CC BY
16УДК 619:616-001.28/.29:579 DOI 10.33632/1998-698Х.2021-1-46-50
ОЦЕНКА ТОКСИЧНОСТИ И БИОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА
Фролов А.В., Василевский Н.М., Низамов Рам. Н., Гайнуллин Р.Р., Нефедова Р.В.
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», 420075, г. Казань, Научный городок-2, e-mail: vnivi@mail. ru
В ходе исследований определяли токсичность и биологическое действие нового препарата, потенциально способного оказывать адаптогенное, радиопротекторное действие. По результатам оценки острой токсичности в опыте на белых мышах препарат отнесен к 4 классу опасности. Биологическое действие препарата оценивали в опыте на белых крысах, для чего его включали в рацион в количестве 2 % от массы корма в течение 30 суток. Установлено увеличение темпа роста животных опытной группы по сравнению с контрольными. Результаты гематологических исследований показали, что скармливание крысам кормовой добавки не оказывало отрицательного влияния на гематологические показатели: количество гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов у всех животных было в пределах физиологической нормы, отмечена тенденция к росту этих показателей в опыте. Скармливание препарата оказывало положительное влияние на развитие внутренних органов крыс: масса тимуса, селезенки, надпочечников, печени и почек опытных крысят превышали аналогичные показатели в контроле.
Ключевые слова: адаптогены, кормовая добавка, острая токсичность препарата, биологическое действие препарата, стимулирующее действие препарата.
Введение. Из-за растущего загрязнения окружающей среды отходами промышленности, учащения техногенных катастроф организм сельскохозяйственных животных подвергается воздействию различных стресс-факторов, что приводит к снижению продуктивности, ухудшению качества продукции животноводства [1, 4].
Для устранения последствий действия неблагоприятных факторов разработаны специальные фармакологические препараты. Хотя на рынке присутствует большое количество таких средств, актуальным остается вопрос разработки новых - обладающих достаточной эффективностью при меньшей стоимости [3, 5].
Целью наших исследований стала разработка препарата, обладающего защитным эффектом в отношении неблагоприятного воздействия стресс-факторов радиациионной, химической, биологической природы. В соответствии с этим решали несколько задач, в том числе - оценивали токсичность и биологическое действие разработанной композиции.
Материалы и методы исследований. Исследуемый препарат представляет собой кормовую добавку, выполнен в твердой форме, получен путем механического перемешивания порошка клубней топинамбура, пчелиного
подмора, люцерновой муки, перги.
Острую токсичность препарата оценивали в опыте на белых мышах и крысах в соответствии с Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств [2].
Действие препарата при длительном поступлении с кормом определяли в опыте на белых крысах - учитывали росто-весовые, гематологические показатели, оценивали развитие внутренних органов.
Статистическую обработку полученных результатов проводили при помощи персонального компьютера и программы Microsoft Office Excel 2007.
Результаты исследований. В первой серии опытов оценивали острую токсичность препарата при однократном пероральном поступлении в организм. Опыты проводили на 100 белых мышах, разделенных на 10 групп, по 10 животных в каждой. Препарат в смеси с водой вводили внутрижелудочно, из расчета: животным первой группы - 500, второй - 1000, третьей - 1500, четвертой - 2000, пятой - 2500; шестой - 3000, седьмой - 3500, восьмой - 4000, девятой - 4500, десятой - 5000 мг препарата на кг живой массы.
Ни в одной из групп после введения препарата не отмечали гибели животных. У
крыс 1, 2, 3, 4 и 5 групп изменений в состоянии не наблюдали: животные имели нормальную подвижность, адекватно реагировали на внешние раздражители, охотно принимали корм. Животные 6, 7 и 8 групп в течение 3-4 часов демонстрировали слабое угнетение, снижение пищевой возбудимости. В 9 и 10 группах наблюдали более сильное угнетение, отсутствие пищевой возбуди-мости, разжижение каловых масс, эти приз-наки исчезали через 1215 часов.
