CC BY
33
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2019
Ефимова Е.Л., Янно Л.В., Прохоренко О.А., Кабакова Н.А.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ПЕРСОНАЛА ОБЪЕКТОВ УНИЧТОЖЕНИЯ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ В ПЕРИОД ВЫВЕДЕНИЯ ИЗ ЭКСПЛУАТАЦИИ
Федеральное государственное унитарное предприятие «Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека» Федерального медико-биологического агентства, 188663, Ленинградская область, Всеволожский район, г.п. Кузьмоловский
В работе изложены результаты проведенного в 2016-2018 гг. комплексного иммунологического обследования персонала объектов по уничтожению химического оружия (ОУХО) «Марады-ковский», «Леонидовка», «Почеп» и «Щучье». Исследование включало показатели врожденной неспецифической защиты, клеточного и гуморального звеньев иммунного ответа, аллергологи-ческого статуса и онкомаркеров, а также иммунорегуляторного индекса и индекса аллергиза-ции. Оценка результатов комплексного иммунологического исследования персонала объектов УХО «Марадыковский», «Почеп», «Леонидовка» и «Щучье» показала наличие иммунологических отклонений у большинства работников объектов, имеющих однонаправленный характер и не зависящих от контакта с фосфороорганическими веществами (ФОВ). Превалировали изменения преимущественно одного звена, чаще Т-клеточного, отмеченные более чем у половины всех обследованных лиц и характеризовавшиеся как признаками иммуносупрессии, так и признаками активации. Изменения фагоцитарной активности заняли второе место и преобладали у работников, имевших контакт с ФОВ, преимущественно за счет повышения показателей, что характеризует активацию механизмов неспецифической резистентности. Отклонения показателей в двух звеньях преимущественно были представлены сочетанием нарушений Т-клеточного звена и фагоцитарной активности. Изменения гуморального звена у персонала объектов встречались за счет единичных случаев отклонений содержания иммуноглобулинов, из которых лидировала гипериммуноглобу-линемия класса A. Более половины всех выявленных отклонений носили пограничный характер, а остальные - умеренный. Привлекают внимание преобладание сниженных значений иммунорегуляторного индекса (ИРИ), и превалирующее повышение индекса аллергизации (ИА), особенно часто отмеченных среди работников ОУХО «Марадыковский» (снижение ИРИ у 75,0 % и повышение ИА у 54,2 %). Таким образом, исследования иммунологической реактивности персонала объектов, характеризовавшиеся признаками напряжения компенсаторных механизмов иммунологической регуляции и повышения риска развития сенсибилизации, показали необходимость динамического наблюдения с проведением иммунологического мониторинга у работавших лиц.
Ключевые слова: иммунная система; персонал; иммунологическое обследование, клеточный, гуморальный иммунный ответ; химическое оружие; фосфороор-ганические вещества.
Для цитирования: Ефимова Е.Л., Янно Л.В., Прохоренко О.А., Кабакова Н.А. Оценка результатов исследования иммунологической реактивности персонала объектов уничтожения химического оружия в период выведения из эксплуатации. Медицина экстремальных ситуаций. 2019 21(3): 416-428.
Для корреспонденции: Ефимова Елена Леонидовна, науч. сотрудник лаборатории Клиники профессиональных заболеваний и отдаленных последствий действия химических веществ № 51 ФГУП «НИИ ГПЭЧ ФМБА», 188663, Ленинградская область, Всеволожский район, г.п. Кузьмоловский. E-mail: shel507@yandex.ru
Efimova E.L., Yanno L.V., Prokhorenko O.A., Kabakova N.A.
ASSESSMENT OF THE RESULTS OF EXAMINATION OF THE IMMUNE REACTIVITY OF THE PERSONNEL OF CHEMICAL WEAPONS DESTRUCTION FACILITIES AT THE DECOMMISSIONING STAGE
Research Institute of Hygiene, Occupational Pathology, and Human Ecology Federal State Unitary Enterprise, Federal Medical Biological Agency, Saint Petersburg, 188663, Russian Federation
The results of a comprehensive immunologic examination of the staff personnel of the Maradykovsky, Leonidovka, Pochep and Shchuch'e chemical weapons destruction facilities (CWDFs) in 2016-2018 are presented. Indices of congenital nonspecific protection, cellular and humoral links of the immune
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
response, the allergic status, and oncomarkers, as well as immunoregulatory and allergic sensitization indices were analyzed. Unidirectional immune deviations were revealed in most workers, irrespective of the degree of occupational contact with organophosphorus compounds (OPS). Changes, predominantly in one, T-cellular, link were observed in half of the examined persons and were characterized both by signs of both immune suppression and activation. The second most common deviations were observed in the phagocytic activity. Such deviations revealed themselves in increased indices relating to nonspecific resistance activation and prevailed in workers who had contact with OPS. The deviations in two links were mainly presented by a combination of deviations in the T-cellular link and phagocytic activity. Changes in the humoral link were quite rare and related to immunoglobulin concentrations, among which hyper-IgA was prevalent. More than half of the revealed deviations had a boundary character, and the others were moderate. The prevalence of reduced immunoregulatory index (to 75,0%) and increased allergic sensitization index (up to 54,2%) were most frequently detected in workers of the Maradykovsky CWDF. Analysis of the immune reactivity of the staffpersonnel of the CWDFs revealed signs of exertion in the compensatory mechanisms of immune regulation and an increase in the risk for the development of allergic sensitization, not directly related to the degree of occupational contact with OPhC, gave evidence for the necessity of monitoring the immune status of workers. Keywords: immune system; personnel; immunological research, cellular, humoral immune response; chemical weapons.
