CC BY
5Ветеринарный врач. 2024. № 1. С. 13 - 22 The Veterinarian. 2024; (1): 13 - 22
Научная статья УДК 619:615.038
DOI: 10.33632/1998-698Х_2024_1_13
ОЦЕНКА ОСТРОЙ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА «МА-34А» НА БЕЛЫХ КРЫСАХ
Анастасия Ильясовна Замалетдинова, кандидат химических наук, [email protected] Рашид Михайлович Асланов, доктор биологических наук, [email protected] Гали Набиевич Нигматулин, кандидат ветеринарных наук, [email protected] Кадрия Фагимовна Халикова, кандидат ветеринарных наук, [email protected] Андрей Валериянович Маланьев, кандидат биологических наук, [email protected] Гузалия Рустамовна Ямалова, [email protected]
Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности, Казань, Российская Федерация
Автор, ответственный за переписку: Анастасия Ильясовна Замалетдинова.
Аннотация. Обязательным условием применения новых веществ является предварительное проведение токсикологических исследований на животных. Одно из основных направлений современной токсикологии напрямую связано с исследованием патологических изменений организма при острых и хронических токсических воздействиях. В связи с вышеуказанным, целью настоящего исследования является изучение острой токсичности препарата «МА-34А» на белых крысах при перо-ральном и внутримышечном введении. Для достижения цели была поставлена следующая задача: определение класса токсичности, переносимых, токсических и летальных доз препарата «МА -34А» при пероральном и внутримышечном введении, и установление причин наступления гибели животных на основе анализа клинической картины интоксикации. В результате проведенных исследований определена средняя смертельная доза препарата «МА-34А» при внутрижелудочном введении для крыс-самок: ЛД50= 3,2 мг/кг, для крыс-самцов ЛД50= 3,19 мг/кг масса тела, при внутримышечном введении для крыс-самок: ЛД50= 2,52 мг/кг, для крыс-самцов ЛД50= 2,51 мг/кг масса тела.
Ключевые слова: миорелаксант, токсичность, доза, белые крысы, пероральное и внутримышечное введение
Для цитирования: Замалетдинова А.И., Асланов Р.М., Нигматулин Г.Н., Халикова К.Ф., Маланьев А.В., Ямалова Г.Р. Оценка острой токсичности препарата «МА-34А» на белых крысах // Ветеринарный врач. 2024. № 1. С. 13 -22. DOI: 10.33632/1998-698Х_2024_1_13
ACUTE TOXICITY OF THE PREPARATION "MA-34A" FOR WHITE RATS
Anastasiya I. Zamaletdinova, candidate of chemical sciences, [email protected] Rashid M. Aslanov, doctor of biological sciences, [email protected] Gali N. Nigmatullin, candidate of veterinary sciences, [email protected] Kadriya F. Khalikova, candidate of veterinary sciences, [email protected] Andrei V. Malanev, candidate of biological sciences, [email protected] Guzaliya R. Yamalova, [email protected]
Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Security, Kazan, Russian Federation
Corresponding author: Anastasiya Ilyasovna Zamaletdinova.
Abstract. A prerequisite for the use of new substances is conducting preliminary toxicological studies in animals. One of the main directions of modern toxicology is directly related to the study of pathological changes in the body in acute and chronic toxic effects. In view of the above, the aim of the present study is to investigate the acute toxicity of "MA-34A" in white rats by oral and intramuscular administration. To achieve the goal, the following task was set: to determine the toxicity class, tolerated, toxic and lethal doses of the drug "MA-34A" during oral and intramuscular administration, and to determine the causes of animal death based on the analysis of the clinical picture of intoxication. As a result of the conducted studies, the average lethal
dose of the drug "MA-34A" was determined with intragastric administration for female rats: LD50 = 3,2 mg / kg, for male rats LD50 = 3,19 mg / kg body weight, with intramuscular administration for rats-with
Keywords: muscle relaxant, toxicity, dose, white rats, oral and intramuscular
Введение. Одной из наиболее актуальных проблем на сегодняшний день в практической ветеринарии Российской Федерации является проблема гуманного отношения к животным при проведении лечебных мероприятий и исследований. Использование обездвиживающих препаратов позволяет уменьшить вероятность получения травм при отлове диких животных, предоставляет возможность обездвиживания животных на расстоянии, благодаря чему можно отлавливать очень осторожных зверей, также сокращается риск нападения животного на сотрудников, занимающихся отловом. Для отлова животных используют в основном две группы препаратов: вещества центрального действия и периферические релаксанты, механизм действия которых состоит в обездвиживании организма животных за счет расслабления скелетной мускулатуры путем блокирования процессов передачи импульсов возбуждения от двигательных нервов на мышечные волокна [1]. Миорелаксанты периферического действия заняли прочное место в арсенале лекарственных средств, широко применяемых в анестезиологии. Они представлены рядом препаратов, различающихся по химическому строению, механизму нервно-мышечного блока, продолжительности эффекта, широте миопаралитиче-ского действия, последовательности расслабления разных групп мышц, эффективности при разных путях введения, побочным эффектам и наличию антагонистов. Периферические мышечные релаксанты - фармакологические вещества, избирательно блокирующие передачу импульсов в нервно -мышечных синапсах скелетных мышц [2, 3].
