CC BY
35
▲1
5щ
УДК 616.155.33-097:575
ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ РАСТВОРИМЫХ ФОРМ ДИФФЕРЕНЦИРОВОЧНЫХ АНТИГЕНОВ У БОЛЬНЫХ С ВЭБ-ИНФЕКЦИОННЫМ МОНОНУКЛЕОЗОМ. ОСОБЕННОСТИ ЦИКЛИЧЕСКОГО И ПРОГРЕАИЕНТНОГО ТЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИИ
А.М. Собчак, О.В. Корочкина, Т.В. Шуклина, И.А. Отмахова, М.В. Шкарина, О.А. Сабурова,
ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия», ГБУЗ НО «Инфекционная больница № 9», г. Н. Новгород
Собчак Девора Михайловна - e-mail: devora.sobchak@mail.ru
Показатели иммунного ответа изучались у 136 больных с ВЭБ-инфекцией. Содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов (sCD95, sCD18, sCD50, sHLAI, sCD54) изучалось методом иммуноферментного анализа с применением моноклональных антител (АТ) ИКО 20 и поликлональных АТ к антигенам мононуклеарных клеток периферической крови человека. В контрольную группу вошли 60 здоровых доноров, сопоставимых по возрасту и полу с основной группой. Было установлено, что у больных с экзантемой, тонзиллярным синдромом, лейкоцитозом, повышением трансаминаз, наличием антител к капсидному антигену (a/VCAIgM) содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов (sCD95, sCD18, sCD50 sHLAI, sCD54) было выше по сравнению с больными, у которых отсутствовали эти симптомы. У больных с отрицательными результатами индикации ДНК-ВЭБ в крови определялось значительное повышение содержания растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих адгезию лейкоцитов (sCD18), активность Т-лимфоцитов (sCD50), распознавание чужеродных антигенов (sHLAI) по сравнению с больными с положительными результатами индикации ДНК-ВЭБ. Предиктором циклического течения ВЭБ-инфекционного мононуклеоза является увеличение показателей sCD95, sCD18 в 1,5-2 раза, а sCD50 и sCD54 в 3 и более раз выше нормы при первичном обследовании. Ко-фактором формирования прогредиентного течения ВЭБ-инфекционного мононуклеоза является снижение показателей активации апоптоза (sCD95) и адгезии лейкоцитов (sCD18) при первичном обследовании в 1,3-1,5 раза по сравнению со средними контрольными значениями.
Ключевые слова: ВЭБ-инфекция, гепатоспленомегалия, генерализованная лимфаденопатия, тонзиллярный синдром, атипичные широкоплазменные мононуклеары, растворимые дифференцировочные антигены, интерлейкины, фактор некроза опухоли.
Indicators of immune response were studied in the case of 136 patients having EBV (Epstein-Barr Virus) infection. Content of soluble forms of differentiation antigens (sCD95, sCD18, sCD50, sHLAI, sCD54) was studied using the method of enzyme immunoassay with the use of monoclonal antibodies (AB) PPI (PlanPosition Indicator) 20 and polyclonal antibodies to antigens of mononuclear cells of human peripheral blood. The control group included 60 healthy donors compared with regard to their age and sex to the main group. It was established that in the case of patients having exanthema, tonsillar syndrome, leukocytosis, increase of transaminases, availability of antibodies to capsid antigen (a/VCAIgM) the content of soluble forms of differentiation antigens (sCD95, sCD18, sCD50 sHLAI, sCD54) was higher in comparison with the patients in the case of whom these symptoms were absent. Patients with negative results of EBV-DNA indication in blood showed increase of content of differentiation antigens soluble forms characterizing adhesion of leukocytes (sCD18), activity of Т-lymphocytes (sCD50), differentiation of foreign antigens (sHLAI) in comparison with the patients having positive results of EBV-DNA indication. Predictor of cyclic course of EBV infectious mononucleosis is increase of indicators sCD95, sCD18 by 1,5-2 times, and sCD50 and sCD54 - by 3 times and more than normal rate in the course of initial examination. Co-factor of forming progredient course of EBV infectious mononucleosis is reduction of apoptosis activation indicators (sCD95) and leukocytes adhesion (sCD18) at initial examination by 1,3-1,5 times in comparison with average control values.
Key words: EBV infection, hepatosplenomegaly, generalized lymphadenopathy, tonsillar syndrome,
atypical broad-plasmic mononuclears, soluble differentiation antigens,
interleukins, tumor necrosis factor.
