CC BY
53
11. Насонов Е.Л., Самсонов М.Ю., Беленков Ю.Н., Фукс Д.Н. Иммунопатология застойной сердечной недостаточности, роль ци-токинов // Кардиология. - 1999. - № 3. -С.66-73.
12. Тюриков П.Ю., Зуева О.Н., Шарова В.Г. Кар-диопротективное действие метаболического препарата милдронат // Успехи современного естествознания. - 2004. - № 10. - С. 131.
13. Шугушев Х.Х., Аттаева М.Ж., Нагоев Б.С. Спонтанный тест восстановления нитросине-го тетразолия у больных инфарктом миокар-
да // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. -2005. - Т. 4, № 4. - С. 30.
14. Щербаков В.И. Применение НСТ-теста для оценки чувствительности нейтрофилов к стимуляторам // Лаб. дело. - 1989. - № 1. - С. 3033.
15. Stanley W., Lopaschuk G., Hall J. et al. Regulation of myocardial carbohydrate metabolism under normal and ischemic conditions // Cardio-vasc. Res. - 1997. - Vol. 33. - P. 243-257.
УДК 616.611-002
ОЦЕНКА РОЛИ ГЕНЕТИЧЕСКИХ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ В ФОРМИРОВАНИИ ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОГО ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА
$
© Юшина И.А., Калмыкова Е.В., Некипелова Е.В., Чурносов М.И.
Кафедра медико-биологических дисциплин медицинского факультета Белгородского государственного университета, Белгород;
Областная клиническая больница Святителя Иоасафа, Белгород
E-mail: churnosov@bsu.edu.ru
Проведено изучение двух групп больных хроническим гломерулонефритом - пациенты без ХПН и пациенты с ХПН Установлено, что с увеличением степени ХПН возрастает концентрация IgA и снижается содержание IgM и IgG. На основе данных о концентрации иммуноглобулинов разработана модель дифференциальной диагностики форм ХГН с почечной недостаточностью и без почечной недостаточности с точностью дискриминации данных групп больных 78,66%. Изучено распределение частот аллелей и генотипов генов фактора некроза опухоли а, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, лимфотоксина а, трансформирующего фактора роста Р и интерлейкина 9 у больных ХГН. Выявлены генетические маркеры неблагоприятного течения хронического гломерулонефрита: с ХПН ассоциированы аллель А и генотип АА гена рецептора фактора некроза опухоли 1 типа.
Ключевые слова: хронический гломерулонефрит, хроническая почечная недостаточность, иммуноглобулины, полиморфизм генов цитокинов.
THE ROLE OF GENETIC AND IMMUNOLOGICAL FACTORS IN CHRONIC RENAL FAILURE ON THE BACKGROUND OF CHRONIC GLOMERULONEPHRITIS Yushina I.A., Kalmykova E.V., Nekipelova E.V., Churnosov M.I.
Department of Medical and Biologic Disciplines of the Medical Faculty of the Belgorod State University, Belgorod;
St. Joasaph's Regional Clinical Hospital, Belgorod
Studying two groups of patients with chronic glomerulonephritis has been carried out - the patients without CGN and patients with CGN. It has been revealed that with the increase in degree of CGN the concentration of IGA grows and the contents of IgM and IgG are reduced. Based on the data on the concentration of antibodies the model of differential diagnostics of CGN with and without renal failure has been developed with accuracy of discrimination of the given groups 78.66%. The frequencies of genotypes of tumor necrosis factor a gene, tumor necrosis factor receptor of the 1 type gene, tumor necrosis factor P gene, the transforming growth factor and interleukin 9 gene in patients with chronic glomerulonephritis have been studied. The genetic markers of unfavourable course of chronic glomerulonephritis are revealed: allele A and genotype АА of tumor necrosis factor receptor of the 1 type gene associated with chronic renal failure.
Key words: chronic glomerulonephritis, chronic renal failure, antibodies, polymorphism of cytokine genes.
