ВИЗНАЧЕННЯ КУМУЛЯТИВНИХ ВЛАСТИВОСТЕЙ ПРЕПАРАТУ КЛОЗАВЕРМ А У БіЛИХ МИШЕЙ Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 619:615.5

Т1шин О. Л., канд. вет. наук, Коцюмбас I. Я., док. вет. наук, Жила М. I., канд.. вет. наук, Патерега I. П., канд. вет. наук, Чайковська О. I., канд. бюл. наук © Державный науково-дослгдний контрольный тститут ветеринарных npenapamie та кормових добавок, м. Львгв

ВИЗНАЧЕННЯ КУМУЛЯТИВНИХ ВЛАСТИВОСТЕЙ ПРЕПАРАТУ КЛОЗАВЕРМ А У БШИХ МИШЕЙ

Встановлено, що препарат клозаверм А не проявляв у быих мишей кумулятивних властивостей. Коефщент кумуляцп за тестом "субхротчног токсичностi" становить 1,65 одиниць. При тдштрному введент за сумарног дози 1920,10 мг/кг, при вивченш кумулятивних властивостей, препарат викликав засттну гтеремт i вогнищевий набряк легень, розширення правог половини серця та засттну гтеремт печтки, нирок i селезтки. У першi дн введення препарат клозаверм А за доз, щодо вивчення кумуляцп, тдвищував масу тыа быих мишей, а починаючи з 8 доби, вна^док токсичного його впливу на оргашзм, викликав гг пониження.

Ключовi слова: клозаверм А, бш мишi, пaтоморфологiя, кумулятивн влaстивостi, коефщент кумуляцп, маса тыа.

Вступ. Для профилактики та лжування екто- i ендопаразиив велико! рогато! худоби, овець i юз нами, разом з "Укрзооветпромпостачем", розроблений комбшований препарат клозаверм А, до складу якого входять дiючi речовини — аверсектин С i клозантел, яю проявляють синерпчну дш. Отриманий препарат мае широкий спектр протипаразитарно! ди на трематоди, нематоди, личинки rедзiв, збудниюв саркоптозiв. Однак, внаслщок комбшацп вищевказаних препарата i застосуванш вщповщних розчинниюв, невщомий вплив новостворено! лжарсько! форми на оргашзм тварин. Важливим етапом у розробщ нового препарату е токсиколопчш дослщження, зокрема, виявлення кумулятивних властивостей. Багаторазове введення в оргашзм тварин лжарсько! речовини може призвести до нагромадження !! у тканинах оргашзму, тому знання кумулятивних властивостей речовин або умов, яю можуть призвести до кумуляцп, особливо важливi для розумшня патогенезу штоксикаци, бо це явище часто лежить в основi гострих i хрошчних отруень [1]. Згщно з матерiалами НВО "Фармбюмед" (Росшська федерацiя), коефiцiент кумуляцi! аверсектину С становить 3,78 одиниць. Нами були вивчеш кумулятивш властивостi препарату клозаверм А на бших щурах [2]. Проте, ще невiдомi кумулятивнi властивост новоствореного препарату при введеннi його бшим мишам.

Мета та завдання. Визначити кумулятивш властивост препарату клозаверм А на бших мишах.