В связи с вышесказанным, разработка, синтез и поиск новых, эффективных и безопасных средств иммобилизации животных является актуальной задачей теоретической и практической ветеринарной фармакологии. В процессе опытного лабораторного синтеза нами получен препарат из группы бис-четвертичных аммониевых солей под шифром «МА-34А».
Целью настоящего исследования является изучение острой токсичности препарата «МА -34А» на белых крысах при пероральном и внутримышечном введении. Для достижения цели была поставлена следующая задача: определение класса токсичности, переносимых, токсических и летальных доз препарата «МА-34А» при пероральном и внутримышечном введении, и установление причин наступления гибели животных на основе анализа клинической картины интоксикации [4, 5].
Материалы и методы. Эксперименты проводились на 60 самках и 60 самцах нелинейных белых крыс (Album rat), полученных из питомника (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»), массой тела к началу исследования 170 - 220 г. Количество животных в каждой группе 10 голов (5 самок и 5 самцов).
Животные содержались в секции барьерного типа. Основные правила содержания и ухода соответствовали «Санитарно-эпидемиологическим требованиям к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев), утвержденным Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, постановление № 51 от 29.08.2014 и согласно действующим в ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» инструкциям [6].
Кормление лабораторных животных проводили согласно «Санитарным правилам по содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)», утверждёнными МЗ СССР 06.07.73 г, и Приказу МЗ СССР № 755 от 12.08.77. Животные имели постоянный доступ к питьевой воде, находившаяся в поилках (бутылочки из прозрачного стекла с силиконовой пробкой со стеклянным носиком). Приготовление воды для поения осуществлялось путем доочистки питьевой воды с помощью твердофазного фильтра типа «Аквафор» и последующего автоклавирования.
При определении острой токсичности использовалось действие препарата при внутрижелудочном и внутримышечном введении действующего вещества. Введение исследуемого препарата осуществляли однократно. Животным, лишённым корма (на промежуток времени не менее 8 часов) со свободным доступом к воде. Навески препарата взвешивали отдельно для каждого животного, объем введения рассчитывали индивидуально для каждого животного, основываясь на массе тела, зарегистрированной непосредственно перед введением вещества. Доступ к корму возобновляли через час после введения. Животным контрольной группы вводилась вода для инъекций (изотонический раствор натрия хлорида в бидистиллированной воде).
Определение параметров острой токсичности проводилось с использованием метода Пер-шина. Для изучения острой токсичности препарата «МА-34А» для каждого из путей введения испытуемого средства было сформировано 6 групп животных, по 5 самок и 5 самцов в каждой группе.
Введение объекта исследования животным опытных групп осуществлялось внутрижелудочно (в дозах 3,0-3,4 мг/кг массы тела) и внутримышечно (в дозах 2,3 -2,7 мг/кг массы тела) однократно. Контрольным группам (5 самцов и 5 самок) вводилась вода для инъекций, использованная в качестве растворителя в опытных группах животных. Во время эксперимента производился клинический осмотр, учёт потребления воды и корма, регистрация смертности, признаков токсичности, оценки поведения и общего состояния. Животные наблюдались индивидуально после введения препаратов на протяжении 30 минут, затем не реже раза в час на протяжении 4 -х часов, далее ежедневно 1 раз в день в течение 14 дней.
Выполняли подробный осмотр животного в клетке содержания, в руках (крысы) и на стандартной открытой площадке. Отмечали:
- поведение (активность — повышенная или пониженная);
- походку (мышечный тонус, тремор, балансирование);
- темперамент (вялость, возбудимость, агрессивность);
- внешний вид (истощение, ожирение);
- состояние шерстяного покрова (выпадение шерсти);
- состояние глаз (слезотечение, воспаление, помутнение роговицы), ушей (воспаление, цвет -бледность или покраснение, выделение секрета, чувствительность, подергивание), конечностей (цвет, отек), зубов (цвет, выпадение);
- физиологические функции, такие, как дыхание (число дыхательных движений в минуту, характер, особенности), слюноотделение, мочеиспускание, экскрет (цвет, консистенция).
