CC BY
25
УДК 636.2:591.111.3
ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА У КОРОВ ПРИ КЛИНИЧЕСКОЙ ФОРМЕ МАСТИТА
© 2015 г. Ю.Л. Ошуркова, Е.Н. Соболева
Ошуркова Юлия Леонидовна - кандидат биологических наук, доцент, кафедра анатомии и физиологии, Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н.В. Верещагина, ул. Шмидта, 2, г. Вологда, 160555, e-mail: yul.oshurkova@yandex.ru
Oshurkova Yuliya Leonidovna - Candidate of Biological Science, Associate Professor, Department of Anatomy and Physiology, Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy, Shmidt St., 2, Vologda, 160555, Russia, e-mail: yul. oshurkova@yandex. ru
Соболева Елена Николаевна - ведущий ветеринарный врач, кафедра анатомии и физиологии, Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н.В. Верещагина, ул. Шмидта, 2, г. Вологда, 160555, e-mail: ensobol@yandex.ru
Soboleva Elena Nikolaevna - Leading Veterinarian, Department of Anatomy and Physiology, Vereshchagin Vologda State Dairy Farming Academy, Shmidt St., 2, Vologda, 160555, Russia, e-mail: ensobol@yandex.ru
Изучалось функционирование системы гемостаза у лактирующих коров при клинической форме мастита. Для диагностики применялся метод тромбоэластографии, позволяющий за один тест оценить все звенья свертывающей системы крови. Описан принцип работы тромбоэластографа TEG5000. В результате исследования установлено, что при воспалении молочной железы у лактирующих коров наблюдается выраженная активация системы гемокоагуляции.
Ключевые слова: гемостаз, тромбоэластограмма, коровы, мастит, сгусток, фибрин.
The work on the hemostasis system functioning study in lactating cows under the clinical mastitis form has been performed. Tromboelastography method allowing estimate all the parts of blood clotting system per one test has been used for diagnosis. The concept of tromboelastography TEG5000 work has been described. The result determines that under the mammary gland inflammation in lactating cows a marked activation of hemocoagulation system has been observed.
Keywords: haemostasis, thromboelastogramma, cows, mastitis, clot, fibrin.
Изучалось функционирование системы гемостаза у лактирующих коров при клинической форме мастита. Для диагностики применялся метод тромбоэластографии, позволяющий за один тест оценить все звенья свертывающей системы крови. Описан принцип работы тромбоэластографа ТБ05000. Установлено, что при воспалении молочной железы у лактирующих коров наблюдается выраженная активация системы гемокоагуляции.
В настоящее время не вызывает сомнений, что морфофункциональные особенности лактационного периода у коров во многом зависят от интенсивности кровоснабжения вымени. Для образования 1 л молока необходимо, чтобы через вымя прошло 400 - 500 л крови. Особенностям кровоснабжения молочной железы у коров посвящено довольно много работ [1-3]. Но данные о функционировании системы гемостаза у коров в период лактации немногочисленны и неполны. От этой системы в значительной степени зависит уровень доставки необходимого количества кислорода и питательных веществ, необходимых для образования молока.
Во время лактации организм коров испытывает сильное физиологическое напряжение, что может привести к снижению сопротивляемости к неблагоприятным условиям внешней среды и возникновению различных заболеваний, которые могут вызывать избыточную активацию системы гемокоагуля-ции в сторону увеличения тромбообразования [3, 4].
Для комплексной оценки функционирования системы гемостаза, как дополнение к традиционным методам, многие авторы рекомендуют применять метод тромбоэластографии [5-7]. Большинство научных работ посвящено использованию этого метода для исследования функционирования системы гемостаза у собак, кошек и лошадей [5, 8, 9,]. Применению метода тромбоэластографии у крупного рогатого скота в норме и при патологии, к сожалению, не уделялось должного внимания.
Поэтому целью нашего исследования было изучение функционирование системы гемостаза у лак-тирующих коров при клинической форме мастита методом тромбоэластографии (ТЭГ).
