CC BY
28
УДК 612.42:612.017.1
ОЦЕНКА УРОВНЯ ЦИТОКИНОВ, ПРОДУЦИРУЕМЫХ МОНОНУКЛЕАРАМИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКОЙ СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ ПОСЛЕ МОБИЛИЗАЦИИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА Г-КСФ
Ольга Владимировна ПОВЕЩЕНКО12, Ирина Иннокентьевна КИМ12, Алла Владимировна ШЕВЧЕНКО12, Евгений Анатольевич ПОКУШАЛОВ2, Александр Борисович РОМАНОВ2, Наталья Анатольевна БОНДАРЕНКО12, Александр Петрович ЛЫКОВ12, Александр Федорович ПОВЕЩЕНКО12, Александр Михайлович КАРАСЬКОВ2, Владимир Иосифович КОНЕНКОВ12
1 ФГБУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН 630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
2 ФГБУ Новосибирский НИИ патологии кровообращения им. акад. Е.Н. Мешалкина Минздрава России
630055, г. Новосибирск, ул. Речкуновская, 15
В работе исследовано влияние введения Г-КСФ на продукцию цитокинов мононуклеарами периферической крови после обогащения их стволовыми клетками костного мозга. Показано, что мононуклеары пациентов с хронической сердечной недостаточностью в 48-часовой культуре in vitro продуцируют широкий спектр цитокинов с регуляторным действием как в спонтанных условиях, так и при стимуляции митогенами. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности использования мононуклеарных клеток после мобилизации Г-КСФ для стимуляции ангиогенеза и репаративных процессов в миокарде.
Ключевые слова: стволовые клетки, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, ишемическая болезнь сердца, цитокины.
Стволовые/прогениторные клетки (СК) для последующей трансплантации в настоящее время коллекционируются путем проведения цита-фереза после 5-6-дневного курса введения человеческого рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) [4]. Г-КСФ, связываясь с рецептором на нейтрофилах, индуцирует экспансию нейтрофилов и их предшественников в костном мозге и синтез ими про-теаз, что приводит к инактивации адгезии между
гемопоэтическими СК и костным мозгом и выходу СК в периферическое русло крови [8]. В крови увеличивается количество как гемопоэтических и эндотелиальных, так и мультипотентных мезен-химальных стромальных предшественников [1, 6, 12]. Показано, что высокоаффинный рецептор к Г-КСФ наряду с гранулоцитами экспрессируется на клетках миелоидного и лимфоидного ряда, тем самым влияя на функциональные свойства лимфоцитов, моноцитов, дендритных клеток. Эндо-
Повещенко О.В. - к.м.н., зав. лабораторией лимфотропной терапии и лимфодиагностики, e-mail: [email protected]
Ким И.И. - научный сотрудник лаборатории лимфотропной терапии и лимфодиагностики, e-mail: [email protected]
Шевченко А.В. - к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории клинической иммуногенетики, e-mail: [email protected]
Покушалов Е.А. - д.м.н., зам. директора, e-mail: [email protected]
Романов А.Б. - к.м.н., врач-хирург центра хирургической аритмологии, e-mail: [email protected] Бондаренко Н.А. - аспирант лаборатории лимфотропной терапии и лимфодиагностики, e-mail: [email protected]
Лыков А.П. - к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории лимфотропной терапии и лимфодиагностики, e-mail: [email protected]
Повещенко А.Ф. - д.м.н., зав. лабораторией физиологии протективной системы,
e-mail: [email protected]
Караськов А.М. - академик РАН, д.м.н., директор
Коненков В.И. - академик РАН, д.м.н., директор, e-mail: [email protected]
телиоциты также несут рецепторы к Г-КСФ [2, 8, 15]. Все эти клетки активно продуцируют цито-кины и другие биологически-активные пептиды, способные оказывать различные эффекты при клиническом использовании концентрата клеток после процедуры цитафереза (аферезного продукта) [1, 2, 6, 12, 15].
Несмотря на очевидные успехи в терапии хронической сердечной недостаточности (ХСН), существует определенная группа больных, у которых традиционные фармакологические и хирургические методы лечения неэффективны. Новой стратегией лечения больных с кардиовас-кулярной патологией является клеточная кардио-миопластика с применением СК, в том числе периферической крови после мобилизации Г-КСФ [3, 9, 10, 17, 20]. Паракринное влияние вводимых клеток путем секреции различных ростовых факторов и цитокинов рассматривается как один из возможных механизмов репарации миокарда наряду с дифференцировкой СК в эндотелиоциты и кардиомиоциты [6, 12]. Цитокины определяют выживаемость, рост, дифференцировку и функциональную активацию клеток. В то же время их продукция может выступать в качестве биомаркера тяжести заболевания, прогноза и ответа на терапию [5].