Масса тела регистрировалась перед началом периода введением препарата, затем на 7 и 14 сутки после введения путём взвешивания на электронных весах с дискретой ±0,1 г. При этом значения показателей, использованных в расчётах, округлялись до целых чисел. Температура определялась путём ректального введения ртутного термометра.
Патоморфологическое исследование включало некропсию и макроскопическое исследование. Проводили полную некропсию тел всех животных, подвергнутых декапитации. При некропсии исследовали: каркас и скелетно-мышечную систему, внутренние поверхности и проходы, полость черепа и поверхность мозга, шею с органами и тканями, грудную, брюшную и тазовую полости с находящимися в них органами и тканями. Определение токсических доз (ЛД16, ЛД50, ЛД84) действующего препарата «МА-34А» проводили по методике, предложенной Миллером и Тейнтер, применяя пробит-анализ [7 - 10]. Доверительный интервал генеральной средней ЛД50 вычисляется по формуле:
ЛД50 = ЛД50 ± tSЛД50,
где ЛД50 - среднесмертельная доза;
t- критерий достоверности;
SЛД50, - показатель ошибки ЛД50.
Для всех количественных данных вычисляли групповое среднее арифметическое (М), стандартную ошибку среднего (SEM) либо среднеквадратичное отклонение (SD). Вероятность различий показателей средних в группах определяли с использованием критерия t-Стъюдента, Различия считали достоверными при уровне значимости р <0,05.
Результаты исследований и их обсуждение. Оценку острой пероральной токсичности препарата «МА-34А» проводили на 60 белых крысах. Животные были разделены на 6 групп по 5 крыс в каждой, с массой тела 170-220 г. Введение препарата «МА-34А» крысам (самки и самцы) опытной группы осуществляли внутрижелудочно в следующих дозах: 3,0; 3,1; 3,2; 3,3; 3,4 мг/кг массы тела. Животным контрольной группы вводили воду для инъекций.
При введении токсических доз вещества «МА-34А» у крыс (самки) отмечали угнетение, нарушение координации движений, отсутствие реакции на тактильные, болевые и звуковые раздражители. Обездвиживающий эффект у животных наблюдался при дозах 3,0-3,3 мг/кг массы тела через 612 минут после их введения и продолжался в течение 15 -20 минут. В это время у животных регистрировали снижение тонуса скелетных мышц, отсутствие реакции на тактильные, болевые и звуковые раздражители, незначительную миофибрилляцию. При дозе 3,2 мг/кг массы тела клинические признаки проявлялись возбуждением, шаткой походкой, боковым положением трех животных, одышкой, миофибрилляцией, через 40-45 минут после введения вещества «МА-34А» три крысы пали. При увеличении дозы до 3,3 мг/кг массы тела клиника характеризовалась угнетением, протиранием глаз и носа, шаткой походкой, наступлением бокового положения, подёргиванием мышц,
дыхательной аритмией. Гибель четырех животных наступила в интервале 37 -43 минут после введения исследуемого препарата «МА-34А» от остановки дыхания. Доза соединения 3,4 мг/кг массы тела оказалась абсолютно смертельной, животные пали в течение 35 -37 минут. При этом клинические признаки проявлялись в виде угнетённого состояния, нарушения координации движений, подергивания мышц, подпрыгивания, брадикардии. Вычисление ЛД 50 препарата «МА-34А» для белых крыс (самки) представлено в таблице 1.
Таблица 1 - Исходные данные для вычисления ЛД50 препарата «МА-34А» для белых крыс
при внутрижелудочном введении
Группа Крысы, внутрижелудочное введение
Самки крыс Самцы крыс
Доза, мг/кг Выборка Выжило Пало Пробиты Доза, мг/кг Выборка Выжило Пало Пробиты
1 0,0 5 5 0 - 0,0 5 5 0 -
2 3,0 5 5 0 3,36 3,0 5 5 0 3,36
3 3,1 5 4 1 4,16 3,1 5 3 2 4,75
4 3,2 5 2 3 5,25 3,2 5 3 2 4,75
5 3,3 5 1 4 5,84 3,3 5 1 4 5,84
6 3,4 5 0 5 6,64 3,4 5 0 5 6,64
ЬБ50 3,2±0,26 3,19 ±0,35
Расчёт ЛД16 и ЛД84 препарата «МА-34А» производили на основании анализа влияния количественного признака на бинарный отклик (рисунок 1).
