CC BY
30
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
ми MLVA-профилями. Результаты MLVA-метода на основе используемых семи локусов были воспроизводимы и стабильны, что позволяет использовать этот метод для разделения на генотипы большого числа штаммов и создания компьютерной базы данных, содержащей информацию о генотипических профилях штаммов. Большинство штаммов (89,5%), характеризующихся идентичным глобально распространенным во многих странах фенотипом резистентности (сниженной чувствительностью к фтор-хинолонам), имели одинаковый MLVA-профиль, что позволило выделить их в один генотип. Такие штаммы ежегодно (2005—2010 гг.) выделялись от заболевших брюшным тифом на различных территориях РФ. Штаммы с другими фенотипами резистентно -сти или чувствительные к антибиотикам, выделенные в разные годы, относились к индивидуальным генотипам.
Полученные результаты указывают на то, что MLVA-анализ в сочетании с определением чувствительности к антибиотикам обеспечивают высокую информативность исследования штаммов возбудителей брюшного тифа и может быть рекомендован для выявления источника инфекции, путей и факторов передачи возбудителя при групповых и спорадических случаях данного заболевания. Результаты проведенной работы легли в основу создания российской базы данных биологических свойств (включая чувствительность к антимикробным препаратам выбора и генетическую характеристику), штаммов возбудителя брюшного тифа, зарегистрированного в РФ.
ИНФЕКЦИЯ, ОБУСЛОВЛЕННАЯ CLOSTRIDIUM DIFFICILE У ГОСПИТАЛИЗИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ С ДИАРЕЕЙ
А.С. Кветная, М.К. Бехтерева, П.С. Макриди, О.И. Ныркова
ФГБУ«НИИДИФМБА России», Санкт-Петербург
Острые кишечные инфекции (ОКИ) по-прежнему остаются одними из наиболее частых инфекционных заболеваний у детей. Несмотря на ведущую роль вирусов в инфекционной патологии ЖКТ, не потеряли своей актуальности и бактериальные кишечные инфекции, но в тоже время за последние годы произошло значительное изменение их этиологической структуры. В настоящее время во всем мире как среди взрослых, так и среди детской популяции все большую актуальность приобретают антибиоти-коассоциированные диареи, в том числе, вызванные Clostridium difficile.
Клостридиоз диффициле — энтероколит (шифр МКБ 10 — A04.7), вызванный Clostridium difficile — острое инфекционное заболевание, вызываемое ан-тибиотикоиндуцированными штаммами Clostridium difficile, клинически проявляющееся симптомами инфекционного токсикоза, диареей вплоть до развития псевдомембранозного колита. Цель данного исследования — установить частоту встречаемости диарей у детей, вызванных токсинопродуцирующими штаммами Clostridium difficile. Исследование фекалий от детей, госпитализированных в клинику кишечных инфекций ФГБУ «НИИДИ ФМБА России», на обнаружение токсинов А&В Clostridium difficile с использованием анализатора «Vidas» проводилось у детей, у которых нельзя было исключить анти-
биотикоассоциированный характер диарей (68%) и у больных с затяжной диареей, сопровождавшейся недостаточным эффектом от проводимой традиционной стартовой терапии (амбулаторно). Всего было обследовано 217 пациентов, из них положительный результат был получен у 39 детей (18%), в том числе по клинико-лабораторным данным у 68% больных была диагностирована водянистая диарея, обусловленная Clostridium difficile, у 28,5% был верифицирован антибиотикоассоциированный колит, вызванный Clostridium difficile, а 1 пациент (2,56%) переносил псевдомембранозный колит.
97,5% пациентов были направлены в клинику с диагнозом «острая кишечная инфекция», средний возраст пациентов составил 3,65+0,55 лет, преобладали мальчики — 67%. У 52% детей выявление токсинов А&В Clostridium difficile сочеталось с обнаружением в фекалиях других этиологических агентов: диареегенных вирусов (ротавирусы, норовирусы, астровирусы) в ПЦР, патогенных (сальмонелл, диа-реегенных эшерихий, кампилобактерий) и условно-патогенных бактерий (клебсиелл) — в ПЦР или с помощью классического бактериологического метода.
