CC BY
16
УДК 619:631.453:599.323.4
ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ПЕРОРАЛЬНОЙ ТОКСИЧНОСТИ НОВОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ ДЛЯ ЯИЧНОГО ПТИЦЕВОДСТВА
Маланьев А.В. - к.б.н., с.н.с., Ямалова Г.Р. - мл.н.с., Халикова К.Ф. - к.вет.н., с.н.с., Семенов Э.И. - д.вет.н., г.н.с, Фицев И.М. - к.х.н., вн.с., Насыбуллина Ж.Р. - врио. директора
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической
безопасности»
Ключевые слова: птицеводство, кормовая добавка, острая токсичность, белые крысы, пробит-анализ
Keywords: poultry, feed additive, acute toxicity, white rats, probit-analysis
Успешное ведение индустриального птицеводства в нынешних экономических условиях может быть достигнуто не только за счет комплектования поголовья кроссами птицы со значительным генетическим потенциалом, введения новейших технологий, но и за счет применения инновационных
фармакологических исследований,
улучшающих состояние
сельскохозяйственной птицы [5, 13].
В современном птицеводстве встречается большое количество факторов, оказывающих неблагоприятное
воздействие на организм
сельскохозяйственной птицы:
несбалансированное кормление,
нарушение условий содержания и технологии хранения кормов, снижение двигательной активности. Все это приводит к развитию заболеваний птицы и снижению ее продуктивности. Основными причинами, способствующими снижению сохранности и продуктивности птицы, являются плохие корма,
контаминированные различными
токсинами природного и антропогенного происхождения (микотоксины, пестициды, нитраты, тяжелые металлы, консерванты, эмульгаторы и др.). Кроме того, в рационах часто наблюдается недостаток витаминов, микро- и макроэлементов,
антиоксидантных веществ, растительных волокон. Нарушение условий хранения и переработки кормов, режимов кормления, отсутствие уборки в кормушке,
залеживание комбикормов способствуют заболеваемости поголовья птицы. Вместе с этим нарушение условий содержания и кормления не всегда является основной причиной заболеваний птиц, но в совокупности со стресс-факторами на фоне снижения резистентности организма негативно сказывается на общем состоянии птицы [1, 6, 11, 15].
Контаминация кормов птицы антипитательными или токсичными элементами, является одним из ограничивающих условий при
производстве продуктов птицеводства. Следует отметить, что корма поражаются ксенобиотиками при внесении в посевы удобрений, очень часто встречается поражение кормов микотоксинами. Ксенобиотики обладают значительной токсичностью, а большинство из них -мутагенными, тератогенными,
канцерогенными и иммуносупрессивными свойствами [9].
С учетом изложенного выше, актуальной является разработка эффективных кормовых добавок комплексного антитоксического и гепатопротекторного действия,
регулирующих микрофлору желудочно-кишечного тракта, которые по эффективности не уступают широко распространенным кормовым
антибиотикам. Одним из развивающих факторов является усовершенствование комплексных кормовых добавок на базе химического синтеза их безопасных
компонентов, усиленных
гепатопротекторными и
детоксицирующими веществами,
участвующими в регуляции процессов токсикокинетики чужеродных соединений, включая этапы всасывания, печеночно-кишечной циркуляции, биотрансформации и детоксикации. При этом в организме они метаболируют с образованием безопасных соединений [4, 8].
Определение параметров острой пероральной токсичности на лабораторных животных является необходимым этапом исследований для оценки безопасности и дальнейшего изучения кормовой добавки в рамках доклинических исследований.
Цель настоящей работы состояла в оценке острой токсичности кормовой добавки для яичного птицеводства под шифром «Т-1.4».
Материал и методы
исследований. Эксперименты по определению острой токсичности проводили на лабораторных животных -нелинейных белых крысах по методике, приведенной в [10]. Группы животных формировали по принципу аналогов с учетом возраста, живой массы и пола [6, 14]. Животные были разделены на 5 групп по 5 особей в каждой, с массой тела 180200 г. В опыте использовали клинически здоровых животных одного возраста, находившихся в одинаковых условиях кормления и содержания. Животных включали в опыт после предварительной выдержки их на карантине в течение 14 суток. При проведении экспериментов применяли кормовую добавку под шифром «Т-1.4», синтезированную в ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической
безопасности».
Животным внутрижелудочно,
используя иглу с оливой на конце, однократно в различных дозах (1800 мг/кг, 2000 мг/кг, 2200 мг/кг, 2400 мг/кг и 2600 мг/кг массы тела) вводили кормовую добавку «Т-1.4», животным контрольной группы - дистиллированную воду.