For citation: Efimova E. L., Yanno L.V., Prokhorenko O.A., Kabakova N.A. Assessment of the results of examination of the immune reactivity of the personnel of chemical weapons destruction facilities at the decommissioning stage. Meditsina ekstremal'nykh situatsiy (Medicine of Extreme Situations, Russian journal) 2019; 21(3): 416-428. (In Russian).
For correspondence: Elena L. Efimova, MD, Researcher at the Laboratory "Clinic for Occupational Diseases and the Long-Term Effects of Chemicals" No. 51,Research Institute of Hygiene, Occupational Pathology and Human Ecology, Federal Medical Biological Agency, St. Petersburg, 188663, Russian Federation. E-mail: shel507@yandex.ru
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest. Acknowledgments. The study had no sponsorship. Received: April 17, 2019 Accepted: September 09, 2019
Введение
Накопленный за последние годы достаточный объем литературных данных, посвященных исследованию длительного воздействия на организм низких доз химических ксенобиотиков, позволил установить высокую чувствительность иммунной системы к неблагоприятным воздействиям веществ различной природы. ФОВ, являясь стойкими соединениями, способными длительное время сохраняться в почвах, растениях и животных тканях, представляются одними из наиболее опасных ксенобиотиков. Ведущим звеном в поражении ФОВ и механизме их действия на биологические структуры является нарушение каталитической функции ферментов холинэстераз, в результате чего происходит накопление ацетилхолина в тканях центральной нервной системы и других органов. У лиц, имеющих контакт с низкими и подпороговыми дозами токсических веществ, торможение активности эстераз им-
мунокомпетентных клеток, вызываемое ФОВ, приводит к иммунологическим нарушениям: В-лимфопении, снижению абсолютного и относительного числа Т-лимфоцитов CD3+ и CD4+ на фоне относительного лимфоцитоза, нейтро-пении, ретикулоцитоза. Вместе с тем, показатели гуморального звена практически не меняются. Среди персонала, обслуживающего объекты УХО, повышен процент лиц с высокой фагоцитарной активностью нейтрофилов [1]. Нарушения клеточного иммунитета являются наиболее характерными для персонала объекта хранения химического оружия, оснащенного ФОВ. Ранее проведенные исследования показали способность ФОВ ингибировать в большей степени ацетилхолинэстеразу на клеточной мембране лимфоцитов Th1-типа [2]. Работа в условиях профессионального контакта с ХО, продолжительностью более 5 лет, способствует развитию в иммунной системе персонала комплекса структурно-функциональных нарушений, кото-
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
рые можно квалифицировать как вторичное им-мунодефицитное состояние Т-клеточного типа с нарушением функциональной активности им-мунокомпетентных клеток (ИКК) [3].
Важно отметить, что основной характеристикой состояния иммунной системы лиц, работающих на объекте по уничтожению химического оружия, являются не только изменения отдельных показателей, но наличие дисбаланса в работе ее звеньев вследствие наибольшей чувствительности системы регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов. Активация и функциональная несостоятельность Т-клеточного звена в дальнейшем может привести к развитию аутоиммунных и аллергических процессов [4].
Иммунная система является одной из наиболее чувствительных биомишеней в организме, и поэтому результаты иммунологических исследований могут выступать в качестве наиболее ранних и дополнительных экспертных критериев при установлении причинной связи заболеваний с вредными условиями труда на объектах УХО, позволяя своевременно отслеживать состояние здоровья персонала с целью профилактики риска развития иммунопатологии и аллергологических заболеваний.
Цель работы - оценка особенностей иммунологической реактивности персонала объектов УХО «Марадыковский», «Леонидовка», «Почеп» и «Щучье» в период выведения объектов из эксплуатации для выявления клинических и лабораторных признаков патологических изменений.
Материал и методы
Комплексное иммунологическое обследование работников объектов УХО «Марадыков-ский» (199 ), «Леонидовка» (178), «Почеп» (140) и «Щучье» (149 человек) проводилось в течение трех лет с 2016 по 2018 г и включало определение субпопуляций лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+, CD56+, CD20+) в периферической крови с применением иммуноцитохимического (стреп-тавидин-биотинового) метода и системы визуализации (NovocastraNCL, Великобритания) [5], с расчетом иммунорегуляторного индекса (ИРИ); содержания иммуноглобулинов классов А, М, G в сыворотке крови турбодиметричес-ким методом на биохимическом анализаторе Furuno СА 400 с использованием коммерческих
реагентов (AuditDiagnostics (Ирландия), Randox (Великобритания); общего иммуноглобулина Е в сыворотке крови методом иммунохимии на анализаторе Multiskan Ascent (Финляндия) с использованием наборов реактивов производства ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск; исследование показателей фагоцитоза (по числу фагоцитирующих клеток, фагоцитарый индекс, %, и способности к поглощению опсонизированных частиц зимозана в среднем на фагоцит, фагоцитарное число, усл. ед.) [6]; определение уровня аутоантител к антигенам клеток нервной системы (S100, GFAP, ОБМ, 5HT-Rc, Ach-Rc, DOPA-Rc, GABA-Rc, Glu-Rc, NF-200, V-Ca-channel, beta-эндорфину и опиоидным ^-рецепторам) методом Эли-Нейро-12-Тест с использованием тест-системы ООО МИЦ «Иммункулус», г. Москва [7]; определение онкомаркеров (РЭА, СА-19-9, СА-15-3, СА-125, АФП, ПСА общ.) в сыворотке крови иммунохимическим методом на анализаторе MultiskanAscent (Финляндия), с использованием коммерческих тест-систем ЗАО «Вектор-Бест», Россия. По результатам лейкоцитограммы был рассчитан индекс аллер-гизации (ИА) [8,9].