Ранее показано, что мобилизация Г-КСФ у пациентов с хронической ишемией миокарда приводит к увеличению количества прогенитор-ных клеток (гемопоэтических CD34+ и эндоте-лиальных CD34+CD133+KDR+), изменяется число и функциональная активность лимфоцитов и моноцитов, что сопровождается определенным уровнем секреции обогащенными СК монону-клеарными клетками (МНК) ростовых факторов и цитокинов [1,19]. Целью нашего исследования является сравнительная оценка содержания цито-кинов, относящихся к различным функциональным группам, в концентрате МНК крови после введения Г-КСФ в условиях спонтанной продукции и при митогенной стимуляции.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследование проведено у 72 пациентов с ИБС, ХСН функциональных классов Ш-1У (ОТНА), давших информированное согласие, согласно протоколам, утвержденным этическими комитетами и учеными советами НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН (г. Новосибирск) и Новосибирского НИИ патологии кровообращения им. академика Е.Н. Мешалкина. Средний возраст пациентов 57,0 ± 7,7 года (среднее ± ошибка среднего), 91 % из них мужчины; длительность ИБС составила
7,2 ± 5,4 года, количество ИМ - 1,5 ± 0,8, фракция выброса левого желудочка - менее 35 %, давность перенесенного инфаркта - не менее 12 месяцев. Рекомбинантный человеческий Г-КСФ (Грасаль-ва, Израиль) вводили подкожно в дозе 3,3-5,0 мкг/кг массы тела в сутки общим количеством 5 инъекций, на 6-е сутки пациентам проводили процедуру аппаратного цитафереза на сепараторе клеток крови (Haemonetics MCS+, США). МНК из сепарированной крови выделяли на градиенте плотности фиколла/верографина (р = 1,078 г/л) («БиолоТ», Санкт-Петербург). Введение Г-КСФ проводилось с целью мобилизации СК из костного мозга в кровь для последующего интрамиокар-диального введения МНК периферической крови.
Для определения содержания цитокинов МНК культивировали в течение 48 ч при 37 °С в С02-инкубаторе в круглодонных 96-луночных планшетах в среде RPMI-1640 с 10 % фетальной сывороткой телят FCS, дополненной 0,3 мг/мл L-глутамина («БиолоТ», Санкт-Петербург) в присутствии липополисахарида (ЛПС, Escherichia coli 0111:B4, Sigma, США) в конечной концентрации 10 мкг/мл или конканавалина А (КонА; Sigma) в конечной концентрации 15 мкг/мл, а также в отсутствие митогенной стимуляции. Отобранные кондиционные среды (аликвотами по 0,2 мл) хранили при -70 °С до тестирования. Содержание в кондиционной среде 9 цитоки-нов (ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-13, ФНО-а, ИФН-y, ГМ-КСФ) оценивали методом проточной флуориметрии на двулучевом лазерном автоматизированном анализаторе (BioPlex Protein Assay System, BioRad, США) с использованием коммерческих тест-систем в соответствии с инструкцией фирмы-производителя. Методом ИФА оценивали содержание ИЛ-ф, ИЛ-6 (тест-системы ЗАО Вектор-Бест, Кольцово). Интенсивность иммуноферментной реакции измеряли на автоматическом спектрофотометре Stat Fax 2100 (Awareness Technology Inc., США) при длине волны 492 нм.
Полученные данные проверяли на нормальность распределения согласно критериям Колмогорова-Смирнова, меры центральной тенденции и рассеяния описаны в случае нормального распределения признаков средним их значением (M) и средним квадратичным отклонением (± о), а параметры, не имеющие нормального распределения, - медианой (Me), нижним (LQ) и верхним (HQ) квартилями. Достоверность различий оценивали по критериям Манна-Уитни (в независимых группах) и Вилкоксона (в зависимых группах). Различия считали достоверными при p < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Установлено, что МНК, обогащенные СК костного мозга, на 6-е сутки после завершения курса мобилизации Г-КСФ у пациентов с ХСН спонтанно продуцируют широкий спектр цито-кинов - ИЛ-1Р, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-13, ФНО-а, ГМ-КСФ и ИФН-у (табл. 1), наиболее высоким было содержание провоспалительных цитокинов ИЛ-1Р и ИЛ-6. Концентрация в кондиционной среде противовоспалительного цитокина ИЛ-4 находилась ниже, а ИЛ-5 - на нижней границе чувствительности метода. Уровень остальных анализируемых цитоки-нов в кондиционных средах нестимулированных культур (ИЛ-2, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-13, ФНО-а, ГМ-КСФ и ИФНу) был невысоким и варьировал в диапазоне 5,11-21,47 пг/мл.
