Оценка возможности применения пивной дробины при сбраживании гидролизатов лигноцеллюлозного сырья в биобутанол Текст научной статьи по специальности «Промышленные биотехнологии»

/1\Л научный электронный журнал

ПРИНЦИПЫ экологии

ПГГРОЗдРОЛСШЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ

vi 1ив:рситст

О

http://ecoprl.ru

УДК 631.95; 579.66

http://petrsu.ru

оценка возможности применения пивной дробины при сбраживании гидролизатов лигноцеллюлозного сырья в биобутанол

морозова

татьяна сергеевна

Национальный исследовательский Томский государственный университет, Tsmorozova1991@gmail.com

с

еменов

сергей юрьевич

Национальный исследовательский Томский государственный университет, p9138009960@gmail.com

Ключевые слова:

Пивная дробина

биобутанол

гидролизат

лигноцеллюлозного сырья Clostridium acetobutylicum АТСС 824

ростовые вещества глюкоза аминокислоты ингибирование

Аннотация: Изучен комплекс синантропных некрофильных двукрылых и воздействие урбанизации на их состав и структуру. На трупах людей найдено девять видов мух, относящихся к четырем семействам. Основу населения составляют красноголовая синяя падальница (СаШрЬога vicina), зеленая падальница (ЬисШа саезаг) и мясная муха новоземельская (Protophormia 1еггаепоуав). Ведущую роль в формировании комплекса некрофильных двукрылых играют сезонные аспекты изменения видового состава, условия нахождения трупа и его состояние. Наиболее успешными в размножении, развитии и колонизации трупа являются экологически пластичные виды с широким трофическим спектром.

© Петрозаводский государственный университет

Получена: 23 декабря 2016 года

Введение

В соответствии с Экологической доктриной Российской Федерации (2002 г.) увеличение доли возобновляемых ресурсов в получении моторных топлив является актуальной задачей современности. Перспективным вариантом считается производство моторных топлив из растительного сырья путем ферментации. Особыми потребительскими преимуществами в качестве добавки в традиционные топлива обладает биобутанол, получаемый путем сбраживания углеводсодержащих сред бактериями рода Clostridium (Qureshi, Ezeji, 2008).

При этом все более актуальным становится получение биобутанола не из пищевого сырья, а из недорогого легкодоступного растительного сырья, в качестве которого могут быть использованы предварительно гидро-лизованные отходы АПК и лесного хозяй-

Подписана к печати: 4 июля 2017 года

ства (Procentese et al., 2016). Использование в качестве сырья 100 % лигноцеллюлозного гидролизата может значительно снизить себестоимость растворителей в сравнении с использованием в качестве субстрата пищевого сырья (Morone, Pandey, 2014).

Перед сбраживанием гидролизаты лигноцеллюлозного сырья очищают от ингибиторов, образующихся в процессе гидролиза за счет деградации лигнина, целлюлозы и гемицеллюлозы, и затем обогащают ростовыми веществами, необходимыми для аце-тонобутиловых бактерий (Roth, Tippkötter, 2016; Nanda et al., 2014). Применяемые на сегодняшний день ростовые компоненты, такие как ПАБК, тиамин, биотин и др., в большинстве своем имеют высокую стоимость, поэтому поиск недорогих источников ростовых веществ является одним из наиболее значимых факторов в снижении себестоимости производства биобутанола.

В 60-х годах прошлого века в качестве недорогих источников необходимых белковых компонентов и витаминных комплексов предлагалось использование кукурузного глютена или жмыха подсолнечника (Яровен-ко, 1963), которые по ряду свойств являются ценной кормовой добавкой для сельскохозяйственных животных и имеют долгий срок хранения из-за невысокой влажности. Поэтому их использование в ацетонобутиловом производстве (АБЭ-процесс) нерационально, т. к. после процесса они насыщаются влагой и срок их хранения резко снижается.