По результатам исследований препарат был отнесен к 4 классу опасности веществ -малоопасные.
Во второй серии опытов изучали влияние препарата на организм белых крыс при длительном поступлении с пищей. В исследовании использовали дозу, аналогичную оп-
тимальной дозе ранее исследованного и близкого по составу препарата «Вита-Форце М».
Опыты проводили на 30 крысятах -отъемышах, которых разделили на 2 группы по 15 особей в каждой. Крысята 1 группы получали обычный рацион, 2 группы - обычный рацион с добавлением исследуемого препарата в количестве 2 % от массы корма. Скармливание препарата продолжалось в течение 30 суток.
На протяжении опыта животные имели нормальную пищевую возбудимость, адекватно реагировали на внешние раздражители. Патологий со стороны системы пищеварения не отмечено. Результаты изучения росто-весовых показателей опытных и контрольных животных представлены на рисунках 1 и 2.
200 150 100 50 0
180,7.
159,8
98,1
76,8 76,6
92,1
115 111,7
44,9 45,1
58,5 58,1
145,3
168,4
до нач. оп. 3 сут 7 сут 10 сут 14 сут 21 сут 30 сут
□ опытная группа, г □ контрольная группа, г
Рисунок 1 - Динамика живой массы крыс
Как видно из данных, представленных на рисунке 1, при скармливании исследуемого препарата крысятам в течение 30 суток масса их тела росла быстрее, чем у контрольных животных: на конец опыта
значение данного показателя превосходило контрольную величину на 7,3 %. Длина тела опытных животных также увеличивалась быстрее, чем контрольных (рисунок 2), и к концу опыта была выше на 3,0 %.
140 120 100 80 60 40 20 0
127,7 124
109,8 104,9
65,5
7 сут
14 сут
21 сут
30 сут
□ опытная группа, см □ контрольная группа, см
Рисунок 2 - Динамика длины тела крыс
Для дальнейшего изучения биологического действия препарата на организм животных проводили оценку гематологических показателей крыс -определяли количество
гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов. Результаты этих исследований представлены на рисунке 3.
Рисунок 3 - Морфологические показатели крови крыс
if 14 12 10
8 6 4 2
14.4 14.1 13.3
7 2 7
Количество гемоглобина.. Количество эритроцитов. Количество лейкоцитов..
г/100 мл 1012/л 10 э/л
■ опытная группа □ контрольная группа
Как видно из рисунка 3, скармливание крысятам кормовой добавки отрицательного влияния на гематологические показатели не оказывало - количество гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов у всех животных было в пределах физиологической нормы, близким у крыс обеих групп. Отмечена тенденция к незначитель-
Из данных рисунка 4 видно, что скармливание препарата оказывало положительное влияние на развитие внутренних органов крысят: масса тимуса, селезенки, надпочечников, печени и почек опытных крысят превышали аналогичные показатели в контроле, соответственно, на 6,5, 7,6, 8,4, 6,1 и 6,3 %. Патологических изменений в органах и тканях животных не отмечено.
ному увеличению значений этих показателей у опытных животных.
По окончании опытов животные опытной и контрольной групп были подвергнуты пато-логоанатомическому исследованию для изучения влияния препарата на состояние и развитие внутренних органов (рисунок 4).
Заключение. Результаты проведенных экспериментов показали, что исследуемый препарат относится к 4 классу опасности веществ (малоопасные), обладает стимулирующим эффектом: положительно влияет на рост и развитие организма лабораторных животных, улучшает их гематологические показатели, способствует лучшему развитию внутренних органов.
400 300 200 100 0
333,5
282,9
193,4.
164,3
56,8 47,5
I-1
4,73 4,38
1,62 1,49
Масса тимуса, мг Масса селезенки, Масса Масса печени, г Масса почек, г
мг надпочечников, мг
□ опытная группа □ контрольная группа
Рисунок 4 - Показатели развития внутренних органов крыс
Литература
1. Жербин, Е.А. Радиационная гематология / Е.А. Жербин, А.В. Чухловин. - М.: Медицина, 1989. - 176 с.
