Оценка влияния фотохимической обработки и у-облучения тромбоконцентратов на экспрессию маркера апоптоза контаминирующих лимфоцитов Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3

узлы, селезенка, биоптаты опухоли различной локализации. FISH-исследование может также выполняют на мазках крови и костного мозга, отпечатках лимфатических узлов, селезенки и др. и срезах с парафиновых блоков биопсийного материала.

Материалы и методы. К цитогенетическим нарушениям, имеющим диагностическую ценность относят: транслокации t(11;14)(q13;q32) при лимфоме из клеток мантийной зоны, t(14;18)(q32;q21) и вариантные t(18q21/Bcl-2) при фолликулярной лимфоме, t(8;14)(q24;q32) и вариантные t(8q24/ c-MYC) при лимфоме Беркитта, t(3q27/Bcl-6) при диффузных В-крупноклеточных лимфомах, t(11;18)(q21;q21) при МАЛТ-лимфоме, t(2;5)(p23;q35) и другие t(2p23/ALK) при анаплазированной T-крупноклеточной лимфоме, инверсия inv(14)(q11;q32) при Т-пролимфоцитарном лейкозе, изохромосома i(7)(q10) в сочетании с трисомией 8 хромосомы при Т- у5 гепатолиенальной лимфоме.

Результаты и обсуждение. При других опухолях не выявлено единого цитогенетического маркера, но определен спектр наиболее часто встречающихся аномалий хромосом,

позволяющих уточнить вариант заболевания и определить его прогноз. К таким хромосомным нарушениям относятся: делеции 13q14, 11q23/ATM, 17p13/p53 и трисомия хромосомы 12 при хроническом В-клеточном лимфолейкозе; делеция/моносомия хромосомы 13, транслокации t(11;14) (q13;q32), t(4;14)(p16;q32) и t(14;16)(q32;q22) при множественной миеломе.

Заключение. На материале о 1804 больных (лимфома из клеток мантийной зоны - 178, фолликулярная лимфома -117, лимфома Беркитта - 98, диффузные В-крупноклеточные лимфомы - 182, лимфома маргинальной зоны селезенки -56, МАЛТ-лимфома - 38, хронический В-клеточный лимфолейкоз - 912, множественная миелома - 181, Т-клеточные лимфомы - 42) показана диагностическая ценность, прогностическое значение хромосомных нарушений и разработан алгоритм цитогенетического обследования больных с лимфатическими опухолями: выбор материала и методов исследования и последовательность их применения с учетом клинических, гистологических и иммунологических данных.

Оценка влияния фотохимической обработки и у-облучения тромбоконцентратов на экспрессию маркера апоптоза контаминирующих лимфоцитов

М.Д. Огородникова1, Т.Н. Заботина 2, А.А. Борунова 2, З.Г. Кадагидзе 2, Е.В. Огородникова 2, А.Д. Онуфриевич 1, О.А. Рукавицын 1

1ФБУ Главный военный клинический госпиталь им. акад. Н.Н. Бурденко МО РФ; 2ФГБУ Российский онкологический научный центр

им. Н.Н.Блохина РАМН, Москва

Введение. С присутствием в компонентах крови, в том числе, тромбоконцентратах (ТК), резидуальных лейкоцитов донора, связан широкий спектр посттрансфузионных реакций. у-Облучение компонентов крови, используют с 1970-х годов и является "золотым стандартом" для профилактики реакции "трансплантат против хозяина", ассоциированной с трансфузиями (РТПХ-АТ) за счет инактивации жизнеспособных контаминирующих лимфоцитов. Фотохимическая обработка (ФХО) ТК применяется недавно с целью инактивации патогенов и аллогенных лейкоцитов и рассматривается как альтернатива для у-облучения в плане профилактики РТПХ-АТ. Механизм действия ФХО заключается в неизбирательном блокировании генетического материала, присутствующего в ТК. Сравнительное изучение ультраструктурных изменений лимфоцитов в результате физико-химической обработки до настоящего времени не проводилось. Цель работы - проведение сравнительной оценки экспрессии маркера апоптоза резидуальных лимфоцитов в ТК, после у-облучения и после ФХО.

Материалы и методы. Изучено 16 специально полученных пулов тромбоцитов, которые в последующем не применяли для трансфузий. Их получали из лейкотромбослоя 5 доз цельной крови с добавлением 65% PAS. В рамках процедуры заготовки выполнялась лейкоредукция. у-Облучение выполняли в дозе 25 Гр. ФХО проводили с применением фотосенсибилизатора амотосалена и длинноволнового ультрафиолета А. Исследовали пробы пулов тромбоцитов: необработанных на 1-е и 5-е сутки хранения и пробы после ФХО и после у-облучения также на 1-е и 5-е сутки хранения. Методом проточной цитоме-

трии выделяли контаминирующие лимфоциты (использовали моноклональные антитела, меченные флюорохромом PE Cy-7 к панлимфоцитарному маркеру CD45) и определяли на этих лимфоцитах экспрессию маркера апоптоза - фосфатидилсерина PS (связывание Annexin V) с применением ANNEXIN V-FITC Kit.

Результаты и обсуждение. В образцах необработанных пулов тромбоцитов в 1-е сутки хранения экстернализация PS была выявлена только на 10,32 ± 3,79% лимфоцитов. После ФХО и у-облучения при исследовании в 1-е сутки не выявлено статистически значимого (р = 0,78 и р = 0,94) изменения уровня экспрессии маркера апоптоза на лимфоцитах по отношению к таковому до обработки в 1-е сутки хранения: экс-тернализация PS после ФХО наблюдалась на 10,62 ± 4,8%, а после у-облучения - на 10,34 ± 3,95% лимфоцитов. Хранение необработанных пулов тромбоцитов в течение 5-и суток также не привело к статистически значимому (р = 0,51) увеличению в них доли апоптотически-измененных лимфоцитов: экстернализацию PS определили на 10,84 ± 2,81% лимфоцитов. После хранения ФХО образцов в течение 5 суток экс-тернализацию PS выявили на 12,63 ± 4,95% лимфоцитов, что не являлось статистически значимым (р = 0,59) увеличением по сравнению с 1-м днем хранения. К 5-м суткам хранения после у-облучения выявлено статистически значимое увеличение (р = 0,007) маркера апоптоза до 13,22 ± 3,16%.

Заключение. Инактивация генетического материала кон-таминирующих ТК лимфоцитов с помощью у-облучения и ФХО не приводит к их гибели путем апоптоза в течение всего регламентированного срока хранения ТК.

Обнаружение хромосомных аберраций определяет прогноз заболевания у взрослых больных с Ph-негативным острым лимфобластным лейкозом.

Результаты Российского многоцентрового исследования - RALL-группа

Е.Н. Паровичникова1, Ю.Р. Давидян1, Е.В. Домрачева1, С.Н. Бондаренко2, Т.С. Капорская3, Т.В. Рыльцова4,

Е.В. Кондакова5, О.Ю. Баранова6, В.Г. Савченко1

1 ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва; 2 Санкт-Петербургский государственный медицинский университет; 3 Областная клиническая больница, Иркутск; 4 Областная клиническая больница,Тула; 5 Областная клиническая больница, Сургут;

6 Российский онкологический научный центр, Москва.

Введение. Острые лимфобластные лейкозы (ОЛЛ) взрос- Например, частота обнаружения таких неблагоприятных хро-

лых отличаются от ОЛЛ у детей, как по эффективности хими- мосомных аберраций, как t(9;22) и t(4;11), у взрослых значи-

отерапии, так и по многим биологическим характеристикам. тельно выше, чаще определяются миелоидные антигены на

18