Более экономичным считается использование таких отходов, которые имеют определенные ограничения на использование в качестве корма для сельскохозяйственных животных. Например, пивная дробина, массовый отход пивоваренного производства, являясь прекрасным кормом, обладающим комплексом питательных, минеральных и биологически активных веществ, в то же время из-за высокой влажности (75-85 %) имеет крайне короткий срок хранения. Уже на вторые сутки происходит ее закисание и поражение патогенными для сельскохозяйственных животных грибками. В настоящее время основная масса прокисшей пивной дробины складируется на полигонах твердых бытовых отходов или на несанкционированных свалках. Ее сброс в окружающую среду приводит к загниванию, сопровождающемуся выделением токсичных продуктов распада (аммиак, скатол, индол, микотоксины и др.), что вызывает увеличение экологической нагрузки на окружающую среду. При этом степень экологической опасности дробины в течение месяца возрастает с V класса до IV (Руденко, 2007).

Пивная дробина образуется в технологиях пивоваренного производства после фильтрования затора и промывания солодовой дробины горячей водой и представляет собой остаток дробленых зерновых продуктов (Тихомиров, 1998). Содержание гемицеллюлозы и целлюлозы в сухом веществе пивной дробины составляет 52 %. Для нее характерно высокое содержание пентоз. После кислотного гидролиза содержание пентоз в гидролизате пивной дробины составляет 7 об. %. А соотношение таких углеводов, как глюкоза/ксилоза/арабино-за, составляет приблизительно 1:2:1 ^^акорои^, 2009). Пивная дробина богата протеинами (до 24 % к абсолютно сухому веществу), клетчаткой, жирами и витаминными комплексами (Петров и др., 2014).

Лигноцеллюлозную часть пивной дробины ранее уже предлагали использовать в качестве источника редуцирующих веществ при производстве спиртов (Xiros, Christakopoulos, 2009). Белково-витаминный комплекс, остающийся после осуществления гидролиза пивной дробины, так же было бы рациональным использовать в технологиях получения биотоплива как возможный источник ростовых веществ.

Таким образом, пивная дробина содержит в себе все необходимые ростовые вещества, необходимые для биоагентов аце-тонобутилового брожения. Возможность ее использования в технологиях ацетонобути-лового производства позволила бы снизить себестоимость производства биобутанола, а также решить вопрос эффективной утилизации массового отхода пивоварения.

Целью работы является изучение возможности использования пивной дробины в качестве источника ростовых веществ в ацетонобутиловом производстве при сбраживании гидролизатов лигноцеллюлозного сырья.

Материалы

Для проведения исследований нами была получена пивная дробина с ОАО «Томское пиво» влажностью 82-86 %. Процесс брожения осуществлялся штаммом бактерий Clostridium acetobutylicum ATCC 824, полученным из ВКПМ. Данный штамм характеризуется способностью сбраживать как пентозы, так и гексозы (Ounine et al., 1983), а также обладает ярко выраженной амилоли-тической (Croux et al., 1992) и протеолитиче-ской способностью (Annous, Blaschek, 1990).

Поскольку свежая пивная дробина может являться ценной кормовой добавкой, а после ее хранения более суток в ней образуются микотоксины, в результате чего ее использование в кормопроизводстве становится невозможным, для осуществления экспериментов нами была использована четырехдневная пивная дробина. Использование прокисшей пивной дробины в ацетонобутиловом производстве не только позволит осуществить эффективную утилизацию некондиционной пивной дробины, но и провести ее дезинфекцию и детоксикацию, в результате чего отработанная в ацетонобутиловом процессе пивная дробина может быть в дальнейшем использована в качестве кормовой добавки.

В опытах по оценке влияния пивной дробины на сбраживаемость углеводов штаммом бактерий C. acetobutylicum АТСС 824

использовались среды, включающие в себя 45 г/л глюкозы и пивную дробину в различных концентрациях. В качестве контроля осуществлялось сбраживание полусинтетической среды, указанной в паспорте культуры С. асе1оЬи1уИсит АТСС 824, включающей в себя следующие компоненты (г/л): глюкоза - 20, аммония ацетат - 3, дрожжевой экстракт - 1, пептон - 1, крахмал -1, КН2Р04 - 0.7, К2НР04 - 0.7, цистеин - 0.5, MgSO4* 7Н20 - 0.1, МП504* Н20 - 0.02, FeSO4* 7Н20 - 0.015, NaCl - 0.01, ПАБК - 0.001.

