CC BY
59
УДК 615.262.1-092.4:616.31
ОЦЕНКА РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ КОМПОЗИЦИЙ НА ОСНОВЕ КРЕМНИЙТИТАНОРГАНИЧЕСКОГО ГЛИЦЕРОГИДРОГЕЛЯ ПРИ МЕСТНОМ ПРИМЕНЕНИИ НА СЛИЗИСТУЮ ОБОЛОЧКУ ПОЛОСТИ РТА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ И ИХ ОБЩЕЕ ЭТОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ
А.А. Бакуринских, Л.П. Ларионов, М.А. Бакуринских, А. О. Чернова, Е.А. Калганов
ГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации г. Екатеринбург, Россия
Аннотация. Одним из частых травмирующих агентов тканей полости рта является термическое поражение. Слизистая оболочка выполняет важные функции, такие как: защитная, сенсорная, секреторная, иммунная и другие. Не корректный выбор тактики лечения может привести к осложнениям, в том числе и к нарушению функций слизистой ротовой полости. В результате большого выбора лекарственных средств для лечения ожога слизистой оболочки рта не все средства отвечают терапевтическим свойствам. В статье рассматривается действие двух новых фармацевтических композиций на основе кремнийтитанорганического глицерогидрогеля. Данные композиции ускоряют сроки заживления, обладают противовоспалительным эффектом, не токсичны, безопасны в применении.
Ключевые слова: слизистая оболочка, ожог, кремнийтитанорганический глицерогидрогель, открытое поле.
Введение. Травматизация тканей полости рта представляет частое явление. Одним из агентов травмы является термическое поражение. При несвоевременном и неэффективном лечении возможны осложнения. Патологические процессы, как правило, носят воспалительный характер. Слизистая оболочка рта является важным барьером организма и тесно связана с внутренними органами и системами [1, 3]. Сегодня представлен обширный спектр лекарственных средств для лечения и профилактики заболеваний полости рта. Некоторые из них обладают рядом побочных эффектов [2]. Поэтому, существует необходимость расширения
арсенала лекарственных средств, обладающих ра-нозаживляющим, регенерирующим и антибактериальным, противовоспалительным действиями. При этом они не должны обладать токсичностью, быть простым в получении, удобным для использования.
Цель: выявить ранозаживляющее действие фармацевтических композиций при местном применении на слизистую оболочку полости рта крыс после создания термомеханической травмы и проанализировать возможные изменения ориентировочно-поведенческих реакций в тесте «открытое поле».
—--—-
~ 296 ~
Материалы и методы. Исследования выполняли на базе кафедры фармакологии и клинической фармакологии ГБОУ ВПО УГМУ согласно Руководству по проведению доклинических исследований лекарственных средств (М.2005, М.2013) на крысах в зимне-весенний период [4]. Исследуемые новые фармацевтические композиции представляют собой мягкую лекарственную форму и имеют следующий состав: фармацевтическая композиция № 1 — бифидумбактерин 1%, гидроксиапатит 1%, кремнийтитанорганический глицерогидрогель (остальное); фармацевтическая композиция № 2 — бифидумбактерин 1%, гид-роксиапатит 1%, лидокаин 1%, кремний-титан-органический глицерогидрогель (остальное). Кремнийтитанорганический глицерогидрогель 281(СзН70з)4-Т1(СзН70з)4- 22СзН80з -88^0 обладает транскутанной проводимостью лекарственных добавок, оказывает противоотёчное действие, не токсичен. За счёт наличия в его составе эссен-циального микроэлемента кремния в биологически активной форме проявляет выраженное раноза-живляющее и регенерирующее действие; титан способствует проявлению антиоксидантного и ци-топротектерного действия [5].
Бифидумбактерин — это комплексный препарат группы пробиотиков, содержащий микробную массу живых, антагонистически активных бифидо-бактерий штаммов Bifidum bacterium bifidum № 1 или 791, лиофилизированную. Препарат активен в отношении многих болезнетворных организмов, включая энтеропатогенную кишечную палочку, протей, стафилококки, некоторые виды дрожже-подобных грибов [6; 8].