Эндогенные инфекции все чаще встречаются в практике врачей разных специальностей. Экологические проблемы, условия экономического кризиса, угроза эпидемий, физические и психоэмоциональные стрессы, несбалансированное питание, безусловно, создают предпосылки для про-грессирования иммунодефицитного синдрома и формирования вторичных оппортунистических инфекций. Герпесвирусы широко распространены в человеческой популяции, они способны поражать практически все органы и системы хозяина, вызывая латентную, острую и хроническую
формы инфекции. Диагностика и лечение герпесвирусных инфекций являются одной из актуальных проблем современной медицины [1, 2]. На сегодняшний день открыто более 100 представителей семейства вирусов герпеса, из которых восемь типов патогенны для людей. К ним относятся: вирус простого герпеса, вирус ветряной оспы, цитомегаловирус, вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), герпесвирусы 6-го, 7-го и 8-го типов.
ВЭБ является представителем онкогенных ДНК-содержащих вирусов, относится к группе вирусов герпеса.
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
Его капсид диаметром 120-150 нм окружен оболочкой, содержащей липиды [3, 4]. К настоящему времени выделены группы иммуногенных белков (ранний антиген, включает белки р54, р138; ядерный антиген, белок р72; капсидный антиген, включает комплекс белков р150, р18, р23; латентный мембранный белок, др125). Индикация антител к этим белкам позволяет дифференцировать стадию инфекции.
Первичная репликация вируса происходит в эпителии слизистой оболочки ротоглотки и носоглотки, протоках слюнных желез, а также в лимфоидных образованиях. Затем наблюдается гематогенная и лимфогенная диссеми-нация вируса. При этом в первую очередь инфицируются В-лимфоциты, которые начинают под влиянием митоге-нов вируса интенсивно пролиферировать, формируя плазматические клетки [5, 6]. Пролиферация В-лимфоцитов приводит к активации Т-супрессоров, которые подавляют пролиферацию В-лимфоцитов. Молодые формы Т-лимфоцитов циркулируют в крови, они часто имеют вид антипичных широкоплазменных мононуклеа-ров [7, 8]. Пролиферация В-лимфоцитов подавляется также естественными киллерами и путем антителозависи-мого цитолиза. В результате гибели инфицированных лимфоцитов вирус высвобождается и инактивируется антителами. Однако часть инфицированных В-лимфоцитов сохраняется и вирус персистирует в них пожизненно [9].
Персистирование ВЭБ является этиологическим фактором клинического синдрома, получившего название «хроническая ВЭБ-инфекция». Есть основания полагать, что в процессе хронической персистенции в эпителии и клетках иммунной системы ВЭБ может самостоятельно реализо-вывать механизмы иммуносупрессии [9]. Они не позволяют иммунной системе контролировать инфекционный процесс, индуцированный вирусом. Вот некоторые механизмы иммуносупрессии:
1) белок ВЭБ BCRF-1 имеет 70% гомологии с ИЛ-10 и существенно ингибирует продукцию интерферона;
2) белок ВЭБ BARF-1 является рецептором для колоние-стимулирующих факторов, вследствие чего происходит уменьшение их концентрации. Это приводит также к снижению синтеза интерферона и угнетению мобилизации стволовых клеток;
3) белок ВЭБ BHRF-1 - индуктор синтеза Ьс1-2, который блокирует апоптоз;
4) белок LMP-1 индуцирует Ьс1-2 и белок А20, также эффективно блокирующий апоптоз.
При Т-клеточном иммунодефиците возможна реактивация ВЭБ, возникновение В-клеточных лимфом, так как Т-лимфоциты перестают контролировать пролиферацию В-лимфоцитов. С иммунодефицитом и реактивацией ВЭБ связывают также развитие лимфомы Беркитта и назофа-рингеальной карциномы [10].
Существуют следующие механизмы уклонения вируса от иммунного ответа: изменения иммунодоминантных эпи-топов вируса; препятствие клеточному иммунитету, подавление презентации вирусных пептидов и угнетение активности натуральных киллеров; подавление синтеза цитоки-нов, а также апоптоза инфицированных клеток. Так, вирусы кодируют гомологи цитокинов, хемокинов, растворимых форм мембранных антигенов - молекул, которые играют важную роль в контроле иммунного ответа [7, 8].
