CC BY
50
И.О. Убашеев, И.М. Балъхаев, К. С. Лоншакова. Оценка комплексного гепатозащитного влияния СепПапорзЛ ЬагЬа1а (Ргое!) МА. при остром токсическом гепатите у белых крыс
2 Golberg L.E. Influence of Antibiotics - aminoglycosides on some functions of the microorganism. - 1969. - 260 p.
3. Kapitanenko AM., Dochkin A.M. Clinical Analysis of
Laboratory Studies in the Practice of a Military Doctor.
M., 1985 -P. 122-125.
4. Kiseleva A.F. et al Morphofunctional Methods of Stud-
ies in the Norm and Pathology. - Kiev, 1983,- 161 p.
5. Korsun V.F., Suvorov A.P Phytotherapy of the Uro-
genital diseases. - St.Petersburg, 1999,- 224 p.
6. Korsun V.F. On the Use of BAS in the Complex Treat-
ment of Some Virus Diseases // Practical Phytotherapy -
2003. -N 3.-P. 31-38.
7 Lukyanova E.M. Nephrotoxicity of Antibiotics in newborns // Qualitative Clinical Practice. - 2002. - № 2. - P 53-63.
8. Mashkovsky M.D. Medicinal Remedies. - Kharkov,
2004, - 560 p.
9. Menshikov V.V Laboratory Methods of Studies
(Guide-book). - M., 1987,- 368 p.
10. Microscopical Equipment. Manual for Physicians and Laboratory Assistants.-M., 1996.- 544 p.
11 Nikolaev S.M. Influence of Plant Polyphenols on the Lipid
I lemiluminescence in Liver Injury.- Ufa, 1986,- P. 66.
12. Guide for Experimental (Preclinic) Study of New Pharmacological Agents - M., 2001.- 764 p.
13. Sergienko V.I., Bondarev Clinical Studies -M., 2001,-256 p.
14. VIDAL Guidebook. Medicinal Preparations in Russia.-M., 2004,- 1488 p.
15. Staneva-Stoycheva D., Stoychev Ts. Drug Interaction -Sofia, 1984,-279 p.
16. Ubasheyev I.O., Lonshakova K S., Bartanov A,I. et al. Morphofunctional Fundamentals of Regenerative Therapy with Natural Medicinal Preparations of Experimental Liver Injuries. - Ulan-Ude, 2005.- 206 p.
17. Umnova L.V., Koroleva V.G., Goncharskaya T.Ya. // Antibiotics.- 1981,-N8.-P. 612.
18. Kharkevich D.A Pharmacology - M., 1999.- 664 p.
19. Aujard Y. Neonatal Infections - A Special Case? Res. Clin Forums, 1997 - P.67-77.
20. Fanos V., Padovani E.M. Importance of Evaluation of Urinary enzymes and Microglobulins in the Neonatal Period I.J.P.- 1995 -Vol. 6.-P. 775-783.
21. Moestrup S., Gin S., Varum C. et al. Evidence that Epithelial Glycoprotein 330/megalin Mediates Uptake of Polybasis Drugs // J. Clin. Invest.- 1995,- N 96.- P. 1404-1413.
22. Pastoriza-Minoz E., Timmerman D. et al. // P. Pharmacol., Exp. Ther.- 1982,- Vol. 220,- P. 604-608.
23. Smaoui H., Schaeverbeke M., Mallie J.P. et al. Trans-placentae Effects of Gentamycin on Endocitosis in Rat Renal Proximal Tubular Cells.// Pediatr Nephron -1984 - Vol. 8 (4).-P 447-450.
I.B. Mathematical Statistics in
Лоншакова Клара Сергеевна - доктор биологических наук, профессор медицинского факультета Бурятского государственного университета, ведущий научный сотрудник Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, Улан-Удэ.
Убашеев Иннокентий Оширович - доктор медицинских наук, профессор Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, Улан-Удэ.
