглобулинов (преимущественно IgG), абсорбируемых через получение молозива кобыл в тонком кишечнике, препятствуя системным инфекциям в течение времени между воздействием патогенов и развитием иммунного ответа. Передача материнских антител является критическим для благополучия жеребят. Здоровые жеребята, потребляющие хорошего качества молозиво в первые часы после рождения, будут типично иметь содержание иммуноглобулина G (IgG) >8,0 мг/мл в 24 часа жизни, что рассматривается как адекватная передача пассивного иммунитета. Полное нарушение передачи пассивного иммунитета устанавливается при содержании IgG <4,0 мг/мл после возраста 24 часа. Частичное нарушение передачи пассивного иммунитета определяется при содержании IgG 4,0 8,0 мг/мл. Эти уровни иммуноглобулинов рассматриваются как важные индикаторы и критерии оценки эффективности передачи пассивного иммунитета. Инцидентность нарушений передачи пассивного иммунитета у жеребят колеблется в пределах 3-24%, частичные нарушения составляют 14-31%. Идеальные скринирующие тесты должны быть надежными, количественными, точными, легко выполнимыми с быстрым получением результатов. В качестве скринирующих тестов для оценки передачи пассивного иммунитета используются: простая радиальная иммунодиффузия, глутаральдегидовый тест коагуляции, тест помутнения с сульфатом цинка, реакция латекс-агглютинации, иммуноферментный анализ, активность гамма глутамилтрансферазы, турбидиметрические тесты и определение общего белка в сыворотке крови. Метод радиальной иммунодиффузии рассматривается как золотой стандарт для диагностики нарушений передачи пассивного иммунитета у жеребят. Турбидиметрические тесты являются превосходными методами скринирования у жеребят нарушений передачи пассивного иммунитета. Объектом данной статьи является описание использования в ветеринарной практике новых количественных турбидиметрических тестов для определения концентрации IgG в сыворотке крови или плазме новорожденных жеребят. Этот краткий обзор анализирует методы, пригодные для лабораторной оценки иммунного статуса и полевой диагностики передачи пассивного иммунитета у жеребят, её нарушений, обсуждает положительные и отрицательные аспекты каждого метода. Обзор суммирует подходящие находки о передаче пассивного иммунитета у новорожденных жеребят из работ, опубликованных в различных научных журналах.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Федоров Юрий Николаевич, Богомолова Олеся Анатольевна, Царькова Кристина Николаевна, Конкина Софья Владимировна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

PASSIVE IMMUNITY IN NEWBORN FOALS: INDICATORS AND CRITERION OF EVALUATION

Failure of transfer of passive immunity is most common immunodeficiency disorder in the horse and is associated with an increased risk of infectious disease and mortality. Newborn foals are born without circulating immunoglobulins, because the diffuse epitheliochorial placenta of mares does not allow antibody transfer during pregnancy. It is crucial that the newborn foal receives immunoglobulins from the mare’s colostrum to prevent infectious disease during the first few months of life. Foals are entirely dependent on maternal immunoglobulins (primarily IgG) absorbed through ingestion of mares colostrum in the first 24 hr of life. Successfull absorption of immunoglobulins by specialised enterocytes in small intestine, prevents systemic infection during the lag time between exposure to pathogens and development of protective immune response. Transfer of maternal antibodies is critical for the well-being of foals. Failure transfer of passive immunity significant increases the risk of infections and death. Healthy foals ingesting good-quality colostrum will typically have immunoglobulin G (IgG) levels >8,0 mg/ml at 24 hr of life, which is considered as adequate transfer of passive immunity. Complete failure of transfer of passive immunity is commonly defined as an IgG level < 4,0 mg/ml after 24 hr of age. Partial failure of transfer of passive immunity is defined as an IgG level between 4,0 and 8,0 mg/ml at 24 hr of age. These immunoglobulin levels suggested as meaningful indicators and criterion of evaluation transfer of passive immunity. The incidence of failure of passive immunity in foals ranges 3-24% and that of partial ranges from 14-31%. An ideal screening test would be fast, quantitative, accurate, and inexpensive. Success of passive transfer should be measured early in life so that it is possible to intervene if needed. An ideal screening test would be fast, quantitative, accurate, inexpensive, reliable, easy to perform, and with rapidly available results. Screening tests available for evaluation transfer of passive immunity are single radial immunodiffusion, glutaraldehyde coagulation, zinc sulfate turbidity, latex agglutination, enzyme immunoassay, gamma-glutamyltransferase activity, turbidimetric assay, and serum total protein. Single radial immunodiffusion is considered the gold standard for diagnosing transfer of passive immunity in foals. The turbidimetric assay is an excellent technique for screening foals for failure of transfer of passive immunity. The objective of this paper is to describe the use of a new quantitative turbidimetric immunoassay a for measuring concentrations of serum or plasma IgG in neonatal foals in veterinary practice, to analyze the evaluation methods available for the laboratory estimate of immune status and field diagnosis of transfer of passive immunity in foals and its failure, to discuss the positive and negative aspects of each technique. This review summaries pertinent findings about transfer of passive immunity in newborn foals from work published in a variety research journals.