Хронический гломерулонефрит (ХГН) является одной из актуальных проблем современной медицины, в связи с широким распространением в разных странах мира. Среди нефрологических заболеваний хронический гломерулонефрит составляет более 35% [6, 8]. Хронический гломерулонефрит - заболевание характеризующиеся неуклонным прогрессированием, начавшись, процесс постепенно приводит к склерозированию почечной ткани. Случаи выздоровления больных при
этом заболевании казуистически редки. Очевидно, что это самый частый вид патологического процесса, который является одной из распространенных причин хронической почечной недостаточности (ХПН), для лечения которой необходимы гемодиализ и пересадка почки [9]. Распространенность и заболеваемость терминальными стадиями хронической болезни почек неуклонно увеличивается в разных регионах мира [15]. Поэтому остаётся актуальным вопрос о выделении критериев,
позволяющих оценить степень хронической почечной недостаточности, прогноз развития ХПН у больных хроническим гломерулонефритом. Согласно экспериментальным и клиническим данным, существенный вклад в развитие ХГН вносят цитокины и факторы роста [2]. В развитии воспаления важную роль играет фактор некроза опухоли - мощный провоспалительный цитокин, который, в свою очередь, влияет на синтез макрофагами других хемокинов, важнейшими из которых являются интерлейкин 1 и его рецепторы. Известно, что определенные мутации в генах, кодирующих соответствующие хемокины, значительно изменяют уровень их экспрессии, что может влиять на развитие хронического воспалительного процесса [10].
Уровень иммуноглобулинов в периферической крови является одним из наиболее часто тестируемых параметров иммунной системы, характеризующих иммунный статус в норме и при иммунопатологических расстройствах.
Учитывая особую медико-социальную значимость проблемы развития хронической почечной недостаточности у больных хроническим гломерулонефритом и выявления факторов связанных с этим процессом, целью нашей работы стало изучение полиморфизма генов цитокинов и содержания иммуноглобулинов у больных хроническим гломерулонефритом с хронической почечной недостаточностью.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Группу исследования составили 370 человек: 202 больных хроническим гломерулонефритом и 168 человек популяционного контроля. В выборки больных и популяционного контроля включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Белгородской области и не имеющие родства между собой. Клинико-лабораторные обследования и формирование выборки больных проводились на базе отделения нефрологии областной клинической больницы. В зависимости от степени ХПН больные ХГН составили: ХПН ГП ст. (п=38), ХПН III ст. (п= 53), без ХПН (п=111). Наличие хронической почечной недостаточности констатировали при
постоянном повышенном уровне креатинина в крови более 120 мкМоль/л в течение 6 месяцев. В сформированной нами выборке у 81 пациента с ХГН отмечалась стадия клиниколабораторной ремиссии, у 57 больных -обострение ХГН, 49 больных получали заместительную почечную терапию по поводу терминальной стадии ХГН и 15 пациентов наблюдались с почечным аллотрансплантатом.
Материалом для исследования послужила венозная кровь в объеме 8-9 мл, взятая из локтевой вены пробанда. Забор венозной крови производили в вакуумные пробирки с консервантом, содержащим 0,5М раствор ЭДТА (рН=8.0) (для генетических исследований), и без консерванта (для иммунологических исследований).
Выделение геномной ДНК из периферической крови проведено методом фенольнохлороформной экстракции [15].
Анализ локусов Т^а -3080/А, ТЫЕШ -36А/0, Ltа -2500/А, TGFp1-869T/C, ¡Ь-9-113Т/М осуществлялся методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) синтеза ДНК по методикам, указанным в работах [12, 13, 18]. ПЦР проводилась на амплификаторе "Тер-цик-МС4" производства компании "ДНК-технология" с использованием ДНК-полимеразы ^егтш aquaticus производства фирмы "Силекс-М" и олигонуклеотидных праймеров, синтезированных фирмой "Син-тол". Генотипирование ДНК-маркеров производилось методом анализа полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ) продуктов ПЦР-амплификации специфических участков генома с использованием соответствующих ферментов рестрикции производства ООО "Сибэнзим" (Новосибирск).
Уровень иммуноглобулинов А, М, G определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) в образцах сыворотки крови со стандартными наборами в соответствии с инструкцией производителя.
Статистическую обработку данных осуществляли с использованием программы "Statistica 6.0", которая включала основную статистику, факторный и дискриминантный анализы.