Абгалдаева Елена Алексеевна - кандидат медицинских наук, Центр Восточной медицины М3 РБ, Улан-Удэ. Мондодоев Александр Гаврилович-кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, Улан-Удэ. РазуваеваЯнина Геннадьевна- кандидат биологических наук, научный сотрудник Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, e-mail: [email protected], Улан-Удэ Лемза Сергей Васильевич-кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, Улан-Удэ.
УДК 615.2
Оценка комплексного гепатозащитного влияния 6ЕМТ1АМ0РЯ1Я ВАЯВ А ТА (ЯШ)ЕЕ) МА. при остром токсическом гепатите у белых крыс
И.О.Убашеев, И М. Бальхаев, К.С. Лоншакова
Данные исследований влияния экстракта горечавки бородатой на модели Сал-гепатитау белых крыс отчетливо показывают его гепатозащитный эффект.
The evaluation of hepatoprotective action of GENTIANOPSIS BARBATA (FROEL) MA. extract during acute toxic hepatitis in white rats
IO. Ubasheev, I.M. Balhaev, K.S. Lonshakova
The paper deals with experimental data on combined stimulating effect ofpolyphenolic compounds from the extract of Gentiana barbata (Froehl) on regenerative processes in acute toxic hepatitis in white rat liver.
Говоря о природных лекарственных и действие последних на больной организм средствах, следует подчеркнуть, что по- проверялось не на одном десятке поколений, скольку уже на первых порах развития обще- то отдаленные результаты при лечении ими, ства человек лечился природными объектами, как правило, благоприятны. Однако в настоя-
37
ВЕСТНИК БУРЯТСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА
2008/12
щее время, отводя большую роль лекарственным средствам природного происхождения «как стимуляторам бодрости, катализаторам работоспособности, хорошего настроения, долголетия» (1), исследователи всегда уделяли и уделяют значительное внимание изучению адаптогенных механизмов влияния их на разных уровнях организма, оценке стимулирующего действия самых различных природных средств на восстановительные процессы в поврежденных органах и тканях, видя в этом основу регенерационной терапии заболеваний человека и животных. Из природных средств, используемых для лечения болезней человека и животных, наибольшего внимания заслуживают лекарственные растения. Фитотерапия заболеваний в медицине и ветеринарии получила в последние годы широкое распространение, так как препараты растительного происхождения при наличии достаточной фармакотерапевтической эффективности не оказывают при их рациональном использовании побочное влияние на организм (9, 10). Представляет значительный научный интерес оценка комплексного адаптогенного, антиок-сидантного и стимулирующего регенерацию печени влияния экстракта горечавки бородатой при токсическом ее повреждении у белых крыс, что и явилось целью настоящих исследований. Кратко сведения о горечавке бородатой (СепЦапорБГБ ЬагЬа1а Ное1.) сводятся к следующему: надземная часть ее содержит в своем составе 16 соединений гамма-пироно-вой природы, из которых 8 относятся к фла-вонам, а остальные - к ксантоновым соединениям (4, 5). Экстракт горечавки бородатой получен из надземной части растения по технологической схеме, включающей измельчение растительного сырья, экстракцию горячей водой, упаривание экстракта в вакууме при 30-60° С и последующую быструю сушку в вакуумно-сушильной установке при 60-70° С. Полученный экстракт представлял собой легко растворимый коричневый аморфный порошок с содержанием 7-20% веществ фе-нольной природы, представленных преимущественно флавоноидами и ксантонами. На способ получения экстракта получено авторское свидетельство № 92567 от 21.12.81 г.
Опыты по моделированию острого токсического гепатита проведены на белых крысах путем введения четыреххлористого углерода. В наших опытах на белых крысах обое-
го пола с массой 180-220 г СС14 вводили в виде 50%-ного масляного раствора в объеме 0,4 мл/200 г массы животного (трехкратно, через день, подкожно). В качестве контроля служили животные, которым вводили подсолнечное масло. Печень забитых крыс исследовали на 7-, 14-, 21- и 28-е сутки с начала опытов. На выбранной модели повреждения печени у белых крыс оценивалась фармакоте-рапевтическая эффективность экстракта горечавки бородатой. Указанное средство вводили в течение 4 дней внутрижелудочно в дозе 0,3 г/кг массы крысы. В качестве препарата сравнения животным вводили аллохол в дозе 80 мг/кг массы. Животные контрольной группы получали только раствор СС14.