© Тшин О. Л., Коцюмбас I. Я., Жила М. I., Патерега I. П., Чайковська О. I., 2009

173

Матер1али та методи. Властивост препарату щодо кумуляци вивчали на бiлих мишах-самцях, 2-3-мiсячного вжу, масою 20-25 г. Для визначення ступеня кумуляци препарату використали метод-тест "субхрошчно! токсичностГ' за К. С. Лiмом зi спiвавторами у модифжаци К. К. Сидорова [1, 3, 4]. При проведенш "субхрошчно! токсичностГ' було використано 18 мишей, з яких було сформовано 2 аналопчш групи (I — контрольна та II — дослщна) по 9 тварин у кожнш. Мишам II групи клозаверм А вводили пщшюрно, щодобово, починаючи з дози 116,1 мг/кг (0,11 мл/кг), яка вщповщно становила 1/10 DL50, з послщовним збiльшенням дози у 1,5 рази через кожш 4 доби. Для переводу препарату з мл на мг, питому вагу клозаверму А визначали за допомогою ареометра. Дозу 1/10 DL50 було визначено при дослщжеш гостро! токсичност клозаверму А на бiлих мишах [5]. Першiй контрольнiй групi тварин вводили розчин з дистильовано! води та пропшенглжолю у спiввiдношеннi 1 : 1, в аналопчних дозах. На початку дослщу перед введенням i через кожнi 4 доби, тд час збiльшення дози, проводили зважування лабораторних тварин та тд час дослiдження враховували !х загальний стан i загибель. У мишей, що загинули, проводили патологоанатомiчний розтин. Залежно вiд дози препарату, вираховували коефiцieнт кумуляци за формулою, запропонованою Ю. С. Каганом i В. В. Станкевичем [2, 4, 7]: Ккум = DL50 п : DL50 1

де: Ккум — коефщент кумуляци, DL50 п та DL50 1 — середнi смертельш дози за багаторазового та одноразового введення, вщповщно.

Сумарну введену середню дозу препарату на одну дослщну тварину визначали за К. К. Сидоровим [2, 4].

Результати дослщжень. При дослiдженнi кумулятивних властивостей препарату клозаверм А за метод-тестом "субхрошчно! токсичностГ' встановлено, що загибель мишей наставала на 9 добу вщ початку введення препарату, а на 17 добу загинули вс дослщжуваш лабораторш тварини, яким вводили препарат. Клозаверм А викликав початок загибелi мишей вщ повторно введено! збшьшено! дози 263,75 мг/кг (0,25 мл/кг), яка у 5 разiв бшьша вiд терапевтично! i становила 0,23 DL50 та яка сумарно складала на одну тварину 1730,20 мг/кг (1,64 мл/кг) i була в 32,8 рази бшьша вщ терапевтично! i становила 1,49 одиниць. Сумарно введена середня доза клозаверму А за час дослщу на одну мишу при введенш протягом 16 дiб становила 1920,10 мг/кг (1,82 мл/кг), що у 36,4 рази бшьша вщ терапевтично!. Згщно з формулою коефщент кумуляци становив: Ккум = 1920,10 : 1160,5 = 1,65 одиниць.

Таким чином, при визначенш кумулятивних властивостей клозаверму А за метод-тестом "субхрошчно! токсичностГ' встановлено, що коефщент кумуляци становить 1,65 одиниць, а це за даною методикою вказуе на розвиток пщвищено! толерантноси оргашзму до дослiджувано! речовини, тобто свщчить про вiдсутнiсть кумулятивних властивостей дослщжуваного клозаверму А [2, 3, 4].

При патологоанатомiчному розтиш мишей, що загинули, встановлено: легеш тiстувато! консистенцi!, дещо збiльшенi, де-не-де червоного кольору, на розрiзi видшялася кров'янисто-пiниста рiдина. Шматочки легень занурено

174

плавали. Серце заокруглено! форми, передсердя заповнеш згустками кров1 На костальнш плеврi спостер^алися поодиною крапчастi крововиливи. Очеревина гладенька, блискуча, волога. Печшка в'яло! консистенци, темно-вишневого кольору, повнокровна, кра! гострi. Нирки дещо збiльшенi, темно-вишневого кольору, в'яло! консистенци, капсула напружена, знiмалася легко. Селезшка була дещо збiльшена, темно-вишневого кольору, кра! заокруглеш. На кишечнику з серозно! поверхнi поодинокi крапковi крововиливи. Слизова оболонка кишечнику св^ло-рожевого кольору, гладенька, блискуча, волога без нашарувань. Головний мозок без видимих макроскотчних змiн.

Отже, при патоморфолопчному дослiдженнi мишей за пiдшкiрного введення препарату у дозах щодо кумуляци макроскопiчно встановлено застiйну гiперемiю i вогнищевий набряк легень, розширення право! половини серця та застшну гшеремш печiнки, нирок i селезiнки.