Гидроксиапатит — кальцийфосфорсодержа-щее соединение состава Са10(РО4)6(ОН)2, наиболее близкое по химическому составу к костной ткани и зубной эмали. Оказывает гемостатическое, рано-заживляющее и остеопластическое действие [7].
Лидокаин (или Лидокаина гидрохлорид) — это препарат, который используется для местной анестезии. Блокирует потенциалзависимые натриевые каналы, что препятствует генерации импульсов в окончаниях чувствительных нервов и проведению импульсов по нервным волокнам.
Исследования проводили на белых крысах обоего пола популяции линии Wistar с массой
180—220 г. Животные содержались в клетках при стандартных условиях вивария: температуры, влажности, естественного светового цикла со свободным доступом к пище и воде. Для эксперимента было сформировано три группы особей по 10 в каждой. Первая группа-крысы с ожогом слизистой оболочки рта и с дальнейшим лечением фармацевтической композицией № 1. Вторая группа — крысы с ожогом слизистой оболочки рта и с дальнейшим лечением фармацевтической композицией № 2. Третья группа — крысы с ожогом слизистой оболочки рта, но без лечения (контроль).
До и после травматизации слизистой оболочки рта экспериментальных животных провели тест «открытое поле». Данная методика включает в себя: время реакции ухода особи с центрального круга площадки, горизонтальную и вертикальную активность, обследование «нор» (отверстий) и гру-минг (количество приёма чистки). Регистрацию указанных поведенческих реакций осуществляли после исходного уровня через 30, 60, 90, 120 минут. Экспозиция составляла 3 минуты.
Модель термического ожога слизистой рта крыс (рис. 1) осуществляли под эфирным наркозом (согласно требованиям Международного этического комитета по экспериментам на лабораторных животных) путём нанесения на слизистую оболочку металлического шпателя нагретого в кипящей воде до 100—98 °С. Шпатель прикладывали к слизистой рта крыс трёх групп в течение 20 секунд. На рис. 2 представлен ожог слизистой на вторые сутки в виде отёчности прикасаемой ткани к пластинке.
Результаты исследования и их обсуждение. Показания ориентировочно-исследовательских реакций по тесту «открытое поле» представлены в табл. 1—3. Общая экспозиция 3 минуты. В связи с тем, что при регистрации указанных реакций животных показатели значительно отличаются в зависимости от групп животных, для более целенаправленного обсуждения полученных результатов, мы решили дополнительно результаты реакций перевести в единую единицу измерения — проценты, за исключением реакции ухода особей с центрального круга.
—--—-
~ 297 ~
—--—
Рис. 1. Создание ожога Рис. 2. Ожог слизистой оболочки
Таблица 1
Результаты активности особей в «открытом поле» до ожога
Группа № 1
мин. секунды (A) кол-во квадратов (B) кол-во вставаний (С) кол-во нор (D) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 17,53 ± 7,23 10,27 ± 4,26 2,42 ± 0,53 1,86 ± 0,34 0 3,64 ± 1,28 100
