CC BY
3УДК 579.89, 579.62
ОЦЕНКА ПАТОГЕННОГО ВЛИЯНИЯ S. TYPHIMURIUM14028S ARELA НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЛАБОРАТОРНЫХ
ЖИВОТНЫХ
Миндолина Ю.В., студент группы 13Био(ба)Бх, Оренбургский государственный университет, Оренбург e-mail: yliamindolina@mail.ru
Научный руководитель: Плотников А.О. к.мед.н., доцент, институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН
В статье представлены данные по исследованию биохимических показателей сыворотки крови лабораторных животных, подверженных заражению генномодифицированными штаммами S. typhimurium 14028S с отсутствующим геном ArelA.
Ключевые слова: Salmonella typhimurium, сальмонеллез, биохимические показатели крови, аланинаминтрансфераза, аспартатаминотрансфераза, щелочная фосфатаза.
Актуальность. Сохранение актуальности проблемы острых кишечных инфекционных заболеваний с диарейным синдромом связано с широким распространением и высокой степенью заболеваемости, развитием внутрибольничных вспышек и неэффективностью антибиотикотерапии. Одним из наиболее часто встречаемых инфекционных поражений желудочно-кишечного тракта является сальмонеллез, который вызывается бактериями рода Salmonella, в частности сероварами Enteritidis и Typhimurium. По статистике ежегодно в мире регистрируется десятки миллионов случаев заболевания людей сальмонеллезом. Тяжелая форма данного заболевания может проходить с осложнениями и приводить к летальному исходу (вероятность 0,1 - 0,3 процента). К группе риска относятся дети, пожилые люди и пациенты с ослабленным иммунитетом [1 - 4].
В связи с этим на базе Оренбургского государственного университета изучается патогенез сальмонеллезной инфекции, а также влияние генномодифицированных штаммов S. typhimurium 14028S на организм лабораторных животных. Одной из задач данных исследований выступает оценка биохимических показателей крови экспериментальных животных. Биохимические показатели позволяют определить, каким образом проходит метаболизм, провести анализ работы иммунной системы и проверить, есть ли на данный момент в организме воспалительный процесс.
Материалы и методы. Исследование проводилось на белых лабораторных крысах чистой линии Wistar в количестве 45 животных, из которых были сформированы 3 группы по 15 животных (с учетом половой принадлежности, возраста и веса). Схема, по которой проводилось составление экспериментальных групп, представлена на рисунке 1.
Кровь исследовалась по следующим биохимическим показателям:
- аланинаминотрансфераза (АлАТ) - маркерный фермент при диагностике поражений печени. В норме содержится в небольших количествах (31 - 41 Ед/л);
- аспартатаминотрансфераза (АсАТ) - фермент, являющийся индикаторным при диагностике поражений сердечной мышцы. Нормальное содержание - 31 - 37 Ед/л;
- щелочная фосфатаза (ЩФ) - в норме ее содержание составляет от 30 до 130 Ед/л. Его концентрация увеличивается при повреждениях клеток печени [5 - 7].
Рисунок 1 - Схема составления экспериментальных групп из лабораторных животных
Биохимические показатели крови определялись при помощи универсального биохимического анализатора «ФЛЮОРАТ-02-АБЛФ-Т» фирмы ООО «ЛЮМЕКС», Россия.
Результаты и обсуждения. По полученным результатам нами были составлены графики изменения концентрации биохимических показателей сыворотки крови лабораторных животных (рисунки 2, 3, 4, 5, 6).
Анализ концентрации аланинаминотрансферазы в группе О1 показал, что максимальное значение данного фермента было достигнуто на третьи сутки эксперимента, после чего оно начало снижаться. В то время как в группе К1 наблюдается незначительное изменение АлАТ в большую сторону, а максимум приходиться на шестой день исследования. С первых суток и до шестого дня включительно концентрация АлАТ в обеих группах находилась выше контрольных значений, к девятому дню происходит снижение и вплоть до заключительного дня показатели находятся в пределах нормы.