Основной контингент обследованных имел стаж работы на ОУХО 5-11 лет, в зависимости от контакта с ФОВ, работники на каждом объекте были разделены на две группы: 1-я группа -основная (лица, имевшие постоянный контакт с ФОВ, 112 человек в 2016 г., 143 - в 2017 г. и 114 - в 2018 г.), 2-я группа - сравнения (без контакта с ФОВ, 76 человек в 2016 г., 117 - в 2017 г. и 104 - в 2018 г.).
Статистическая обработка проводилась при помощи программы «БиоСтат 2007» для анализа качественных признаков методом исследования критического значения %- квадрат в сопряженных таблицах. Различия считались статистически значимыми при уровне значимостиp < 0,05.
Результаты
Клинико-иммунологическая оценка состояния персонала объектов УХО. Результаты ал-лергологического и иммунологического опроса персонала объектов за 2016-2018 гг. показали различную частоту клинических проявлений сенсибилизации и иммунологический недостаточности у обследованных лиц. Среди ра-
ботников ОУХО «Марадыковский» отмечен рост клинических проявлений инфекционно-воспалительной патологии в 2017 и 2018 гг. и сокращение числа лиц этой категории среди персонала ОУХО «Леонидовка» и «Щучье» в 2018 г. (рис. 1).
Необходимо отметить, что при проведении аллергологического и иммунологического опроса в 2018 г. наличие клинических признаков сенсибилизации и иммунологической недостаточности указали 42,3% работников основной группы ОУХО «Почеп» и 52,2% основной группы объекта «Марадыковский». В то же время, на объектах «Леонидовка» и «Щучье» частота аллергических проявлений в группе сравнения со статистически значимым различием (р < 0,05) превышала частоту аллергических проявлений у работников основной группы.
При последнем исследовании (2018 г.) среди персонала ОУХО «Марадыковский» число лиц с лабораторными отклонениями и сочетанием клинических и лабораторных изменений было практически одинаковым в обеих группах, в то время как на остальных трех объектах преобладали лица, имеющие только лабораторные нарушения.
Характеристика периферического состава крови персонала объектов УХО. По результатам исследования клинического анализа крови у персонала объектов УХО изменения периферического состава имели от 46 до 62% работников. Из отклонений лидировал лимфоцитоз, выявленный практически в равной степени среди всех обследованных в течение всего периода наблюдений (от 18,9 до 39,0%), и не зависящий от контакта с ФОВ. Из прочих изменений следует отметить нейтропению, тромбоцитопению, лейкопению, ретикулоцитоз и эозинофилию.
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
ОУХО «Марадыковский»
38
2016 2017 2018
Год
ОУХО «Почеп»
2016 2017 2018
Год
ОУХО «Леонидовка»
ОУХО «Щучье»
Год
В Аллергический синдром | Инфекционно-воспалительный синдром □ Рецидивирующий герпес В Сочетанная патология
Рис. 1. Частота иммунологической и аллергологической патологии по результатам опроса персонала ОУХО «Марадыковский», «Леонидовка» и «Щучье» в 2016-2018 гг., %.
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Таблица 1 Сравнительная оценка частоты отклонений индекса аллергизации в зависимости от ОУХО и наличия контакта с ФОВ, %
Показатель Год «Марадыковский» «Почеп» «Леонидовка» «Щучье»
основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего
количество лиц с отклонениями, %
Повышенный индекс аллергизации 2016 27,3 - 27,3 35,7 0 27,3 65,0 45,8 51,9 40,5 - 40,5
2017 50,9 51,8 51,4 38,5 52,0 45,1 47,4 46,2 47,1 34,6 36,4 35,4
2018 54,2 54,3 54,2 42,3 59,3 50,9 33,3 35,7 34,0 35,5 24,1 30,0
По результатам лейкоцитограммы для всех обследованных был рассчитан индекс аллерги-зации (ИА). Наиболее часто повышение ИА отмечалось среди работников объекта «Леонидов-ка» в 2016 г., с акцентом в группе с постоянным контактом с ФОВ (65,0%), а к 2018 г. повышенные значения ИА чаще имели работники ОУХО «Марадыковский» (54,2%). Следует отметить, что, если в 2016 г. клинические признаки аллергических проявлений указали лишь четверть из всех работников с повышением ИА на объектах «Марадыковский» и «Почеп», то по результатам 2017 г выявлено практически двукратное увеличение числа лиц с повышением ИА (табл. 1).
Таким образом, периферический состав крови персонала объектов УХО в период 20162018 гг. характеризовался стабильным лимфо-цитозом в сочетании с нейтропенией, и нередко сопровождался повышением ИА, что отражает напряженный иммунный ответ у лиц, работающих в условиях производственного контакта с ФОВ. Проведенное исследование наглядно продемонстрировало, что ИА может быть показателем не только существующих аллергических реакций и заболеваний, но и проявлением доклинической латентной сенсибилизации.