Текст научной работы на тему «ПАССИВНЫЙ ИММУНИТЕТ У НОВОРОЖДЕННЫХ ЖЕРЕБЯТ: ИНДИКАТОРЫ И КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ»

Ветеринарный врач. 2024. № 5. С. 15 - 21

The Veterinarian. 2024; (5): 15 - 21

Научная статья

УДК 619.616-097.3

DOI: 10.33632/1998-698Х 2024515

ПАССИВНЫЙ ИММУНИТЕТ У НОВОРОЖДЕННЫХ ЖЕРЕБЯТ: ИНДИКАТОРЫ И КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ

Юрий Николаевич Федоров, доктор биологических наук, fun181@mail.ru Олеся Анатольевна Богомолова, кандидат биологических наук, vnitibp@mail.ru Кристина Николаевна Царькова, vnitibp@mail.ru

Софья Владимировна Конкина, vnitibp@mail.ru

и

Всероссийский

научно-исследовательский

технологический

институт

биологической

промыщленности, г.о.Лосино-Петровский, Московская область, Российская Федерация

Автор, ответственный за переписку: Олеся Анатольевна Богомолова.

Аннотация. Нарушение передачи пассивного иммунитета является наиболее распространенным иммунодефицитом у лошадей, который ассоциируется с повышенным риском возникновения инфекционных болезней и смертностью. Новорожденные жеребята рождаются без циркулирующих иммуноглобулинов, поскольку диффузная эпителиохориальная плацента кобыл препятствует передаче антител в период беременности. Это обстоятельство является критическим для получения новорожденными жеребятами иммуноглобулинов из молозива кобыл для защиты от инфекционных болезней в течение первых нескольких месяцев жизни. Жеребята всецело зависят от материнских иммуноглобулинов (преимущественно IgG), абсорбируемых через получение молозива кобыл в тонком кишечнике, препятствуя системным инфекциям в течение времени между воздействием патогенов и развитием иммунного ответа. Передача материнских антител является критическим для благополучия жеребят. Здоровые жеребята, потребляющие хорошего качества молозиво в первые часы после рождения, будут типично иметь содержание иммуноглобулина G (IgG) >8,0 мг/мл в 24 часа жизни, что рассматривается как адекватная передача пассивного иммунитета. Полное нарушение передачи пассивного иммунитета устанавливается при содержании IgG <4,0 мг/мл после возраста 24 часа. Частичное нарушение передачи пассивного иммунитета определяется при содержании IgG 4,0 - 8,0 мг/мл. Эти уровни иммуноглобулинов рассматриваются как важные индикаторы и критерии оценки эффективности передачи пассивного иммунитета. Инцидентность нарушений передачи пассивного иммунитета у жеребят колеблется в пределах 3-24%, частичные нарушения составляют 14-31%. Идеальные скринирующие тесты должны быть надежными, количественными, точными, легко выполнимыми с быстрым получением результатов. В качестве скринирующих тестов для оценки передачи пассивного иммунитета используются: простая радиальная иммунодиффузия, глутаральдегидовый тест коагуляции, тест помутнения с сульфатом цинка, реакция латекс-агглютинации, иммуноферментный анализ, активность гамма - глу-тамилтрансферазы, турбидиметрические тесты и определение общего белка в сыворотке крови. Метод радиальной иммунодиффузии рассматривается как золотой стандарт для диагностики нарушений передачи пассивного иммунитета у жеребят. Турбидиметрические тесты являются превосходными методами скринирования у жеребят нарушений передачи пассивного иммунитета. Объектом данной статьи является описание использования в ветеринарной практике новых количественных турбидиметрических тестов для определения концентрации IgG в сыворотке крови или плазме новорожденных жеребят. Этот краткий обзор анализирует методы, пригодные для лабораторной оценки иммунного статуса и полевой диагностики передачи пассивного иммунитета у жеребят, её нарушений, обсуждает положительные и отрицательные аспекты каждого метода. Обзор суммирует подходящие находки о передаче пассивного иммунитета у новорожденных жеребят из работ, опубликованных в различных научных журналах.