- 200
0 I I
О 3 6 9 12
Сроки исследования, сутки
Рисунок 2 - Динамика изменения концентрации АлАТ в сыворотке крови экспериментальных животных (Примечание: К1 - группа заражения 8. ТурЫшипиш 140288 ЖТ; О1 - группа заражения & typhimurium 14028S Аге1А)
Концентрация аспартатаминотрансферазы достигает своего максимального значения на шестой день эксперимента в обеих группах, после чего начинает снижаться. На протяжении всего эксперимента показатели АсАТ как в группе К1, так и в группе О1 находится выше контрольных значений.
следования, сутки
Рисунок 3 - Динамика изменения концентрации АсАТ в сыворотке крови экспериментальных животных (Примечание: К1 - группа заражения 8. ТурЫшипиш 140288 ЖТ; О1 - группа заражения & typhimurium 14028S Аге1А)
При изучении отношения сывороточных ферментов аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы было выявлено, что в группе К1 коэффициент де Ритиса равен 3,15. Это является показателем того, что в организме протекают патологические процессы в сердечно-сосудистой системе. В группе О1 на третий день эксперимента отмечается превышение показателей АлАТ над концентрацией АсАТ, однако на шестые сутки АсАТ становиться выше АлАТ. Коэффициент де Ритиса имеет значения 3,17 и 2,84 соответственно, что свидетельствует о наличии патологических процессов в данной группе, как со стороны печени, так и со стороны сердечно-сосудистой системы.
Сроки исследования, сутки
Рисунок 4 - Динамика изменения концентраций АлАТ и АсАТ в группе К1
9 12
Сроки исследования, сутки
Рисунок 5 - Динамика изменения концентраций АлАТ и АсАТ в группе О1
Показатели концентрации щелочной фосфатазы в группе К1 достигают своего максимума на третий день эксперимента, а затем вплоть до заключительного дня идут на снижение. В группе О1 максимум устанавливается на шестые сутки, минимум - на девятые. Максимальные значения в обеих группа находятся выше контроля, но на девятый день концентрации ЩФ опускаются ниже контрольных значений, однако в группе О1 наблюдается повышение показателей на двенадцатые сутки.
Сроки исследования, сутки
Рисунок 6 - Динамика изменения концентрации ЩФ в сыворотке крови экспериментальных животных (Примечание: Ki - группа заражения S. typhimurium 14028S WT; О1 - группа заражения S. typhimurium 14028S ArelÄ)
Выводы. Исходя из результатов исследования биохимических показателей сыворотки крови можно сделать вывод, что в группах К1 и О1 наблюдается развитие острого инфекционного заболевания и патологических изменений со стороны печени и сердечнососудистой системы.
Литература
1. Орлова, А.А. Обработка статистических данных сальмонеллёза в п. Переволоцкий / А.А. Орлова, Г.В. Чернова, Е.А. Пономарева // Молодой ученый. - 2016. -№10. - С. 521-524.
2. Пак, С. Г. Сальмонеллёз / С. Г. Пак, М. Х. Турьянов, М. А. Пальцев. - М.: Медицина, 1988. - 304 с.
3. Козырева, В. К. Клональное распространение CTX-M-5-продуцирующих нозокомиальных штаммов Salmonella Typhimurium в России, Беларуси и Казахстане / В. К. Козырева, М. В. Эйдельштейн, Д. В. Тапальский, И. С. Азизов, А. В. Романов, Р. С. Козлов // Клиническая Микробиология и Антимикробная Химиотерапия. - 2012. - Т. 14. - №1. - С. 3850.
4. Богуцкий, М. И. Сальмонеллёзная инфекция в современный период / М. И. Богуцкий, А. В. Васильев, В. М. Цыркунов // Медицинская панорама. - 2009. - № 7. - С. 3 -4.
5. Оскоров, А. Н. Диагностика болезней внутренних органов / А. Н. Оскоров. -М.: Мед. лит., 2001. - 512 с.
6. Козинец, Г. И. Интерпретация анализов крови и мочи и их клиническое значение / Г. И. Козинец. - М.: «Триада - Х», 1998. - 104 с.
7. Данилова, Л. А. Анализы крови и мочи / Л. А. Данилова. - СПб.: Салит-Медкнига, 2003. - 128 с.
Научно исследовательская работа проводится в рамках гранта РФФИ «Молекулярно-генетические механизмы, обеспечивающие выживание и размножение протеобактерий в водных экосистемах», № проекта 14-04-01796.
Руководитель проекта: Плотников А.О., кандидат медицинских наук, доцент, Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, Оренбург.