При аналiзi показникiв середньо! маси тша дослiджуваних тварин встановлено, що клозаверм А у дозах, за вивчення кумулятивних властивостей препарату, при введенш протягом 8 дiб сприяв, порiвняно з контролем, !! пiдвищенню, а на 12 добу рiзкому пониженню (рис.).

1 доба 4 доба

8 доба 12 доба

11 -група

ШII - група

Рис. — Динамика маси тша бших мишей при внвченш кумулятивних властивостей препарату клозаверм А

Так, виявлена тенденщя до збшьшення маси тiла бiлих мишей в дослщнш групi тварин на 4 добу введення, порiвняно з контролем, на 6,0 %, а на 8 добу — на 1,9 % (табл. 1, 2). Як видно, на 8 добу введення препарату у дозах за вивчення щодо кумуляци, тенденщя до збшьшення маси тша до контролю у дослщнш груш не була вираженою, а на 12 добу спостер^али !! зменшення на 6,2 %. Порiвняно з 8 добою, на 12 добу в II грут тварин, яким вводили препарат, вiдмiчено зменшення середньо! маси тша на 9,6 %, в той час як у контрольнш груш це зменшення становило 1,83 %. Зменшення маси тша у

г

175

контрольнш I грут можна пояснити щодобовим пщшюрним введенням розчину, що е стресом для тварин. Загалом зменшення середньо! маси тша за час 12-добового у контрольнш грут мишей, порiвняно з початком введення, становило 8,3 %, а у дослщнш — 14,3 %.

Таблиця 1

Динамика маси тша бших мишей на 4 добу дослвду за вивчення кумулятивних властивостей препарату клозаверм А, г (М ± т)

Групи тварин Маса тша Змши маси тша

на початку дослщу на 4 добу введення загаль- но! за 4 даб по грут середньодобово! у перерахунку на:

загаль-на по грут середня одте! тварини загаль-на по грут середня одте! тварини

вс1х щур1в групи одного щура з групи

I (п=9) 231,21 25,69+0,717 224,73 24,97+0,667 -6,48 -1,620 -0,180

II (п=3) 77,39 25,80+2,744 79,37 26,46+3,357 -1,98 -0,495 -0,165

Вщповщно, середньодобова маса тiла одше! миш^ порiвняно з початком введення, у контрольнш грут тварин, порiвняно з дослщною, була меншою на 4 i 8 доби введення у дозах, щодо кумуляцп, вiдповiдно на 8,3 i 20,5 % (табл. 1, 2).

Таблиця 2

Динамика маси тша бших мишей на 8 добу дослщу за вивчення

кумулятивних властивостей препарату клозаверм А, г (М ± т)

Групи тварин Маса тша Змши маси тша

на початку дослвду на 8 добу введення загаль- но! за 8 даб по грут середньодобово! у перерахунку на:

загаль-на по грут середня одте! тварини загаль-на по грут середня одте! тварини

вах щур1в групи одного щура з групи

I (п=9) 231,21 25,69+0,717 216,12 24,01+0,780 -15,09 -1,886 -0,210

II (п=3) 77,39 25,80+2,744 73,38 24,46+3,705 -4,01 -0,501 -0,167

У той же час на 12 добу встановлено збшьшення середньодобово! маси тша одше! миш^ порiвняно з початком введення, у контрольнш грут тварин, порiвняно з дослщною, на 72,9 % (табл. 3).

Отже, клозаверм А за доз, щодо вивчення кумуляцп, у першi дт ведення препарату тдвищував масу тша бших мишей, а починаючи з 8 доби, внаслщок токсичного впливу на оргашзм, викликав !! пониження.

176

Таблиця 3

Динамика маси тша бших мишей на 12 добу дослвду за вивчення

кумулятивних властивостей препарату клозаверм А, г (M ± m)

Групи тварин Маса тша Змши маси тша

на початку дослщу на 12 добу введення загальноï за 12 д1б по груш середньодобово! у перерахунку на:

загаль-на по груш середня одше1 тварини загаль-на по грут середня одше1 тварини

вах щур1в групи одного щура з групи

I (n=9) 231,21 25,69+0,717 212,13 23,57+0,698 -19,08 -1,59 -0,177

II (n=3) 77,39 25,80+2,744 66,36 22,12+4,303 -11,03 -0,919 -0,306

Висновки. 1. Препарат клозаверм А не проявляв у бших мишей кумулятивних властивостей. Коефщент кумуляци за тестом "субхрошчно! токсичностГ' становить 1,65 одиниць.