Общая характеристика иммунологической реактивности персонала ОУХО по результатам комплексного иммунологического исследования в 2016—2018 гг. Анализ результатов комплексного иммунологического обследования показал высокий процент лиц с изменениями иммунного статуса, практически одинаковый у большинства персонала всех объектов за все годы наблюдения - от 76,2% работников УХО «Щучье» в 2016 г. до 90,6% лиц «Почеп» в 2018 г.. Необходимо отметить, что в большин-
стве случаев отклонения носили пограничный характер, а в остальных - умеренный.
В период наблюдения за 2016-2018 гг. иммунологические изменения у персонала объектов в целом имели однонаправленный характер (рис. 2).
Более чем у половины работников наблюдались изменения только одного звена, чаще Т-клеточного, отклонения со стороны которого имели до % всех обследованных лиц. Так, реже всего изменения Т-клеточного звена отмечались у работников ОУХО «Щучье» (38,1%), наиболее часто - среди персонала объекта «По-чеп» в том же 2016 г. (75,0%).
Обращает на себя внимание схожий характер изменений Т-клеточного звена у персонала объектов УХО, среди которых превалировало снижение абсолютного числа СD3+ и CD4+ Т-лимфоцитов, в последнем исследовании 2018 г. наиболее выраженные у персонала объектов «Марадыковский» и «Леонидовка». У работников основной группы объекта «Леонидов-ка» активация отмечена наиболее часто, за счет повышения относительного содержания CD4+ и СD8+ Т-лимфоцитов. В 2017 г. у работников ОУХО «Марадыковский» отмечена активация В-лимфоцитов CD20+, с акцентом в группе с постоянным контактом с ФОВ (20,8%).
На объекте «Почеп» число работников с признаками угнетения Т-клеточного звена, представленных преимущественно снижением абсолютного содержания субпопуляций Т-лимфоцитов, наиболее выраженных в 2016 г., в последнем исследовании 2018 г. значительно сократилось, но существенно выросло число лиц с признаками активации иммунного ответа за счет роста случаев повышения относительной экспрессии CD4+
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
100
* i 80 О s
m x 60
c5 i 60
CD ¿ 40 -
Ü 20£ о 0
87,1 86 2 88,1
ОУХО «Марадыковский»
71,6 66,1
45,2 ГШ 367 -L 47,5
ill П% ГНИ.
Всего
1-г
Т-клеточного Гуморального Фагоцитарной звена звена активности
Изменения
^ о
ОУХО «Почеп»
66
861 90,6 ss 100 75 66
i II : ДЛ
Ы О 0 --i -
Всего Т-клеточного
49,1
Т-клеточного Гуморального Фагоцитарной звена звена активности
Изменения
a-s 100-1
* ! 80 О s
m х 60
cd £ 40
Ц 20
£ О 0
ОУХО «Леонидовка»
1 S80,4JS 74,7 686
68,6 64,6
17,6 16,7
43,1 43,8
Всего
Т-клеточного Гуморального Фагоцитарной звена звена активности
Изменения
a-s 100
* ! 80-
о
60
СО X
Б X CD ¿ 40
Ü 20 £ о 0
76,2 83,7 79,3
ОУХО «Щучье» 71,4
429 38,8 34,5
Всего
Т-клеточного Гуморального Фагоцитарной звена звена активности
Изменения
Год:
2016 □ 2017 ■ 2018
Рис. 2. Число лиц с изменениями иммунной системы в целом на ОУХО "Марадыковский», "Почеп", "Леонидовка» и "Щучье» в 2016-2018 гг.
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
х
си
X
о
с; ^
н о
го
I-
о &
го :т
80 70 60 50 40 30 20 10 0
71,4
«Марадыковский»
73,1
«Почеп»
66,7
50
1 л
45,5
26,71
40 40
11,1
II
16,7 16,7
-клеточное звено: I основной группы \ группы сравнения
Гуморальное звено: ■ основной группы 0 группы сравнения
«Леонидовка»
Фагоцитоз: ■ основной группы й группы сравнения
«Щучье»
Онкомаркеры: ■ основной группы группы сравнения
Рис. 3. Частота отклонений показателей иммунной системы персонала ОУХО в 2018 г. по звеньям в зависимости от контакта с ФОВ, %.
Т-лимфоцитов, и абсолютного числа цитотокси-ческих Т-лимфоцитов (CD8+). Среди работников объекта «Марадыковский» признаки супрессии и активации Т-клеточного ответа были выражены практически в равной степени и в совокупности с наибольшим числом лиц со снижением иммунорегуляторного индекса (ИРИ) и наибольшим числом лиц с повышением ИА.
Дальнейшие исследования показали тенденцию к сокращению различий к 2018 г., когда изменения Т-клеточного ответа имели от 55,2% работников объекта «Щучье» до 66,1% лиц на ОУХО «Почеп». Частота и характер отклонений Т- и В-клеточного звена не зависели от контакта с ФОВ и характеризовались однонаправленными изменениями у персонала всех объектов (рис. 3).
В последнем исследовании 2018 г. наметилась тенденция к нарастанию признаков активации иммунного ответа обследованного персонала. Среди них преобладало повышение относительного содержания CD4+ и цитотоксических CD8+ Т-лимфоцитов, преимущественно у работников ОУХО «Марадыковский» и «Почеп», с акцентом у лиц основных групп (табл. 2).