30 14,63 ± 4,63 7,64 ± 4,11 1,46 ± 0,74 0,32 ± 0,14 1,61 ± 0,73 2,76 ± 1,43 76
60 11,22 ± 5,64 9,74 ± 3,24 1,38 ± 0,31 2,32 ± 1,16 0,98 ± 0,38 3,61 ± 1,27 99
90 5,41 ± 2,42 3,75 ± 1,96 0,84 ± 0,41 1,62 ± 0,35 2,53 ± 1,42 2,19 ± 1,03 60
120 7,64 ± 3,21 5,46 ± 2,14 1,61 ± 0,32 0 0,62 ± 0,24 1,92 ± 0,67 48
сред. из четырёх 9,73 ± 3,97 6,65 ± 2,86 1,32 ± 0,44 1,06 ± 0,49 1,44 ± 0,69 2,62 ± 1,12 71
Группа № 2
мин. секунды (A) кол-во квадратов (B) кол-во вставаний (С) кол-во нор (D) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 15,52 ± 5,26 18,17 ± 7,62 3,53 ± 1,42 3,43 ± 2,31 0 6,28 ± 2,83 100
30 11,23 ± 6,67 9,82 ± 3,61 1,85 ± 0,53 3,14 ± ±2,03 0,77 ± 0,32 3,89 ± 1,62 62
60 6,63 ± 2,27 3,71 ± 1,35 0 0,67 ± 0,34 0 1,09 ± 0,42 17
90 8,73 ± 3,37 7,62 ± 4,27 0,74 ± 0,24 0,73 ± 0,44 0,63 ± 0,17 2,43 ± 1,28 39
120 4,21 ± 3,02 5,48 ± 2,16 0,33 ± 0,12 1,67 ± 0,22 0 1,87 ± 0,62 30
сред. из четырёх 7,7 ± 3,83 6,65 ± 2,84 0,73 ± 0,22 1,55 ± 0,75 0,35 ± 0,12 2,32 ± 0,98 37
—--—-
~ 298 ~
Окончание таблицы 1
Контрольная группа
мин. секунды (A) кол-во квадратов (В) кол-во вставаний (С) кол-во нор (Б) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 14,26 ± 5,35 16,16 ± 7,83 1,07 ± 0,52 2,62 ± 1,62 1,94 ± 0,36 5,35 ± 2,58 100
30 12,53 ± 4,36 7,53 ± 3,73 0,83 ± 0,32 1,52 ± 0,32 0 2,47 ± 1,09 46
60 7,53 ± 4,17 8,17 ± 4,83 2,62 ± 1,27 0 1,53 ± 0,84 3,08 ± 1,73 57
90 4,53 ± 3,05 4,31 ± 1,62 0 0 1,25 ± 0,31 1,39 ± 0,48 26
120 8,62 ± 3,84 5,26 ± 2,06 1,36 ± 0,63 1,52 ± 0,87 0,72 ± 0,21 2,21 ± 0,94 41
сред. из четырёх 8,30 ± 3,85 6,27 ± 3,06 1,20 ± 0,55 1,41 ± 0,70 1,36 ± 0,43 2,56 ± 1,18 48
Примечание. А — время реакции ухода с центрального круга (секунды); В — горизонтальная активность (количество пересеченных квадратов); С — вертикальная активность (количество вставаний на задние лапки); Б — исследовательская активность (количество обследованных «нор»); Е — груминг (количество приёмов умываний).
Таблица 2
Результаты активности особей в «открытом поле» после ожога
Группа № 1
мин. секунды (A) кол-во квадратов (В) кол-во вставаний (С) кол-во нор (Б) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 23 ± 5,33 13,67 ± 6,56 2,76 ± 0,33 1,33 ± 0,69 0 4,44 ± 1,89 100
30 15,33 ± 6,56 7,33 ± 3,21 2,33 ± 1,24 1,54 ± 0,89 1,17 ± 0,89 3,09 ± 1,55 70
60 10,52 ± 4,24 10,33 ± 4,44 1,67 ± 0,44 2,67 ± 1,78 0,77 ± 0,49 3,86 ± 1,78 87
90 5,63 ± 2,67 3,33 ± 1,64 0,53 ± 0,24 0,33 ± 0,14 1,93 ± 0,78 1,53 ± 0,7 34
120 8,21 ± 3,33 7,33 ± 3,56 1,43 ± 0,67 0 0,33 ± 0,11 2,27 ± 1,08 51
сред. из четырёх 9,92 ± 4,2 7,08 ± 3,21 1,49 ± 0,64 1,14 ± 0,70 1,05 ± 0,56 2,69 ± 1,41 61
Группа № 2
мин. секунды (A) кол-во квадратов (В) кол-во вставаний (С) кол-во нор (Б) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 17,33 ± 6,78 22,33 ± 8,22 3,82 ± 2,14 2,68 ± 1,93 0 7,2 ± 3,07 100
30 12,53 ± 5,34 9,33 ± 4,78 1,27 ± 0,62 3,36 ± 1,38 1,37 ± 0,62 3,83 ± 1,85 53