Ключевые слова: новорожденные жеребята, пассивный иммунитет, нарушение передачи пассивного иммунитета, иммуноглобулины, диагностические тесты, индикаторы, критерии оценки

16

Для цитирования: Федоров Ю.Н., Богомолова О.А., Царькова К.Н., Конкина С.В. Пассивный иммунитет у новорожденных жеребят: индикаторы и критерии оценки // Ветеринарный врач. 2024. № 5. С. 15 - 21. DOI: 10.33632/1998-698Х 2024 5 15

PASSIVE IMMUNITY IN NEWBORN FOALS: INDICATORS AND CRITERION OF EVALUATION

Yuri N. Fedorov, doctor of biological sciences, fun181@mail.ru

Olesya A. Bogomolova, candidate of biological sciences, noo_vnitibp@mail.ru

Kristina N.Tsar'kova, vnitibp@mail.ru

Sofja V. Konkina, vnitibp@mail.ru

All-Russian Research and Technological Institute of the Biological Industry. Moscow Province, g.o. Losino-Petrovskij, Russian Federation

Corresponding author: Olesya Anatolyevna Bogomolova.

Abstract. Failure of transfer of passive immunity is most common immunodeficiency disorder in the horse and is associated with an increased risk of infectious disease and mortality. Newborn foals are born without circulating immunoglobulins, because the diffuse epitheliochorial placenta of mares does not allow antibody transfer during pregnancy. It is crucial that the newborn foal receives immunoglobulins from the mare’s colostrum to prevent infectious disease during the first few months of life. Foals are entirely dependent on maternal immunoglobulins (primarily IgG) absorbed through ingestion of mares colostrum in the first 24 hr of life. Successfull absorption of immunoglobulins by specialised enterocytes in small intestine, prevents systemic infection during the lag time between exposure to pathogens and development of protective immune response. Transfer of maternal antibodies is critical for the well-being of foals. Failure transfer of passive immunity significant increases the risk of infections and death. Healthy foals ingesting good-quality colostrum will typically have immunoglobulin G (IgG) levels >8,0 mg/ml at 24 hr of life, which is considered as adequate transfer of passive immunity. Complete failure of transfer of passive immunity is commonly defined as an IgG level < 4,0 mg/ml after 24 hr of age. Partial failure of transfer of passive immunity is defined as an IgG level between 4,0 and 8,0 mg/ml at 24 hr of age. These immunoglobulin levels suggested as meaningful indicators and criterion of evaluation transfer of passive immunity. The incidence of failure of passive immunity in foals ranges 3-24% and that of partial ranges from 14-31%. An ideal screening test would be fast, quantitative, accurate, and inexpensive. Success of passive transfer should be measured early in life so that it is possible to intervene if needed. An ideal screening test would be fast, quantitative, accurate, inexpensive, reliable, easy to perform, and with rapidly available results. Screening tests available for evaluation transfer of passive immunity are single radial immunodiffusion, glutaraldehyde coagulation, zinc sulfate turbidity, latex agglutination, enzyme immunoassay, gamma-glutamyltransferase activity, turbidimetric assay, and serum total protein. Single radial immunodiffusion is considered the gold standard for diagnosing transfer of passive immunity in foals. The turbidimetric assay is an excellent technique for screening foals for failure of transfer of passive immunity. The objective of this paper is to describe the use of a new quantitative turbidimetric immunoassay a for measuring concentrations of serum or plasma IgG in neonatal foals in veterinary practice, to analyze the evaluation methods available for the laboratory estimate of immune status and field diagnosis of transfer of passive immunity in foals and its failure, to discuss the positive and negative aspects of each technique. This review summaries pertinent findings about transfer of passive immunity in newborn foals from work published in a variety research journals.

Keywords: newborn foals, passive immunity, failure of transfer passive immunity, immunoglobulins, diagnostic tests, indicators, criterion of evaluation

Введение. Сохранение жеребят в ранний постнатальный период остается важной проблемой для конезаводчиков и ветеринарных специалистов, обслуживающих коневодство. Жеребята рождаются без иммуноглобулинов в сыворотке крови, поскольку диффузная эпителиохориальная плацента кобыл препятствует поступлению иммуноглобулинов от матери плоду в период беременности [1-4]. Поэтому новорожденные жеребята должны получить материнские иммуноглобулины через молозиво для формирования пассивной иммунной защиты (пассивного иммунитета) до тех пор, пока не начнется продукция собственных иммуноглобулинов и других иммуно-активных компонентов. Абсорбция иммуноглобулинов молозива кобыл кишечником новорожденных жеребят происходит в первые 24 часа