В экспериментах по сбраживанию гидролизатов лигноцеллюлозного сырья совместно с пивной дробиной в качестве источников редуцирующих веществ применялся ферментативный гидролизат целлюлозы мискантуса, содержащий 34.8 г/л глюкозы и 15.6 г/л ксилозы. В контрольном варианте в качестве ростовых веществ использовались следующие компоненты полусинтетической среды: ПАБК - 0.001, тиамин - 0.001, биотин -0.001, цистеин - 0.5, дрожжевой экстракт - 1.

Методы

Стерилизация сред осуществлялась при 0.15 МПа при температуре 111±2°С в течение 20 минут. Проводилась раздельная стерилизации источников ростовых и редуцирующих веществ с целью предотвращения образования продуктов карамелизации и меланоидинов. В соответствии с методикой (Логоткин, 1958) в свежеприготовленную стерильную среду, охлажденную до 60 °С, вносился инокулят в количестве 3 об. %. Для создания анаэробных условий объем сосудов заполнялся на 85 %. Сосуды закрывались ватно-марлевыми пробками, использование пеногасителя не требовалось. Культивирование проводили в термостате при 37 °С.

Процесс брожения оценивался по макропараметрам: образование разрыва, подъема, осадка и по интенсивности газовыделения и пенообразования, а также микроскопированием.

Концентрации бутанола, ацетона и этанола измерялись газовым хроматографом Хроматэк кристалл. 5000.2.

Данные, полученные в ходе экспериментов, обрабатывались с помощью пакета STATISTICA, версия 6.0. Обработка результатов сбраживания сред была выполнена с использованием методов параметрической статистики с вычислением средних значений и стандартного отклонения.

Результаты

На первом этапе работ по оценке влияния пивной дробины на сбражи-ваемость углеводов штаммом бактерий С. асе^Ь^уНсит АТСС 824 проводилось сбраживание среды, состав которой включал в себя 20 об. % четырехдневной пивной дробины влажностью 86 % и 40 г/л глюкозы. Опыт состоял из 8 повторностей. После внесения в среду инокулята в половине повторностей брожение наступило со значительным опозданием (через 56 часа) и остановилось на первой стадии образования кислот. В процессе брожения были зафиксированы разрыв, подъем, образование осадка, но газовыделение в течение всей ферментации было крайне слабым. При этом в половине повторностей брожение не наступило.

В результате серии последовательных брожений, в которых состав среды оставался прежним, а микроорганизмы каждого эксперимента использовались как инокулят для следующего эксперимента, процесс сбражи-ванияуглеводов не был значительно улучшен.

Для достижения нормального процесса брожения, характеризующегося интенсивным газовыделением и пенообразова-нием, а также последовательным образованием разрыва, подъема и осадка, был проведен ряд экспериментов на обнаружение отсутствующего в пивной дробине какого-либо компонента, являющегося лимитирующим фактором процесса жизнедеятельности ацетонобутиловых бактерий.

Для определения недостающего компонента были приготовлены стандартные среды с пивной дробиной (20 об. % пивной дробины и 45 г/л глюкозы), включавшие те или иные соединения, которые определялись в соответствии с составом полусинтетической среды, прописанной в паспорте для штамма бактерий С. асе1оЬи1уИсит АТСС 824 (табл. 1). В качестве контроля выступал опыт по сбраживанию полусинтетической среды с добавлением 20 об. % пивной дробины.

Во всех вариантах брожение отсутствовало, вследствие чего был сделан вывод о наличии веществ в пивной дробине, ингибирующих ацетонобутиловое брожение.

С целью удаления ингибиторов были проверены два способа очистки пивной дробины: высушивание и промывка водой. Часть пивной дробины тщательно промывалась водопроводной водой, а другая часть высушивалась притемпературе 110 °С до влажности 0 %. Состав среды изменен не был.