Материал и методы
Исследования проводились на коровах айршир-ской породы молочно-товарного комплекса «Майский» СХПК «Племзавод Майский» Вологодского района. В ходе опыта все животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления, которые существенно не менялись в течение опыта.
По результатам диспансеризации были созданы две опытные группы животных, находящиеся на 4 - 5-м месяце лактации. В первую группу вошли клинически здоровые животные (п=10), во вторую -больные клиническим маститом (п=30).
Кровь для исследования брали из яремной вены с использованием вакуумных систем для взятия венозной крови в пробирки с 3,8%-м раствором цитрата натрия. Исследование взятых образцов крови проводили на анализаторе TEG®5000.
Анализатор измеряет физические свойства сгустка крови, используя для этого специальную цилиндрическую чашечку, в которую помещается образец крови. Чашечка совершает вращательные движения относительно своей оси на угол 4°45. Каждый вращательный цикл длится 10 с. Стержень, погруженный в образец крови, был подвешен на скручивающейся нити. Крутящий момент вращающейся чашечки передается на погруженный в образец стержень только после того, как образующийся за счет фибрино-тромбоцитарных связей сгусток начинает соединять чашечку и стержень вместе. Сила этих связей определяет угол поворота стержня: несвернувшаяся кровь не передает вращение, рыхлый сгусток лишь частично передает вращение, а прочный сгусток заставляет стержень двигаться синхронно с чашечкой.
Как только сгусток начинает сжиматься или разрушаться, связи рвутся, взаимодействие между чашечкой и стержнем ослабевает и передача движения чашечки на стержень уменьшается. Вращательные движения стержня фиксируются компьютером и записывается кривая — тромбоэластограм-ма (рис. 1) [10].
Г^^глсп/ло атитт^
При интерпретации полученных данных мы оценивали пять основных параметров образования сгустка и его лизиса: R - время реакции, которое отражает скорость образования тромбопластина и соответствует первой невидимой фазе свертывания крови, мин; K — время коагуляции, необходимое для достижения максимальной плотности сгустка, мин; а — угловая константа, измеряет скорость образования прочного фибринового сгустка (процесс уплотнения или степень прочности формирования сгустка), градусы; MA — максимальная амплитуда, отражает физические качества сгустка и соответствует III фазе свертывания крови, мм. Величина МА соответствует концу продуктивной фазы свертывания, после которой начинается ретракция сгустка и фибринолиз, отражает свертывающую активность тромбоцитов и фибриногена; LY 30 — индекс фиб-ринолиза, т.е. процент, на который уменьшается величина (амплитуда) сгустка в течение 30 мин после достижения МА.
Результаты, полученные в ходе исследований, обрабатывали с помощью программы Microsoft Exсel. Значения полученных результатов представлены в виде M±m, где М - средняя величина; m -стандартная ошибка средней. Сравнение между собой данных проводилось с применением t-кри-терия Стьюдента [11, 12].
Результаты исследований и обсуждение
Большая информативность метода ТЭГ позволила нам получить данные, которые характеризуют не только процесс свёртывания крови в целом, но и отдельные его фазы. Изменения в системе гемостаза мы определяли при сравнении показателей тром-боэластограммы опытной и контрольной групп животных (рис. 2).
При анализе результатов полученных тромбо-эластограмм у больных клиническим маститом коров наблюдали ускорение времени начала формирования нитей фибрина (R) (р < 0,05). У здоровых коров время R составило 23,37 ± 2,49 мин, у больных - 15,5 ± 1,07.
Расхождение ветвей ТЭГ на 20 мм от начала формирования нитей фибрина у больных маститом коров происходило за 8,04 ± 0,94 мин. Это быстрее, чем у животных контрольной группы на 32,2 % (К = 11,86 ± 3,2 мин).