17

после рождения и является важным фактором их устойчивости против возбудителей инфекций в первые два месяца после рождения. Успешная абсорбция иммуноглобулинов препятствует системным инфекциям в течение задержки времени между воздействием патогенов и развитием протективного иммунного ответа. Передача материнских антител является чрезвычайно важным фактором противостояния инфекционным агентам. Нарушение передачи пассивного иммунитета с молозивом значительно увеличивает риск инфекционных болезней и смертности. Концентрация иммуноглобулинов у жеребят в сыворотке крови зависит от количества полученного молозива, содержания иммуноглобулинов в молозиве и времени его получения после рождения. У жеребят в возрасте более 24 часов регистрируется полное нарушение передачи пассивного иммунитета при концентрации в сыворотке крови IgG <4,0 мг/мл. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови жеребят от 4,0 до 8,0 мг/мл в период после 24 часов после рождения рассматривается как частичное нарушение передачи пассивного иммунитета, а концентрация более чем 8,0 мг/мл - как адекватная защита от патогенов. Отдельные жеребята при высокой эффективности передачи пассивного иммунитета с молозивом имеют содержание IgG в сыворотке крови в суточном возрасте >20,0 мг/мл. Распространение нарушений передачи пассивного иммунитета у жеребят колеблется от 3 до 24%, частичное нарушение составляет от 14 до 31%. Многие исследования показывают, что нарушения передачи пассивного иммунитета от матери с молозивом имеют место у 10-20% жеребят, с увеличением до 30% [5-8]. В различных странах с развитым коневодством инцидентность нарушений передачи пассивного иммунитета имеет место в различных пределах, что связано с использованием характера диагностических тестов для определения концентрации IgG, референсных показателей, возраста жеребят при тестировании. Наиболее важными инфекционными болезнями у новорожденных жеребят являются септицемия, энтериты, пневмония и артриты. Главной причиной неонатальной смертности жеребят является септицемия, которая регистрируется в первую неделю после рождения и связана с нарушением передачи пассивного иммунитета с молозивом. Важным фактором риска для развития нарушений передачи пассивного иммунитета у жеребят является низкая концентрация иммуноглобулинов в молозиве кобыл (<30,0 мг/мл), способ получения молозива после рождения (естественный путь или выпойка). Раннее тестирование концентрации иммуноглобулинов у новорожденных жеребят позволяет идентифицировать иммунодефицитное состояние, связанное с нарушением передачи пассивного иммунитета. За последние годы разработаны скри-нирующие тесты для оценки содержания IgG у жеребят: Метод радиальной иммунодиффузии рассматривается как референсный тест («золотой стандарт») для количественного определения концентрации IgG у жеребят. Для получения результатов применения этого теста требуется 24 часа. Поэтому он не используется для рутинных исследований на конефермах, в полевых ситуациях или в ветеринарных клиниках, поскольку только быстрое получение результатов позволяет осуществлять терапевтические мероприятия при нарушениях передачи пассивного иммунитета у жеребят. Экспресс-методы для практического определения концентрации иммуноглобулинов у жеребят включают: тест коагуляции с глутаровым альдегидом, тест помутнения с сульфатом цинка, тест преципитации с сульфитом натрия, латекс-агглютинация, ИФА, турбидиметрические методы иммуноанализа [9-16].

Индикаторы, критерии оценки и диагностика нарушений передачи пассивного иммунитета. Методы и их обсуждение.

Метод радиальной иммунодиффузии (РИД) основан на том, что иммуноглобулины испытуемых

проб сыворотки крови радиально диффундируют

агар, содержащий моноспецифическую

в

антисыворотку или моноклональные антитела к иммуноглобулинам отдельных изотипов, образуя кольцо преципитации, диаметр которого прямо пропорционален концентрации иммуноглобулинов в испытуемой пробе. Метод рассматривается как наиболее точный для количественного определения концентрации IgG у жеребят. Как прямой тест определения концентрации IgG, он является золотым стандартом, арбитражным референсным методом по отношению к другим методам для подтверждения нарушений передачи пассивного иммунитета. Однако, для получения результатов требуется 18-24 ч, метод является дорогостоящим и не рекомендуется в качестве рутинного для мониторинга эффективности передачи пассивного иммунитета в полевых условиях (на фермах) или в ветеринарных клиниках, потому что быстрые результаты необходимы для терапевтического вмешательства в случаях нарушений передачи пассивного иммунитета у жеребят. Поэтому метод радиальной иммунодиффузии рекомендуется только для научных исследований и в качестве арбитражного теста при вспышках массовой смертности новорожденных в связи с нарушением передачи пассивного иммунитета [9, 12].

