CC BY
0
DOI: 10.24412/2074-5036-2023-4-76-80 УДК: 619:615.038:636.087.72
Ключевые слова: лабораторные животные (белые мыши), острая токсичность, хроническая токсичность, профилактический препарат
Key words: laboratory animals (white mice), acute toxicity, chronic toxicity, prophylactic drug
Кручинкина Т. В.
ОЦЕНКА ТОКСИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ МИНЕРАЛЬНОГО ОБМЕНА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
ASSESSMENT OF THE TOXIC PROPERTIES OF A PREVENTIVE DRUG FOR NORMALIZATION OF MINERAL METABOLISM IN CATTLE
Дальневосточный зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Адрес: 675005, Россия, Благовещенск, Северная ул., 112 Far East Zone Research Veterinary Institute Address: 675005, Russia, Blagoveshchensk, Severnaya str., 112
Кручинкина Татьяна Викторовна, кандидат ветеринарных наук, ведущий научный сотрудник,
e-mail dalznivilabbiohim@mail.ru
Kruchinkina Tatyana Viktorovna, PhD of Veterinary Sciences, Leading Researcher, e-mail dalznivilabbiohim@mail.ru
Аннотация. В Амурской области патология обмена веществ у крупного рогатого скота регистрируется во всех районах и имеет массовый характер, так как относится к неблагоприятным биогеохимическим зонам, в которых большой дефицит всех нормируемых макро- и микроэлементов. Нарушения обменных процессов проявляются гипопротеинемией, гипогликемией, гипокальцемией, нарушением соотношения кальция и фосфора. Нами был разработан профилактический препарат для нормализации минерального обмена у крупного рогатого скота на основе природных цеолитов Вангинского месторождения. Обязательным этапом доклинического исследования нового препарата является изучение его токсикологических свойств. Острую и хроническую токсичность определяли на белых мышах. При изучении острой токсичности профилактического препарата признаки острой интоксикации у мышей отсутствовали. Определить среднелетальную дозу (LD50) не удалось. При изучении хронической токсичности установили, что включение в рацион белых мышей профилактического препарата в дозах 1,0 г/кг и 2,0 г/кг массы в течение 2-х месяцев не выявило признаков хронической интоксикации, о чем свидетельствует увеличение прироста живой массы у мышей опытных групп в 3,4 и 1,6 раза по сравнению с контролем и 100 %-ная сохранность мышей во всех группах, что подтверждает его безвредность. Исходя из полученных результатов, подтверждено, что профилактический препарат для нормализации минерального обмена крупного рогатого скота относится к IV классу токсичности - «вещества малоопасные».
Summary. In the Amur Region, the pathology of metabolism in cattle is registered in all areas and has a massive character, since it refers to unfavorable biogeochemical zones in which there is a large shortage of all normalized macro-and microelements. Metabolic disorders are manifested by hypoproteinemia, hypoglycemia, hypocalcemia, violation of the ratio of calcium and phosphorus. We have developed a preventive drug for normalization of mineral metabolism in cattle based on natural zeolites of the Wanginsky deposit. A mandatory stage ofpreclinical research of a new drug is the study of its toxicological properties. Acute and chronic toxicity was determined on white mice. When studying chronic toxicity, it was found that the inclusion of a prophylactic drug in the diet of white mice in doses of 1.0 g/kg and 2.0 g/kg of weight for 2 months did not reveal signs of chronic intoxication, as evidenced by an increase in live weight gain in mice of the experimental groups by 3.4 and 1.6 times compared with the control and 100 % safety of mice in all groups, which confirms its harmlessness. Based on the results obtained, it was confirmed that the prophylactic drug for normalization of mineral metabolism of cattle belongs to the IV class of toxicity - "low-risk substances".
Введение
Основой существования живых организмов является обмен веществ, представляющий собой непрерывный и очень сложный процесс многочисленных взаимосвязанных преобразований химических соединений.
Минеральные вещества играют важную роль в построении структурных частей и тканей организма животных, входят в состав органических веществ, поддерживают защитные функции организма [2, 3, 6].
Вследствие нарушения минерального обмена происходит снижение интенсивности развития и набора массы тела у растущего молодняка, снижение продуктивных показателей у молочных коров, ухудшается качество продукции, показатели воспроизводства и, в конечном итоге, увеличиваются затраты кормов и средств на продукцию [1, 5].