ОЦЕНКА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК НОСО- И РОТОГЛОТКИ В ПРОГНОЗИРОВАНИИ ИСХОДОВ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ У ДЕТЕЙ
А.С. Кветная, Л.И. Железова, О.С. Калиногорская
ФГБУ «НИИДИ ФМБА России», Санкт-Петербург
Положения и концепция последних лет об адап-тационно-регуляторных механизмах взаимодействия, определяющих антиинфекционную резистентность слизистых оболочек на начальном этапе развития инфекционного процесса, явились научным обоснованием разработанного в НИИ детских инфекций алгоритма оценки морфофункциональ-ного состояния слизистой носо-ротоглотки, основанный на качественных и количественных показателях клеточного состава секрета слизистой, степени деструкции эпителия, показателей колонизационной резистентности слизистой — индекса инфицирования (ИИ) и показателей колонизационной активности возбудителя и УПМ — индекса адгезии (ИА), показателей фагоцитарной активности ПМЯЛ и мононуклеаров — фагоцитарной активности (ФА) и фагоцитарного индекса (ФИ), уровней электрокинетической активности ядер эпи-телиоцитов (ЭлА) и IgA в секрете слизистой в прогнозировании исходов инфекционной патологии у детей. Эффективность разработанного алгоритма изучена на материале от больных детей с дифтерией (116 проб) и коклюшем (529 проб). Установлено, что отсутствие деструктивных процессов на слизистой ротоглотки, высокая степень колонизации C. diphtheriae, наличие полинуклеаров с фагоцитарной активностью по отношению, например, к S. aureus — критерии для подтверждения диагноза «ангина + бактерионосительство токсигенных дифтерийных палочек». Высокие показатели ЭЛА ядер буккаль-ного эпителия определяет благоприятный исход течения дифтерии. Низкие уровни ЭЛА формируют затяжные формы дифтерийного бактерионосительства. Выраженные деструктивные процессы, низкие показатели колонизационной резистентности слизистой, высокий ИА возбудителя и УПМ, снижение
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
ФА поли- и мононуклеаров, регистрация эозино-филов, снижение уровня ЭлА ядер эпителиоцитов, отсутствие или низкий уровень IgA — критерии прогноза неблагоприятного течения коклюша как у привитых, так и непривитых детей. У детей с тяжелым течением коклюша, установлена тесная корреляционная связь с выраженностью деструктивных изменений слизистой ротоглотки (р < 0,05, г = 0,8). Таким образом, интегральная оценка основных показателей — ЭлА, ИА, ИИ эпителиоцита, ФА и ФИ фагоцитов и SIgA, может служить основой для прогнозирования характера течения инфекционного процесса и показателем для назначения рациональной этиотропной терапии.
ПУТИ ОПТИМИЗАЦИИ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ПНЕВМОНИЙ, ОСЛОЖНИВШИХ ТЕЧЕНИЕ ОРВИ У ДЕТЕЙ
А.С. Кветная, Л.И. Железова, О.С. Калиногорская
ФГБУ «НИИдетских инфекций ФМБА России, Санкт-Петербург
Ежегодно в России регистрируется от 27,3 до 41,2 млн больных детей острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ). Основываясь на том, что пневмонии относятся к тем заболеваниям, в диагностике которых своевременной этиологической расшифровке придается решающее значение, разработка алгоритма проведения бактериологической диагностики пневмоний, осложняющих течение ОРВИ, является актуальной задачей здравоохранения. Алгоритм включал: цитобактериоскопическое исследование браш-биоптатов с оценкой морфофунк-ционального состояния слизистой ротоглотки, выделение и идентификацию возбудителя с определением чувствительности к антибактериальным препаратам и использованием анализатора VITEC 2-COMPACT; посев крови с использованием анализатора «BacT/ ALERT 3D, ретроспективное серологическое исследование парных сывороток крови с аутоштаммом. Обследовано 128 детей в возрасте от 1-го мес до 15 лет, находившихся на лечении в отделении капельных инфекций ФГБУ «НИИ детских инфекций ФМБА России» с рентгенологически-подтвержденным диагнозом «пневмония», осложнившей течение ОРВИ. Достоверно чаще (р < 0,05) пневмонии регистрировались (74,0% случаев) у детей в возрасте от 