Об ассоциации аллелей и генотипов с предрасположенностью к развитию хронической почечной недостаточности при хрониче-
ском гломерулонефрите судили по величине отношения шансов (ОR) [17] - показателю, отражающему, во сколько раз вероятность оказаться в группе "случай" (больные с ХПН) отличается от вероятности оказаться в группе "контроль" (здоровые) для носителя изучаемого генотипа (аллеля): ОR=(А/В)/(С/D), где А и В - количество больных, имеющих и не имеющих мутантный аллель или генотип, соответственно; D и C - количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный аллель или генотип, соответственно. ОR>1 рассматривали как положительную ассоциацию заболевания с исследуемым генотипом или аллелем (фактор риска) и ОR<1 - как отрицательную ассоциацию (фактор устойчивости). Границы 95% доверительного интервала (И) для ОR вычисляли по формулам [17]:
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При изучении распределения частот генотипов рассматриваемых полиморфных генетических систем среди больных ХГН и в популяционном контроле выявлено, что для большинства из них выполняется равновесие Харди-Вайнберга. Выявлена значительная вариабельность аллельного разнообразия по исследованным локусам среди населения Белгородской области: показатель наблюдаемой гетерозиготности варьировал от Н0=0,19-
0,21 (для Т^а -3080/А) до Н0=0,45-0,52 (для TGFpl-869T/C), что соответствует литературным данным по другим популяциям [4, 10].
При сравнительном изучении распределения частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов Т^а -3080/А, Ltа -2500/А, ТШЯ1 -36А/0, TGFp1-869T/C и ¡Ь-9 Т113М в группах больных ХГН в зависимости от уровня креатинина (без удвоения креа-тинина; с удвоением креатинина) (табл. 1) установлено статистически значимое увели-
чение частоты провоспалительных аллеля А (63,24%) и генотипа АА (47,06%) гена рецептора фактора некроза опухоли (Ш?Ш -36А/0) у больных с удвоенным уровнем креа-тинина по сравнению как с контрольной группой (45,52% и 22,76% соответственно; OR = 2,00; 95% С1 = 1,09-3,66; р<0,05), так и с больными без удвоенного уровня креатинина (47,52% и 26,74%; OR = 2,96; 95% С1 = 1,555,72; р<0,05).
При этом частоты генов и генотипов изучаемых полиморфных маркеров у больных без удвоения креатинина и в контрольной группе были одинаковы. По полиморфным маркерам генов TNFа -3080/А, Ltа -2500/А, TGFв1-869T/C и ¡Ь-9 Т113М достоверных различий между группами больных с разным уровнем креатинина и контрольной группой не выявлено.
Таким образом, провоспалительные аллель А и генотип АА гена рецептора фактора некроза опухоли (Т№Я1 -36А/0) являются факторами риска неблагоприятного течения ХГН, что проявляется удвоением исходного уровня креатинина.
Результаты генотипирования 64 больных пациента с терминальной стадией хронической почечной недостаточности (ТХПН) по локусам Т^а -3080/А, Ltа -2500/А, ТЫЕЯ1 -36А/0 и TGFв1-869T/C представлены в табл. 2.
При сравнительном анализе распределения аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов Т^а -3080/А, Ltа -2500/А, ТЫЕШ -36А/0 и TGFpl-869T/C обнаружено увеличение частоты аллеля А (60,32%) и генотипа АА (42,90%) гена ТЫЕШ -36А/0 у больных с ТХПН по сравнению с контрольной группой (45,52% и 22,76% соответственно, р<0,05). По полиморфным маркерам генов Т^а -3080/А, Ltа -2500/А, TGFpl-869Т^ достоверных различий между больными с ТХПН и контрольной группой не выявлено.
Проведённое изучение уровней иммуноглобулинов показало (табл. 3), что у больных ХГН наблюдается более высокое содержание иммуноглобулинов А (3,75г\л) и G (18,85 г\л) по сравнению с контрольной группой (2,98г\л и 12,42г\л соответственно, р<0,001). Уровень иммуноглобулина М у
больных и в контроле оказался одинаков (р>0,05).