В Амурской области под действием эндемического фактора патология обмена веществ у крупного рогатого скота занимает одно из ли-
дирующих мест в списке болезней незаразной этиологии.
Нами установлено, что в Амурской области патология обмена веществ у крупного рогатого скота регистрируется во всех районах и имеет массовый характер, так как регион относится к неблагоприятным биогеохимическим зонам, в которых большой дефицит всех нормируемых макро- и микроэлементов. Нарушения обменных процессов проявляются гипопротеинемией у 35 % животных, гипогликемией у 54 %, гипо-кальцемией у 87,3 % обследованных животных, нарушением соотношения кальция и фосфора [4]. Нарушение обмена этих макроэлементов сопровождается серьезными изменениями в здоровье животных, поэтому нами был разработан профилактический препарат для нормализации минерального обмена у крупного рогатого скота на основе природных цеолитов Вангинского месторождения.
Обязательным этапом доклинического исследования нового препарата является изучение его токсикологических свойств.
Таким образом, целью исследования являлось определение острой и хронической токсичности препарата для профилактики нарушений минерального обмена крупного рогатого скота на лабораторных животных (белых мышах).
Материалы и методы исследований
Исследования проводились в отделе животноводства и птицеводства, виварии ФГБНУ ДальЗНИВИ.
Для изучения острой токсичности профилактического препарата были сформированы две группы белых мышей массой 24-25 г по 11 голов в каждой. Мышам опытной группы скармливали профилактический препарат с хлебным мякишем. Начальная доза препарата составляла 1,0 г/кг массы, которая через два дня составила 2,0 г/кг, затем 4,0 г/кг, в дальнейшем дозу препарата увеличивали в два раза, таким образом, должны были определить среднелетальную дозу LD50. Хроническую токсичность препарата изучали на мышах массой 23-24 г при однократном введении в течение 60 дней с кормом в дозах 1,0 г/кг и 2,0 г/кг массы. В опыте было три группы мышей (две опытных и одна контрольная) по 11 голов в каждой.
За всеми животными вели наблюдение, при этом учитывали общее состояние, поведенческие реакции, потребление корма, воды, состояние волосяного покрова, слизистых оболочек, изменение массы тела. До начала опыта и по завершении опыта проводили гематологические
и биохимические исследования крови. В крови определяли количество лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина. В сыворотке крови при помощи диагностических наборов ВИТАЛ на биохимических анализаторах StatFax 3300 и StatFax 1904-R были определены мочевина, глюкоза, холестерин, аланинаминотрансфераза (АлАТ) и аспартатаминотрансфераза (АсАТ), общий кальций, неорганический фосфор, общий магний. Ионизированный кальций определяли расчетным методом по Й. Тодорову. Количество общего белка устанавливали рефрактометрически с использованием рефрактометра РЛ-2. По завершении эксперимента отдельных животных подвергали эвтаназии с помощью эфира диэтилового, проводили диагностическое вскрытие с целью макроскопического исследования внутренних органов.
Математически при помощи программы Microsoft Excel обрабатывали экспериментальные данные, вычисляли среднюю арифметическую (M) и их ошибку (m).
Результаты исследований
Скармливание мышам профилактического препарата в начальной дозе 1,0 г/кг массы не оказало влияние на общее состояние животных. Мыши полностью съедали корм, были подвижны, активно проявляли реакцию на окружающих. В дозе 64,0 г/кг мыши съели 46,5 % препарата. Признаков интоксикации у животных не установлено - животные были подвижны, активно реагировали на внешние раздражители. До начала и после окончания опыта у животных опытной и контрольной групп определяли массу, и по завершении опыта была взята кровь для морфологических и биохимических исследований.
Признаки острой интоксикации у мышей отсутствовали, о чем свидетельствуют гематологические и биохимические показатели крови мышей опытной и контрольной групп (табл. 1). Определить среднелетальную дозу (LD50) не представилось возможным, так гибель мышей от приема препарата в максимальной дозе 32,0 г/кг массы отсутствовала.
Скармливание профилактического препарата способствовало приросту живой массы мышей опытной группы в 2,9 раза по сравнению с контролем.