Повышение относительного содержания В-лимфоцитов (CD20+) больше всего отмечено среди работников основной группы объекта
«Щучье», что, в свою очередь, отразилось в наибольшем проценте лиц с гипериммуно-глобулинемией всех классов среди персонала ОУХО «Щучье» (см. рис. 3).
К особенностям иммунологической реактивности лиц, работающих на объектах УХО, следует отнести стабильное преобладание сниженного ИРИ, более, чем у половины работников всех объектов УХО. В ходе исследования установлено, что снижение функционального индекса ИРИ наиболее часто имели работники ОУХО «Марадыковский» (69,5% в 2018 г.) и «Леонидовка» (72,0 и 68,1% в 2017 и 2018 гг. соответственно), что коррелирует со степенью иммуносупрессии Т-клеточного звена у работников объектов. В то же время, последнее исследование показало снижение ИРИ при нормальных показателях CD4+ и СD8+ Т-лимфоцитов у 66,7% работников основной группы объекта «Марадыковский», и только у 33,3% лиц это было обусловлено повышением значений CD8+, а у персонала основной группы объекта «Почеп» наблюдалось обратное соотношение. Учитывая, что ИРИ рассчитывается из соотношения относительного числа CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов, снижение только ИРИ у практически здоровых
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
Таблица 2
Сравнительная оценка частоты отклонений Т-клеточного ответа в зависимости от ОУХО и наличия контакта с ФОВ в 2018 г., %
Показатель,
«Марадыковский»
«Почеп»
«Леонидовка»
«Щучье»
группа
референтное значение основная, n = 24 сравнения, n = 35 основная, n = 26 сравнения, n = 27 основная, n = 33 сравнения, n = 14 основная, n = 31 сравнения, n = 27
CD3+, % î 4,2 5,7 11,5 11,1 0 0 6,4 18,5
(N = 50-80) 4 0 0 0 0 12,1 14,3 0 0
Ш3+,109/л î 0 0 7,7 3,7 3,0 0 0 3,7
(N = 1,0-2,4) 4 20,8 40,0 15,4 18,5 39,4 35,7 12,9 11,1
CD4+, % î 25,0* 5,7 30,8 18,5 0 0 9,7 29,6
(N = 31-50) 4 0 0 0 0 15,1 35,7 6,4 0
Ш4+,109/л î 0 0 3,9 0 0 0 0 3,7
(N = 0,6-1,7) 4 16,7 34,3 3,9 7,4 48,5 42,9 22,6 7,4
CD8+, % î 25,0 17,1 34,6 25,9 0 0 19,3 7,4
(N = 16-39) 4 0 0 0 0 0 0 0 3,7
Ш8+,109/л î 0 2,8 7,7 11,1 3,0 0 3,2 7,4
(N = 0,3-1,0) 4 0 5,7 3,9 0 18,2 7,1 3,2 0
CD56+, % î 8,3 5,7 11,5 7,4 0 0 0 14,8
(N = 5-25) 4 0 0 0 0 3,0 0 0 0
Ш56+,109/л î 0 0 0 3,7 0 0 0 3,7
(N = 0,045-0,7) 4 0 0 0 0 0 0 0 0
CD20+, % î 16,7 14,3 7,7 3,7 6,1 14,3 25,8 11,1
(N = 6-23) 4 0 0 0 0 0 0 0 0
Ш20+,109/л î 0 2,8 0 0 3,0 0 3,2 3,7
(N = 0,05-0,6) 4 0 0 0 0 0 0 0 0
ИРИ, усл. ед. î 0 0 7,7 0 0 0 3,2 3,7
(N = 1,5-2,5) 4 75,0 65,7 50,0 59,3 60,6 85,7 6,4 59,2
Примечание . Здесь и в табл. 3: | - повышенные показатели; | - сниженные показатели; * ■ различие по отношению к группе сравнения прир < 0,05.
■ статистически значимое
лиц может характеризовать функциональные нарушения Т-клеточного звена с напряжением компенсаторных механизмов иммунного ответа (табл. 3).
Изменения фагоцитарной активности как наиболее раннего и одного из самых важных компонентов врожденной неспецифической резистентности встречались несколько реже и заняли второе место, их имели от четверти до половины персонала объектов, с некоторым снижением в 2017 г. до 10-40% лиц на всех объектах. Отклонения были представлены как снижением, так и повышением показателей, характер изменений фагоцитарного звена различался в зависимости
от объекта и контакта с ТВ, и также претерпел изменения при наблюдении (табл. 4, рис. 4).
Как видно из представленной диаграммы, в 2016 г. у работников ОУХО «Марадыков-ский» и «Щучье» преобладали повышенные показатели фагоцитоза, а у персонала объекта «Леонидовка» преобладало угнетение фагоцитарной активности (см. рис. 4).