Было обнаружено, что у белков, присутствующих на мембране клеток иммунной системы, могут быть растворимые гомологи. Такие гомологи обнаруживаются в биологических жидкостях, и в том числе в крови, в разных концентрациях. Основной способ образования растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы - это протеолитическое отщепление внеклеточной части мембранных белков с поверхности клеток, называемое протеолитическим шеддингом (слущивани-ем, сходом), или кливеджем (расщеплением) [11]. Шеддинг чаще всего является следствием активационных процессов, затрагивающих различные популяции клеток. Растворимые формы мембранных антигенов участвуют в регуляции иммунологических механизмов на разных этапах реализации иммунного ответа. Существует тесная связь между цитокиновой сетью и пулом растворимых антигенов. Механизмы регулирующего действия растворимых форм мембранных антигенов клеток довольно разнообразны. Растворимые антигены исполняют роль клеточных коммуникаторов. При этом в клетку может передаваться сигнал, изменяющий ее функциональное состояние. Изменение концентрации растворимых антигенов, по-видимому, может давать важную мониторинговую и прогностическую информацию при герпетической инфекции [12].
Различают три основных группы мембранных белков клеток иммунной системы, имеющих растворимые формы.
Первая из них - это молекулы главного комплекса гистосовместимости. У человека продемонстрировано существование растворимых форм молекул Н1_А I и II классов [13].
Вторая группа мембранных белков клеток иммунной системы, имеющих растворимые формы, - это рецепторы цитокинов. К этой обширной группе растворимых антигенов относятся растворимые рецепторы интерлейкинов-1, 2, 4, 5, 6, 7, 9, рецептор ИНФа, ФНО.
К третьей категории мембранных антигенов, имеющих растворимые изоформы, можно отнести обширную группу дифференцировочных антигенов, представленных разнообразными белками, принимающих участие в созревании клеток иммунной системы и выполнении ими своих эффекторных функций [14].
Наибольшее практическое значение имеют следующие растворимые дифференцировочные антигены: CD18, CD50, CD54, CD95, HLA I [15]:
sСD18 - принимает участие в механизмах адгезии лейкоцитов к ламинину, фибронектину, коллагену I и IV типа;
sСD50 - способствует презентации антигена Т-лимфоцитам и активации Т-лимфоцитов;
sCD54 - играет важную роль в механизмах адгезии и участвует в формировании иммунологического синапса;
sCD95 - один из клеточных рецепторов, инициирующих апоптоз;
sHLAI - обеспечивает распознавание иммунной системой чужеродных антигенов и аутоантигенов.
Результатом взаимодействия вируса и макроорганизма является активация механизмов апоптоза, адгезии, активация Т-лимфоцитарных реакций, распознавание чужеродных антигенов, формирование иммунологического синапса. Медиаторы иммунного ответа и растворимые
▲1
SSM
формы дифференцировочных антигенов могут характеризовать различные механизмы взаимодействия возбудителя и макроорганизма. Поэтому мы можем оценивать содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных с герпетической инфекцией с целью прогнозирования течения болезни и эффективности противовирусной и иммунокорригирующей терапии [16, 17].
Цель работы: оценить содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных с ВЭБ-инфекцией в зависимости от пола, тяжести течения болезни, лабораторных показателей, наличия ДНК-вируса, исходов инфекции.
Материал и методы
Показатели иммунного ответа изучались у 136 больных с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом (70 мужчин, 66 женщин) в возрасте от 18 до 30 лет (средний возраст -24,3±2,8 года). Среднетяжелая форма болезни отмечена у 112 пациентов, тяжелая форма - у 24 больных.
Диагноз ВЭБ-инфекционного мононуклеоза устанавливали на основании данных анамнеза, клинических данных (длительность лихорадки; тонзиллярный синдром; гепато-спленомегалия; генерализованная лимфаденопатия; наличие атипичных широкоплазменных мононуклеаров в крови). Методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) проводилась индикация ДНК-ВЭБ в лимфоцитах крови (гибридиза-ционно-флуоресцентная детекция «АмплиСенс EBV/CMV/ HHV6-скрин-FL»), методом ИФА определялись антитела к ВЭБ: a/VCA-IgM, a/VCA-IgG, a/EA-IgG, a/EBNA-IgG.
Были установлены два варианта течения ВЭБ-инфекционного мононуклеоза: циклическое (1-я группа) и прогредиентное (2-я группа). Циклическое течение характеризовалось нормализацией клинико-лабораторных показателей и элиминацией вируса на 2-3-й неделе болезни. Прогредиентный характер сопровождался волнообразным течением болезни, когда в течение шести месяцев после перенесенной первичной инфекции определялись рецидивы болезни (клинико-лабораторные обострения) и были зарегистрированы положительные результаты индикации ДНК-ВЭБ в крови.
Группу с циклическим течением составили 111 больных, с прогредиентным течением - 25 пациентов.
Содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов (sCD95, sCD18, sCD50, sHLAI, sCD54) изучалось методом иммуноферментного анализа с применением моноклональных антител (АТ) ИКО 20 и поликлональных АТ к антигенам мононуклеарных клеток периферической крови человека (Нижегородский институт молекулярной биологии и региональной экологии ННГУ им. Н.А. Лобачевского, директор института - д. б. н. профессор В.В. Новиков). Уровень растворимых форм дифференцировочных антигенов определялся по результатам первичного обследования в первую неделю болезни.
В контрольную группу вошли 60 здоровых доноров, сопоставимых по возрасту и полу с основной группой. Средние показатели sCD95, sCD18, sCD50, sHLAI, sCD54 в контрольной группе составили соответственно 374,5±23,4 U/ml, 120,1±10,6 U/ml, 57,7±6,7 U/ml, 74,1±5,9 U/ml, 168,7±17,7 U/ml.
Статистическая обработка фактического материала и анализ результатов, полученных при исследованиях,
выполнялись на компьютере с использованием пакета программ Statistica v. 6.0 при помощи критериев Шапиро-Уилка; Левена; t-критерия Стьюдента. Различия считались достоверными при р<0,05.
Результаты исследования
Изучение уровня растворимых форм дифференцировочных антигенов проводилось у мужчин, женщин со среднетяжелым и тяжелым течением болезни.
Было установлено, что содержание всех изучаемых растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих активность апоптоза, адгезию лейкоцитов, активацию Т-лимфоцитов, формирование иммунологического синапса, распознавание чужеродных антигенов (sCD95, sCD18, sCD50, sCD54, sHLAI) было несколько выше у женщин по сравнению с мужчинами (таблица 1). Однако эти различия были недостоверны.
ТАБЛИЦА 1.
Содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных ВЭБ-инфекционным мононуклеозом в зависимости от пола, тяжести течения (данные первичного обследования, средние значения в U/ml)
Показатели Кол-во больных sCD95 SCD18 sCD50 sHLAI sCD54
Женщины 66 289,0±18,3 266,2+16,5 327,4+23,4 66,3+4,2 597,9+41,4
Мужчины 70 239,0±19,8 219,0+13,6 363,0+23,5 76,2+5,2 503,2+42,8
Р=0,124 Р=0,215 Р=0,118 Р=0,307 Р=0,213
Течение средней тяжести 112 384,3±21,5 205,5+15,4 368,3+28,4 145,3+8,3 568,4+42,3
Тяжелое течение 24 365,2±23,8 185,3+13,4 325,5+21,3 72,4+6,4 * 412,3+36,2 *
Р=0,113 Р=0,207 Р=0,213 Р=0,022 Р=0,018
Контрольная группа 60 374,5+23,4 120,1+10,6 57,7+6,7 74,1+5,9 168,7+17,7
Уровень растворимых форм дифференцировочных антигенов определялся у больных со среднетяжелым и тяжелым течением болезни. Было выявлено, что показатели, характеризующие распознавание чужеродных антигенов (sHLAI) и формирование иммунологического синапса (sCD54), были значительно выше у больных со среднетяжелой формой болезни по сравнению с тяжелой (таблица 1).
Содержание показателей, характеризующих апоптоз, адгезию лейкоцитов, активацию Т-лимфоцитов ^СЭ95, sCD18, sCD50), у больных с разными формами тяжести отличались несущественно.
Показатели растворимых форм дифференцировочных антигенов изучались у больных с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом в зависимости от преобладания различных клинических симптомов.
Было отмечено, что у больных с длительной лихорадкой (более 14 дней) и гепатоспленомегалией определялся несколько более высокий уровень всех изучаемых растворимых форм дифференцировочных антигенов (sCD95, sCD18, sCD50, sCD54, sHLAI) по сравнению с пациентами, у которых эти симптомы отсутствовали (таблица 2). Однако эти различия были недостоверны.
В процессе исследования установлено, что у пациентов с экзантемой содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих активность апоптоза
NK
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
(sCD95) и адгезию лейкоцитов (sCD18), были значительно выше по сравнению с больными, у которых эти симптомы не выявлялись (таблица 2).
ТАБЛИЦА 2.
Содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных ВЭБ-инфекционным мононуклеозом при различных клинических симптомах (данные первичного обследования, средние значения в U/ml)
Показатели Кол-во больных sCD95 SCD18 sCD50 sHLAI sCD54
Лихорадка более 14 дней 50 395,6±28,9 185,6±15,3 215,4±15,6 118,2±7,8 418,5±32,4
Отсутствие длительной лихорадки 86 372,3±25,4 163,8±10,2 185,2±11,4 107,4±5,8 385,6±25,7
Р=0,133 Р=0,218 Р=0,207 Р=0,322 Р=0,158
Экзантема 40 398,6±22,4 215,4±16,3 235,4±16,3 121,4±8,7 322,4±25,5
Отсутствие экзантемы 96 275,5±19,8 115,6±10,2 205,6±15,7 115,8±7,2 285,6±22,1
Р=0,012 Р=0,018 Р=0,312 Р=0,124 Р=0,208
Тонзиллярный синдром 116 385,3±22,8 218,5±18,5 145,5±5,3 125,3±7,8 215,3±19,1
Отсутствие тонзил-лярного синдрома 20 365,3±28,5 185,3±8,3 72,4±5,2 * 107,8±8,2 112,4±7,2 *
Р=0,214 Р=0,139 Р=0,022 Р=0,308 Р=0,025
Гепато- спленомегалия 110 345,2±26,5 173,5±4,5 118,3±8,2 182,3±11,2 153,4±10,3
Отсутствие гепато-спленомегалии 26 320,4±28,4 125,6±7,5 115,7±7,5 165,8±12,3 132,5±7,2
Р=0,187 Р=0,335 Р=0,213 Р=0,318 Р=0,215
Контрольная группа 60 374,5±23,4 120,1±10,6 57,7±6,7 74,1±5,9 168,7±17,7
Было отмечено, что у больных с выраженным тонзилляр-ным синдромом также определялось существенное повышение растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих активацию Т-лимфоцитов (sCD50) и формирование иммунологического синапса (sCD54), по сравнению с пациентами, у которых эти симптомы не определялись (таблица 2).
Уровень растворимых форм дифференцировочных антигенов определялся у больных с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом в зависимости от спектра маркеров ВЭБ.
Было отмечено, что содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов, определяющих активность Т-лимфоцитов (sCD50) и распознавание чужеродных антигенов ^ЬДО, существенно выше у пациентов с наличием антител к капсидному антигену (a/VCA IgM) по сравнению с больными, у которых отсутствует a/VCA IgM (таблица 3).
Противоположная тенденция отмечалась при изучении содержания растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных с положительными результатами индикации ДНК-ВЭБ. У больных с отрицательными результатами индикации ДНК-ВЭБ определялись значительно более высокие показатели растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих адгезию лейкоцитов (sCD18), активность Т-лимфоцитов (sCD50), распознавание чужеродных антигенов (sHLAI), по сравнению с пациентами с положительными результатами индикации ДНК-ВЭБ (таблица 3, рис.).
У больных при выявлении антитела к раннему антигену (a/EAIgG) и ядерному антигену (a/EBNA) отмечено некоторое повышение содержания всех исследуемых раство-
римых форм дифференцировочных антигенов (таблица 3). Однако эти отличия были несущественны.
Следующим направлением работы было определение содержания дифференцировочных антигенов у больных с циклическим и прогредиентным течением.
ТАБЛИЦА 3.
Содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных ВЭБ-инфекционным мононуклеозом в зависимости от результатов индикации вируса ДНК-ВЭБ и спектра антител (данные первичного обследования, средние значения в U/ml)
Показатели Кол-во больных sCD95 sCD18 sCD50 sHLAI sCD54
VCA-IgM пол 80 385,5±25,3 175,6±12,4 198,5±14,1 146,5±10,3 342,7±21,7
VCA-IgM отр 56 348,3±25,6 134,3±10,1 96,4±7,3 * 72,8±3,6 * 312,4±28,7
Р=0,207 Р=0,305 Р=0,012 Р=0,018 Р=0,213
EA-IgG пол 76 368,4±26,2 165,4±10,6 142,5±12,3 125,3±10,7 131,8±11,8
EA-IgG отр 60 325,8±+28,3 148,2±+12,5 124,7±+10,3 114,5±+10,5 125,2±+11,7
Р=0,135 Р=0,108 Р=0,204 Р=0,147 Р=0,203
EBNA-IgG пол 50 318,5±28,5 152,6±13,4 128,7±10,5 134,5±12,7 178,3±15,6
EBNA-IgG отр 86 292,8±22,5 142,3±12,7 112,6±10,4 118,9±9,8 152,8±13,2
Р=0,314 Р=0,176 Р=0,207 Р=0,112 Р=0,248
ДНК-ВЭБ пол 96 358,3±23,8 182,4±12,5 178,5±13,1 148,2±12,9 215,3±18,3
ДНК-ВЭБ отр 40 318,4±20,7 91,2±4,2 * 83,1±5,4 * 71,3±4,1 * 208,2±15,7
Р=0,146 Р=0,025 Р=0,014 Р=0,021 Р=0,132
Контрольная группа 60 374,5±23,4 120,1±10,6 57,7±6,7 74,1±5,9 168,7±17,7
РИС.