Рисунок 1 - Вычисление токсических доз препарата «МА-34А» для белых крыс (самки) при
внутрижелудочном введении
Дозы, мг/кг массы тела
Значения величин ЛД84 и ЛД16 находят на графике, при этом ЛД84 соответствует пробит 6, а ЛД16 - пробит 4. В данном случае ЛД§4 равна 3,3 мг/кг массы тела, а ЛД16 - 3,1 мг/кг массы тела. Для того чтобы иметь полное представление о ЛД50, которая может значительно варьироваться в результате индивидуальных особенностей животных данного вида и возраста, а также в результате случайных ошибок эксперимента, необходимо знать интервал ее колебания. Для этого вычислили доверительный интервал генеральной средней ЛД50, который равняется 3,2 (2,94^3,46) мг/кг массы тела животного. Клинические признаки при введении белым крысам (самцы) препарата «МА-34А» характеризовались угнетением, нарушением координаций движения, отсутствием реакции на тактильные, болевые и звуковые раздражители. Обездвиживающий эффект у животных наблюдался при дозах 3,0-3,3 мг/кг массы тела через 5-10 минут после их введения и продолжался в течение 13-23 минут. В это время у животных регистрировали снижение тонуса скелетных мышц, отсутствие реакции на
тактильные, болевые и звуковые раздражители, незначительную миофибрилляцию. При введении доз 3,1-3,2 мг/кг массы тела клинические признаки проявлялись возбуждением, шаткой походкой, одышкой, миофибрилляцией, наступлением бокового положения трех животных, через 41-43 минут после введения соединения «МА-34А» две крысы пали. При увеличении дозы до 3,3 мг/кг клиника наблюдалась через 39-40 минут и характеризовалась угнетением, протиранием глаз и носа, шаткой походкой, наступлением бокового положения, подёргиванием мышц, дыхательной аритмией. Гибель четырех животных наступила в интервале 36-38 минут после введения исследуемого соединения «МА-34А» от асфиксии. Доза соединения 3,4 мг/кг массы тела оказалась абсолютно смертельной, животные пали в течение 32-35 минут. При этом клинические признаки проявлялись в виде угнетённого состояния, нарушения координации движений, бокового положения, подергивания мышц, мио-фибрилляции, брадикардии. Вычисление ЛД50 вещества «МА-34А» для белых крыс (самцы) представлено в таблице 1. Расчёт ЛД16 и ЛД84 вещества «МА-34А» производили на основании анализа влияния количественного признака на бинарный отклик (рисунок 2).
Рисунок 2 - Вычисление токсических доз препарата «МА-34А» для белых крыс (самцы) при
внутрижелудочном введении
Дозы, мг/кг массы тела
Значения величин ЛД84 и ЛД16 находят на графике, при этом ЛД84 соответствует пробит 6, а ЛД16 - пробит 4. В данном случае ЛД84 равна 3,32 мг/кг массы тела, а ЛД16 - 3,07 мг/кг массы тела. Для того чтобы иметь полное представление о ЛД50, которая может значительно варьироваться в результате индивидуальных особенностей животных данного вида и возраста, а также в результате случайных ошибок эксперимента, необходимо знать интервал ее колебания. Для этого вычислили доверительный интервал генеральной средней ЛД50, который равняется 3,19 (2,84^3,54) мг/кг массы тела животного.
Исследование острой токсичности препарата «МА-34А» при внутримышечном введении проводили на 60 белых крысах, с массой тела 170-220 г. Введение соединения «МА-34А» самкам и самцам опытной группы осуществляли внутримышечно в следующих дозах: 2,3; 2,4; 2,5; 2,6; 2,7 мг/кг массы тела. Животным контрольной группы вводили воду для инъекций (изотонический раствор натрия хлорида в бидистиллированной воде). На фоне введения токсических доз препарата «МА-34А» у крыс (самки) отмечали угнетение, нарушение координации движений, отсутствие реакции на тактильные, болевые и звуковые раздражители. Обездвиживающий эффект у животных наблюдался при дозах 2,3-2,6 мг/кг массы тела через 5-10 минут после введения и продолжался в течение 8 -10 минут. При введении доз 2,4-2,5 мг/кг массы тела клинические признаки проявлялись возбуждением, шаткой походкой, миофибрилляцией, наступлением бокового положения двух крыс, через 20-25 минут после введения соединения «МА-34А» одна крыса пала. При увеличении дозы до 2,6 мг/кг массы тела клиника наблюдалась через 5-8 минут и характеризовалась угнетением, протиранием глаз и носа, шаткой походкой, наступлением бокового положения, подёргиванием мышц, дыхательной аритмией. Гибель четырех животных наступила в интервале 17 -20 минут после введения исследуемого препарата «МА-34А» от остановки дыхания. Доза соединения 2,7 мг/кг массы тела оказалась
абсолютно смертельной, животные пали в течение 15 -17 минут. При этом клинические признаки проявлялись в виде угнетённого состояния, нарушения координации движений, подергивания мышц, миофибрилляции, брадикардии. Вычисление ЛД50 препарата «МА-34А» для белых крыс (самки) представлено в таблице 2.