Таким образом, введение в рацион белых мышей профилактического препарата на основе природных цеолитов не оказало отрицательного влияния на биохимические и гематологические показатели животных, способствовало увеличению среднесуточного прироста живой
Таблица 1
Гематологические и биохимические показатели крови мышей при включении в рацион профилактического препарата
Показатели До начала опыта (п=6) Контроль (п=11) Опыт (п=11)
Эритроциты, 1012/л 4,12±0,198 4,25±0,090 4,78±0,245
Лейкоциты, 109/л 5,83±0,912 4,00±0,138 4,02±0,324
Гемоглобин, г/л 111,79±4,035 106,52±3,063 108,23±2,973
Общий белок, г/л 62,18±1,470 63,95±1,032 64,33±0,644
Мочевина, мМ/л 6,75±0,156 9,76±1,063 8,81±0,302***
Холестерин, мМ/л 3,78±0,233 4,03±0,162 4,06±0,251
Глюкоза, мМ/л 1,52±0,094 1,56±0,112 1,69±0,142
Кальций, общ., мМ/л 2,11±0,026 2,11±0,057 2,11±0,023
Фосфор, неорг., мМ/л 1,68±0,122 2,15±0,190 1,81±0,109
Са++, мМ/л 0,99±0,019 0,97±0,034 0,97±0,012
Магний, мМ/л 0,96±0,007 1,16±0,077 1,00±0,026
АлАТ, Е/л 36,43±1,821 38,56±4,698 47,17±1,248
АсАТ, Е/л 155,77±19,076 160,64±11,243 167,79±10,090
Средняя масса, г. начало опыта 24,83±1,138 24,00±1,345 25,27±0,469
завершение опыта 24,57±0,996 26,91±0,706
Примечание: Р<0,001***.
Таблица 2
Гематологические и биохимические показатели крови мышей при включении в рацион профилактического препарата в течение 60-ти дней
Показатели До начала опыта (п=7) Контроль (п=11) Опытные группы (п=11)
1,0 г/кг 2,0 г/кг
Эритроциты, 1012/л 5,78±0,392 5,17±0,294 5,97±0,252* 5,09±0,325
Лейкоциты, 109/л 2,14±0,249 2,20±0,343 5,54±0,482*** 5,00±0,486***
Гемоглобин, г/л 132,10±5,815 125,44±4,264 124,07±5,229 118,52±4,336
Общий белок, г/л 61,30±0,598 65,86±1,744 65,45±0,986 62,43±0,906
Мочевина, мМ/л 6,38±0,218 11,07±1,148 6,49±0,296** 6,82±0,43**
Холестерин, мМ/л 1,63±0,0,102 1,61±0,130 1,61±0,088 1,37±0,068
Глюкоза, мМ/л 1,57±0,111 1,67±0,121 1,75±0,111 1,83±0,176
Кальций, общ., мМ/л 2,24±0,051 2,21±0,083 2,32±0,570** 2,11±0,040
Фосфор, неорг., мМ/л 2,00±0,243 2,26±0,228 2,89±0,108 1,82±0,170
Са++, мМ/л 1,07±0,024 1,01±0,043 1,07±0,029 0,99±0,016
Магний, мМ/л 1,00±0,045 1,24±0,091 1,15±0,027 1,09±0,059
Калий, мМ/л 5,50±0,153 7,24±0,171 7,10±0,212 6,62±0,237
Триглицериды, мМ/л 0,68±0,017 0,76±0,046 0,65±0,035 0,55±0,033
АлАТ, Е/л 28,32±2,246 42,67±5,726 37,31±2,836 45,40±3,409
АсАТ, Е/л 121,64±10,164 171,96±12,462 141,05±6,164 157,32±10,902
Средняя масса, г. начало опыта 24,00±1,345 23,45±1,073 24,27±1,113 24,45±0,966
завершение опыта 24,73±0,727 28,64±1,072 26,45±1,163
Примечание: Р<0,05*; Р<0,01**; Р<0,001***.
массы мышей, что подтверждает его безвредность.
Включение в рацион белых мышей профилактического препарата в дозах 1,0 и 2,0 г/кг массы в течение 60 дней не выявило признаков хронической токсичности. В течение всего опыта мыши были подвижны, активно реагировали на окружающих, полностью поедали корм, слизистые оболочки ротовой полости были розовые, шерстяной покров гладкий, блестящий.
Подтверждением отсутствия хронической интоксикации препарата свидетельствовали гематологические и биохимические показатели крови опытных и контрольных мышей.