Исследование 2017 г. показало значительное сокращение числа лиц с активацией фагоцитоза среди персонала объекта «Марадыковский» в целом, при этом у работников основной группы ОУХО «Марадыковский» и «Леонидовка» превалировало снижение показателей фагоцитарной
423
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Таблица 3 Сравнительная оценка частоты отклонений иммунорегуляторного индекса у персонала объектов в 2016-2018 гг. в зависимости от ОУХО и наличия контакта с ФОВ, %
Показатель Год «Марадыковский» «Почеп» «Леонидовка» «Щучье»
количество лиц с изменениями
основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего
ири 4 2016 68,2 - 68,2 53,6 75,0 58,3 55,0 69,5 65,8 58,5 - 58,5
2017 62,3 64,3 63,3 36,0 40,0 38,0 73,0 69,2 72,0 57,7 63,6 60,4
2018 75,0 65,7 69,5 50,0 59,3 54,7 60,6 85,7 68,1 71,0 59,2 65,5
Таблица 4
Сравнительная оценка частоты изменений фагоцитарной активности в зависимости от ОУХО и наличия контакта с ФОВ в 2016-2018 гг., %
Год «Марадыковский» «Почеп» «Леонидовка» «Щучье»
количество лиц с изменениями
основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего основная группа группа сравнения всего
2016 45,4 66,7 51,6 21,4 37,5 25,0 55,0 36,8 46,2 45,2 - 45,2
2017 19,2 29,2 24,0 16,0 4,0 10,0 37,8 15,4 32,0 40,0 40,9 40,4
2018 45,8 48,6 47,4 61,5 37,0 49,1 45,5 40,0 43,8 38,7 31,0 35,0
активности, тогда как в группе сравнения чаще встречались лица с повышением фагоцитоза. В последнем исследовании 2018 г. вновь преобладали повышенные показатели фагоцитоза, преимущественно у персонала основных групп, наиболее часто отмеченные у работников объекта «Почеп» (52,8%), с акцентом в основной группе 61,2%. У персонала ОУХО «Щучье» в ходе всего исследования стабильно превалировало повышение фагоцитарной активности (см. рис. 4).
Изменения в двух звеньях чаще были представлены сочетанием нарушений Т-клеточного звена и фагоцитарной активности, и на объектах «Почеп» и «Леонидовка» преобладали у персонала основных групп, а на ОУХО «Мара-дыковский» — у работников группы сравнения.
Отклонения гуморального звена - основного эффекторного механизма иммунного ответа, наблюдались в наименьшей степени, так же как и сочетание дисиммуноглобулинемии с откло-
60 50
н
е 40 н о л к т о
а т о
ост
а
:т
30
20
10
«Марадыковский»
«Почеп» «Леонидовка» ОУХО
«Щучье»
2016 г.:
□ Т □ I
2017 г.:
2018 г.: ■ ■
Рис. 4. Частота изменений фагоцитарной активности у персонала объектов УХО в 2016—2018 гг., %.
424
0
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
40n
I 30H
X
CD X
о
5 20
О
CO H
о
о со IT
10
«Марадыковский» «Почеп» «Леонидовка»
ОУХО
«Щучье»
2016 г.:
| Всего лиц
□ 1дАТ
2017 г.:
| Всего лиц
□ 1дАТ
2018 г.:
| Всего лиц
□ 1дАТ
Рис. 5. Частота отклонений гуморального звена и числа лиц с повышением ^Л среди персонала объектов УХО в 2016—2018 гг., %.
нениями показателей других звеньев иммунного ответа. Изменения гуморального звена характеризовались единичными случаями повышения отдельных классов иммуноглобулинов и не зависели от контакта с ФОВ. Из отклонений лидировала гипериммуноглобулинемия класса А, наиболее часто встречавшаяся у всех обследованных в 2016 г и стабильно лидирующая в течение 3 лет у работников ОУХО «Почеп».
В ходе исследования выявлена тенденция к сокращению числа работников с изменениями гуморального звена в динамике. В 2016 г снижение или повышение содержания иммуноглобулинов отмечены у 25,6% персонала ОУХО «Леонидовка» до 38,7% среди работников ОУХО «Марадыковский». К 2018 г число лиц с отклонениями среди работников ОУХО «Марадыковский» сократилось со статистически значимым различием (р < 0,05) и составило всего 8,5%, в т.ч. 8,3% среди персонала основной
группы, а для работающих на остальных объектах не превышало максимальных 22% (среди работников ОУХО «Щучье»), (рис. 5).
Изменения, более чем в двух звеньях иммунной системы, у работников всех четырех объектов УХО отмечались в единичных случаях.
Результаты скринингового исследования персонала объектов УХО на содержание онко-маркеров. Оценка результатов исследования персонала объектов на содержание онкомаркеров показала наибольшую частоту повышения их содержания среди работников ОУХО «Почеп» (25,5%) и Леонидовка» (23,5%) в 2017 г. В ходе всего периода наблюдения у всех обследованных наиболее часто встречались повышение АФП 15-3 и СА-15-3 у женщин, с акцентом у лиц старше 40 лет. Повышенное содержание С-19-9 чаще касалось работников основной группы. Повышение содержания остальных онкомаркеров отмечалось в небольшом проценте случаев (рис. 6).
Рис. 6. Частота повышения содержания онкомаркерову персонала ОУХО в 2016 - 2018 гг., %.
0
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
Результаты исследования уровня продукции органоспецифических аутоантител к белкам тканей нервной системы. В ходе исследования иммунного статуса в 2016 г. проведено определение продукции органоспецифических аутоантител методом Нейро - 12-Тест. Результаты исследования показали высокую распространенность гиперпродукции органо-специфических аутоантител к холинорецепто-рам А^-Кс у персонала всех объектов УХО, наиболее часто представленной у работников ОУХО «Марадыковский» и «Леонидовка», повышенную частоту гипопродукции аутоанти-тел к глиальным клеткам GFAP у работников основной группы объекта «Марадыковский»; и гипопродукции аутоантител к специфическому белку аксонов NF-200, с наибольшей частотой отмеченной у персонала объектов «Почеп» и «Щучье», вне зависимости от контакта с ТВ.