Таблица 1
Частоты аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов Т^а -3080/А, Lta -2500/А, ТЫЕШ -36А/0, TGFв1-869T/C и ¡Ь-9 Т113М у больных ХГН в зависимости от уровня креатинина
Ген Аллели, генотипы Контрол. группа % (п) (п=168) Больные ХГН (п=138) Критерий различий при х2 (р)
без удвоения креатинина, % (п) (п=104) с удвоением креатинина % (п) (п=34)
00 о со і а н АллельТЫБ*1 88,36 82,52 82,35 1,01 (0,32)
АллельТЫБ*2 11,64 17,48 17,65
ГенотиптаП/таБ 1 78,61 (132) 71,84 (75) 70,58 (24) 1,14 (0,29)
ГенотипТЫП/ТОТ^ 19,50 (33) 21,36 (22) 23,53 (8) 0,02 (0,89)
ГенотипТОТ^/ТОТ^ 1,89 (3) 6,80 (7) 5,89 (2) 3,14 (0,08)
Lta-250 Аллель Ы*1 30,95 24,75 33,33 0,84 (0,36)
Аллель Ы*2 69,05 75,25 66,67
ГенотипLta 1/Lta 1 8,93 (15) 7,92 (8) 12,12 (4) 0,02 (0,90)
ГенотипLta1/Lta2 44,05 (74) 33,66 (35) 42,43 (14) 2,47 (0,12)
ГенотипLta2/Lta2 47,02 (79) 58,42 (61) 45,45 (16) 3,03 (0,08)
ЮТЮ АллельТЫБЯ1*Л 45,52 47,52 63,24* 3,55 (0,05)
АллельТЫБЯ^О 54,48 52,48 36,76*
Генотип АА 22,76 (38) 26,74 (28) 47,06* (16) 7,42 (0,01)
Генотип ЛО 45,52 (76) 41,58 (43) 32,35 (11) 3,48 (0,06)
Генотип ОО 31,72 (54) 31,68 (33) 20,59 (7) 1,38 (0,24)
TGFP1-869 Аллель ТОБ*Т 61,60 54,41 64,71 0,01 (0,91)
Аллель ТОБ*С 38,40 45,59 35,29
Генотип ТТ 35,8 (60) 32,35 (34) 44,12 (15) 0,53 (0,47)
Генотип ТС 52,5 (88) 44,12 (46) 41,18 (14) 1,01 (0,32)
Генотип СС 12,7 (20) 23,53 (24) 14,70 (5) 0,03 (0,87)
Т113М Аллель ГЬ-9*Т 81,36 80,68 81,82 0,09 (0,76)
Аллель ГЬ-9*М 18,69 19,32 18,18
Генотип ТТ 66,67 (112) 66,67 (69) 64,46 (22) 0,01 (0,98)
Генотип ТМ 30,32 (51) 30,95 (32) 34,71 (11) 0,01 (0,99)
Генотип ММ 3,01 (5) 2,38 (3) 0,83 (1) 0,01 (1,00)
Примечание: * - различия достоверны (р<0,05) в сравнении с контрольной группой и с группой больных без удвоенного уровня креатинина
При анализе концентрации иммуноглобулинов у больных ХГН, в зависимости от наличия и выраженности ХПН (табл. 4) установлено, что, во-первых, больные ХГН без ХПН отличаются от контрольной группы лишь по высокому содержанию 1§0 (20,28г/л против 12,42 г/л в контроле, р<0,001). Во-вторых, больные ХГН с ХПН существенно отличаются от контрольной группы по уров-
ню рассмотренных иммуноглобулинов: концентрация 1^Л (3,96 г\л) и 1^0 (16,94 г/л) выше, а содержание 1^М (2,43 г/л) ниже, чем в контроле. Следует отметить достоверные различия по уровню 1§0 между больными ХГН с ХПН (16,94 г/л) и без ХПН (20,28 г/л, р<0,01). В-третьих, с увеличением степени ХПН возрастает концентрация 1§Л и снижается содержание 1^М и 1^0.