60 7,33 ± 3,44 4,43 ± 2,25 0 0,45 ± 0,24 0 1,22 ± 0,62 17
90 8,33 ± 4,89 6,33 ± 3,11 1,62 ± 0,24 1,75 ± 0,63 0,48 ± 0,15 2,54 ± 1,03 35
120 5,64 ± 2,33 5,35 ± 3,67 0,79 ± 0,32 0,38 ± 0,23 1,48 ± 1,02 2,0 ± 1,31 27
сред. из четырёх 8,45 ± 4,0 6,36 ± 3,45 0,92 ± 0,92 1,48 ± 0,62 0,83 ± 0,44 2,39 ± 1,2 33
—--—-
~ 299 ~
—--—
Окончание таблицы 2
Контрольная группа
мин. секунды (A) кол-во квадратов (B) кол-во вставаний (С) кол-во нор (D) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 18,54 ± 5,34 17,64±6,73 1,56 ± 0,73 0 1,34 ± 0,59 5,13 ± 2,01 100
30 14,76 ± 4,32 8,23±3,43 0 1,75 ± 0,39 0,45 ± 0,22 2,6 ± 1,01 50
60 6,21 ± 3,75 7,87 ± 3,54 1,37 ± 0,24 1,86 ± 0,79 0 2,77 ± 1,14 54
90 5,31 ± 2,53 4,61 ± 2,23 0,32 ± 0,14 2,43 ± 1,34 0,85 ± 0,31 2,05 ± 1,0 40
120 7,75 ± 4,36 5,48 ± 3,73 1,75 ± 0,32 0,73 ± 0,42 0 1,09 ± 1,11 39
сред. из четырёх 8,5 ± 3,74 6,54 ± 3,23 0,85 ± 0,17 1,69 ± 0,73 0,32 ± 0,13 2,35 ± 1,06 45
Примечание. Обозначения см. в табл. 1.
Таблица 3
Результаты активности особей в «открытом поле» после 10-дневного курсового лечения
Группа № 1
мин. секунды (A) кол-во квадратов (B) кол-во вставаний (С) кол-во нор (D) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 17,67 ± 5,56 15,67 ± 7,56 2,33 ± 0,86 2,33 ± 1,78 3,63 ± 2,13 6,0 ± 3,08 100
30 18,42 ± 6,44 8,35 ± 3,36 1,33 ± 0,21 3,67 ± 0,89 2,65 ± 1,33 4,0 ± 1,44 66
60 16,54 ± 6,33 14,67 ± 7,89 2,33 ± 0,74 4,46 ± 2,31 3,53 ± 2,11 6,24 ± 3,26 104
90 13,43 ± 5,78 10,33 ± 4,11 1,74 ± 0,67 4,63 ± 2,71 2,64 ± 1,34 4,83 ± 2,2 80
120 10,33 ± 3,48 9,37 ± 3,74 1,67 ± 0,71 4,47 ± 3,16 0 7,75 ± 1,9 129
сред. из четырёх 14,68 ± 5,5 10,68 ± 4,7 1,76 ± 0,58 4,3 ± 2,26 2,2 ± 1,2 5,7 ± 2,2 95
Группа № 2
мин. секунды (A) кол-во квадратов (B) кол-во вставаний (С) кол-во нор (D) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 18,32 ± 6,42 11,67 ± 5,56 0 4,53 ± ±2,51 1,67 ± 0,89 4,46 ± 2,24 100
30 9,45 ± 3,67 13,53 ± 6,67 1,33 ± 0,21 0 0,35 ± 0,14 3,8 ± 1,75 85
60 7,23 ± 4,11 13,75 ± 5,25 2,67 ± 1,78 4,67 ± 2,62 0 5,27 ± 2,41 118
90 7,67 ± 3,89 10,67 ± 4,34 2,97 ± 1,33 4,32 ± 1,41 1,53 ± 1,02 4,87 ± 2,02 109
120 6,54 ± 2,35 9,85 ± 3,67 0,67 ± 0,34 2,37 ± 0,64 2,64 ± 0,67 3,9 ± 1,33 87
сред. из четырёх 7,72 ± 3,5 11,9 ± 4,9 1,91 ± 0,41 2,84 ± 1,16 1,13 ± 0,45 4,46 ± 1,8 100
—--—-
~ 300 ~
Окончание таблицы 3
Контрольная группа
мин. секунды (A) кол-во квадратов (Б) кол-во вставаний (С) кол-во нор (О) груминг (E) сред. из четырёх %
Исход. 20,34 ± 6,44 15,84 ± 6,52 1,85 ± 0,53 2,79 ± 1,24 0,57 ± 0,29 5,26 ± 2,14 100
30 12,26 ± 5,31 7,53 ± 4,13 0 1,46 ± 0,23 1,37 ± 0,64 2,59 ± 1,25 21
60 7,53 ± 4,25 9,32 ± 4,75 2,17 ± 0,94 1,24 ± 0,35 0,54 ± 0,11 3,31 ± 1,53 62
90 6,46 ± 3,13 5,14 ± 2,54 0,54 ± 0,31 0 0 1,42 ± 0,71 26
120 8,35 ± 3,76 6,68 ± 4,23 0 0,96 ± 0,63 0 1,91 ± 1,21 36
сред. из четырёх 8,65 ± 4,11 7,16 ± 3,91 0,67 ± 0,31 0,91 ± 0,30 0,47 ± 0,18 2,3 ± 1,17 43