Общая продолжительность
наблюдения за животными составила 14 суток. С первого дня после введения
препарата лабораторные крысы находились под непрерывным клиническим
наблюдением. В ходе него учитывали: интенсивность и характер двигательной активности, тонус скелетных мышц, реакцию на тактильные, болевые, звуковые и световые раздражители, размер зрачка, частоту дыхательных движений, ритм сердечных сокращений, состояние волосяного и кожного покрова, окраску слизистых оболочек, потребление корма и воды, изменение массы тела. В случае гибели проводили патологоанатомическое исследование.
Были проведены расчеты таких параметров острой токсичности как ЛД50, ЛД16 и ЛД84, ошибки средней смертельной дозы и доверительного интервала генеральной средней ЛД50. Определение средней смертельной дозы ЛД50 проводили по методике, приведенной в [2] вычисление ЛД16 и ЛД84 - методом пробит-анализа Миллера и Тейнтер, класс опасности кормовой добавки «Т-1.4» определяли с применением нормативно-технической документации [3].
Результат исследований. При введении крысам кормовой добавки «Т-1.4» в дозе 1800мг/кг видимых клинических изменений в поведении и общем состоянии не наблюдали.
В дозе 2000 мг/кг при введении «Т-1.4» в желудок отмечали временное угнетение животных, выражающееся в малоподвижности и слабом реагировании на внешние раздражители, которое проходило через сутки.
При дозе «Т-1.4» равной 2200 мг/кг клинические признаки проявлялись в виде слабой седации, которая сочеталась с понижением подвижности. При этом фиксировали незначительное увеличение частоты дыхательных движений, снижение потребления корма и воды, одышку, тремор с чередующимися судорогами. Через 6 ч 50 мин после введения «Т-1.4» одна крыса пала, вторая - пала через сутки. У выживших животных состояние нормализовалось на вторые сутки. В дальнейшем у выживших животных наблюдали восстановление дыхания и чувствительности. Животные начали
проявлять активность на третьи сутки исследований. Также фиксировали восстановление тактильной и болевой чувствительности до уровня контрольных показателей. На 3 сутки и в более поздние сроки падежа животных не наблюдалось.
При увеличении дозы до 2400 мг/кг клинические признаки наблюдали через 6 мин и характеризовались угнетением, протиранием глаз и носа, через 10-12 мин фиксировали скученность,
малоподвижность, частое закрывание глаз, через 21-25 мин затрудненное дыхание,
шаткую походку, через 47-50 мин тремор с чередующимися судорогами. Гибель 4 животных наступила на 59-63 мин после введения «Т-1.4». Доза «Т-1.4» в 2600 мг/кг оказалась абсолютно смертельной, вызывала гибель всех подопытных животных на 49-54 мин.
Далее были проведены расчеты следующих параметров острой токсичности - ЛД50, ЛД16, ЛД84, ошибки средней летальной дозы «Т-1.4» и доверительного интервала генеральной средней ЛД50 (Таблица 1).
Таблица 1 - Исходные данные для вычисления среднесмертельной дозы кормовой добавки «Т-1.4» для белых крыс
Группа животных Количество животных в группе Доза препарата, мг/кг Число животных Процент гибели животных Соответствующие пробиты
Выживших погибших
1 2 3 4 5 6 7
1 5 1800 5 0 0 -
2 5 2000 5 0 0 3,36
3 5 2200 3 2 40,0 4,75
1 2 3 4 5 6 7
4 5 2400 1 4 80 5,84
5 5 2600 0 5 100 6,64
Для вычисления ЛД50 использовали формулу:
£(а+Ь)(т-п)
ЛД50=
200
где знак суммирования стоящих после него величин; a и Ь - величины смежных доз; m и п - частоты смертельных исходов, %; 200 - постоянный коэффициент.
ЛД50= 2260 мг/кг
£(3800Х0)(4200Х40) (4600Х40)(5000Х20)
200
0+168000+184000+100000 200
(1)
452000 200
По результатам расчетов средняя смертельная доза кормовой добавки «Т-1.4» для белых крыс составила 2260 мг/кг массы тела животного.
По приведенным в таблице данным был получен рисунок 1, для вычисления ЛД84 и
ЛД16.
Дозы «Т-1.4», мг/кг
Рисунок 1 - Вычисление ЛД84 и ЛД16
Величины ЛД84 и ЛД16 находили на графике - ЛД84 соответствует пробит 6, а ЛД16 - пробит 4. Таким образом, значение ЛД84 составляет 2455 мг/кг, а ЛД16 2090 мг/кг.