Таблица 2 - Исходные данные для вычисления ЛД50 препарата «МА-34А» для белых крыс
при внутримышечном введении
Группа Крысы, внутримышечное введение
Самки крыс Самцы крыс
Доза, мг/кг Выборка Выжило Пало Пробиты Цоза, мг/кг Выборка Выжило Пало Пробиты
1 0,0 5 5 0 - 0,0 5 5 0 -
2 2,3 5 5 0 3,36 2,3 5 5 0 3,36
3 2,4 5 4 1 4,16 2,4 5 3 2 4,16
4 2,5 5 2 3 4,16 2,5 5 3 2 4,75
5 2,6 5 1 4 5,84 2,6 5 1 4 5,84
6 2,7 5 0 5 6,64 2,7 5 0 5 6,64
ЬБ50 2,52±0,26 2,51 ±0,35
Расчёт ЛД16 и ЛД84 препарата «МА-34А» производили на основании анализа влияния количественного признака на бинарный отклик (рисунок 3).
Рисунок 3 - Вычисление ЛД§4 и ЛД16 препарата «МА-34А» для белых крыс (самки) при
внутримышечном введении
6,64
2,8
Дозы, мг/кг массы тела
Значения величин ЛД84 и ЛД16 находят на графике, при этом ЛД84 соответствует пробит 6, а ЛД16 - пробит 4. В данном случае ЛД§4 равна 2,74 мг/кг массы тела, а ЛД16 -2,4 мг/кг массы тела. Для того чтобы иметь полное представление о ЛД50, которая может значительно варьироваться в результате индивидуальных особенностей животных данного вида и возраста, а также в результате случайных ошибок эксперимента, необходимо знать интервал ее колебания. Для этого вычислили доверительный интервал генеральной средней ЛД50, который равняется 2,52 (2,26^2,78) мг/кг массы тела животного.
При введении токсических доз препарата «МА-34А» самцам отмечали угнетение, нарушение координации движений, отсутствие реакции на тактильные, болевые и звуковые раздражители. Обездвиживающий эффект у животных наблюдался при дозах 2,3-2,5 мг/кг массы тела и продолжался в течение 7-10 минут. При дозе введения 2,5 мг/кг массы тела клинические признаки проявлялись возбуждением, шаткой походкой, наступлением бокового положения, одышкой, миофибрилляцией, через 17-20 минут после введения соединения «МА-34» две крысы пали. При увеличении дозы до 2,6 мг/кг массы тела клинические признаки характеризовались угнетением, протиранием глаз и носа, шаткой походкой, боковым положением, подёргиванием мышц, дыхательной аритмией. Гибель четырех животных наступила в интервале 15-18 минут после введения исследуемого препарата «МА-
34» от остановки дыхания. Доза соединения 2,7 мг/кг массы тела оказалась абсолютно смертельной, животные пали в течение 13-17 минут. При этом клинические признаки проявлялись в виде угнетённого состояния, нарушения координации движений, подергивания мышц, миофибрилляции, бради-кардии. Вычисление ЛД50 препарата «МА-34А» для крыс-самцов представлено в таблице 2.
Приведённые выше результаты для определения ЛД16 иЛД84 препарата «МА-34А» проиллюстрированы на рисунке 4.
Рисунок 4 - Вычисление ЛД84 и ЛД16 препарата «МА-34» для белых крыс (самцы) при внутримышечном введении
6,64
2,8
Дозы, мг/кг массы тела
Значения величин ЛД84 и ЛД16 находят на графике, при этом ЛД84 соответствует пробит 6, а ЛД16 - пробит 4. В данном случае ЛД84 равна 2,63 мг/кг массы тела, а ЛД16 - 2,39 мг/кг массы тела. Провели вычисление доверительного интервала генеральной средней ЛД 50, который равняется 2,39 (2,16^2,86) мг/кг массы тела животного.
При изучении влияния препарата «МА-34А» на динамику массы тела белых крыс при внутримышечном и внутрижелудочном введении статистически достоверного изменения массы тела крыс, при введении различных доз препарата «МА-34» в сравнении с показателями у интактных животных не обнаружено. Динамика изменения массы тела белых крыс при внутримышечном и внутрижелу-дочном введении препарата «МА-34А» представлено в таблицах 3 и 4.