2. Миронов, А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / А.Н. Миронов, Н.Д. Бунатян. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.
3. Низамов, Р.Н. Влияние апифитопрепарата «Вита-Форце М» на систему антиоксидантной защиты в условиях воздействия на организм различных экстремальных факторов / Р.Н. Низамов, Г.Ф. Кабиров, Р.Х. Юсупов, Р.А. Сетдеков, А.А. Иванов, М.З. Тухфатуллов, Г.Р. Юсупова, Р.Р. Гайнуллин, К.В. Сычев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2014. - Т. 220. - С. 171-176.
4. Низамов, Р.Н. Влияние микробных иммунотропных препаратов на радиоиндуцированный иммунодефицит животных / Р.Н. Низамов, Г.В. Конюхов, Д.Т. Шарифуллина, А.С. Титов, М.М. Шакуров // Ветеринарный врач. - 2019. - № 4. - С. 31-35.
5. Низамов, Р.Н. Радиозащитный эффект веществ зоогенного происхождения / Р.Н. Низамов, Г.В. Конюхов, Д.Т. Шарифуллина, А.С. Титов, М.М. Шакуров // Ветеринарный врач. - 2019. - № 2. - С. 62-67.
ASSESSMENT OF TOXICITY AND BIOLOGICAL ACTIONS OF THE EXPERIMENTAL PREPARATION
Frolov A.V., Vasilevskiy N.M., Nizamov Ram. N, Gaynullin R.R., Nefedova R.V.
FSBSI «Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety», Kazan, e-mail: [email protected]
The research determined, the toxicity and biological effect of a new drug, potentially capable of having an adaptogenic, radioprotective effect. According to the results of the assessment of acute toxicity in the experiment on white mice, the drug is classified as a hazard class 4. The biological effect of the drug was evaluated in an experiment on white rats, for which it was included in the diet in an amount of 2% of the feed weight for 30 days. An increase in the growth rate of animals of the experimental group compared with the control ones was found. The results of hematological studies showed that feeding rats with a feed additive did not have a negative effect on hematological parameters: the amount of hemoglobin, erythrocytes and leukocytes in all animals was within the physiological norm, there was a tendency to increase these indicators in the experiment. Feeding the drug had a positive effect on the development of the internal organs of rats: the mass of the thymus, spleen, adrenal glands, liver and kidneys of experimental rats exceeded similar indicators in the control.
Keywords: adaptogens, feed additive, acute toxicity of the drug, biological effect of the drug, stimulating effect of the drug.
References
1. Zherbin, E.A. Radiation hematology / E.A. Zherbin, A.V. Chukhlovin. - M.: Medicine, 1989. - 176 p.
2. Mironov, A.N. Guidelines for conducting preclinical studies of medicines / A.N. Mironov, N.D. Bunatyan. - M.: Grif and K, 2012. - 944 p.
3. Nizamov, R.N. The influence of the apiphytopreparation "Vita-Force M" on the system of antioxidant protection under the influence of various extreme factors on the body / R.N. Nizamov, G.F. Kabirov, R.H. Yusupov, R.A. Setdekov, A.A. Ivanov, M.Z. Tukhfatullov, G.R. Yusupova, R.R. Gainullin, K.V. Sychev // Scientific notes of the Kazan State Academy of Veterinary Medicine named after N.E. Bauman. - 2014. T. 220. - P. 171-176.
4. Nizamov, R.N. The influence of microbial immunotropic drugs on radio-induced immunodeficiency of animals / R.N. Nizamov, G.V. Konyukhov, D.T. Sharifullina, A.S. Titov, M.M. Shakurov // Veterinary doctor. - 2019. - No. 4. - P. 31-35.
5. Nizamov, R N. Radioprotective effect of substances of zoogenic origin / R.N. Nizamov, G.V. Konyukhov, D.T. Sharifullina, A. S.Titov, M.M. Shakurov // Veterinary doctor. - 2019. - No. 2. -P. 62-67.