Частота повышения содержания растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом с разными результатами индикации ДНК-ВЭБ.
Было установлено, что у больных с циклическим течением болезни определялись более высокие значения растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих активацию апоптоза (sCD95), адгезию лейкоцитов (sCD18), активацию Т-лимфоцитов (sCD50), формирование иммунологического синапса (sCD54), по данным первичного обследования по сравнению с пациентами, у которых формировалось прогредиентное течение (528,5±32,8 U/ml, 242,6±21,3 U/ml, 345,4±25,5 U/ml, 550,5±38,4 U/ml и 221,3±18,5 U/ml, 92,8±7,4 U/ml, 132,3±10,2 U/ml, 273,8±22,7 U/ml соответственно р=0,001, р=0,021, р=0,018, р=0,015).
Растворимые формы дифференцировочных антигенов у больных с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом изучались
▲1
SSM
в процессе динамического наблюдения. Определение содержания дифференцировочных антигенов проводилось в группе больных с циклическим и прогредиентным течением инфекции. Пациенты наблюдались в течение четырех недель.
Было выявлено существенное снижение содержания sСD95 и sCD18 у больных с циклическим течением ВЭБ-инфекционного мононуклеоза к 4-й неделе болезни (528,6±33,4 U/ml и 225,8±18,3 U/ml, р=0,023; 242,6±22,5 U/ml и 112,5±10,3 U/ml, р=0,018). В процессе динамического наблюдения содержание sCD50, sHLAI, sCD54 снижались незначительно.
У больных с прогредиентным течением ВЭБ-инфекционного мононуклеоза уровень изучаемых растворимых форм дифференцировочных антигенов в процессе динамического наблюдения изменялся несущественно. Сохранялись монотонно низкие показатели растворимых форм дифференцировочных антигенов, что характеризовало слабый неадекватный ответ иммунной системы на инфекцию.
Обсуждение
Было установлено, что содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих распознавание чужеродных агентов (sHLAI) и формирование иммунологического синапса (sCD54), было выше у больных со среднетяжелым течением болезни по сравнению с тяжелым. Это, по-видимому, характеризовало формирование адекватного иммунного ответа при среднетяжелом течении болезни.
Было выявлено, что у больных с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом с экзантемой и тонзиллярным синдромом содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих активность апоптоза (sCD95), адгезию лейкоцитов (sCD18), активацию Т-лимфоцитов (sCD50) и формирование иммунологического синапса (sCD54), было значительно выше по сравнению с больными, у которых отсутствовали эти симптомы. Это свидетельствовало о том, что изучаемые антигены (sCD95, sCD18, sCD50, sCD54), вероятно, способствовали формированию более сильного иммунного ответа, повышению проницаемости сосудов и появлению токсико-аллергических симптомов.
Наибольший интерес представляло изучение содержания растворимых форм дифференцировочных антигенов у больных с ВЭБ-инфекцией в зависимости от спектра маркеров ВЭБ.
Было отмечено, что содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов, определяющих активность Т-лимфоцитов (sCD50) и распознавание чужеродных антигенов (sHLAI), существенно выше у пациентов с наличием антител к капсидному антигену (a/VCAIgM) по сравнению с больными, у которых отсутствовали a/ VCAIgM.
Противоположная тенденция отмечалась при изучении уровня растворимых форм дифференцировочных антигенов у пациентов с положительными результатами индикации ДНК-ВЭБ. У больных с отсутствием ДНК-ВЭБ определялось значительно более высокое содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих адгезию лейкоцитов (sCD18), активность
Т-лимфоцитов (sCD50), распознавание чужеродных антигенов (sHLAI) по сравнению с пациентами с положительными результатами индикации ДНК-ВЭБ. Это, вероятно, отражало формирование адекватного Т-клеточного ответа и образование антител.
В процессе нашего исследования было установлено, что у больных с циклическим течением болезни определялись более высокие значения растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих активацию апоптоза (sCD95), адгезию лейкоцитов (sCD18), активацию Т-лимфоцитов (sCD50), формирование иммунологического синапса (sCD54) по данным первичного обследования по сравнению с пациентами, у которых формировалось прогредиентное течение. Эти изменения, по-видимому, подтверждают активацию Т-эффекторных механизмов, формирование адекватного иммунного ответа и элиминацию вируса у больных с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом, у которых наблюдалось циклическое течение. И наоборот, снижение уровня изучаемых дифференцировочных антигенов у больных с про-гредиентным течением ВЭБ-инфекционного мононуклеоза характеризует слабый, неадекватный иммунный ответ на инфекцию.