Таблица 3 - Влияние однократного внутримышечного введения препарата «МА-34А» на динамику массы тела белых крыс, г (M±m)
Группа Пол Срок исследования, сут
Фон 7 14
1 группа 6 197,00±5,04 227,20±13,94 251,80±6,06
(контроль) ? 181,40±4,04 206,00±3,87± 236,80±3,42
2 группа 195,20 ±4,32 220,00±3,08 252,25±3,27
? 179,00 ±4,47 202,75±9,26 229,50±3,64
3 группа 6 192,60±2,41 213,25±2,22 242,75±2,75
? 180,60±5,32 205,50±1,29 235,25±2,50
4 группа 6 196,40±3,21 216,33±2,08 247,00±8,72
? 178,80±4,21 204,5±5,20 235,75±8,88
5 группа 6 197,20±4,97 216,00 241,00
? 179,80±4,06 200,00 225,00
6 группа 6 194,80±4,55 - -
? 181,00±4,06 - -
Таблица 4 - Влияние однократного внутрижелудочного введения препарата «МА-34А» на динамику массы тела белых крыс, г (М±т)
Группа Пол Срок исследования, сут
Фон 7 14
1 группа (контроль) 6 204,80±6,22 236,60±5,37 269,60±5,03
? 185,00±6,22 212,60±4,51 237,80±4,09
2 группа 195,80 ±3,83 226,50±4,39 258,50±5,36
? 181,80 ±3,70 206,00±1,87 233,25±2,17
3 группа 6 201,20±5,76 228,67±3,51 261,00±5,29
? 180,40±3,36 207,50±5,51 233,00±4,97
4 группа 6 201,40±4,56 230,00±2,65 262,00±2,65
? 191,40±4,21 204,5±5,20 235,75±8,88
5 группа 6 204,60±6,23 225,00 257,00
? 180,40±4,45 212,00 220,00
6 группа 6 208,60±4,83 - -
? 208,60±4,83 - -
Таблица 5 - Влияние однократного внутримышечного введения препарата «МА-34А» на ректальную температуру белых крыс, °С (М±т)
Группа Пол Срок исследования, сут
Фон 7 14
1 группа 6 38,68±0,19 38,74±0,27 38,60±0,16
(контроль) ? 38,74±0,29 38,60±0,16 38,48±0,33
2 группа 6 38,86 ±0.27 38,63±0,19 38,58±0,13
? 38,78±0,29 38,60±0,19 38,58±0,27
3 группа 6 38,62±0,33 38,80±0,22 38,68±0,33
? 38,78±0.22 38,58±0,17 38,70±0,29
4 группа 6 38,78±0,16 38,73±0,15 38,70±0,10
? 38,66±0,24 38,75±0,13 38.73±0,17
5 группа 6 38,54±0,21 38,50 38,50
? 38,68±0,26 38,40 38,40
6 группа 6 38,64±0,27 - -
? 38,68±0,24 - -
Таблица 6 - Влияние однократного внутрижелудочного введения препарата «МА-34А» н ректальную температуру белых крыс, °С (М±т)
Группа Пол Срок исследования, сут
Фон 7 14
1 группа 6 38,64±0,23 38,62±0,19 38,68±0,27
(контроль) ? 38,58±0,19 38,56±0,11 38,56±0,21
2 группа 6 38,50±0,40 38,63±0,19 38,65±0,23
? 38,68±0,15 38,63±0,13 38,65±0,23
3 группа 6 38,72±0,16 38,63±0,21 38,63±0,32
? 38,70±0,22 38,78±0.17 38,60±0,29
4 группа 6 38,72±0,26 38,73±0,21 38,73±0,21
? 38,52±0,13 38,65±0,07 38,50±0,14
5 группа 6 38,78±0,26 38,50 38,73
? 38,56±0,18 38,50 38,60
6 группа 6 38,72±0,19 - -
? 38,78±0,26 -
Достоверных отличий между опытом и контролем при 95% уровне вероятности не установлено. Статистически достоверного изменения ректальной температуры крыс, при введении различных доз препарата «МА-34А», в сравнении с показателями крыс у контрольных животных не обнаружено (таблица 5, 6).
При 95% уровне вероятности достоверных отличий между опытной и контрольной группой не установлено.