Таблица 1. Предполагаемые отсутствующие компоненты в составе среды с пивной дробиной, необходимые для штамма бактерий С. асе1оЬи1уНсит АТСС 824

№ опыта_Предполагаемые недостающие компоненты

1 дрожжи, КН2РО4 К2НРО4 MgSO4*7H2O, MgSO4*7H2O, FeSO *7Н О, MnSOl*H О, №С1

2 ПАБК, тиамин, биотин

3 ПАБК, биотин

4 ПАБК, тиамин

5 аммоний ацетат

Во всех повторностях с промытой пивной дробиной брожение наступило на 36-м часу, а в повторностях с высушенной дробиной - на 44-м часу. Так как ферментация наблюдалась во всех случаях, было сделано предположение, что данные ингибиторы являются летучими веществами. Кроме того, данное предположение подтверждалось тем, что четырехдневная пивная дробина перед промывкой или выпариванием имела кисловато-сладкий запах, который возникает при закисании пивной дробины, из-за чего в ней образуются летучие соединения. К предполагаемым ингибиторам относятся фурфурол, муравьиная кислота, ацетаты и др., которые удаляются из среды промывкой или выпариванием. Но при обоих методах удаления ингибиторов брожение, начавшись нормально, внезапно остановилось, и к концу процесса значение рН составило 4.5-4.7, что свидетельствовало о прокисании среды и остановке брожения на стадии образования кислот.

Анализируя литературные данные, учитывая при этом высокое содержание протеинов в пивной дробине (до 24 % к абсолютно сухому веществу), был сделан вывод об ингибировании аминокислотами второй стадии брожения - стадии образования растворителей. Считается, что избыток легко усвояемых протеализатов способствует хорошему росту культуры ацетонобутиловых бактерий, но мешает наступлению второй фазы брожения (Логоткин, 1958). Сольвентогенная стадия брожения может осуществляться только в том случае, если бактерии в период быстрого размножения питаются высокомолекулярными фракциями. При развитии бактерий за счет продуктов расщепления белков способность культуры к осуществлению второй фазы нарушается. Так как для пивной дробины характерно высокое содержание аминокислот, вероятно, что при такой используемой ее концентрации в среде содержалось избыточное количество легкоусвояемых

азотистых веществ, что привело к ингибированию второй фазы брожения.

Таким образом, следующий опыт заключался в поиске оптимальной концентрации пивной дробины, при которой не происходит ингибирования аминокислотами, но при этом ее достаточно для обеспечения ацетонобу-тиловых бактерий необходимыми ростовыми веществами. Проводилась оценка сбра-живаемости глюкозы при различных концентрациях пивной дробины. Брожение во всех случаях начиналось через 22-24 часа после внесения в среду инокулята. По окончании процесса был проведен хроматографический анализ на выход целевых продуктов (рис. 1).

На основании хроматографического анализа была определена оптимальная концентрация пивной дробины, которая составила 5-6 % от объема среды. При таком количестве пивной дробины в сбраживаемой среде наблюдался наибольший выход целевых продуктов по окончании брожения.

Для того чтобы сократить время начала брожения от момента заражения среды с 22-24 до 8-10 часов, осуществлялась серия последовательных сбраживаний сред, содержащих 45 г/л глюкозы и 6 об. % пивной дробины, для заражения которых использовался инокулят из отбродивших сред аналогичного состава. В результате 4-5 последовательных генераций время начала брожения уменьшилось до 8 часов, а выход целевых продуктов повысился в 1.5-2 раза.

В опытах по сбраживанию ферментативного гидролизата целлюлозы мискантуса, очищенного при помощи специально адаптированного активного ила (Morozova, Semyonov, 2016), из 16 повторностей брожение наступило во всех случаях и характеризовалось интенсивными процессами газовыделения и пенообразования. Брожение наступило через 8-9 часов и закончилось через 79-88 часов. Контроль также имел все признаки интенсивного брожения. Средние результаты сбраживания представлены в табл. 2.