1-го года до 7-ми лет, переносивших грипп А3 и парагрипп: монобактериальные пневмонии у 32,8% (42 ребенка), пневмонии смешанной природы у 67,2% (86 детей). Основным этиологическим фактором пневмоний, осложнивших течение ОРВИ у детей, по-прежнему, является S. pneumoniae (59,5% — 29 детей) и в 67,6% (86 детей) случаев S. pneumoniae выделялся в ассоциациях: S. pneumoniae—Chlamydia spp. (44 реб. — 51,2%), S. pneumoniae—Hib — (18 детей — 20,9%), S. pneumoniae—K. pneumoniae (9 детей — 10,5%) и у 15 детей (17,4%). Критериями постановки бактериологического диагноза явились: при цитобакте-риоскопии — наличие в поле зрения > 10 пар грам(+) кокков с капсулой или грам(-) полиморфных палочек, нейтрофилов, альвеолярных макрофагов, фагоцитарной реакции по отношению к подозреваемому возбудителю, 10—20% фарингеального эпителия с адгезированными диплококками, при обнаружение возбудителя в условно-диагностической концентрации > 105/г микробных клеток в 1 мл (м.кл/
мл) ларингеальных смывов и мокроты, повторное выделение возбудителя в возрастающей концентрации или исчезновение его в результате этиотропной терапии, нарастание титра соответствующих антител в сыворотке крови больных в 4 и более раз, наличие клинико-лабораторных и рентгенологических данных, свидетельствующих об осложненном течении ОРВИ.
АДГЕЗИВНАЯ АКТИВНОСТЬ САЛЬМОНЕЛЛ В ОЦЕНКЕ ХАРАКТЕРА ТЕЧЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛЕЗНО-ЛЯМБЛИОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ У ДЕТЕЙ
А.С. Кветная, И.В. Партина, Л.И. Железова, О.С. Калиногорская
ФГБУ «НИИ детских инфекций ФМБА России», Санкт-Петербург
Обследовано 205 детей в возрасте от 1 месяца до 14 лет, находившихся на лечении в клинике кишечных инфекций НИИДИ (Санкт-Петербург) в период с 2008 по 2011 гг. с диагнозом «Сальмонеллез». Результаты показали, что сальмонеллез на современном этапе протекает в основном по типу сочетанной сальмонеллезно-лямблиозной инфекции (117 детей, 57,07 ±3,54%). С целью изучения этиопатогенетиче-ских механизмов формирования начального этапа развития сальмонеллезной инфекции, сочетанной с лямблиозной инвазией, нами была разработана in vitro модель «сальмонелла-циста лямблии». Сущность разработанной модели заключалась в регистрации яркого специфического свечения (флюоресценция на3—4 «+») микробных клеток сальмонелл по периферии цист Lamblia intestinalis в реакции непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ). На основании результатов изучения характера взаимодействия сальмонелл с цистными формами лямблий в модели «сальмонелла — циста лямблии», нами впервые была установлена способность сальмонелл проявлять адгезивную активность к поверхности цист простейшего. Расчет среднего количества флюоресцирующих О-соматических антигенов сальмонелл, адгезиро-ванных на поверхности цист простейших проводился по разработанной формуле: Хсредн. = x+y+z: где, х — среднее значение адгезированных на цистах микробных клеток в 1-м поле зрения; y — во 2-м поле зрения; z — в 3-м поле зрения; Хсредн. — среднее значение адгезированных на поверхности цист клеток сальмонелл в трех полях зрения (п/з). x = nj+n2+n.../ q; y = n3+n4+n.../c2; z = n5+n6+n.../c3, где с^д. — количество цист простейших в поле зрения; п1Д3. — количество микробных клеток сальмонелл, адгези-рованных на одной цисте. Установленная «прочная» адгезивная активность сальмонелл к поверхности цист лямблий у детей с сальмонеллезной инфекцией, явилась косвенным доказательством течения со-четанного инфекционного процесса, обусловленного ассоциацией Salmonella spp. и Lamblia intestinalis. Результаты сравнительной оценки тяжести течения сальмонеллеза, ассоциированного с лямблиозом у детей, со средними показателями адгезивной активности сальмонелл по отношению к поверхности цист простейших, позволили установить, что от 1-й до 4-х клеток сальмонелл на цистах лямблий, регистрировалась легкая форма, от 5-и до 12-и — средне-тяжелая форма и от 13-и до 25-и и выше — тяжелая форма течения заболевания. Полученные результаты