Печень лабораторных животных фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Кусочки органов заливали в целлоидин парафин. Гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по ван Ги-зон (2). При оценке влияния природных препаратов на репаративную регенерацию печени после токсического повреждения использовали морфологические показатели, характеризующие регенераторный процесс. В частности, для суждения о пролиферации гепагоци-тов исследовалась их митотическая активность. Митозы подсчитывали в 100 полях зрения гистологического препарата. Мито-тический индекс выражали в промилле (%о), т е. количество митозов на 1000 клеток, способных к делению. Для полного суждения об интенсивности пролиферативных процессов внутриклеточной регенерации в дополнение к одноразовому определению ми-тотического индекса подсчитывали в 100 полях зрения количество двуядерных и гипертрофированных печеночных клеток Для исследования митотической активности ге-патоцитов использовали обычные гистологические срезы печени (целлоидин-парафиновые) толщиной 7-10 мк, окрашенные гематоксилин-эозином. Подсчет митозов и печеночных клеток осуществлен под иммерсионным увеличением. Для оценки морфо-функционального состояния печени животных использовали ряд гистологических и гистоэнзимологических методов. В частности, в свежезамороженных срезах печени выявляли содержание гликогена ШИК-реакцией, нейтрального жира - окраской Суданом черным «Б» по Беренбауму, активность
И.О. Убашеев, И.М. Балъхаев, К. С. Лоншакова. Оценка к ЬагЬа1а (Ргое!) МА. при остром токсическом гепатите у сукцинатдегидрогеназы (СДГ-азы) и лактат-
дегидрогеназы (ЛДГ-азы) - по Нахласу (6). Содержание гликогена в печени животных оценивали в баллах по методу В.В. Соколовского (8), а остальным гистохимическим реакциям давали качественную оценку.
Одним из морфологических признаков, характеризующих активацию перекисного окисления липидов, является содержание в печени пигмента липофусцина. Последний имеет различные названия: пигмент изнашивания, пигмент старения, хромолипоид, це-роид и др. Это пигмент образуется из липи-дов. Одним из механизмов его образования является окислительный, поэтому он считается липидом высокой степени окисления (6). В печени липофусцин имеет вид желтых сферических гранул диаметром от 1 до 20 мк. Он локализуется в гепатоцитах, часто гранулы его образуют ободок кислотоустойчивого материала вокруг крупных жировых капелек. В наших опытах для выявления липофусцина использован метод Шморля (6).
Полученные в опытах цифровые данные обрабатывали по Е В. Монцевичюте-Эрин-гене (7), по параметрическому критерию (1) Стыодента-Фишера (7).
На 7-е сутки с момента введения СС14 в печени животных всех групп выявлены резкие структурные изменения, сводящиеся к значительным гемодинамическим нарушениям в виде полнокровия междольковых сосудов, расширения просвета центральных вен, утолщения стенок их, периваскуляр-ного отека и расширения пространства Дис-се, а также к выраженным изменениям геп-тоцитов в форме «баллонной», зернистой и жировой дистрофии. По ходу сосудов располагаются обширные очаги клеточной инфильтрации. Встречаются единичные дву-ядерные гепатоциты. Обнаруживались гранулы липофусцина. У животных, получав-
[лексного гепатозащитного влияния СепПапорзл ых крыс
ших экстракт горечавки бородатой, на 14-е сутки опытов гемодинамические нарушения и альтернативные изменения в печени выражены в гораздо меньшей степени, чем у контрольных животных. Центролобулярные очаги некроза исчезали, хотя гепатоциты, заполнившие их, еще приближались к норме. Они более крупных размеров, с двумя-тремя ядрами, темноокрашенные. Клеточная инфильтрация внутри долек и по ходу сосудов значительно выражена. В инфильтратах преобладают гистиолимфоцитарные и мак-рофагальные элементы. По па-
томорфологической картине налицо менее выраженные, чем в контроле, признаки воспалительного процесса, в частности, явления экссудации с признаками активной регенерации в органе. Гранулы диформазана выявлялись в отдельных случаях. Об активности регенераторных процессов судили по выявлению крупных темноокрашенных клеток с гиперхромными ядрами, частоте митозов и увеличению числа двуядерных гепатоцитов (табл. 1, 2). Во все сроки исследований данные признаки регенерации выявлялись в печени животных, принимавших экстракт горечавки бородатой, гораздо чаще, чем у животных, не принимавших какой-либо препарат или получавших аллохол.