Скорость роста фибриновой сети повышена у коров с клиническими признаками мастита, на что указывает увеличение показателя а. Показатель МА у больных животных, который характеризует механическую плотность образовавшегося сгустка,
Рис. 1. Графическое изображение тромбоэластограммы
был достоверно (р > 0,05) выше, чем у здоровых животных, и составил 83,57 ± 0,67 мм.
■ контрочыыя групп»-п 'О "Опытная группа. п 30
Рис. 2. Показатели тромбоэластограммы у здоровых коров и больных клинической формой мастита
Индекс фибринолиза (LY30), регистрирующийся через 30 мин после достижения кривой тромбоэластограммы максимальной амплитуды и характеризующий процесс растворения сгустка, у больных коров был равен 0 %, тогда как у здоровых животных достигал 0,06±0,05 %.
Из анализа полученных данных следует, что при клинических формах мастита у коров отмечается выраженная активация системы гемостаза. В этот период в организме развивается состояние гиперкоагуляции, наблюдается ухудшение реологических свойств крови.
Выводы
Изменение интенсивности непрерывно протекающего свертывания крови сопровождает большинство физиологических и патологических состояний организма, вызываемых реакцией напряжения. Не является исключением в этом смысле и период лактации у молочных коров.
В середине лактационного периода у здоровых коров наблюдается усиление фибринолиза, что обеспечивает оптимальные реологические свойства крови и эффективное кровоснабжение всех органов. Именно в этот период удои достигают своего максимума [4].
При воспалении молочной железы у коров наблюдаются изменения в системе гемостаза, ведущие к повышенному тромбообразованию. Исследование системы гемостаза при помощи метода тромбоэла-стографии позволяет быстро оценить состояние как плазменного, так и тромбоцитарного звеньев свертывающей системы крови и своевременно назначить обоснованную патогенетическую терапию.
Литература
1. Акопян К.А. Изменчивость общего количества крови и ее составных частей в течение лактации // Успехи зоотех. науки. 1937. Т. 3. С. 53-55.
2. Билозор Р.В. Артериальная васкуляризация вымени крупного рогатого скота в связи с молочной продуктивностью: автореф. дис. ... канд. биол. наук, Львов, 1958. 19 с.
3. Рыбаков А.В. Артериальное русло молочной железы крупного рогатого скота костромской породы в постнатальном онтогенезе: автореф. дис. . канд. вет. наук. Кострома, 2004. 138 с.
4. Ошуркова Ю.Л., Соболева Е.Н., Власов И.А. Анализ состояния системы гемостаза у коров в разные периоды лактации // Вестн. ветеринарии. 2012. № 63 (4). С. 91 - 93.
5. Martini W.Z., Cortez D.S., Dubick M.A., Park M.S., Holcomb J.B. Thrombоelastography is better than PT, aPTT, and activated clotting time in detecting clinically relevant clotting abnormalities after hypothermia, he-morrhagic shock and resuscitation in pigs // J. Trauma.
2008. Vol. 65, № 3. Р. 35-43.
6. Kol A., Borjesson D.L. Application of throm-belastography / thromboelastometry to veterinary medicine // Vet. Clin. Pathol. 2010. Vol. 39, № 4. Р. 405 -416.
7. Wiinberg B., Kristensen A.T. Thromboelastogra-phy in veterinary medicine // Seminars in Thrombosis and hemostasis. 2010. Vol. 36, № 7. Р. 747 - 756.
8. Epstein K.L., Brainard B.M., Lopes M.A., Barton M.H., Moore J.N. Thromboelastography in 26 healthy horses with and without activation by recombinant human tissue factor // J. Vet. Emerg. Crit Care (San Antonio).
2009. Vol. 19, № 1. Р. 96 - 101.
9. Marschner C.B., Kristensen A.T., Wiinberg B. Thromboelastography results on citrated whole blood from clinically healthy cats depend on modes of activation // Acta Veterinaria Scandinavica. 2010. Vol. 52. Р. 38 - 42.
