CC BY
15
УДК: 619:615.5
Пер1г Ж. М., к. вет. н., ст. науковий ствробггаик © Жила М. I., к. вет. н., ст. науковий ствроб^ник Т1шин О. Л., к. вет. н., ст. науковий ствробггаик Хом'як Р. В., зав лаборатори К1сц1в О.С., науковий ствробггаик Державный науково-дослгдний контрольный ¡нститут ветеринарных препарат1в та кормових добавок, м. Львгв
ОЦ1НКА ДП ДЕЗ1НФЕКТАНТА КРИСТАЛ-1100
НА ОРГАН1ЗМ Б1ЛИХ ЩУР1В ПРИ ВИВЧЕНН1 ХРОН1ЧНО1
ТОКСИЧНОСТ1
Наведет результати дослгджень впливу дезтфектанта Кристал - 1100 в хронгчному досл1д1 на лабораторних тварин. Установлено, що показники кровI змтювалися в залежност1 в1д дози отриманого препарату. Введення препарату у найвищт доз1, а саме 1/10 ЛД50 призвело до розвитку в оргашзм1 гтерхромног макроцитарног анемп, дистрофгчних процеав у печтщ та вогнищевого запалення слизовог оболонки шлунка I дванадцятипалог кишки.
Ключовi слова: лабораторш щури, кров, дезтфектанти, хрошчна токсичтсть
Вступ. Розробка нових i удосконалення наявних дезшфектанив пролонговано! ди е актуальним завданням для ветеринарно! практики.
До антисептиюв ставляться наступт вимоги: використання сучасних високоефективних неагресивних, еколопчно чистих активнодшчих речовин; безпечтсть при обробщ ветеринарних шструменив i обладнання для штучного оЫменшня тварин [1].
Цим вимогам вщповщае препарат нового поколшня Кристал-1100, який створений ДНДК1 ветпрепаратiв та кормових добавок стльно iз ТзОВ "1нтер-Синтез" (м. Борислав, Львiвськоl областi). Це комплексний препарат, що мктить iзопропропиловий спирт, глутаровий альдегщ, алкилдиметилбензил-амонiю хлорид i алкилдиметилб^уанщину гiдрохлорид. Його застосовують для дезшфекци ветеринарних iнструментiв i обладнання для штучного оЫменшня сiльськогосподарських тварин. За параметрами гостро! токсичностi, при введенш в шлунок, дезiнфектант належить до IV класу токсичностi (малотоксичнi речовини) [2].
Препарати, що використовуються для дезшфекци, у вщповщносп з вимогами, яю до них висуваються, поряд з високими бактерицидними i дезшфжуючими властивостями, не повиннi створювати шкщливу дiю на органiзм тварин i людини. Враховуючи це, нами були проведет дослщження хротчно! токсичностi препарату Кристал - 1100 на оргашзм бших щурiв,
© Пер1г Ж. М., Жила М. I., Тшин О. Л., Хом'як Р. В., Юсщв О.С., 2009
100
основою яких е виявлення ступеня шкщливо! ди препарату на оргашзм за умов довготривалого його введення [3].
Метою наших дослщжень було виявити найбшьш чутлив1 органи \ системи оргашзму бших щур1в тд д1ею дезшфектанта "Кристал-П00" тд час вивчення хрошчно! токсичност препарату.
Матер1ал 1 методи. Хрошчну токсичшсть препарату Кристал-1100 вивчали на 24 бших щурах масою 90-110 г, !з яких сформували 4 групи по 6 тварин в кожнш. Щури I групи були контрольними, !м вводили питну воду. Тваринам II групи препарат вводили в дозП000 мг/кг (1/10 ЛД50), III групи -500 мг/кг (1/20 ЛД50) та IV групи - 200 мг/кг (1/50 ЛД50). При вивченш хрошчно! токсичност брали до уваги результати, отримаш при вивченш гостро! токсичност [2]. Препарат задавали, натще, внутршньошлунково протягом 10 д1б. Масу тша щур1в визначали зважуванням перед початком дослщу та на 7-у { 10-у добу дослщу. Впродовж дослщу проводили спостереження за клмчним станом та поведшкою дослщних тварин.