Обсуждение
Подводя итоги проведенного иммунологического исследования лиц, работающих в производственном контакте с ФОВ, на этапе вывода из эксплуатации объектов УХО, следует указать на однонаправленный характер изменений в целом, не зависящий от контакта с ФОВ, с невысокой частотой отклонений гуморального звена, среди которых преобладала гипериммуноглобулинемия класса А. Изменения фагоцитарной активности, выявленные от 40 до 60% работников объектов, отличались преимущественно повышением показателей, что характеризует активацию механизмов неспецифической резистентности и повышение риска формирования сенсибилизации. В течение всего периода наблюдения доминировали изменения Т-клеточного звена, отмеченные более чем у половины персонала всех объектов УХО. Обращает на себя внимание схожий характер отклонений Т-клеточного звена, обусловленный признаками супрессии, за счет снижения абсолютного числа СD3+и CD4+ Т-лимфоцитов, преобладавших у работников основной группы объекта «Леонидовка», и активацией, за счет повышения процентного содержания CD4+ и СD8+ Т-лимфоцитов. Среди работников объекта «Марадыковский» при-
знаки супрессии и активации Т-клеточного ответа были выражены практически в равной степени и сочетались с наибольшим числом лиц со снижением ИРИ и наибольшим числом лиц с повышением ИА. Развитие супрессии Т-клеточного ответа у работавших лиц в период 2016-2018 гг., обусловлено, возможно, в том числе и прекращением воздействия антигенной нагрузки [10]. Вышеуказанные особенности, очевидно, являются признаками напряжения компенсаторных механизмов иммунологической регуляции, с развитием тенденции к истощению ресурсных возможностей иммунной системы и повышением риска формирования сенсибилизации у ряда лиц. Подобные иммунологические изменения особенно часто касались персонала объекта «Марадыковский», где в 2018 г. установлен наиболее высокий процент лиц с клиническими признаками сенсибилизации и иммунологической недостаточности (52,2% работников основной группы).
Важно отметить, что подобный характер изменения функциональных расчетных индексов, с доминирующим снижением иммунорегуля-торного индекса и высокой частотой отклонений расчетного индекса аллергизации, с преобладанием повышенных значений ИА, отмечен у значительной доли персонала всех объектов УХО в период 2016-2018 гг. Таким образом, характер отклонений расчетных функциональных индексов (ИРИ и ИА) может особенно наглядно демонстрировать характер иммунологических изменений у лиц, работавших в производственном контакте с ФОВ.
Картина изменений периферического состава крови работников ОУХО, представленная лимфоцитозом, сопровождающегося ней-тропенией у большинства обследованных лиц, согласуется с характером иммунологических нарушений и служит дополнением к ним. Ней-трофилы составляют самую многочисленную группу клеток и, поскольку развитие нейтрофи-лов нарушается раньше остальных клеток, выявляется относительный лимфоцитоз, что мы и наблюдаем в наших исследованиях. У лиц, работавших в условиях производственного контакта с ФОВ, одной из причин нейтропении могут быть химические вещества, выступающие в
роли гаптенов, опосредующих разрушение ней-трофилов или их предшественников иммунной системы.
Более половины выявленных отклонений носили пограничный характер, а остальные -умеренный, следовательно, большая часть изменений иммунной системы у лиц, контактирующих с ФОВ, находясь в пределах интервала адаптивного реагирования, может иметь компенсаторный характер. Вместе с тем, индуцированная токсикантами дисгармонизация нейро-иммуно-эндокринной регуляции, которая подразумевает нарушение баланса между отдельными элементами регуляторных систем при отсутствии существенных нарушений в каждом из этих элементов, может приводить к утрате иммунологической толерантности и развитию иммунозависимой патологии. Полученное в результате многолетнего скрининга персонала объектов УХО стабильное лидирующее повышение АФП у работников не может не привлекать внимания [11]. Онкомаркер АФП, или альфа - фетопротеин - гликопроте-ин, синтез которого у взрослого человека происходит преимущественно в печени, поэтому в настоящее время его принято считать одним из самых значимых диагностических маркеров опухолей органов брюшной полости, печени или малого таза. Повышение онкомаркера СА-19-9, считающегося диагностическим он-комаркером опухолей органов желудочно-кишечного тракта, особенно поджелудочной железы, чаще отмечалось среди обследованных основной группы.
Подъем продукции органоспецифических аутоантител отражает активацию процессов апоптоза или распада субклеточных структур, что обычно происходит на ранних и активных стадиях патологических органных изменений [7]. Раннее выявление изменений в продукции органоспецифических аутоантител может служить наиболее ранним маркером латентного, хронического воздействия токсикантов на организм. Таким образом, данный вид исследования может использоваться для раннего выявления рисков формирования и клинической манифестации разных форм патологии центральной и/или периферической нервной системы у лиц, работающих в контакте с ФОВ.
MEDICAL AND BIOLOGICAL SCIENCES
Заключение
Результаты, полученные в ходе динамического иммунологического исследования, характеризующиеся высокой распространенностью изменений Т-клеточного звена, стабильно сохраняющимся лимфоцитозом, сопровождающиеся повышением индекса аллергизации и снижением иммунорегуляторного индекса, отражают напряжение компенсаторных механизмов иммунологической регуляции у работников объектов УХО и повышение риска развития иммуносу-прессии и сенсибилизации, вне четкой зависимости от контакта с ФОВ. Все вышеизложенное обусловливает необходимость динамического наблюдения с проведением иммунологического мониторинга и организации профилактических мероприятий для лиц, работающих в условиях контакта с производственной вредностью с целью предотвращения развития различных форм иммунозависимой патологии.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
ЛИТЕРАТУРА
1. Конева Т. А., Павлова А. А., Федорченко А.Н. и др. Мониторинг состояния здоровья работников объектов хранения и уничтожения химического оружия. Токсикологический вестник. 2011; 6: 30-3.