Стимуляция митогенами (КонА, ЛПС) МНК приводила к статистически значимому увеличению продукции всех анализируемых цитокинов в кондиционную среду, и в целом МНК после мобилизации Г-КСФ характеризовались высокой реактивностью. Так, при культивировании МНК
с Т-клеточным митогеном КонА отмечено значительное увеличение продукции ИФН-у, ФНО-а, ИЛ-13 и ИЛ-5 в сравнении со спонтанной продукцией (табл. 2), значения индекса стимуляции которых (отношение концентрации цитокина после внесения митогена к их содержанию в кондиционной среде нестимулированных МНК) были от 92,25 до 398,81. Индекс стимуляции КонА-стимулированных цитокинов ИЛ-1Р, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-10, ГМ-КСФ находился в пределах 12,934,71, для ИЛ-6 и ИЛ-12 показатель был менее выражен. Стимуляция МНК ЛПС, являющимся митогеном для клеток моноцитарного ряда, приводила к активной продукции МНК провос-палительных цитокинов ФНО-а, ИЛ-13, ИФН-у, ИЛ-1Р, ГМ-КСФ и противовоспалительных цитокинов ИЛ-4 и ИЛ-10; секреция ИЛ-2, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-12 была менее интенсивной. Таким образом, КонА, являясь Т-клеточным митогеном, в большей степени, чем ЛПС, стимулирует продукцию МНК ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-10, ФНО-а и ИФН-у. ЛПС, стимулируя клетки моноцитарного ряда, в большей степени, чем КонА, увеличивает секрецию МНК ИЛ-ф, ИЛ-6, ИЛ-13, ГМ-КСФ.
Таблица 1
Содержание цитокинов (пг/мл) в кондиционных средах МНК, полученных на 6-е сутки после завершения курса мобилизации Г-КСФ у пациентов с ХСН, Ме (LQ - HQ)
Цитокин Тип продукции
Спонтанная Стимулированная КонА Стимулированная ЛПС
ИЛ-10 129,92 (64,84-260,11) 1584,26 (307,87-3496,92); р = 0,004 7425,37 (5980,93-8293,81); р = 0,003
ИЛ-2 7,46 (7,46-22,93) 113,34 (62,71-196,07); р = 0,0004 20,52 (20,52-51,93); р = 0,003
ИЛ-4 0,46 (0,46-1,52) 15,49 (8,11-22,49); р = 0,001 11,46 (4,71-24,49); р = 0,001
ИЛ-5 2,07 (1,67-2,89) 359,37 (88,14-812,38); р = 0,007 10,1 (8,19-11,99); р = 0,021
ИЛ-6 6014,19 (1256,14-27690,62) 21247,32 (16371,87-44647,52); р = 0,009 40185,06 (40185,06-371413,47); р = 0,018
ИЛ-10 21,47 (13,91-53,41) 745,22 (379,76-1289,37); р = 0,001 319,69 (182,55-549,75); р = 0,001
ИЛ-12 5,54 (3,26-14,81) 26,46 (18,09-41,63); р = 0,001 26,83 (23,62-26,83); р = 0,013
ИЛ-13 5,11 (5,11-6,84) 862,83 (137,73-1443,35); р = 0,0001 1209,82 (911,96-1350,72); р = 0,0004
ФНО-а 11,02 (11,02-47,64) 4003,27 (591,81-14036,93); р = 0,001 2231,84 (1431,78-3896,16); р = 0,002
ИФН-у 8,2 (4,44-27,59) 2667,31 (1113,07-61846,82); р = 0,0004 553,57 (388,66-983,63); р = 0,017
ГМ-КСФ 8,61 (0,02-19,99) 148,85 (100,88-524,62); р = 0,001 178,13 (143,1-263,42); р = 0,002
Примечание. р - достоверность различий с величиной спонтанной продукции цитокинов после введения Г-КСФ (по Вилкоксону).