Тест преципитации с сульфитом натрия (Na2SO3) - турбидиметрический пробирочный тест представляется как трехступенчатый полуколичественный метод с использованием 14, 16 и 18%-ных растворов сульфита натрия. Он является наиболее простым и информативным экспресс-методом оценки иммунного статуса у новорожденных жеребят, диагностическим тестом нарушений передачи

18

пассивного иммунитета, позволяющим определять уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови. Метод основан на селективной преципитации высокомолекулярных белков растворами сульфита натрия различных концентраций. Иммуноглобулины, которые появляются в сыворотке крови новорожденных телят после приема молозива, преципитируются растворами сульфита натрия в концентрациях от 14 до 18%. Более низкие концентрации реагента не эффективны, а более высокие - преципитируют и другие сывороточные белки, не относящиеся к иммуноглобулинам.

Пробы плазмы крови непригодны для использования в

тесте с сульфитом натрия, так как

фибриноген и другие факторы свертывания преципитируются сульфитом натрия. В стеклянные пробирки вносится 1,9 мл каждого из трех растворов сульфита натрия (14, 16 и 18%) и добавляется по 0,1 мл испытуемой сыворотки крови жеребят. Содержимое пробирок тщательно встряхивается и оставляется при комнатной температуре на один час. При положительной реакции в пробирке при визуальной оценке появляется помутнение или выпадает осадок (Таблица 1). Растворы в указанных концентрациях позволяют выявить уровень иммуноглобулинов в наиболее важных значениях для оценки иммунного статуса: до 4,0 мг/мл, от 4,0 до 8,0 мг/мл и свыше 8,0 мг/мл. Чувствительность метода составляет 89% и специфичность - 99%. Тест с сульфитом натрия является простым, недорогим и эффективным непрямым экспресс-методом оценки передачи пассивного иммунитета в полевых условиях (на фермах) [13, 15].

Таблица 1

преципитации с сульфитом натрия

Определение иммуноглобулинов в сыворотке крови жеребят по результатам

Уровень иммуноглобулинов, мг/мл Оптимальный ( > 8,0 мг/мл)

Пониженный (4,0-8,0 мг/мл)

Низкий (< 4,0 мг/мл)

14% Na;SO3 +

16% Na;SO3 + +

18% Na;SO3 + +

+

Отсутствие иммуноглобулинов (0,0 мг/мл)

Примечания

1 - «+» - наличие иммуноглобулинов.

2 - «-» - отсутствие иммуноглобулинов.

Глутаральдегидовый тест коагуляции. Быстрый и недорогой глутаральдегидовый тест с успехом применяется в Европе в течение многих лет для диагностики воспалительных болезней у крупного рогатого скота. Отрицательный глутаральдегидовый тест используется как полуколичественный индикатор гипогаммаглобулинемиии у жеребят, вызываемой нарушением передачи пассивного иммунитета. Принцип метода основан на способности глутарового альдегида в растворах различной концентрации коагулировать белки сыворотки крови с образованием нерастворимых комплексов. Глутаральдегидовый реагент в глутаральдегидовом тесте осуществляет коагуляцию фибриногена или гаммагло-булинов в ЭДТА - стабилизированной крови за счет химической реакции между альдегидовыми группами и свободными аминогруппами в фибриногене и иммуноглобулинах. При этом время, необходимое для этой химической реакции, обратно пропорционально концентрации иммуноглобулинов в реа-гируемой смеси. Процесс начинается как первая степень химической реакции, в которой реакционное время прямо пропорционально концентрации фибриногена и иммуноглобулинов. Метод применяется у жеребят для оценки степени передачи иммуноглобулинов через молозиво. Глутаральдегидовый тест имеет варианты с использованием цельной крови и сыворотки крови. Последний является предпочтительным за счет элиминации потенциального взаимодействия с фибриногеном. В одной из модификаций теста помутнения с глутаровым альдегидом раствор для теста готовится смешиванием 50 мл 25%-ного глутарового альдегида, 1 г Na2-ЭДТА и 1 л 0,9% NaCl. Для реакции 2 мл крови смешивают с 2 мл приготовленного раствора глутарового альдегида в пробирках с антикоагулянтом. Результаты оцениваются в течение 15 мин или до наступления процесса коагуляции. Результаты классифицируются от 1 до 4, согласно следующим критериям. Время наступления коагуляции от 0 - <3 минут—высокое содержание иммуноглобулинов; >3 - <6 минут—умеренная концентрация иммуноглобулинов; > 6 - <15 минут — низкая концентрация иммуноглобулинов; 15 минут - отсутствие иммуноглобулинов (Таблица 2) [10, 11, 16 ].