2. При пщшюрному введенш, за дози 1920,10 мг/кг при вивченш кумулятивних властивостей, препарат викликав застшну гшеремш i вогнищевий набряк легень, розширення право! половини серця та застшну гшеремш печшки, нирок i селезшки.

3. У першi дш введення препарат клозаверм А за доз, щодо вивчення кумуляци, тдвищував масу тша бших мишей, а починаючи з 8 доби, внаслщок токсичного його впливу на оргашзм, викликав ïï пониження.

Перспективи подальших дослвджень. Для повнiшоï токсикологiчноï характеристики доцшьно провести дослiдження щодо вщдалених наслiдкiв дiï препарату клозаверм А на оргашзм тварин.

Л^ература

1. Докшшчш дослiдження ветеринарних лiкарських засобiв / I. Я. Коцюмбас, О. Г. Малик, I. П. Патерега та ш.; За ред. I. Я. Коцюмбаса. — Львiв: Трiада плюс, 2006. — 360 с.

2. Тшин О. Л. Визначення кумулятивних властивостей препарату клозаверм у бших щурiв / О. Л. Тшин, К. О. Висоцька // Мат. Полкького Мiжнародного науково-практичного семшару "Сучаснi проблеми дiагностики в паразитологи та ветеринарно-саштарнш експертизi" (19-21 листопада 2008 р.) — м. Житомир: ЖНАУ, 2008. — С. 67-70.

3. Lim K. S. A method for the evaluation of cumulation and tolerance by the determination of acute and subchronic median effective doses / K. S. Lim, K. G. Rink, H. G. Glass // Arch. Intern. Pharmacodyn. Ther. — 1961. — Vol. 130. — P. 336-353.

4. Сидоров К. К. О некоторых методах количественной оценки кумулятивного эффекта / К. К. Сидоров // Токсикология новых промышленных химических веществ. — 1967. — Вып. 9. — Л.: Медицина. — С. 19-27.

5. Визначення параметрiв гострох' токсичност препарату клозаверм на бших мишах iз застосуванням рiзних методiв обчислення / I. Я. Коцюмбас, О. Л. Тшин, К. О. Висоцька, А. С. Кабанець // Проблеми зоошженери та ветеринарноï медицини: Зб. наук. пр. — Харюв: ХДЗВА, 2008. — Вип. 16 (41), ч. 2, Т. 3 (Ветеринарш науки). — С. 318-330.

177

Summary

Tishyn O. L., Cand. Vet. Sc., Kotsjumbas I. Ja., Doc. Vet. Sc., Zhyla M. I., Cand. Vet. Sc., Patereha I. P., Cand. Vet. Sc., Chajkovska O. I., Cand. Biol. Sc.

State Scientific-Research Control Institute of Veterinary Preparations and Feed

Additives, Lviv, Ukraine DETERMINATION OF CUMULATIVE PROPERTIES OF PREPARATION CLOZAVERM A IN WHITE MISE

It was established that preparation Clozaverm A not showed for the white mise of cumulative properties. A coefficient of cumulation after a test "sub-chronic toxicness" makes 1,65 units. At hypodermic introduction at the total dose of 1920,10 mg/kg, at the study of cumulative properties, preparation caused stagnant hyperemia and hearth pulmonary edema, expansion of right half of heart and stagnant hyperemia of liver, buds and spleen. On the first days introduction preparation of Clozaverm A at doses, in relation to the study of cumulation, promoted mass of body of white mise, and beginning from 8 days, as a result of his toxic influence on an organism, caused its lowering.

Key words: Clozaverm A, white mise, patho-morphology, cumulative properties, coefficient of cumulation, mass of body.

Стаття надшшла до редакцИ 18.09.2009

178