Ü :

J

L

4 6 8

Концентрация пивной дробины, об, %

□ J

□ 2

П 3

L

10

Рис. 1. Выход целевых продуктов в зависимости от концентрации пивной дробины влажностью 82-86 % в сбраживаемой среде: 1 - бутанол, 2 - ацетон, 3 - этанол

Fig.1. Yield of target products depending on the concentration of the spent grain (moisture 82-86 %) in the fermentation medium: 1 - butanol, 2 - acetone, 3 - etanol

Таблица 2. Выход бутанола, ацетона и этанола с различных сред на основе ферментативного

гидролизата целлюлозы мискантуса

Состав среды

Средний выход целевых продуктов, г/л

бутанол

ацетон

этанол

Гидролизат + компоненты полусинтетической среды (г/л): ПАБК - 0.001, тиамин - 0.001, биотин

- 0.001, цистеин - 0.5, дрожжевой _экстракт - 1._

10.21 ± 0.74 02.97 ± 0.43 0.97 ± 0.4

Гидролизат + пивная дробина (6 об. %)

10.14 ± 0.87 02.48 ± 0.53 01.02 ± 0.42

Обсуждение

Полученные результаты по сбраживанию гидролизатов лигноцеллюлозного сырья соответствуют литературным данным (Ло-готкин, 1958; Яровенко, 1963). При использовании пивной дробины в концентрации 5-6 об. % брожение протекает нормально, характеризуется интенсивными процессами газовыделения и пенообразования. При использовании оптимальной концентрации пивной дробины установлено, что при таком варианте не происходит ингибирования жизнедеятельности бактерий веществами, обра-

зующимися при закисании дробины (фурфурол, муравьиная кислота, ацетаты и др.), поэтому необходимость в ее промывании или высушивании отсутствует. Тем не менее срок хранения дробины не должен превышать 30 суток, в этом случае для осуществления процесса брожения требуется промывание прокисшей пивной дробины, что, однако, может повысить себестоимость целевых продуктов. Поэтому для наиболее эффективного применения пивной дробины в ацетонобутиловом производстве в качестве источника ростовых веществ рекомендуется использовать

пивную дрье для получения гидролизатов с целью их дальнейшего сбраживания в спирты. В этом случае возможна полная утилизация отхода пивоваренного производства.

При использовании пивной дробины в ацетонобутиловом производстве (АБЭ-процесс) только в качестве источника ростовых веществ отработанная в ацетонобутиловом брожении дробина может быть в дальнейшем применена в качестве корма для сельскохозяйственных животных. При этом выдержка прокисшей пивной дробины в анаэробных условиях, промывка ее большим количеством воды и воздействие на нее бутано-лаобину, которая хранилась от 2 до 30 суток.

Интересным представляется вариант, при котором смыв с пивной дробины (отжим) будет применяться в качестве источника ростовых веществ, а сухой остаток (жом) - как сыр и ацетона снижают токсичность ее как корма, поэтому прокисшую дробину, переработанную в АБЭ-процессе, также можно будет скармливать сельскохозяйственным животным или сырой, или после предварительного силосовования.

Заключение

Полученные в ходе исследования результаты указывают на возможность использования пивной дробины в качестве источника ростовых веществ для ацетоно-бутилового сбраживания гидролизатов лигноцеллюлозного сырья. В серии опытов по оценке влияния пивной дробины на сбра-живаемость углеводов штаммом бактерий С. асв1оЬи1уИсит АТСС 824 определены лимитирующая и ингибирующая концентрации дробины в среде, которые составили 2 и 20 об. % соответственно. Выявлена оптимальная доза дробины, составившая 6 об. %. Для ацетонобутилового брожения допускается применение как свежей, так и закисшей пивной дробины. Использование прокисшей пивной дробины в АБЭ-процессе позволяет осуществить ее дезинфекцию, а также не снижает ее в количественном соотношении, т. е. не происходит безвозвратной утилизации ценного потенциального пищевого ресурса, как, например, в процессах сжигания или захоронения пивной дробины. Предложенный способ утилизации пивной дробины, основанный на ее использовании в АБЭ-процессе, позволит снизить себестоимость производства биобутанола и решить экологическую проблему утилизации отхода пивоваренного производства.

Библиография

Логоткин И. С. Технологии ацетоно-бутилового производства . М.: Пищепромиздат, 1958. 254 с.

Об Экологической доктрине Российской Федерации: Распоряжение Правительства РФ от 31 авг. 2002 г. № 1225-р // СПС КонсультантПлюс.

Петров С. М., Филатов С. Л., Пивнова Е. П., Шибанов В. М. К вопросу о способах утилизации пивной дробины // Пиво и Напитки. 2014. № 6. С. 32-37.