Динамика гематологических и биохимических показателей крови у мышей в зависимости от дозы препарата представлена в табл. 2. Как видно из результатов исследований, у мышей первой и второй опытных групп отмечали достоверное (Р<0,001) увеличение лейкоцитов в 2,5 и 2,2 раза в сравнении с контрольной группой. Количество эритроцитов на протяжении опыта было на одном уровне, однако в первой опытной группе отмечалась достоверное (Р<0,05) увеличение в сравнении со второй опытной группой в 1,2 раза.
С начала опыта отмечалось недостоверное снижение количества гемоглобина в крови мышей всех групп, но при этом показатель оставался в пределах физиологической нормы.
У мышей всех групп в сыворотке крови отмечали увеличение общего белка по сравнению с исходным состоянием. Уровень мочевины в контрольной группе превышал верхнюю границу физиологической нормы. В первой и второй опытных группах уровень мочевины был ниже в 1,7 и 1,6 раза по сравнению с контролем соответственно и был в пределах нормативных показателей. Концентрация холестерина в сыворотке крови мышей первой опытной и контрольной групп был на одном уровне, во второй опытной группе отмечалось достоверное (Р<0,05) снижение на 17,5 % по сравнению с первой группой.
В конце опыта наблюдалось увеличение глюкозы в сыворотке крови мышей всех групп, в первой и второй опытных группах уровень глюкозы был на 4,8 % и 9,6 % выше по сравнению с контролем соответственно.
Содержание кальция, фосфора и магния в сыворотке крови мышей опытных и контрольной групп существенно не отличалось.
В сыворотке крови у мышей всех групп отмечалось увеличение активности АлАТ и АсАТ по сравнению с исходным состоянием, однако при этом их уровень не выходил за пределы нормы.
Скармливание профилактического препарата способствовало приросту живой массы мышей в первой опытной группе на 4,37 г, во второй опытной группе на 2,0 г против 1,28 г в контроле.
В ходе опыта по истечении 60-ти дней лабораторные мыши всех групп были подвергнуты эвтаназии путем декапитации. При патологоана-томическом исследовании внутренних органов животных изменений в их структуре не выявлено. Внутренние органы располагались анатомически правильно, жидкость в плевральной и брюшной полостях отсутствовала. Просвет трахеи и бронхов свободен, ткань легких имела розовый цвет. Слизистая оболочка, выстилающая желудок и кишечник, имела естественную серовато-розовую окраску, без видимых изъязвлений и геморрагий. При патологоанатомическом исследовании выяснено, что использование препарата не вызвало каких-либо дегенеративных, некротических и других патологических изменений в изучаемых образцах контрольной и опытных групп.
Таким образом, профилактический препарат не обладает хронической токсичностью для белых мышей. Дозу препарата 1,0 г/кг можно считать оптимальной, так как биохимические показатели крови мышей, получавших препарат в указанной дозе, и в дозе 2,0 г/кг, не имеют значительных отличий.
Заключение
Включение в рацион белых мышей профилактического препарата в дозах 1,0 г/кг и 2,0 г/кг массы в течение 2-х месяцев не выявило признаков хронической интоксикации, о чем свидетельствует увеличение прироста живой массы у мышей опытных групп в 3,4 и 1,6 раза по сравнению с контролем, и 100 %-ную сохранность мышей во всех группах, что подтверждает его безвредность.
Гематологические и биохимические показатели крови мышей опытных групп оставались на протяжении всего исследования в пределах контрольных значений. Скармливание мышам профилактического препарата не приводило к существенным изменениям в биохимических показателях.
При патологоанатомическом исследовании установлено, что использование препарата не вызвало патологических изменений в контрольной и опытных группах, что говорит об отсутствии негативного действия препарата на организм животных. Профилактический минеральный препарат не обладает острой, хронической токсичностью.
Исходя из полученных результатов, подтверждено, что профилактический препарат для нормализации минерального обмена крупного рогатого скота относится к IV классу токсичности - «вещества малоопасные».
Список литературы
1. Антипов, В. А. Перспективы применения природных алюмосиликатных минералов в ветеринарии / В. А. Антипов, М. П. Семененко, А. С. Фонтанецкий // Ветеринария. 2007. № 8. С. 54-57.