Таблица 2
Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов TNFa -3080/Л, Lta -2500/Л, ТМГЯ1 -36Л/0 и TGFpl-869T/C у больных ХГН и в контрольной группе (%)
Ген Аллели, генотипы Контрольная группа (п=168) Больные ХГН с ТХПН(п=64) Критерий различий при^Ч, х2(р) ОЯ (95% СІ)
Т№а-308 АллельТ№*1 88,36 86,51 0,03 (0,86) 1,09 (0,44-2,73)
АллельТ№*2 11,64 13,49
ГенотипТОТ 1/Т№ 1 78,61 (132) 76,20 (49) 0,02 (0,88) 0,89 (0,43-1,82)
ГенотипТОТІ/ТОТ^ 19,50 (33) 20,60 (13) 0,01 (1,00) 1,06 (0,51-2,23)
ГенотипТОТ^/ТОТ^ 1,89 (3) 3,20 (2) 0,02 (0,90) 1,52 (0,20-13,30)
Ltа-250 Аллель Lta*1 30,95 30,16 0,01 (1,00) 0,95 (0,50-1,82)
Аллель Lta*2 69,05 69,84
Генотип Lta1/Lat1 8,93 (15) 9,50 (6) 0,01 (1,00) 1,12 (0,40-3,81)
Генотип Lta1/Lta2 44,05 (74) 41,30 (26) 0,10 (0,75) 0,88 (0,49-1,67)
Генотип Lta2/Lta2 47,02 (79) 49,20 (32) 0,07 (0,80) 1,08 (0,60-1,96)
ютю Аллель ТОТЯ^А 45,52 60,32* 3,82 (0,05) 0,56 (0,31-0,99)
Аллель ТОТЯ^О 54,48 39,68*
Генотип АА 22,76 (38) 42,90* (28) 9,16 (0,01) 2,53 (1,31-4,88)
Генотип АО 45,52 (76) 34,90 (22) 1,81 (0,18) 0,63 (0,34-1,16)
Генотип ОО 31,72 (54) 22,20 (14) 1,89 (0,17) 0,60 (0,30-1,18)
О', ю 00 1 % о Н Аллель ТОБ в 1*Т 61,60 57,14 0,25 (0,62) 0,81 (0,44-1,48)
Аллель ТОБ в 1*С 38,40 42,86
Генотип ТТ 35,8 (60) 31,75 (20) 0,24 (0,63) 0,84 (0,45-1,57)
Генотип ТС 52,5 (88) 50,79 (33) 0,01 (1,00) 0,96(0,53-1,74)
Генотип СС 12,7 (20) 17,46 (11) 0,71 (0,40) 1,61 (0,69-3,82)
Примечание: * - различия достоверны между больными и контрольной группой (р<0,05).
Таблица 3
Уровень иммуноглобулинов А, М, О у больных ХГН и в контрольной группе (г/л)
Иммуноглобулины Больные ХГН (п=164) Контроль (п=62) Р
І8 А 3,75±14 2,98±0,15 р<0,001
1§М 2,81±0,09 2,80±0,14 р<0,05
1§о 18.85± 0,56 12,42±0,73 р<0,001
Таблица 4
Уровни иммуноглобулина в зависимости от степени ХПН (в г/л)
Выраженность ХПН N ^Л ^М
Без ХПН 83 3,50±0,21 3,13±0,12 20,28±0,85***
С ХПН 83 3,96±0,18** 2,43±0,11 16,94±0,69**
1-11 степени ХПН 29 3,73±0,31* 2,75±0,23 19,32±1,24***
III степень ХПН 45 4,0±60,23*** 2,1±0,10** 15,36±0,72**
Контрольная группа 62 2,98±0,15 2,80±0,15 12,42±0,74
Примечание: * - р<0,005; ** - р<0,01; *** - р<0,001 (сравнение групп больных с контролем).
1,4
1,2
1,0
0,8
0,6
0,4
0,2
0,0
-0,2
-0,4
-0,6
-0,8
-1,0
-1,2
контроль
I ст.ХПН
1-11 ст. ХПН
без ХПН
-1,0 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 0,0 0,2 0,4
0,6 0,8
1,0
1,2
1,4
1,6
Рис. 1. Расположение в пространстве двух главных факторов групп больных ХГН в зависимости от степени ХПН.