Таблица 2
Индекс стимуляции митогенами продукции цитокинов МНК, полученными на 6-е сутки после завершения курса мобилизации Г-КСФ у пациентов с ХСН, Ме (LQ - HQ)
Цитокин КонА ЛПС
ИЛ-10 12,19 (6,19-40,18) 57,15 (35,32-83,21)
ИЛ-2 15,19 (4,59-26,28) 2,75 (1,88-11,17)
ИЛ-4 33,67 (6,48-43,41) 24,91 (7,93-53,21)
ИЛ-5 173,61 (38,54-332,45) 4,88 (5,36-7,84)
ИЛ-6 3,53 (1,02-11,95) 6,68 (1 69-15,59)
ИЛ-10 34,71 (9,46-74,36) 14,89 (11,91-22,29)
ИЛ-12 4,78 (2,13-6,74) 4,84 (1,13-7,14)
ИЛ-13 115,61 (28,70-291,29) 236,76 (178,46-264,33)
ФНО-а 92,25 (29,75-557,30) 112,85 (84,54-153,29)
ИФНу 398,81 (69,69-2092,01) 50,39 (30,88-64,66)
ГМ-КСФ 17,29 (7,13-43,11) 20,69 (8,93-51,01)
Продукция ИЛ-12 под влиянием митогенов КонА и ЛПС находилась в сопоставимых значениях. Очевидно, что ряд регуляторных цитокинов се-кретировался преимущественно Т-лимфоцитами и накапливался в кондиционной среде в течение 48 ч, другие цитокины секретировались преимущественно моноцитами. Кроме того, ранее было показано, что введение Г-КСФ приводит к мобилизации в периферическую кровь различных популяций СК - гемопоэтических, эндотелиальных, мультипотентных мезенхимальных, что может повышать их функциональную активность, приводя к секреции цитокинов [1].
Развитие и прогрессирование сердечной недостаточности, сопровождающееся дисфункцией левого желудочка, не только зависит от параметров гемодинамики, но и связано с развитием как системных, так и местных (в мышце сердца) воспалительных процессов. Важную роль в патофизиологических процессах воспаления отводится провоспалительному цитокину ФНО-а, который способствует фиброзу, апоптозу кардиомиоци-тов, эндотелиальной дисфункции [21]. Противовоспалительный цитокин ИЛ-10, по данным ряда исследований, обладает кардиопротективным действием, ограничивает чрезмерный иммунный ответ, снижая секрецию провоспалительных ци-токинов, таких как ФНО-а [7, 11, 14, 16]. Кроме того, ИЛ-10 увеличивает мобилизацию эндоте-лиальных прогениторных клеток и их функциональные свойства [13].
Более точным показателем, характеризующим функциональное состояния миокарда, является не столько уровень про- и противовоспалительных цитокинов, сколько их соотношение [11], о котором мы судили по соотношению кон-
центраций ИЛ-10 и ФНО-а. У пациентов с ХСН после курса мобилизации Г-КСФ величина данного показателя свидетельствовала о превалировании противовоспалительного цитокина ИЛ-10 (Ме 1,86, LQ - Щ 1,27-2,54), что может иметь существенное значение для ограничения силы воспаления в месте ишемизации миокарда и возможности избегания активации воспалительных реакций при интрамиокардиальном введении клеточного трансплантата.