2. Кононский А. И. Биохимия животных [Учебники и учебные пособия для студентов высших учебных заведений]. 3-е изд., перераб. и доп. / А. И. Кононский М.: Колос. 1992. С. 420-431.
3. Кощаева О. С. Органические микроэлементы — природное решение проблемы минерального питания живот-
ных и птицы / О. С. Кощаева, И. А. Кощаев, Ю. Н. Литвинов // Актуальные вопросы сельскохозяйственной биологии. 2017. №. 3. С. 7-12.
4. Кручинкина Т. В. Степень нарушения минерального обмена у крупного рогатого скота в Амурской области / Т. В. Кручинкина, И. В. Сиянова // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2022, № 1 (53). С. 56-60.
5. Семененко М. П. Болезни минеральной недостаточности у сельскохозяйственных животных: лечение и профилактика: методические рекомендации / М. П. Семененко, Е. В. Кузьминова, А. Н. Трошин, А. Х. Шантыз. Краснодар, 2016. 44 с.
6. Чичула С. И. Проблемы минерального питания животных и птицы / С. И. Чичула, О. С. Кощаева // Селекция на современных популяциях отечественного молочного скота как основа импортозамещения животноводческой продукции. 2018. С. 376-381.
DOI: 10.24412/2074-5036-2023-4-80-84 УДК:636.093
Ключевые слова: зоофильные мухи, Musca domestica, Lucilia caesar, пушные звери, звероводческое хозяйство, инсектициды
Key words: zoophilic flies, Musca domestica, Lucilia caesar, fur animals, fur farming, insecticides
Ромашова Е. Б.
ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ СОВРЕМЕННЫХ ИНСЕКТИЦИДОВ ГРУППЫ BUFF ДЛЯ БОРЬБЫ С ЗООФИЛЬНЫМИ МУХАМИ В УСЛОВИЯХ ЗВЕРОВОДЧЕСКИХ ХОЗЯЙСТВ
EXPERIENCE OF APPLICATION OF MODERN INSECTICIDES OF THE BUFF GROUP TO COMBAT ZOOPHILIC FLIES IN THE CONDITIONS OF FARM BREEDINGS
ФГБОУ ВО «Санкт-Петербургский государственный университет ветеринарной медицины» Адрес: 196084, Россия, г. Санкт-Петербург, ул. Черниговская, д. 5
St. Petersburg State University of Veterinary Medicine Address: 196084, Russia, St. Petersburg, Chernigovskaya st., 5
Ромашова Елизавета Борисовна, аспирант кафедры паразитологии им. В. Л. Якимова,
e-mail: Elizavettarom@mail.ru
Romashova Elizaveta Borisovna, Postgraduate Student of the Department of Parasitology named after V. L. Yakimov,
e-mail: Elizavettarom@mail.ru
Аннотация. Основным методом содержания пушных зверей в условиях звероводческого хозяйства являются полуоткрытые шеды, что является условием для широкого распространения зоофильных мух. В звероводческом хозяйстве «Савватьево» Тверской области нами выявлены доминирующие среди зоофильных мух виды -Musca domestica (сем. Muscidae) и Lucilia caesar (сем. Calliphoridae). Выделено несколько факторов негативного влияния этих насекомых на пушное звероводство: «фактор стресса», «фактор транспозиции», «фактор паразитизма» и «фактор беспокойства». Для борьбы с зоофильными мухами нами впервые для условий звероводческого хозяйства было проведено испытание препаратов группы BuFF («Максимум» и «Ультимейт»). Для эксперимента были выбраны два шеда: шед с лисицами и шед с норками. Первый шед был обработан препаратом BuFF «Максимум», второй шед - BuFF «Ультимейт». Распыление препарата проводили с помощью специализированной машины-распылителя MT Vulcano Sprayer 300 L в присутствии животных. Препараты BuFF («Максимум» и «Ультимейт») показали высокую эффективность для борьбы с зоофильными мухами в условиях звероводческого хозяйства. После применения препаратов количество погибших насекомых для BuFF «Максимум» достигало 30-40 экз./м2, для BuFF «Ультимейт» - 45-50 экз./м2. Также отмечен ярко репеллент-ный эффект от препаратов, продолжительность которого составляет 10-20 дней. Считаем, что инсектицидные препараты BuFF можно рекомендовать в звероводческую практику с целью борьбы с зоофильными мухами и эффективного снижения их численности.