Таким образом, формирование ХПН и степень её выраженности оказывают значимое влияние на гуморальный иммунитет, обусловливая повышение уровня ^Л и уменьшение содержания 1§;М и при развитии и прогрессировании ХПН.
Наличие значимой дифференцировки групп больных с разной степенью ХПН по содержанию иммуноглобулинов ^Л, ^М, как между собой, так и с контрольной группой выявлено и при факторном анализе. На основе метода главных компонент выде-
лено два значимых фактора с вкладом в общую дисперсию признака 99,94% (вклад первого фактора - 54,65%, второго - 45,28%). Анализ графического расположения групп больных с разной степенью ХПН и контрольной группы в пространстве двух главных факторов (рис. 1) свидетельствует о том, что группа больных с III степенью ХПН по уровню иммуноглобулинов максимально отличается как от контрольной группы, так и от пациентов без ХПН.
С использованием дискриминантного ХПН. Для этих двух групп больных получе-
анализа проведено изучение двух групп ны две дискриминантные функции (табл. 5).
больных - пациенты без ХПН и пациенты с
Таблица 5
Коэффициенты линейных дискриминантных функций для больных хроническим
гломерулонефритом без ХПН и с ХПН
Признаки Пациенты без ХПН п=87 Пациенты с ХПН п=77
Иммуноглобулин А 0,298 0,688
Иммуноглобулин М 1,935 1,559
Иммуноглобулин О 0,272 0,175
Константа -6,958 -5,668
Таблица 6
Значения критериев отбора для признаков, включённых в дискриминантный анализ
Признаки Критерий Уилкса Б-критерий Р Толерантность (Т)
Иммуноглобулин А 0,920 12,69 0,0002 0,770
Иммуноглобулин М 0,873 5,41 0,021 0,895
Иммуноглобулин О 0,912 12,69 0,0005 0,732
Изученные нами все три иммуноглобулина (^Л, ^М, ^О) при дискриминантном анализе дали значение критерия Уилкса 0,845, при Б(3,160)=9,80 и р<0,001. Эти данные позволяют заключить, что две рассматриваемые нами группы больных (с ХПН и без ХПН) по набору из трёх изученных иммуноглобулинов демонстрируют неслучайную межгрупповую вариацию. Значения критериев Уилкса, Б-критериев, вероятности Р, а также показателей толерантности для каждого из выявленных в дискриминантном анализе иммуноглобулинов представлены в табл. 6.
Анализ Б-критериев и показателей вероятности статистической ошибки 1 -го рода (р) по отдельным иммуноглобулинам свидетельствует о том, что по всем изученным иммуноглобулинам р<0,05, и это позволяет их использовать при дискриминартном анализе. Значения толерантности по рассматриваемым иммуноглобулинам (Т=0,77-0,89) существенно выше критического уровня Т<0,10 [3], что исключает мультиколлениарность данных признаков т.е. отсутствуют высокие взаимные корреляции этих признаков, наличие которых снижает точность оценок. Точность распознания индивидуумов относящихся к
группе больных с ХПН составляет 89,61%, а без ХПН - 68,96%. В среднем процент правильных дискриминаций в группы больных хроническим гломерулонефритом с ХПН и без ХПН на основе данных о содержании иммуноглобулинов А, М, О составляет 78,66%.
С помощью полученных коэффициентов дискриминантных функций, на основе данных об уровнях 1^А, 1^М, 1§О у конкретного больного с хроническим гломерулонефритом можно определить его принадлежность к группе пациентов без ХПН или к группе больных с ХПН. Уравнение линейной дискриминантной функции (ЛДФ) имеет следующий вид:
у = аіхі+а2х2+азхз+.. ,+апхп+ С, где хі - информативные признаки, а; - коэффициенты для данных признаков, С - константа.
В нашем случае уравнения ЛДФ будут следующими:
- для отнесения в группу больных без ХПН
у =-6,958+ 0,298хі+1,935х2+0,272хз
- для отнесения в группу больных с ХПН у = -5,668+0,688хі+1,559х2+0,175хз,
где хі - уровень иммуноглобулина А,
х2 - уровень иммуноглобулина М, х3 - уровень иммуноглобулина О.