Шсля закшчення дослщу тварин зважували, декаттували, за умов легкого еф1рного наркозу, та вщбирали кров для подальших дослщжень. Проводили патолого-анатом1чний розтин дослщних \ контрольних тварин з макроскотчною оцшкою оргашв \ тканин та вщб1р зразюв для пстолопчного дослщження [4]. Внутршш органи зважували та вираховували вагов1 коефщенти 1х маси. У дослщжуваних пробах кров1 визначали морфолопчш та бюх1м1чш показники згщно загальнопринятих методик у лабораторп !муноморфологи ДНДЮ ветпрепараив та кормових добавок.
Результати дослщження. В результат 10-добового введення тваринам препарату в дозах вщ 200 до 1000 мг/кг загибел1 лабораторних щур1в не встановлено. Не виявлено у них також в1рогщних змш маси тша, пор1вняно з тваринами контрольно! групи (табл.1).
Таблиця 1
Динамика маси тша бших щу|мв на 10-ту добу досл1ду при вивченш _хрошчно!' токсичност1 препарату Кристал -1100 (М±т, п=24)_
Групи тварин
Маса тша, г
На початку дослщу
загальна по груш
середня одн1е1 тварини
На 10 добу введення
загальна по груш
середня однш тварини
Контрольна
730
121,67±3,1
833
138,83±9,2
II
735
122,5±2,8
843
140,5±8,4
III
770
128,33±1,05
823
137,17±3,57
IV
703
117,17±1,01
729
121,5±1,8
При патолого-анатом1чному дослщженш у тварин II I III дослщних груп виявляли збшьшення розм1р1в печшки, орган дрябло! консистенци, неоднорщно забарвлений, на розр1з1 структура дещо згладжена. Слизова оболонка шлунка 1 дванадцятипало! кишки мкцями почервонша, набрякла, вкрита густим тягучим слизом. Нирки темно-червоного кольору, бобовидно! форми, капсула зшмалася легко, консистенщя пружна, на розр1з1 границя м1ж юрковою та мозковою зонами збережена, в окремих випадках спостер1гали др1бш, поодиною крапков1
101
крововиливи тд капсулою органа. 1нтенсивтсть виявлених змш була бшьшою у щурiв II дослщно! групи. У щурiв IV дослщно! групи якихось макроскотчних змш у внутрштх органах не спостерiгали.
10-добове введення Кристалу-1100 в цiлому не викликало вiрогiдних змiн у коефщентах маси внутрiшнiх органiв дослiдних тварин. Лише у щурiв II дослщно! групи (1/10 ЛД50) встановлено вiрогiдне зменшення коефiцieнту маси лiвоï нирки на 11,67 % (p<0,05).
Таблиця 2
Коеф1щенти маси внутр1шн1х оргашв бших щурмв на 10-ту добу досл1ду при
вивченн1 хрошчно!' токсичного препарату Кристал -1100
Внутршш органи Групи тварин
Контроль 1/10 ЛД50 1/20 ЛД50 1/50 ЛД50
Леген! 11,87±1,3 10,66±1,1 10,51±0,5 10,8±1,9
Печшка 38,05±3,4 41,19±2,9 39,72±1,4 37,18±3,7
Нирка права 4,24±0,1 3,94±0,2 4,42±0,1 4,24±0,1
Нирка л1ва 4,37±0,2 3,86±0,1* 4,04±0,2 4,57±0,2
Серце 4,23±0,1 4,37±0,1 4,05±0,1 4,05±0,1
Селезшка 4,13±0,4 3,83±0,3 3,87±0,3 4,05±0,5
Примггка: у цш i наступних таблицях стутнь в1ропдност1 до контролю:
* - Р<0,05, ** - Р<0,01
При дослiдженнi морфологiчних показникiв кровi щурiв пiсля перорального тривалого введення Кристалу-1100, встановлено, що у всiх дослщних групах кшьккть еритроцитiв та рiвень гемоглобiну у кровi дослiдних груп тварин упродовж дослiду суттево не вiдрiзнялися вiд показникiв контрольноï групи (табл. 3). Виявлеш вiрогiднi змши у тварин II групи, яким вводили препарат протягом 10 дiб у найвищш дозi. Установлено вiрогiдне збiльшення, порiвняно з контролем, рiвня кольорового показника, середнього вмiсту гемоглобшу в еритроцитi та середнього об'ему еритроцита на 48,6 %, 41,5 %, 16,8 % вщповщно. Найбшьше виражений зсув бiлоï кровi даноï групи. Кiлькiсть лейкоцитiв збiльшилась на 41,6 %, за рахунок пщвищення рiвня лiмфоцитiв (на 17,3 %) та еозинофшв (35,4 %) по вщношенш до контролю. Встановлено також зменшення у 2 рази кшькосп сегментоядерних нейтрофшв.