Руденко Е. Ю. Современные тенденции переработки основных побочных продуктов пивоварения // Пиво и Напитки. 2007. № 2. С. 66-68.

Яровенко В. Л., Нахманович Б. М., Щеблыкин Н. П., Сенкевич В. В. Непрерывное брожение в ацетонобутиловом производстве . Нальчик: Кабардино-балкарское книжное издательство, 1963. 327 с.

Annous B. A., Blaschek H. P. Regulation and Localization of amylolytic enzymes in Clostridium acetobutylicum ATCC 824 // Applied and environmental microbiology. 1990. Vol. 56 (8). P. 2559-2561.

Croux Ch., Canard B., Goma G. Autolysis of Clostridium acetobutylicum ATCC // Journal of General Microbiology. 1992. Vol. 138. P. 861-869.

Morone A., Pandey R. A. Lignocellulosic biobutanol production: Gridlocks and potential remedies // Renewable and Sustainable Energy Reviews. 2014. Vol. 37. P. 21-35.

Morozova T. S., Semyonov, S. Y. Biological detoxification of lignocellulosic hydrolysates for improved biobutanol production // Key Engineering Materials. 2016. Vol. 683. P. 525-530.

Nanda S., Dalai A. K., Kozinski J. A. Butanol and ethanol production from lignocellulosic feedstock: biomass pretreatment and bioconversion // Energy Science & Engineering. 2014. Vol. 2 (3). P. 138-148.

Ounine K., Petitdemange H., Raval G., Gay R. Acetone-butanol production from pentoses by Clostridium acetobutylicum // Biotechnology Letters. 1983. Vol. 5 (9). P. 605-610.

Procentese A., Raganatia F., Olivieria G., Russo M. E., Feld M., Marzocchella A. Renewable feedstocks for biobutanol production by fermentation // New Biotechnology. 2016. 29 October. P 1-6.

Qureshi N., Ezeji T. C. Isolation Butanol, «a superior biofuel» production from agricultural residues (renewable biomass): recent progress in technology // Biofuels. Bioprod. Bioref. 2008. Vol. 2. P. 319-330.

Roth J., Tippkotter N. Evaluation of lignocellulosic material for butanol production using enzymatic

hydrolysate medium // Cellulose Chem. and Technol. 2016. Vol. 50 (3-4). P. 405-410. Xiros Ch., Christakopoulos P. Enhanced ethanol production from brewer's spent grain by a Fusarium oxysporum consolidated system // Biotechnology for Biofuels. 2009. Vol. 2. P. 4-10.

Благодарности

Работа была выполнена в рамках выполнения госзаказа Минобрнауки России (проект № 6.7525.2017/8.9) и частично поддержана программой «Научный фонд Д. И. Менделеева Томского государственного университета» (проект № 8.1.17.2017/8.9).

evaluation of the possibility of using brewer's spent grain for the fermentation of lignocellulosic hydrolysates to biobutanol

morozova Tatyana sergeevna National Research Tomsk State University, p9138009960@gmail.com

semyonov sergey Yuryevich National Research Tomsk State University, p9138009960@gmail.com

Key words:

Brewer's grain biobutanol

lignocellulosic hydrolysate Clostridium acetobutylicum ATCC 824

growth substances glucose amino acids inhibition

Summary: The paper deals with the investigation of the possible using of brewer's grain as a source of growth substabces in acetone-butanol fermentation of lignocellulosic hydrolysates in order to reduce the cost of biobutanol production and to utilize the brewery waste. The fermentation of glucose was carried out at different concentrations of the brewer's grain by Clostridium acetobutylicum ATCC 824. In the experiments on fermentation of the lignocellulosic hydrolysates an enzymatic hydrolysate of miscanthus cellulose containing 34.8 g/l glucose and 15.6 g/l xylose was used as a source of reducing substances. The sterilization of the medium was carried out at 0.5 KPa for 20 minutes. The sterilization of the growth and reducing substances sources was conducted separately to prevent caramelization of products and melanoidins. For inoculation the spores of 3% (vol/vol) C. acetobutylicum ATCC 824 were transferred to a fresh medium. The strain was grown at 37 °C under anaerobic conditions. In a series of experiments on the evaluation of the influence of the brewer's grain on the fermentability of carbohydrates by the strain of C. acetobutylicum ATCC 824, limiting and inhibitive concentrations of brewer's grain were determined in the medium, which were 2 and 20 % vol., respectively. The optimal amount of the brewer's grain was about 6 % vol. At the optimal concentration of the brewer's grain the fermentation of lignocellulosic hydrolysates occured in all replicates. It was characterized by intensive gas and foam formation that corresponds to the data in literature. After 7988 h of fermentation of miscanthus cellulose hydrolysate the product yield amounted 10.14±0.87 g/L butanol, 02.48±0.53 acetone, 01.02±0.42 g/L ethanol. It was found that at an optimum concentration both the fresh and sour brewer's grain can be used in the fermentation. After the acetone-butanol fermentation the brewer's grain can be used as a food for farm animals. The obtained results indicate the possibility of using the brewer's grain as a source of growth substances for the fermentation of lignocellulosic hydrolysates. The proposed method of using the brewer's grains in acetone-butanol fermentation may reduce the cost of biobutanol and also solve the problem of disposing some waste from the brewing industry.

Received on: 23 December 2016

Published on: 4 July 2017

References

Annous B. A., Blaschek H. P. Regulation and Localization of amylolytic enzymes in Clostridium acetobutylicum ATCC 824, Applied and environmental microbiology. 1990. Vol. 56 (8). P. 2559-2561.

Croux Ch., Canard B., Goma G. Autolysis of Clostridium acetobutylicum ATCC, Journal of General Microbiology. 1992. Vol. 138. P. 861-869.

Logotkin I. S. Technologies of Acetone-Butanol Production. M.: Pischepromizdat, 1958. 254 p.

Morone A., Pandey R. A. Lignocellulosic biobutanol production: Gridlocks and potential remedies, Renewable and Sustainable Energy Reviews. 2014. Vol. 37. P. 21-35.

Morozova T. S., Semyonov, S. Y. Biological detoxification of lignocellulosic hydrolysates for improved biobutanol production, Key Engineering Materials. 2016. Vol. 683. P. 525-530.

Nanda S., Dalai A. K., Kozinski J. A. Butanol and ethanol production from lignocellulosic feedstock: biomass pretreatment and bioconversion, Energy Science & Engineering. 2014. Vol. 2 (3). P. 138-148.

Ounine K., Petitdemange H., Raval G., Gay R. Acetone-butanol production from pentoses by Clostridium acetobutylicum, Biotechnology Letters. 1983. Vol. 5 (9). P. 605-610.

Petrov S. M. Filatov S. L. Pivnova E. P. Shibanov V. M. To the Question of the Methods of Disposal of Brewer's Grains, Pivo i Napitki. 2014. No. 6. P. 32-37.

Procentese A., Raganatia F., Olivieria G., Russo M. E., Feld M., Marzocchella A. Renewable feedstocks for biobutanol production by fermentation, New Biotechnology. 2016. 29 October. P 1-6.

Qureshi N., Ezeji T. C. Isolation Butanol, «a superior biofuel» production from agricultural residues (renewable biomass): recent progress in technology, Biofuels. Bioprod. Bioref. 2008. Vol. 2. P. 319-330.

Roth J., Tippkotter N. Evaluation of lignocellulosic material for butanol production using enzymatic hydrolysate medium, Cellulose Chem. and Technol. 2016. Vol. 50 (3-4). P. 405-410.

Rudenko E. Yu. Modern Trends in Processing of the Main By-products of Brewing, Pivo i Napitki. 2007. No. 2. P. 66-68.

The Environmental doctrine of the Russian Federation: Decree of the RF Government dated 31 Aug. 2002 No. 1225-R, SPS Konsul'tantPlyup.

Xiros Ch., Christakopoulos P. Enhanced ethanol production from brewer's spent grain by a Fusarium oxysporum consolidated system, Biotechnology for Biofuels. 2009. Vol. 2. P. 4-10.

Yarovenko V. L. Nahmanovich B. M. Scheblykin N. P. Senkevich V. V. Continuous Fermentation in Acetone-butanol Production. Nal'chik: Kabardino-balkarskoe knizhnoe izdatel'stvo, 1963. 327 p.