Спектры биологических активностей цито-кинов в значительной степени перекрываются, стимулируя процессы репарации более чем одним цитокином. Кроме того, они обладают полифункциональным действием. Основными продуцентами цитокинов являются зрелые дифференцированные клетки иммунной системы. Также показано, что различные популяции клеток костного мозга способны продуцировать ростовые проангиогенные факторы, такие как сосудистый эндотелиальный фактор роста, фактор роста фибробластов, фактор роста гепатоцитов и ангиопоэтин-1 [12, 18]. С другой стороны, имеются сообщения, что ряд провоспалительных цитокинов, секретируемых клетками костного мозга и клетками иммунной системы (ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО-а, трансформирующий фактор роста-Р, ГМ-КСФ, Г-КСФ) влияют на различные этапы ангио- и васкулогенеза [2]. Так, ФНО-а, играя ключевую роль в тканевом ответе на гипок-сическое повреждение, также способствует миграции и пролиферации эндотелиальных клеток. ГМ-КСФ и Г-КСФ, как полагают, регулируют привлечение, мобилизацию и хоминг различных стволовых клеток костного мозга, участвуя в репарации тканей [15].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Ранее нами показано, что у пациентов с ХСН с положительными результатами перфузии после интрамиокардиального введения МНК после окончания курса мобилизации Г-КСФ продуцировали больший уровень цитокинов с проангио-генными свойствами, чем в группе пациентов с ухудшением перфузии [1]. В настоящем исследовании секреторной функции МНК, обогащенных СК костного мозга Г-КСФ мобилизацией, предназначенных для интрамиокардиального введения, установлено, что у пациентов с ХСН после мобилизации МНК в культуре продуцируют широкий спектр цитокинов с полифункциональным действием. Содержание цитокинов в 48-часовых культурах отражает их накопительный синтез в кондиционной среде. Стимуляция МНК мито-генами приводит к достоверному увеличению секреции различных регуляторных цитокинов, что отражает потенциальную, резервную способность МНК после мобилизации. Таким образом, на основе анализа продукции биологически активных медиаторов нами показано, что МНК после мобилизации Г-КСФ обладают функциональным потенциалом для стимуляции реперативных процессов в миокарде. Это позволяет считать перспективным использование периферической крови после мобилизации Г-КСФ как доступного источника СК для лечения пациентов с хронической сердечной недостаточностью.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Коненков В.И., Повещенко О.В., Ким И.И. и др. Влияние G-CSF на проангиогенные свойства мобилизованных клеток периферической крови у больных с хронической сердечной недостаточностью // КТТИ. 2011. (3). 71-76.
2. Повещенко О.В., Повещенко А.Ф., Коненков В.И. Физиологические и цитологические основы клеточной регуляции ангиогенеза // Успехи физиол. наук. 2012. (3). 48-61.
3. Попов С.В., Рябов В.В., Суслова Т.Е. и др. Фундаментальные и прикладные аспекты клеточных технологий в кардиологии и кардиохирургии // Бюл. СО РАМН. 2008. (4). 5-15.
4. Anderlini P., Champlin R.E. Biologic and molecular effects of granulocyte colony- stimulating factor in healthy individuals: recent findings and current challenges // Blood. 2008. (111). 1767-1772.
5. Falcao Mda C., Zirpoli J.C., Albuquerque V.M. et al. Association of biomarkers with atherosclerosis and risk for coronary artery disease in patients with HIV // Arq. Bras. Cardiol. 2012. 99. (5). 971-978.
6. GnecchiM., Zhang Z., NiA., Dzau V.J. Paracrine mechanisms in adult stem cell signaling and therapy // Circ. Res. 2008. (103). 1204-1219.
7. Gullestad L., Kjekshus J., Damas J.K. et al. Agents targeting inflammation in heart failure // Expert Opin. Investig. Drugs. 2005. 14. (5). 557-566.
8. Honold J., Lehmann R., Heeschen C. et al. Effects of granulocyte colony stimulating factor on functional activities of endothelial progenitor cells in patients with chronic ischemic heart disease // Arte-rioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2006. (26). 2238-2243.
9. Kang H.J., Kim M.K., Lee H.Y. et al. Five-year results of intracoronary infusion of the mobilized peripheral blood stem cells by granulocyte colony-stimulating factor in patients with myocardial infarction // Eur. Heart J. 2012. 33. (24). 3062-3069.
10. Kastrup J., Ripa R.S., Wang Y. et al. Myocardial regeneration induced by granulocyte-colony-stimula-ting factor mobilization of stem cells in patients with acute or chronic ischaemic heart disease: a non-invasive alternative for clinical stem cell therapy // Eur. Heart J. 2006. (27). 2748-2754.
11. Kaur K., Sharma A., Singal P. Significance of changes in TNF-a and IL-10 levels in the progression of heart failure subsequent to myocardial infarction // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2006. (291). 106113.
12. Kinnaird T., Stabile E., Burnett M.S. et al. Marrow-derived stromal cells express genes encoding a broad spectrum of arteriogenic cytokines and promote in vitro and in vivo arteriogenesis through paracrine mechanisms // Circ. Res. 2004. (94). 678-685.
13. Krishnamurthy P., Thal M., Verma S. et al. Interleukin-10 deficiency impairs bone marrow-derived endothelial progenitor cell survival and function in ischemic myocardium // Circ. Res. 2011. 109. (11). 1280-1289.
14. Krishnamurthy P., Rajasingh J., Lambers E. et al. IL-10 inhibits inflammation and attenuates left ventricular remodeling after myocardial infarction via activation of STAT-3 and suppression of HuR // Circ. Res. 2009. (104). 9-18.