19

Таблица 2 - Определение иммуноглобулинов в крови жеребят по результатам коагуляции с глутаровым альдегидом (ГЛА)

ГЛА-категория

1. ~

2.

3.

4.

Время коагуляции 0 - < 3 мин____

>3 - < 6 мин

> 6 - < 15 мин

> 15 мин

____Содержание иммуноглобулинов (Ig) Высокое содержание Ig (> 8,0 мг/мл)_

Умеренное содержание Ig (4,0 - 8,0 мг/мл) Низкое содержание Ig (< 4,0 мг/мл)__

Отсутствие Ig (0,0 мг/мл)

Турбидиметрический тест с сульфатом цинка (ZnSO4.7H2O) является простым, экспресс -методом оценки иммунного статуса жеребят, основанный на преципитации высокомолекулярных белков растворами сульфата цинка различной концентрации, вызывающих феномен помутнения. При этом наблюдается корреляция между результатами теста с сульфатом цинка по определению уровня общих иммуноглобулинов и результатами определения концентрации IgG методом радиальной иммунодиффузии («золотой стандарт»). В исследованиях с высокой специфичностью испытана концентрация раствора с содержанием сульфата цинка 208 мг/л и оценкой интенсивности помутнения на спектрофотометре при

длине волны 660 нм, времени реакционной смеси

60 мин. Проба сыворотки крови в объеме 100 мкл

смешивается с 6 мл раствора сульфата цинка, смесь инкубируется в течение часа. Интенсивность помутнения конвертируется в мг/мл IgG после получения стандартной кривой на основании проб с известной концентрацией IgG лошади или оценивается визуально. Стандартный раствор для оценки результатов содержит 94 мл 0,2 N серной кислоты (95-97%) и 6 мл 1,15 г/100 мл хлористого бария (BaCl2.2H2O), что соответствует 40 ЕД помутнения при спектрофотометрии при длине волны 420 нм и содержанию IgG 8,0 мг/мл. С увеличением концентрации сульфата цинка повышается специфичность теста

с

незначительными изменениями чувствительности по отношению к другим концентрациям.

Исследователи отмечают, что подтверждено и в наших исследованиях, тест помутнения с сульфатом цинка является простым для выполнения и недорогим скринирующим тестом с высокой чувствительностью и достаточной специфичностью, но в определенной степени зависимым от таких факторов, как гемолиз испытуемых проб сыворотки крови, продолжительности времени реакции, окружающей температуры и содержания СО2 в растворах. Поэтому, при определении уровня IgG тест с сульфатом цинка требует подтверждения прямых методов определения концентрации IgG, таких как радиальная иммунодиффузия. Реакция с сульфатом цинка адаптирована для оценки концентрации IgG в сыворотке крови и посредством этого используется для диагностики нарушений передачи пассивного иммунитета у новорожденных жеребят [14, 15].

Заключение. Аналитическая оценка тест-систем контроля иммунного статуса и эффективности передачи пассивного иммунитета у новорожденных жеребят показала, что непрямые методы иммуноанализа, основанные на феноменах преципитации, помутнения и коагуляции (тесты с сульфитом натрия, сульфатом цинка и глутаровым альдегидом) рассматриваются как экспресс-методы диагностики передачи пассивного иммунитета с молозивом у новорожденных жеребят, пригодные для исследований в полевых условиях. При этом классический метод радиальной иммунодиффузии («золотой стандарт») выступает в качестве арбитражного теста для диагностики нарушений передачи пассивного иммунитета. Критерием эффективности передачи и формирования пассивного иммунитета является содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови жеребят в суточном возрасте >8,0 мг/мл. Своевременная диагностика нарушений передачи пассивного иммунитета с использованием экспресс-методов позволяет повысить сохранность молодняка в ранний постнатальный период. Наиболее эффективным средством предотвращения инфекционных болезней в ранний постнатальный период является пассивный иммунитет, полученный с молозивом, который необходимо контролировать в первые дни после рождения с применением диагностических тест-систем различного уровня.

Финансирование исследования. Работа выполнена в соответствии с Государственным заданием по теме FGGS-2022-0001: «Провести проблемно-ориентированные исследования по созданию тест-систем для диагностики цирковируса свиней 2 типа и контроля качества вакцин; определить стратегию и алгоритм диагностики иммунодефицитных состояний у животных в ранний постнатальный период», номер гос. регистрации: АААА-А19-119091190024-3.