Введення препарату у дозi 1/20 ЛД50 викликало зсув у лейкоцитарнш формулi. Так, виявлено збшьшення у 2 рази кшькосп базофшв та лiмфоцитiв на 16,4 %, i зменшення у 2 рази кшькосп сегментоядерних нейтрофшв
У тварин IV групи, яким вводили Кристал-1100 в дозi 1/50 ЛД50 не встановлено змш зi сторони червоноï i бiлоï кровi.
Введення препарату у найвищш доз^ а саме 1/10 ЛД50 призвело до збшьшення еритроцитарних iндексiв та середнього об'ему еритроциту, що може вказувати на розвиток в органiзмi гшерхромнох' макроцитарнох' анеми. Встановленi лейкоцитоз на фот лiмфоцитозу та еозинофiлiï з одночасним зсувом лейкоформули за рахунок сегментоядерних нейтрофшв може свщчити про виснаження захисних сил оргашзму.
102
Бшковий склад кровi е важливим фiзiологiчним показником оргашзму. По концентраци бiлкiв можна судити про iмунологiчну реактивнiсть. Цей показник сприяе розкриттю патогенезу хвороби, дозволяе контролювати характер i ступiнь ди патогенного агента на тварину.
Таблиця 3.
МорфолоНчш показники кров1 бших щурмв на 10-ту добу дослвду
при вивченш хрошчно!' токсичност1 препарату Кристал -1100 (М±т, п=6)
Показники Групи тварин
Контроль II III IV
Гемоглобш, г/л 108,28±4,08 117,2±5,81 116,2±5,23 112,4±7,7
Еритроцити, Т/л 4,08±0,57 3,64±0,05 3,98±0,25 4,25±0,48
Кольоровий показник 0,74±0,06 1,1±0,09* 0,88±0,05 0,83±0,11
Середнш вм1ст гемоглоб1ну в 24,62±1,96 34,85±4,85* 29,41±1,72 27,78±3,73
еритроцит1, пг
Гематокрит, л/л 0,34±0,06 0,35±0,02 0,33±0,02 0,35±0,03
Середнш об'ем еритроцита, мкм3 82,3±0,1 96,1±0,3* 82,9±0,2 82,2±0,09
Лейкоцити, Г/л 6,92±0,78 9,8±0,92* 7,18±0,58 6,86±0,88
Базофши, % 1,33±0,21 1,67±0,33 2,8±0,49* 2,0±0,21
Еозинофши, % 2,4±0,51 3,25±0,48* 3,0±0,58 2,5±0,5
Нейтрофши, %: паличкоядерш 7,0±1,0 6,25±0,48 5,5±1,5 7,5±0,96
сегментоядерн1 25,83±1,94 14,0±2,0** 14,0±1,15** 19,33±3,61
Л1мфоцити, % 62,67±1,58 73,5±2,22* 73,0±2,0* 67,0±5,4
Моноцити, % 1,4±0,24 2,0±0,01 2,0±0,01 1,67±0,39
Особливе значення мають гама-глобулiни, якi вдаграють важливу роль в захисних реакщях. В тих випадках, коли захисш сили органiзму вичерпанi, i продукщя iмунних тiл недостатня, спостерiгаеться пониження гама-глобулмв. Приблизно 98 % антитш мiститься в гама-глобулiнах [5].
Таблиця 4.