В вышеуказанные уравнения ЛДФ подставляются значения концентрации соответствующих иммуноглобулинов у конкретного пациента и рассчитываются новые признаки -у. Пациента следует отнести в ту группу больных ХПН, для которой новый признак у является максимальным.
Например, у пациента П, с хроническим гломерулонефритом определенны следующие концентрации иммуноглобулинов 1^А -
6,74 г/л, ^М - 2,31 г/л, ^О - 12,4 г/л. Подставляем эти значения признаков в два вышеуказанных уравнения ЛДФ и находим в каждом уравнении новый признак у.
у (больные без ХПН) = -6,958+ +0,298-6,74+1,95-32,31+0,272-12,4=2,89
у (больные с ХПН) = -5,668+0,688-6,74+ +1,559-2,31+0,175-12,4=4,74
Максимальное значение нового признака у для данного пациента выявлено при расчётах в уравнении ЛДФ для больных с ХПН, что позволяет отнести этого пациента в группу больных с ХПН. Дальнейшее детальное клинико-лабораторное обследование данного пациента подтвердило наш прогноз - у пациента П. была обнаружена ХПН.
Таким образом, следует отметить, что больные хроническим гломерулонефритом с ХПН характеризуются значительными изменениями гуморального иммунитета, выраженность которых возрастает при повышении степени ХПН (увеличение уровня 1^А и снижение 1^М и 1^0).
Разработанная нами модель дифференциальной диагностики форм хронического гло-мерулонефрита с ХПН и без ХПН позволяет прогнозировать развитие ХПН, что будет улучшать качество диагностики почечной недостаточности у больных хроническим гломерулонефритом и способствовать эффективной реализации комплекса мероприятий по предупреждению хронической почечной недостаточности.
Таким образом, нами изучено распределение частот аллелей и генотипов генов фактора некроза опухоли а, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, трансформирующего
фактора роста ß и интерлейкина 9 у больных ХГН. Выявлены факторы риска неблагоприятного течения ХГН, что проявляется удвоением исходного уровня креатинина. Ими оказалось носительство аллеля А и генотипа АА гена рецептора фактора некроза опухоли 1 типа. Наши результаты согласуются с данными исследований В.П. Завьялова [4] и
H.Н. Коряковой [7], выявивших повышенный уровень провоспалительных цитокинов - рецептора фактора некроза опухоли 1 типа и фактора некроза опухоли а, соответственно, в сыворотке крови пациентов с хронической почечной недостаточностью.
Следует отметить, что больные хроническим гломерулонефритом с ХПН характеризуются значительными изменениями гуморального иммунитета, выраженность которых возрастает при повышении степени ХПН (увеличение уровня IgA и снижение IgM и IgG). Полученные нами результаты соответствуют литературным [1], где также были выявлены значительные изменения содержания ряда иммуноглобулинов у больных с хронической почечной недостаточностью.
Разработанная нами модель дифференциальной диагностики форм хронического гло-мерулонефрита с ХПН и без ХПН позволяет прогнозировать развитие ХПН, что будет улучшать качество диагностики почечной недостаточности у больных хроническим гломерулонефритом и способствовать эффективной реализации комплекса мероприятий по предупреждению хронической почечной недостаточности.
ЛИТЕРАТУРА
I. Алиев Р.А. Роль этиологических и других факторов в развитии хронической почечной недостаточности // Нефрология и диализ. -2001. - Т. 3, № 3. - С. 358-364.
2. Вашурина Т.В., Сергеева Т.В. Цитокины и адгезивные молекулы в патогенезе хронического гломерулонефрита // Нефрология и диализ. - 2002.- № 4.- С. 232-239.
3. Дерябин В.Е. Многомерные биометрические методы для антропологов. - М.: ВИНИТИ, 2001.- С. 105-265.
4. Завьялов В.П. Цитокины и их роль в межклеточных взаимодействиях // Вестн. Рос. АМН. - 1995. - № 2. - С. 8-10.
5. Иванов В.П., Полоников А.В. Полиморфизм гена NAT 2 при инфекционно-аллергической