15. Lapidot T., Petit I. Current understanding of stem cell mobilization: the roles of chemokines, proteolytic enzymes, adhesion molecules, cytokines, and stromal cells // Exp. Hematol. 2002. (30).973-981.
16. Lopes R., Batista M. Jr, Rosa J. et al. Changes in the production of IL-10 and TNF-alpha in skeletal muscle of rats with heart failure secondary to acute myocardial infarction // Arq. Bras. Cardiol. 2010. 94. (3). 293-300.
17. Povsic T.J., Junge C., Nada A. et al. A phase 3, randomized, double-blinded, active-controlled, unblinded standard of care study assessing the efficacy and safety of intramyocardial autologous CD34+ cell administration in patients with refractory angina: Design of the RENEW study // Am. Heart J. 2013. 165. (6). 854-861.
18. Rehman J., Li J., Orschell C.M., March K.L. Peripheral blood «endothelial progenitor cells» are derived from monocyte/macrophages and secrete
angiogenic growth factors // Circulation. 2003. (107). 1164-1169.
19. Rutella S., Zavala F., Danese S. et al. Granulocyte colony-stimulating factor: a novel mediator of T cell tolerance // J. Immunol. 2005. 175. (11). 70857091.
20. Segers V.F., Lee R.T. Stem-cell therapy for cardiac disease // Nature. 2008. 451. (7181). 937-942.
21. Tziakas D., Chalikias G., Parissis J.T. et al. Prolonged activation of tumor necrosis factor (TNF)-alpha and its soluble receptors in chronic heart failure patients both in the compensated and decompensated state. Interplay between their levels and metalloproteinase-3 // Eur. Cytokine Netw. 2004. (15). 231-239.
EVALUATION OF LEVEL OF CYTOKINES PRODUCED BY PERIPHERAL BLOOD MONONUCLEAR CELLS OF PATIENTS WITH CHRONIC HEART FAILURE AFTER MOBILIZATION OF BONE MARROW STEM CELLS WITH G-CSF
Olga Vladimirovna POVESHCHENKO12, Irina Innokentievna KIM12, Alla Vladimirovna SHEVCHENKO12, Eugenie Anatolevich POKUSHALOV2, Aleksandr Borisovich ROMANOV2, Natalia Anatolievna BONDARENKO12, Aleksandr Petrovich LYKOV12, Aleksandr Fedorovich POVESHCHENKO12, Aleksandr Mikhailovich KARASKOV2, Vladimir Iosiphovich KONENKOV12
1 Institute of Clinical and Experimental Lymphology of SB RAMS 630117, Novosibirsk, Timakov str., 2
2 Institute of Circulation Pathology n.a. E.N. Meshalkin of Minzdrav of Russia 630055, Novosibirsk, Rechkunovskaya str., 15
The influence of G-CSF introduction on cytokine production by peripheral blood mononuclear cells after their enrichment with the bone marrow stem cells has been investigated. It is shown that mononuclear cells of patients with chronic heart failure in a 48-hour culture in vitro produce a wide range of cytokines with regulatory effect both in spontaneous conditions and when stimulated by mitogens. The findings suggest the feasibility of using mononuclear cells after mobilization with G-CSF to stimulate angiogenesis and reparative processes in the myocardium.
Key words: stem cells, granulocyte colony-stimulating factor, coronary heart disease, cytokines.
Poveshchenko O.V. - candidate of medical sciences, head of the laboratory of lymphotropic therapy and lymphodiagnostic, e-mail: [email protected]
Kim I.I. - researcher of laboratory of lymphotropic therapy and lymphodiagnostic, e-mail: [email protected] Shevchenko A.V. - candidate of biologic sciences, senior researcher of laboratory for clinical immunogenetics, e-mail: [email protected]
Pokushalov E.A. - doctor of medical sciences, vice-director, e-mail: [email protected] Romanov A.B. - candidate of medical sciences, surgeon of the centre of surgical arrhythmology, e-mail: [email protected]
Bondarenko N.A. - postgraduate student of laboratory of lymphotropic therapy and lympho diagnostic, e-mail: [email protected]
Lykov A.P. - candidate of medical sciences, leading researcher of laboratory of lymphotropic therapy and lympho diagnostic, e-mail: [email protected]
Poveshchenko A.F. - doctor of medical sciences, head of the laboratory ofphysiology of the protective system, e-mail: [email protected]
Karaskov А.М. - academician of RAS, doctor of medical sciences, director
Konenkov V.I. - academician of RAS, doctor of medical sciences, director, e-mail: [email protected]