Через 14 дней после введения вещества «МА-34А» была проведена эвтаназия у выживших животных и патоморфологическое вскрытие. При вскрытии крыс никаких патологий не наблюдалось. Трупы животных правильного телосложения и средней полноты. Естественные отверстия: рот закрыт, язык в полости рта, слизистая оболочка губ, дёсен бледно -розовые, гладкие, блестящие. Ноздри бледно-розовые, сухие, отделяемого нет, проходимость хорошая. Ушные раковины без изменений, наружный слуховой проход чистый. Анус закрыт, бледно-розовая слизистая оболочка. Шерсть хорошо держится, блестит. Кожа эластичная, подкожная клетчатка хорошо выражена, желтоватая, эластичная. Мышцы красноватого цвета, хорошо развиты, сухожилия и связки белые, эластичные, крепкие. Конфигурация костей и суставов не нарушена. Положение органов грудной и брюшной полостей: анатомически правильное. В грудной и брюшной полостях наблюдали жидкость. Проходимость глотки и пищевода не нарушена. Сердце по объему не изменяется. Полости сердца содержат небольшое количество несвернувшейся крови, эндокард гладкий, блестящий. Легкие от светло-розового до красного цвета, неравномерно окрашены, дольки хорошо выражены. Селезенка не увеличена, прозрачная, края продолговатые, эластичной консистенции, красно-коричневого цвета. Печень не увеличена, края острые, формы без изменений, плотной консистенции, вишневого цвета. Желудок заполнен пищевыми массами. Слизистая желудка не гиперемирована, без кровоизлияний. Слизистая оболочка тонкой и толстой кишки без изменений. Почки бобовидной формы, темно-коричневого цвета, околопочечная клетчатка содержит умеренное количество жира, капсула легко отделяется, граница между корковой и мозговой зонами выражена. Мочевой пузырь пуст или наполнен светло-желтой мочой, слизистая бледно-розовая. Половые органы без отклонений. Головной мозг не отечен, костный мозг эластичной консистенции, без кровоизлияний.
Заключение. В результате проведенных исследований установлены токсикометрические параметры препарата «МА-34А» при внутрижелудочном введении для крыс-самок: ЛД84 = 3,3 мг/кг массы тела, ЛД16 = 3,1 мг/кг массы тела, ЛД50= 3,2 мг/кг (2,94^3,46) мг/кг массы тела; для крыс -самцов ЛД84 = 3,32 мг/кг массы тела, ЛД16 = 3,07 мг/кг массы тела, ЛД50= 3,19 (2,84^3,57) мг/кг массы тела животного.
Установлены токсикометрические параметры препарата «МА-34А» при внутримышечном введении для крыс-самок: ЛД84 = 2,74 мг/кг массы тела, ЛД16 = 2,40 мг/кг массы тела, ЛД50= 2,52 мг/кг (2,26^2,78) мг/кг массы тела; для крыс-самцов ЛД84 = 2,63 мг/кг массы тела, ЛД16 = 2,39 мг/кг массы тела, ЛД50= 2,51 (2,16^2,86) мг/кг массы тела животного.
Список источников
1. Громаков В.В., Зимаков Ю.А., Хайрутдинов И.Г., Громаков В.В. Миорелаксанты: проблемы практического использования в ветеринарии // Ветеринарный врач. - 2002. - № 1. - С. 23.
2. Харкевич, Д. А. Фармакология курареподобных средств. М.: Медицина, 1969. - 318 с.
3. Урядов В.Г., Хакимов М.С, Якупова Э.Н., Фицев И.М, Насыбуллина Ж.Р. Блокаторы холиноре-цепторов. Часть 2. Взаимодействие нейромедиаторов и миорелаксантов с трансмембранными рецепторами // Бутлеровские сообщения. - 2023. - Т. 74, № 5. - С. 102-111.
4. ГОСТ Р 8.736-2011. Государственная система обеспечения единства измерений (ГСИ). Измерения прямые многократные. Методы обработки результатов измерений. Основные положения : межгосударственный стандарт : издание официальное: утвержден и введен в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 13 декабря 2011 г. № 1045-ст : введен впервые: дата введения 2013-01-01 / разработан Федеральным государственным унитарным предприятием «Всероссийский научно-исследовательский институт метрологии им. Д. И. Менделеева» (ФГУП «ВНИИМ им. Д. И. Менделеева»). М.: Стандартинформ, 2013. - 24 с.
5. Миронов, А. Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.
6. ГОСТ 33216-2014. Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила содержания и ухода за лабораторными грызунами и кроликами: издание официальное: утверждён и введён в действие приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 9 ноября 2015 г. № 1733-ст : введён впервые : дата введения 2016-07-01 / подготовлен Некоммерческим партнёрством «Объединение специалистов по работе с лабораторными животными» (Rus-LASA). М.: Стандартинформ, 2016. - 16 с.