10. Тромбоэластограф TEG 5000. URL: http://bon-daroksana.ucoz.ru/publ/klinicheskaja_laboratornaja_ diag-nostika/biokhimija/tromboehlastograf_teg_5000_issledova-nie_sistemy_gemostaza/3-1-0-13 (дата обращения: 20.11.2013).
11. Биометрическая обработка лабораторных, клинических и эпизоотологических данных : метод. руководство. Новочеркасск, 1980. 40 с.
12.Лапач С.Н., Чубенко А.В., Бабич П.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel: 2-е изд., перераб. и доп. К., 2001. 408 с.
References
1. Akopyan K.A. Izmenchivost' obshchego koli-chestva krovi i ee sostavnykh chastei v techenie laktatsii
[Variability of the total amount of blood and its components during lactation]. Uspekhi zootekhnicheskoi nauki, 1937, vol. 3, pp. 53-55.
2. Bilozor R.V. Arterial'naya vaskulyarizatsiya vy-meni krupnogo rogatogo skota v svyazi s molochnoi pro-duktivnost'yu [Arterial vascularization of the udder in cattle in connection with dairy efficiency]: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk. L'vov, 1958, 19 p.
3. Rybakov A.V. Arterial'noe ruslo molochnoi zhelezy krupnogo rogatogo skota kostromskoi porody v postnat-al'nom ontogeneze [Arterial channel of a mammary gland of cattle of Kostroma breed in a postnatal ontogenesis]: avtoref. dis. ... kand. vet. nauk. Kostroma, 2004, 138 p.
4. Oshurkova Yu.L., Soboleva E.N., Vlasov I.A. Analiz sostoyaniya sistemy gemostaza u korov v raznye periody laktatsii [Analysis of the hemostatic system in cows in different periods of lactation]. Vestnik veterinarii, 2012, no 63(4), pp. 91-93.
5. Martini W.Z., Cortez D.S., Dubick M.A., Park M.S., Holcomb J.B. Thromboelastography is better than PT, aPTT, and activated clotting time in detecting clinically relevant clotting abnormalities after hypothermia, hemorrhagic shock and resuscitation in pigs. J. Trauma., 2008, vol. 65, no 3, pp. 35-43.
6. Kol A., Borjesson D.L. Application of thrombelas-tography/thromboelastometry to veterinary medicine. Vet. Clin. Path., vol. 39, no 4, pp. 405-416.
Поступила в редакцию_
7. Wiinberg B, Kristensen A.T. Thromboelastography in veterinary medicine. Seminars in Thrombosis and Hemostasis, 2010, vol. 36, no. 7, pp. 747-756
8. Epstein K.L., Brainard B.M., Lopes M.A., Barton M.H., Moore J.N. Thrombelastography in 26 healthy horses with and without activation by recombinant human tissue factor. J. Vet. Emerg. Crit Care., 2009, vol. 19, no 1, pp. 96-101.
9. Marschner C.B., Kristensen A.T., Wiinberg B. Thromboelastography results on citrated whole blood from clinically healthy cats depend on modes of activation. Acta Veterinaria Scandinavica, 2010, vol. 52, pp. 38-42.
10. Tromboelastograf TEG 5000 [Thromboelastograph TEG 5000]. Available at: http://bondaroksana.ucoz.ru/ publ/klinicheskaja_laboratornaja_diagnostika/biokhimija/t romboehlastograf_teg_5000_issledovanie_sistemy_gemo-staza/3-1-0-13 (accessed 20.11.2013).
11. Biometricheskaya obrabotka laboratornykh, klini-cheskikh i epizootologicheskikh dannykh [Biometric processing of laboratory, clinical and epizootic data]. Novocherkassk, 1980, 39 p.
12. Lapach S.N., Chubenko A.V., Babich P.N. Statis-ticheskie metody v mediko-biologicheskikh issledova-niyakh s ispol'zovaniem Excel [Statistical methods in biomedical research using Excel]. Kyiv, 2001, 408 p.
17 февраля 2015 г.