Список источников

1. Kenji KOROSUE, Harutaka MURASE Fumio SATO, Mutsuki ISHIMARU, Yasumitsu KOTOYORI and Yasuo NAMBO. Correlation of Serum IgG Concentration in Foals and Refractometry Index of the Dam’s

20

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

Pre - and Post - Parturient Colostrums: An Assessment for Failure of Passive Transfer in Foals //J.Vet.Med.Sci. 2012. -74 (11). - P.1387-1395. doi:10.1292/jvms.11-0470.

Mackenzie C. Failure of passive transfer in foals //UK- Vet Equine. 2020.- vol.4.- No2.- P.62-65. DOI: 10. 12968/ukve.2020. 4.2.62

Perkins G.A., Wagner B. The development of equine immunity: Current knowledge on immunology in the young horse. //Equine Vet. J. 2015.- 47 (3).- P.267-274.doi:10.1111/evj.12387.

Sellon D.C. Secondary immunodeficiencies of horses //Vet. Clin. North. Am. Equine Pract. 2000.- 16 (1).-

P.117- 130. doi: 10.1016/s 0739 (17) 30122-0.

Ferris R.A., McCue P.M. How to Use a Quantitative Turbidimetric Immunoaasay Assay to determine Immunoglobulin G Concentration in Neonatal Foals //AAEP Annual Convention-Las-Vegas. 2009.-vol.5.-P.45-47.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Kasap S., Kennerman E., Babaeski S., Dulger H. Comparison of Serum IgG Concentration, Total Protein, Glutaraldehyde Coagulation Test and Gamma Glutamyl Transferase in Neonatal Foals //J.Res.Vet. Med. 2019.-38(1).- P.35-38. DOI:30782/uluvfd.476058.

Tyler-McGowan C.M., Hodgson J.L., Hodgson D.R. Failure of passive transfer in foals: incidence and outcome on four studs in New South Wales //Aust.Vet.J. 1997.-75.- P.56-59.

Richter C., Lohman K. Failure of passive transfer in foals: A review. //Large Animal Veterinary Rounds. 2005.- vol.5.- Issue 10.- P.1-6.

Davis D.G., Schaefer D.M., Hinchcliff K.W., Wellman M., Willet V.E. and Fletcher J.M. Measurement of serum IgG in foals by radial immunodiffusion and automated turbidimetric imminoassay. //J. Vet.I ntern. Med. 2005.-19.- P.93-96.

Brink P, Wright J.C. and Schumacher J. An Investigation of the Ability of the Glutaraldehyd Test to Distinguish between Acute and Chronic Inflammatory Disease in Horses //Acta Vet. Scand. 2005. - vol. 46. - no.1-2.- P. 69-78. doi: 10.1186/1751-0147-46-49.

Kasap S., Babaeski S., Yildimir K.N., Orman A. et al. Evaluation of glutaraldehyde coagulation test and colostrum BRIX refractometer compared with SNAP foal IgG test in neonatal foals.//Equine Vet. J. 2023.-vol.56. Issue5.- P.1077-1082. DOI:10.1111/evj.14011.

12. Mancini G., Carbonara O. and Heremans J.F. Immunochemical quantitation of antigens by single radial

13.

14.

15.

immunodiffusion //Immunochem. 1965.- 2. - Р.235-254.

Mcue P.M. Evaluation of Turbidimetric immunoassay for measurement of plasma IgG concentration in foals //Am.J.Vet.Res. 2007.- 68 (9).- P.1005-1009. DOI: 10.2460/ajvr.68.9.1005.

Pompermayer E., de la Corte F.D., Rubin M.I.B. Zinc Sulfate Turbidity as Screening Test of Passive Transfer Immunity in Newborn Foals //Acta Sci.Vet.2019.-47.-Pub.1681. DOI:10.22456/1679- 9216.

96105.

Rumbaugh G.E., Ardans A.A., Ginno D. and Trommershausen-Smith. Measurement of neonatal equine immunoglobulins for assesment of colostral immunoglobulin transfer: comparison of single radial immunodiffusion with the zinc sulfate turbidity test, serum electrophoresis, refractometry for total serum protein, and the sodium sulfite precipitation test.// J.Am.Vet. Med.Assoc.1978.- 172.-P.321-325.

16. Sedlinska M., J. Krejai, M. Vyskoail. Evaluation of Field Methods for Determining Immunoglobulin in Sucking Foals //Acta Vet. Brno. 2005.- 74 (1).- P. 51-58. DOI: 10.2754/avb 200574010051.

References

1.

2.

3.

4.

5.

Kenji KOROSUE, Harutaka MURASE Fumio SATO, Mutsuki ISHIMARU, Yasumitsu KOTOYORI and Yasuo NAMBO. Correlation of Serum IgG Concentration in Foals and Refractometry Index of the Dam’s Pre - and Post - Parturient Colostrums: An Assessment for Failure of Passive Transfer in Foals //J.Vet.Med.Sci. 2012. -74 (11). - P.1387-1395. doi:10.1292/jvms.11-0470.