7. Рахматуллин Э.К., Василевский Н.М., Идиятов И.И., Маланьев А.В., Ямалова Г.Р., Халикова К.Ф., Хакимов М.С. Сравнительная токсикологическая характеристика фармацевтических субстанций, содержащих бис-четвертичные аммониевые соединения // Ветеринарный фармакологический вестник. - 2023. - № 3 (24). - С. 18-29.
8. Ямалова Г.Р., Халикова К.Ф., Маланьев А.В., Борисова Е.Е. Изучение острой токсичности препарата М-4 на белых крысах // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки сельского хозяйства. - 2021. - № 23. - С. 621-623.
9. Фролов А.В., Василевский Н.М., Низамов Рам. Н., Гайнуллин Р.Р., Нефедова Р.В. Оценка токсичности и биологического действия экспериментального препарата // Ветеринарный врач. -2022. - № 1. - С. 46-50.
10. Асланов Р.М., Макаева А.Р. Макаева В.И., Альмитова Л.И. Определение острой и хронической токсичности антидота рр-2 на гидробионтах // Ветеринарный врач. - 2020. - № 5. - С. 18-25.
References
1. Gromakov V.V., Zimakov Yu.A., Khairutdinov I.G., Gromakov V.V. Muscle relaxants: problems of practical use in veterinary medicine // Veterinary doctor. - 2002. - No. 1. - P. 23.
2. Kharkevich, D. A. Pharmacology of curare-like drugs. M.: Medicine, 1969. - 318 p.
3. Uryadov V.G., Khakimov M.S., Yakupova E.N., Fitsev I.M., Nasybullina Z.R. Cholinoreceptor blockers. Part 2. Interaction of neurotransmitters and muscle relaxants with transmembrane receptors // Butlerov Communications. - 2023. - No. 5 (74). - pp. 102-111.
4. State Standard P 8.736-2011. State system for ensuring the uniformity of measurements (SSM). Multiple direct measurements. Methods for processing measurement results. Basic provisions: interstate standard: official publication: approved and put into effect by order of the Federal Agency for Technical Regulation and Metrology dated December 13, 2011 No. 1045-st: introduced for the first time: introduction date 2013-01-01 / developed by the Federal State Unitary Enterprise " All-Russian Research Institute of Metrology named after. D. I. Mendeleev" (FSUE "VNIIM named after D. I. Mendeleev"). M.: Standartin-form, 2013. - 24 p.
5. Mironov, A. N. Guidelines for conducting preclinical studies of drugs. Part one. M.: Grif and K, 2012. -944 p.
6. State Standard 33216-2014. Guide to the care and maintenance of laboratory animals. Rules for the maintenance and care of laboratory rodents and rabbits: official publication: approved and put into effect by order of the Federal Agency for Technical Regulation and Metrology dated November 9, 2015 No. 1733-st: introduced for the first time: date of introduction 2016-07-01 / prepared by Non-profit partnership "Association of Specialists in Working with Laboratory Animals" (Rus-LASA). M.: Standartinform, 2016. - 16 p.
7. Rakhmatullin E.K., Vasilevskiy N.M., Idiyatov I.I., Malanyev A.V., Yamalova G.R., Khalikova K.F., Khakimov M.S. Comparative toxicological characteristics of pharmaceutical substances containing bis-quaternary ammonium compounds // Bulletin of veterinary pharmacology. - 2023. - No. 1 (22). - pp. 19 - 29.
8. Yamalova G.R., Khalikova K.F., Malanyev A.V., Borisova E.E. Study of acute toxicity of the drug M-4 in white rats // Topical issues of improving the technology of production and processing of agriculture. -2021. - No. 23. - pp. 621-623.
9. Frolov A.V., Vasilevskiy N.M., Nizamov Ram. N, Gaynullin R.R., Nefedova R.V. Assessment of toxicity and biological actions of the experimental preparation // Veterinary doctor. - 2022. - No. 1. - pp. 46-50.
10. Aslanov R.M, Makaeva A.R, Makaeva V.I., Almitova L.I. Determination of acute and chronic toxicity of the antidote rr-2 on hydrobionts // Veterinary doctor. - 2020. - No. 5. - pp. 18-25.
Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации.
Авторы подтверждают отсутствие конфликта финансовых/нефинансовых интересов, связанных с
написанием статьи.
All authors have made an equivalent contribution to the preparation of the publication.
The authors declare that there is no conflict of interest.
Принята к публикации / accepted for publication 18.12.2023;
© Замалетдинова А.И., Асланов Р.М., Нигматулин Г.Н., Халикова К.Ф., Маланьев А.В., Ямалова Г.Р. 2024