Было выявлено существенное снижение содержания sСD95 и sCD18 у больных с циклическим течением ВЭБ-инфекционного мононуклеоза к 4-й неделе болезни, что характеризовало уменьшение вирусемии и снижение активности Т-эффекторных механизмов.
У больных с прогредиентным течением ВЭБ-инфекционного мононуклеоза уровень изучаемых растворимых форм дифференцировочных антигенов в процессе динамического наблюдения изменялся несущественно. Сохранялись монотонно низкие показатели растворимых форм дифференцировочных антигенов, что характеризовало слабый неадекватный ответ иммунной системы на инфекцию.
Выводы
1. Критерием адекватной ответной реакции иммунной системы у пациентов с ВЭБ-инфекционным мононуклеозом являлось повышение содержания растворимых форм дифференцировочных антигенов (sCD95, sCD18, sCD50 бН^1, sCD54).
2. Содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих распознавание чужеродных антигенов ^Н1_А1) и формирование иммунологического синапса (sCD54), было выше у больных со средне-тяжелым течением ВЭБ-инфекционного мононуклеза. Это, по-видимому, отражало формирование адекватного иммунного ответа при среднетяжелом течении болезни.
3. У больных с экзантемой, тонзиллярным синдромом, лейкоцитозом, повышением трансаминаз, наличием антител к капсидному антигену (a/VCAIgM) содержание растворимых форм дифференцировочных антигенов (sCD95, sCD18, sCD50 sHLAI, sCD54) было выше по сравнению с больными, у которых отсутствовали эти симптомы.
4. У больных с отрицательными результатами индикации ДНК-ВЭБ в крови определялось значительное повышение содержания растворимых форм дифференцировочных антигенов, характеризующих адгезию лейкоцитов (sCD18), активность Т-лимфоцитов (sCD50), распознавание
NK
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
чужеродных антигенов (sHLAI) по сравнению с больными с положительными результатами индикации ДНК-ВЭБ. Это, вероятно, отражало формирование более сильного Т-клеточного ответа, образование антител и уменьшение репликативной активности вируса.
5. Предиктором циклического течения ВЭБ-инфекционного мононуклеоза является увеличение показателей sCD95, sCD18 в 1,5-2 раза, а sCD50 и sCD54 в 3 и более раз выше нормы при первичном обследовании.
6. Ко-фактором формирования прогредиентного течения ВЭБ-инфекционного мононуклеоза является снижение показателей активации апоптоза (sCD95) и адгезии лейкоцитов (sCD18) при первичном обследовании в 1,3-1,5 раза по сравнению со средними контрольными значениями.
ЛИТЕРАТУРА
1. Исаков В.А., Архипова Е.И., Исаков Д.В. Герпетические инфекции человека. СПб.: СпецЛит, 2006. 301 с.
Isakov V.A., Archipova E.I., Isakov D.V. Gerpeticheskie infekcii cheloveka. SPb: Speclit, 2006.301 s.
2. Fleming D.T., McQuillan G.M. et al. Herpes Simplex Virus Type 2 in the United States, 1994 to 2004. NEJM. 2004. № 16. P. 1105-1111.
3. Weber B. Biology of herpes virus infections and tagers of anti viral therapies. Int. Meet. «Skin Therapy Update, 1994», 14-17 Oct. 1994. EADV, EADV Board. 2004. P. 46.
4. Новиков В.В. Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы при вирусных инфекциях. Вест. Нижегор. ун-та им. Н.А. Лобачевского. 2001. С. 208-217.
Novikov V.V. Rastvorim formi mebrannih belkov kletok immunnoy systemi pri virusnih infekciyah. Vestnik Nigegjrodskogo universiteta im. N.A. Lobachevskogo. 2001. S. 208-217.
5. Бабаев А.А., Новиков В.В., Ежова Г.П., Добротина Н.А. Белки. Ч. 2. Мембранные белки адгезии. Учебное пособие. Н. Новгород: ННГУ, 2004. 60 с.
Babaev A.A., Novikov V.V., Egova G.P., Dobrotina N.A. Belki. Ch. 2. Membrannie belkiadgezii. Ychebnoe posobie. N. Novgorod: NNGU, 2004. 60 s.
6. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и патологии. М.: Медицина, 1996. 239 с.
Erchov F.I. Sistema interferona v norme I patologii. M.: Medicina, 1996. 239 s.
7. Ершов Ф.И. Антивирусные препараты. М.: Медицина, 1998. 192 с. Erchov F.I. Antivirusniipreperati. M.: Medicina, 2006. 1998. 192 s.