Примечание. Обозначения см. в табл. 1.
На основании представленных результатов в табл. 1 видно, что у всех трех групп наиболее четкие изменения прослеживаются в двигательной активности (количество вставаний, нор, груминг).
По результатам табл. 2 в сравнении с результатами табл. 1 так же отчетливо прослеживается снижение общей двигательной активности (количество вставаний, обследование «нор», груминг) на вторые сутки после нанесения ожога.
По данным табл. 3 можно отметить, что на фоне лечения фармацевтическими композициями
в группах № 1, 2 прослеживается повышение двигательной активности, чем в контрольной группе. В контрольной группе отмечается снижение двигательной активности (количество вставаний, обследование «нор», груминг).
На фоне 10-дневного курса лечения слизистой оболочки рта крыс групп № 1 и 2 (рис. 3) отмечено, что процесс эпителизации, снижение гиперемии, отека наблюдалось на 6-е сутки, а полная регенерация на 8-е сутки. У контрольной группы заживление наблюдалось на 10—13-е сутки (рис.4).
Рис. 3. Ранозаживление с лечением
Рис. 4. Ранозаживление без лечения
—--—-
~ 301 ~
Выводы. В ходе проведенной научно-исследовательской работы можно сделать следующие выводы: по результатам теста «открытого поля» до нанесения ожога во всех трёх группах наблюдается снижение ориентировочно-исследовательских реакций; после проведения теста «открытое поле» на второй день после ожога тенденция к снижению активности животных сохраняется. Согласно результатам проведенного лечения в группах № 1, 2 отчетливо прослеживается восстановление двигательной активности животных, чем в группе без лечения, что является свидетельством о положительном влиянии фармацевтических композиций. После нанесения опытных образцов на ожоговую поверхность слизистой рта крыс, в первой и второй группе животных обнаружено равномерное рано-заживляющее действие препаратов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Павлова Т.В., Сумин С.А., Шаповалов К.Г. Тепловая травма: патоморфологические и клинические аспекты. М.: МИА, 2013.
2. Юденич В.В. .Лечение ожогов и их последствий: атлас. М.: Медицина, 1980.
3. Фомина Ю.В. Диагностика доброкачественных и неопластических заболеваний слизистой оболочки
полости рта с использованием оптических методов: ав-тореф. дис. ... канд. мед. наук. Н. Новгород: Б.и., 2003.
4. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М.: Медицина, 2005.
5. Хонина Т.Г., Мельникова Н.Б., Халиуллин Ф.А. Фармакологически активные полиолаты кремния и титана и гидрогели на их основе: синтез, свойства, применение: Автореф. дисс. ... докт. хим. наук. 2012.
6. Несчисляев В.А., Фадеева И.В., Моховикова В.Б. Изучение устойчивости лакто- и бифидобактерий к биологическим жидкостям // Материалы Всеросс. конфер. «Актуальные вопросы разработки, производства и применение иммунобиологических и фармацевтических препаратов». Томск, 2004.