2. Забродский П.Ф., Мандыч В.Г. Иммунотоксикология ксенобиотиков. Саратов, 2007: 420 с.
3. Петленко С.В., Кашуро В.А., Говердовский Ю.Б. и др. Морфо-функциональные изменения клеточного иммунитета при воздействии комплекса факторов объектов хранения химического оружия в ранние сроки работы с токсикантами. Клиническая токсикология. 2018; 19: 1-19. 25.09.2018.URL: http: //medline. ru>public/pdf/19_001.pdf
4. Янно Л.В., Прохоренко О.А., Холодова Е.Д. и др. Оценка состояния иммунной системы у лиц, имевших контакт с веществом VX. Вопросы обеспечения химической безопасности в Российской Федерации. Под ред. А.Н. Гребенюка, С.П. Нечипоренко, В.Р. Рембовского и А.С. Радилова. СПб.: Фолиант, 2007: 244-50.
5. Тотолян А.А., Балдуева И.А., Бубнова Л.Н. и др. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека. Медицинская иммунология. 1999; 1(5): 21-43.
6. Кишкун А.А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. М.: Мед. ин-форм. агентство. 2006: 536 с.
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
7. Полетаев А.Б. Новые подходы к раннему выявлению патологических изменений в организме человека. Методические рекомендации для врачей. М.: МИЦ Иммункулус, 2011: 64 с.
8. Солдатов А.А., Соболев А.В., Берензон М.В. и др. Расчётный индекс лейкоцитов в оценке аллерголо-гического процесса. Клиническая лабораторная диагностика. 1997; 11: 35-6.
9. Бердюгина О.В., Базарный В.В. Информативность некоторых лейкоцитарных индексов в оценке развития послеоперационных воспалительных осложнений. Медицинская иммунология. 2000; 2(2): 150-1.
10. Хаитов Р.М. Иммунология. Учебник. 3-е изд. перераб. и доп. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2016: 496 с.
11. Черкасова Е.А. Социальные риски онкопатологии в современной России. Бюллетень медицинских интернет-конференций. 2011; 1(7): 116-18.
REFERENCES
1. Koneva T.A, Pavlova A.A., Fedorchenko A.N. etc. Monitoring of the state of health of workers of objects of storage and destruction of chemical weapon. Toxico-logicheskiy vestnik. 2011; 6: 30-3. (in Russian)
2. Zabrodskiy P.F., Mandych VG. Immunotoksikologiya of xenobiotics [Immunotoksikikologiya ksenobiotikov]. Saratov. 2007: 420 p. (in Russian)
3. Petlenko S.V., Kashuro V.A., Goverdovsky Yu.B. etc. Morphofunctional changes of cell immunity by the influence of complex of factors of chemical weapon repositories in the early stages of the work with toxicants. Clinical toxicology. 2018; 19: 1-19. 25.09.2018.URL: http://medline.ru>public/pdf/19_001.pdf (in Russian)
4. Yanno L.V., Prokhorenko O.A., Kholodova E.D. etc. Assessment of a condition of the immune system at the persons which had contact with the substance. Voprosy obespecheniya khimicheskoy bezopasnosti v Rossiyskoy Federatsii. Pod red. A.N. Grebenyuka, S.P. Nechiporen-ko, V.R. Rembovskogo i A.S. Radilova. SPb.: Foliant, 2007: 244-50. (in Russian)
5. Totolyan A.A., Balduyeva I.A., Bubnova L.N. etc. Standardization of methods of immunophenotyping of blood cells and marrow of the person. Meditsinskaya immu-nologiya. 1999; 1(5): 21-43. (in Russian)
6. Kishkun A.A. Immunological and serological researches in clinical practice [Immunologicheskie I sero-logicheskie issledovaniya v klinicheskoy praktike]. Moscow: Medical inform. agency. 2006: 536 p. (in Russian)
7. Poletayev A.B. New approaches to early identification of pathological changes in a human body. Methodical recommendations for doctors [Metodicheskie rekomendat-sii dlya vrachey]. Moscow: MITS Immunkulus, 2011: 64 p. (in Russian)
8. Soldatov A.A., Sobolev A.V., Berenzon M.V etc. The calculated leukocyte quotient the assessment of allergo-logical process. Klinicheskaya laboratornaya diagnos-tika. 1997; 11: 35-6. (in Russian)
9. Berdyugina O.V., Bazarnyy V.V. Informative value of some leukocyte quotient development assessment of postoperative inflammatory complications. Meditsins-kaya immunologiya. 2000; 2(2): 150-1. (in Russian)
10. Haitov R.M. Immunology. Textbook [Immunologiya. Uchebnik]. The 3rd prod. reslave. and additional Moscow: GEOTAR-media, 2016: 496 p. (in Russian)
11. Cherkasova E.A. Social risks of an oncopathology in modern Russia. Byulleten meditsinskikh internet-confer-entsiy. 2011; 1(7): 116-18. (in Russian)
Поступила 07 апреля 2019 Принята в печать 09 сентября 2019