По результатам проведенных исследований значение ошибки ЛД50 (5Лд50 ) составило значение, равное 66,6 мг/кг. Вследствие того, что ЛД50 может значительно варьировать в результате индивидуальных особенностей животных данного вида и возраста, а также в результате случайных ошибок
эксперимента, вычисляли доверительный интервал генеральной средней ЛД50, который составил значение
(2132,80-2407,19) мг/кг массы тела животного.
Согласно результатам исследований необходимо отметить, что у животных, которым вводили кормовую добавку «Т-1.4» в дозах близких к ЛД0-ЛД16, наблюдалось увеличение массы тела. Внешнее состояние практически не отличалось от состояния животных контрольной группы. В группе животных, получавших «Т-1.4» в дозах близких ЛД50-ЛД100, наблюдалось снижение массы тела в среднем на 20-25 % относительно контрольных значений.
Павших животных опытных групп подвергали полной макроскопической аутопсии, которая включала исследование наружной поверхности тела, черепных, грудных и брюшных полостей и их содержимого. Внешний вид животных
правильного телосложения, средней упитанности. Шерстный покров блестящий. Кожа эластичная. Скопление жидкости в грудной и брюшной полости не наблюдалось. Сердце увеличено в размере, в полостях умеренное количество несвернувшейся крови, эндокард блестящий. Миокард красноватого цвета, упругий. Легкие равномерно окрашены, упругой консистенции, светло-розового цвета, дольчатость хорошо выражена, отека нет. Селезенка в объеме не увеличена, края острые. Печень красного цвета, края острые. Слизистая оболочка желудка с кровоизлияниями, умеренно
гиперемирована. Слизистая оболочка тонкого и толстого отделов кишечника сероватого оттенка. Капсула почек легко отделяется. Головной мозг не отечен, дольчатость хорошо выражена.
Заключение. Совокупность
результатов проведенных исследований позволила определить токсикологические свойства новой кормовой добавки «Т-1.4», синтезированной в ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», ЛД50 составила значение равное 2260±66,6 мг/кг, а ЛД16 и ЛД84, соответственно, 2090 мг/кг и 2455 мг/кг массы тела. На основании результатов проведенных исследований кормовую добавку «Т-1.4» можно отнести к 3 классу опасности - веществам умеренно опасным.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Алеев, Д. В. Продуктивные
показатели цыплят-бройлеров при интоксикации имидаклопридом на фоне применения сорбентов / Д. В. Алеев, К. Ф. Халикова, А. В. Маланьев, В. И. Егоров, К. Х. Папуниди // Птица и птицепродукты. - 2019. - № 3. - С. 28-30.
2. Беленький, М. Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М. Л. Беленький. - Ленинград: Медгиз. [Ленингр. отд-ние], 1963. - 152 с.
3. ГОСТ 12.1.007-76 Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. - М.: Стандартинформ, 2007. - 7 с.
4. Дорожкин, В. И. Традиционные и инновационные способы решения задач в области ветеринарной санитарии, гигиены и экологии / В. И. Дорожкин, А. М. Смирнов, Н. И. Попов, А. В. Суворов, Н. К. Гуненкова // Российский журнал Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2020. - № 1 (33). - С. 6-11.
5. Ковалев, Д. Г. Изучение уровня безвредности нового производного аденина, проявляющего антидепрессивную активность при однократном введении в максимальных дозах / Д. Г. Ковалев, Л. И. Бугаева, А. А. Озеров // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2010. - №. 4. - С. 15-17.
6. Макаева, А. Р. Мониторинг питательной ценности и химической безопасности основных кормов Республики Татарстан по результатам исследований, выполненных в 2019 году / А. Р. Макаева, О. В. Шлямина, И. М. Фицев // Бутлеровские сообщения. - 2020. - Т. 62 (4). - С. 123-128.
7. Маланьев, А. В. Изучение острой токсичности кинмикса на белых крысах / А. В. Маланьев, К. Ф. Халикова, Г. Р. Ямалова, Д. В. Алеев, В. И. Егоров // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2020. - Т. 242 (II). - С. 108-112.
8. Мишина, Н. Н. Эффективность
энтеросорбентов различной природы при полимикотоксикозе свиней / Н. Н. Мишина, Э. И. Семенов, А. Ф. Хасиятуллин, Р.М. Потехина [и др.] // Ветеринария. -2020. - № 11. - С. 49-53.
9. Папуниди, К. Х. Комбинированные поражения животных и разработка средств профилактики и леч е н ия / К. Х. Папуниди, Г. В. Конюхов, Р. Н. Низамов, Э. И. Семёнов, И. Р. Кадиков. - Казань: ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», 2019. - 248 с.
10. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / А. Н. Миронова. - Москва: Гриф и К, 2012.
- 944 с.
11. Семенов, Э. И. Случаи массового отравления животных, птиц и рыб в некоторых регионах Российской Федерации и стран СНГ / Э. И. Семёнов, А. М. Тремасова, Л. Е. Матросова, И. Р. Кадиков [и др.] // Ветеринария. - 2021.
- № 8. - С. 39-44.
12. Ступников, А. А. Токсичность гербицидов и арборицидов и профилактика отравлений животных / А. А. Ступников. -Ленинград: Колос, 1975. - 240 с.
13. Фисинин, В. И. Мировое и Российское птицеводство: реалии и вызовы будущего: монография: монография / В. И. Фисинин. - Москва: Хлебпродинформ, 2019. - 470 с. - ISBN 978-5-93109-134-1.
14. Ямалова, Г. Р. Изучение острой токсичности препарата М-4 на белых крысах / Г. Р. Ямалова, К. Ф. Халикова, А. В. Маланьев, Е. Е. Борисова // Материалы международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства» Вып. XXIII. -Йошкар-Ола: Мар. гос. ун-т, 2021. - С. 621623.
15. Surai, P. F. Poultry AI Technology in the countries of the former USSR / P. F. Surai // World's Poultry Science Journal.
- 2017. - Vol. 52. - Р. 27-43.
ИЗУЧЕНИЕ ОСТРОЙ ПЕРОРАЛЬНОЙ ТОКСИЧНОСТИ НОВОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ
ДЛЯ ЯИЧНОГО ПТИЦЕВОДСТВА
Маланьев А.В., Ямалова Г.Р., Халикова К.Ф., Семенов Э.И., Фицев И.М., Насыбуллина Ж.Р.
Резюме
Целью исследования является оценка острой токсичности новой кормовой добавки для яичного птицеводства под шифром «Т-1.4». Эксперименты проводились на лабораторных животных - нелинейных белых крысах, сформированных в группы по принципу аналогов. Исследуемую кормовую добавку вводили животным внутрижелудочно в диапазоне доз от 1800 мг/кг до 2600 мг/кг массы тела. Установлено, что ЛД50, выявленная по методу Першина Г.Н., составила значение равное (2270±66,60) мг/кг. Методом пробит-анализа Миллера и Тейнтер определены ЛД16 и ЛД84, составившие, соответственно, 2090 мг/кг и 2455 мг/кг массы тела. Согласно результатам исследований (внешний осмотр, взвешивание) необходимо отметить, что у животных, которым вводили кормовую добавку «Т-1.4» в дозах близких к ЛД0-ЛД16, наблюдалось увеличение массы тела. Внешнее состояние практически не отличалось от состояния животных контрольной группы. В группе животных, получавших «Т-1.4» в дозах близких ЛД50-ЛД100, наблюдалось снижение массы тела в среднем на 2025 % относительно контрольных значений. На основании результатов проведенных исследований можно заключить, что кормовая добавка «Т-1.4» относится к 3 классу опасности (вещества умеренно опасные).
STUDY OF THE ACUTE ORAL TOXICITY OF A NEW FEED ADDITIVE OF EGG POULTRY
Malanev A.V., Yamalova G.R., Khalikova K.F., Semenov E.I., Fitsev I.M., Nasybullina Zh.R.
Summary
The aim of the study is to assess the acute toxicity of a new feed additive for egg poultry under the code "T-1.4". The experiments were carried out on laboratory animals - nonlinear white rats, formed into groups according to the principle of analogues. The studied feed additive was administered to animals intragastrically in the dose range from 1800 mg/kg to 2600 mg/kg of body weight. It was found that LD50 detected by the method of Pershin G.N. was a value equal to (2270 ± 66.60) mg/kg. Using the Miller and Tainter probit analysis, LD16 and LD84 were determined, amounting to 2090 mg/kg and 2455 mg/kg of body weight, respectively. Based on the results of research (external examination, weighing) in animals receiving a feed additive in doses close to LD0-LD16, a positive dynamics of body weight gain was established, while the general condition of the animals, their coat and the condition of the mucous membranes practically did not differ from the condition of the animals of the control group. In groups of laboratory animals to which "T-1.4" was administered at doses close to LD50 - LD100, the body weight gain was lower relative to the control values by an average of 20-25%. At the same time, there was a decrease in mobility, slight sedation. Based on the results of the conducted studies, it can be concluded that the feed additive "T-1.4" belongs to the 3rd hazard class (moderately dangerous substances).