Mackenzie C. Failure of passive transfer in foals //UK- Vet Equine. 2020.- vol.4.- No2.- P.62-65. DOI: 10. 12968/ukve.2020. 4.2.62

Perkins G.A., Wagner B. The development of equine immunity: Current knowledge on immunology in the young horse. //Equine Vet. J. 2015.- 47 (3).- P.267-274.doi:10.1111/evj.12387.

Sellon D.C. Secondary immunodeficiencies of horses //Vet. Clin. North. Am. Equine Pract. 2000.-

16 (1).- P.117- 130. doi: 10.1016/s 0739 (17) 30122-0.

Ferris R.A., McCue P.M. How to Use a Quantitative Turbidimetric Immunoaasay Assay to determine Immunoglobulin G Concentration in Neonatal Foals //AAEP Annual Convention-Las-Vegas. 2009.-vol.5.-P.45-47.

21

6.

7.

8.

9.

10.

11.

Kasap S., Kennerman E., Babaeski S., Dulger H. Comparison of Serum IgG Concentration, Total Protein, Glutaraldehyde Coagulation Test and Gamma Glutamyl Transferase in Neonatal Foals //J.Res.Vet. Med. 2019.-38(1).- P.35-38. DOI:30782/uluvfd.476058.

Tyler-McGowan C.M., Hodgson J.L., Hodgson D.R. Failure of passive transfer in foals: incidence and outcome on four studs in New South Wales //Aust.Vet.J. 1997.-75.- P.56-59.

Richter C., Lohman K. Failure of passive transfer in foals: A review. //Large Animal Veterinary Rounds. 2005.- vol.5.- Issue 10.- P.1-6.

Davis D.G., Schaefer D.M., Hinchcliff K.W., Wellman M., Willet V.E. and Fletcher J.M. Measurement of serum IgG in foals by radial immunodiffusion and automated turbidimetric imminoassay. //J. Vet.I ntern. Med. 2005.-19.- P.93-96.

Brink P, Wright J.C. and Schumacher J. An Investigation of the Ability of the Glutaraldehyd Test to Distinguish between Acute and Chronic Inflammatory Disease in Horses //Acta Vet. Scand. 2005.- vol. 46. -no.1-2.- P. 69-78. doi: 10.1186/1751-0147-46-49.

Kasap S., Babaeski S., Yildimir K.N., Orman A. et al. Evaluation of glutaraldehyde coagulationtest and colostrum BRIX refractometer compared with SNAP foal IgG test in neonatal foals.//Equine Vet. J. 2023.-vol.56. Issue5.- P.1077-1082. DOI:10.1111/evj.14011.

12. Mancini G., Carbonara O. and Heremans J.F. Immunochemical quantitation of antigens by single radial

13.

14.

15.

immunodiffusion //Immunochem. 1965.- 2. - Р.235-254.

Mcue P.M. Evaluation of Turbidimetric immunoassay for measurement of plasma IgG concentration in foals //Am.J.Vet.Res. 2007.- 68 (9).- P.1005-1009. DOI: 10.2460/ajvr.68.9.1005.

Pompermayer E., de la Corte F.D., Rubin M.I.B. Zinc Sulfate Turbidity as Screening Test of Passive Transfer Immunity in Newborn Foals //Acta Sci.Vet.2019.-47.-Pub.1681. DOI:10.22456/1679- 9216.

96105.

Rumbaugh G.E., Ardans A.A., Ginno D. and Trommershausen-Smith. Measurement of neonatal equine immunoglobulins for assesment of colostral immunoglobulin transfer: comparison of single radial immunodiffusion with the zinc sulfate turbidity test, serum electrophoresis, refractometry for total serum protein, and the sodium sulfite precipitation test.// J.Am.Vet. Med.Assoc.1978.- 172.-P.321-325.

16. Sedlinska M., J. Krejai, M. Vyskoail. Evaluation of Field Methods for Determining Immunoglobulin in Sucking Foals //Acta Vet. Brno. 2005. - 74 (1). - P. 51-58. DOI: 10.2754/avb 200574010051.

Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации.

Авторы подтверждают отсутствие конфликта финансовых/нефинансовых интересов, связанных с написанием статьи.

All authors have made an equivalent contribution to the preparation of the publication. The authors declare that there is no conflict of interest.

Принята к публикации / accepted for publication 05.09.2024;

© Федоров Ю.Н., Богомолова О.А., Царькова К.Н., Конкина С.В., 2024

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.