Бшковий склад сироватки кров1 бших щурмв на 10-ту добу досл1ду при
Показники Групи тварин
Контрольна II III IV
Загальний бшок, г/л 76,68±0,4 66,22±2,7* 65,5±0,3** 71,88±2,7
Альбумши, % 51,40±0,4 47,8±0,2* 50,30±0,4 51,4±0,41
а-глобулши, % 11,0±0,32 6,60±0,7** 10,5±0,35 10,92±0,45
Р-глобулши, % 21,3±0,5 16,7±0,3** 17,8±0,5** 19,8±0,5
у-глобулши, % 21,0±0,37 16,9±0,41** 19,9±0,35 20,3±0,48
Аналiзуючи вмiст бшюв, вiдмiтили зниження рiвня загального бшку у I групi на 13,6 % за рахунок альбуммв на 7% (табл. 4). Аналiз вмюту глобулiнiв у данiй групi показав достовiрне (р<0,01) зменшення а- в- та у-глобулмв вiдповiдно на 40 %, 21,6 % та 12,53 %. У тварин III групи встановлено лише зниження рiвня загального бшка на 14,6 % та Р-глобулмв на 16,5 %.
Таким чином, введення препарату Кристал-1100 у високих дозах призвело до гшопротешеми та гшоальбумшеми, зниження рiвня а-, в-,
103
у-глобулмв, що, зумовлено розвитком дистрофiчних процеЫв у печшщ та порушення бшоксинтезуючо1 функци.
Отже, введення препарату Кристал-1100 у дозi 1/50 ЛД50 не викликало достовiрноl рiзницi показникiв, бiлкового складу сироватки кровi у порiвняннi з контролем.
Висновки. При макроскопiчому дослiдженнi внутрiшнiх органiв тварин ii-о!, рiдше Ш-о! дослщних груп виявляли дистрофiчнi змiни у печшщ та ознаки вогнищевого катарального гастродуодешту. Введення препарату у найвищш доз^ а саме 1/10 ЛД50 призвело до розвитку в органiзмi гшерхромно1 макроцитарно! анеми та зниження синтезу iмуноглобулiнiв. Введення препарату у дозi 1/20 ЛД50 викликае змши лейкоцитарного профшю, та порушення бшкового складу сироватки кровi дослiдних щурiв. Тривале введення Кристалу-1100 в дозi 1/50 ЛД50 суттево не вливало на систему кровi органiзму та показники бшкового обмшу.
Л1тература
1. Дезшфекцшш засоби для знезараження мжобактерш / А. I. Завгороднiй, П. М. Тихонов, А. I. Палш, В. М. Горжеев // Вет.медицина Украши. - 2007. - № 7. - С.41-43.
2. Визначення параметрiв гостро! токсичностi нового дезшфектанту Кристал-1100 // Ж. М. Пери-, I. П. Патерега, Р. В. Хом'як, У. I. Тесаршська, С. Я. Мартиник // Науково-техшчний бюлетень Iнституту бюлогп тварин УААН i Державного науково-дослiдного контрольного iнституту ветпрепаратв та кормових добавок. 2008. - Вип.9, № 4. - С. 135-138.
3. Докшшчш дослiдження ветеринарних лжарських засобiв / I. Я. Коцюмбас, О. Г. Малик, I. П. Патерега та ш.; за ред. I. Я. Коцюмбаса — Л^в: Трiада плюс, 2006—360 с.
4. Коцюмбас I. Я., Коцюмбас Г. I., Особливост морфолопчних дослщжень при вивченш токсичност лжарських засобiв //Вiсник Бiлоцеркiв. держ. аграр. ун-ту: Зб. наук. праць. - Бша Церква, 2000. - Вип. 13, Ч.2 - С. 79-84.
5. Степашкина К. И. "Клиническое толкование сдвигов белков крови". -К.: Госмедиздат УССР, 1963.- С.120.
Summary
Perig G. M., Zhyla M. I., Tishin O. L., Khomjak R. V., Kistiv O. S.
THE ESTIMATION OF ACTION OF THE DISINFECTANT CRYSTAL-1100 OF THE ORGANISM OF WHITE RATS UNDER STUDYING OF CHRONIC TOXISITY
In the article demonstration the resuts of influence the desinfectant Crystal-1100 in chronic experement of laboratory animals. It is establishet, that the blood parameters varied depending on the dose received the drug. Application of preparation highest dose, namely 1/10 LD50 led to the development of the body hiperhromic macrocytic anemia, dystrophic processes in the liver and focal inflammation of the mucous membrane of the stomach and duodenal.
Стаття надшшла до редакцИ 16.09.2009
104