8. Букринская А.Г. Вирусология. М.: Медицина, 2006. 536 с. Bukrinskaya A.G. Virusologiya. M.: Medicina, 536 s.
9. Касымова Е.Б. Инфекционный мононуклеоз у детей, ассоциированный с вирусами герпеса 4-го и 5-го типов / Инфекционные болезни. 2012. № 3. С. 44-47.
Kasimova F.L. Infekcionnii mononucleos u detei, associirovannii s virusami 4-go I 5-go tipov/Infekcionnii bolezni. 2012. № 3. S. 44-47.
10. Александров А.В., Джексон А.М., Румянцев А.Г. Анализ механизма модуляции межклеточных молекул адгезии ICAM. Иммунология. 1997. № 1. С. 4-13.
Aleksandrov A.V., Dgekson A.M., RumyancevA.G. Analis mechanisms modulacii megkletochnoi adgezii ICAM. Immunologiya. 1997. № 1. S. 4-13.
11. Бочаров А.Ф. Вирус простого герпеса. Новосибирск: Наука, 2003. 223 с.
Bocharov A.F. Virus prostogo gerpesa. Novocibirsk: Nauca, 2003. 223 с.
12. Новиков В.В., Караулов А.В., Барышников А.Ю. Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы. Мед. информ. агентство. 2008. 249 с.
Novikov V.V., Karaulov A.V., Baryshnikov A.Yu. Rastvorimye formy membrannykh antigenov kletok immunnoy sistemy. Med. Inform. agentstvo. 2008.249 s.
13. Management of herpesvirus infectons in the immunocompromised host with and without HIV infection. Building international congress. IHMF, 2006. P. 67.
14. Paludan S.R., Horan K.A. et al. Recognitin of herpesviruses by the innate immune system. Nat. Rev. Immunol. 2011. № 11. Vol. 2. P. 143-154.
15. Gribencha S.V., Bragina Е.Е., Abdumalikov R.A. Detection of type 2 herpes simplex virus and VEB in cells of soermatogenic epithelium in infected testis of guinea pigs. Bull. Exp. Biol. Med. 2007. Vol. 144. P. 73-76.
16. Wakim L.M., Woodward А., Bevan M.J. Mamory T-cell persisting within the brain after local infection show functional to their tissue of residence. Proc. Nat. Acad. Sci USA. 2010. № 107. P. 17872-17879.
17. Катагадзе З.Г. Иммунодиагностика и иммунотерапия. Вест. РАМН. 2003. № 5. С. 19-22.
Katagadze Z.G. Immunodiagnostica I immunoterapiya. Vest. RAMN. 2003.
УДК 616-036.22-037-084:355.337
ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ВОЗНИКНОВЕНИЯ НЕБЛАГОПОЛУЧНОЙ ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ В КОЛЛЕКТИВАХ НОВОБРАНЦЕВ И МЕТОДЫ ЕЕ ПРОФИЛАКТИКИ
В.А. Никифоров, Е.В. Беляева, Г.Б. Ермолина, Е.В. Борискина,
ФБУН «Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной»
Никифоров Валерий Алексеевич - e-mail: labnikif@yandex.ru
Дана оценка напряженности мукозального иммунитета 193 призывников срочной службы в период формирования воинского коллектива. Обнаружено низкое содержание в слюне лизоцима и дисбаланс в профиле цитокинов, провоцируюшие колонизацию слизистой носоглотки патогенами. Показано увеличение концентрации в сыворотках крови IgM и IgG при выделении со слизистой носоглотки S. aureus, а также сывороточных IgM при обнаружении S. pneumoniae. Зарегистрирован низкий уровень протективного антименингококкового иммунитета у новобранцев. Даны рекомендации по профилактике неблагополучной эпидемиологической ситуации среди военнослужаших.
Ключевые слова: мукозальный иммунитет, противоменингококковый иммунитет,
сывороточные иммуноглобулины.
The appraisal of intensity of mucosal nasopharyngeal immunity of 193 recruits in period of military group forming was given. The low content of lysozyme in saliva and disbalance in cytokine profiles that provoked the colonization of nasopharyngeal mucosa by pathogens were found. The increasing of concentration of IgM and IgG in sera by the isolation S. aureus from nasopharyngeal mucosa and the increasing of serumal IgM concentration by the detection of S. pneumoniae were shown. The low level of protective antimeningo-coccal immunity of recruits was registrated. The recommendations to the prophylaxis of beginning of unfortunate epidemiological situation among military men were given.
Key words: mucosal immunity, antimeningococcal immunity, serumal immunoglobulins.