7. Бакуринских А.А., Ларионов Л.П., Хонина Т.Г., Иваненко М.В., Шадрина Е.В. Оценка лечебно-профилактических свойств новой фармацевтической композиции на основе кремнийтитанорганического глицеро-гидрогеля, содержащей бифидумбактерин и гидрокси-апатит, изучение адгезии в эксперименте // Второй Евразийский конгресс «Медицина, фармация и общественное здоровье» с международным участием. Сборник статей. Екатеринбург: УГМУ, 2015. С. 232—235.
8. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: учебник для студ. мед. вузов / Под. ред. А. А. Воробьева. М.: Мед. информ. агенство, 2004.
QUALIFICATION BALING ACTION BASED P^RMACEUTICAL COMPOSITIONS KREMNIYTITANORGANICНESKOGO GLITSEROGIDROGELYA W^N APPLIED TOPICALLY TO TOE ORAL MUCOSA OF LABORATORY ANIMALS AND TOEIR GENERAL ETOOLOGICAL CONDITION
A.A. Bakurinskikh, L.P. Larionov, M.A. Bakurinskikh, A.O. Chernova, E.A. Kalganov
Ural State Medical University Ministry of Health of Russian Federation Ekaterinburg, Russia
Annotation. One of the frequent traumatic agents oral tissues is the thermal damage. The mucous membrane has important functions such as: protective, sensory, secretory, immune and other. Not correct choice of tactics of treatment can lead to complications, including to the dysfunction of the oral mucosa. As a result, a large selection of drugs for the treatment of burns of the oral mucosa does not meet all the means therapeutic properties. The article discusses the effect of two new pharmaceutical formulations based on kremniytitanorganicheskogo glitserogidrogelya. These compositions accelerate healing time, have anti-inflammatory effects, non-toxic, safe to use.
Key words: mucosa, burns, kremniytitanorganichesky glitserogidrogel, open field.
—--—-
~ 302 ~
REFERENCES
1. Pavlova T.W., Sumin S.A. Shapovalov K.G. Thermal injury: pathologic and clinical aspects. Moscow: MIA, 2013.
2. Yudenich V.V. Treatment of burns and their consequences: satin. M.: Medicine, 1980.
3. Fomina Y. Diagnosis of benign and neoplastic diseases of the oral mucosa using optical methods: Author. dis. cand. honey. sciences. Nizhni Novgorod: BI, 2003.
4. Khabriev R.W. Manual on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances. Moscow, Medicine, 2005.
5. Khonina T.G., Melnikova N.B. Khaliullin F.A. Pharmacologically active poliolaty silicon and titanium and hydrogels based on them: synthesis, properties and application. Abstract of the thesis for the degree of Doctor of Science. 2012.
6. Neschislyaev V.A., Fadeeva I.V., Mokhoviko-va V.B. The study of the stability of lactobacilli and bifidobacteria to the biological fluids. Materials of All-Russian. Conf. "Topical issues of development, production and use of immuno-biological and pharmaceutical products". Tomsk, 2004.
7. Bakurinskikh A.A., Larionov L.P., Khonina T.G., Ivanenko M.V., Shadrina E.V. Evaluation of therapeutic and prophylactic properties of a novel pharmaceutical compositions based on kremniytitanorganicheskogo glitserogid-rogelya containing bifidumbakterin and hydroxyapatite, the adhesion of the study in the experiment. Second Eurasian Congress "Medicine, Pharmacy and Public Health " with international participation. Digest of articles. Yekaterinburg, UGMU, 2015. P. 232—235.
8. Medical Microbiology, Virology and Immunology: the textbook for students. med. Universities. Ed. A.A. Vo-robeva. Moscow, Med. Inf. Agency, 2004.
РЕЦЕНЗЕНТЫ:
Осипенко Артур Васильевич — д.м.н., профессор, Уральский государственный медицинский университет, Российская Федерация, Свердловская область, г. Екатеринбург
Литусов Николай Васильевич — д.м.н., профессор, Уральский государственный медицинский университет, Российская Федерация, Свердловская область, г. Екатеринбург