У животных, получавших экстракт горечавки бородатой, быстрее проходили ге-модинамические нарушения, отечные изменения, гораздо раньше по сравнению с контролем происходило замещение некротических очагов в центре долек вновь образованными гепатоцитами и за счет гипертрофии печеночных клеток, не подвергшихся альтернативным изменениям. Быстрее происходило исчезновение клеточных инфильтратов.
Таблица 1
Показатели митотической активности гепатоцитов крыс при остром токсическом гепатите (М±т), %
Условия опыта Сутки исследования
7-е 14-е 21-е 28-е
СС14 (контроль) 0,3±0,002 0,7±0,002 0,3±0,002 0,3±0,001
СС14 + аллохол 2,0±0,002 1,б±0,003 1,0±0,002 0,7±0,002
СС14 + экстракт горечавки бородатой 4,3±0,004 2,7±0,004 2,7±0,002 3,7±0,001
Примечание: достоверность разницы между' опытом и контролем во всех случаях < 0.001.
И.О. Убашеев, ИМ. Бальхаев, К.С. Лоншакова. Оценка комплексного гепатозащитного влияния Gentianopsis barbata ^гое1) МА. при остром токсическом гепатите у белых крыс
Гистоэнзимологические исследования выше таковой у контрольных крыс и крыс,
Таблица 2
Условия опыта Сутки исследования
7-е 14-е 21-е 28-е
Число двуядерных клеток
СС14 (контроль) 10,6±0,001 22,3±0,02 21,0±0,02 18,3±0,02
СС14 + аллохол 18,6±0,004 19,6±0,01 19,0±0,01 26,0±0,02
СС14 + экстракт горечавки бородатой 37,0±0,03 47,0±0,07 41,0±0,04 31,3±0,30
Число гипертрофированных клеток
СС14 (контроль) 10,6±0,04 22,4±0,02 24,0±0,01 27,6±0,07
СС14 + аллохол 37,6±0,03 36,3±0,01 27,3±0,02 28,5±0,07
СС14 + экстракт горечавки бородатой 54,3±0,05 59,3±0,06 47,0±0,04 36,0±0,02
Примечание: достоверность разницы между опытом и печени белых крыс на 7-е и 14-е сутки с начала опытов позволили выявить, что активность сукцинатдегидрогеназы в печени животных была ниже по сравнению с таковой у интактных животных Размеры гранул ди-формазана варьировали, имело место их слияние в конгломераты. Активность лактат-дегидрогеназы снижена по сравнению с нормой, гранулы диформазана сливались в глыб-ки. В последующие сроки (21-28-е сутки) активность сукцинат- и лактатдегидрогеназ в печени постепенно восстанавливалась, но этот процесс протекал разными темпами в зависимости от препаратов. У животных, получавших экстракт горечавки бородатой, активность изучаемых ферментов в печени во все сроки гистохимического исследования была
Содержание гликогена в печени крыс при
контролем значима (Р < 0,05). получавших аллохол. В конце исследований уровни активности изучаемых ферментов приближались к таковым в печени интактных крыс.
Выраженным дистрофическим изменениям, а также нарушениям окислительно-восстановительных процессов в печени животных в сроки изучения, указанные ранее, соответствовали значительные изменения в жировом, углеводном обменах. Последние сводились к увеличению содержания гликогена в печени. Однако во все сроки отмечено, что у крыс, леченных экстрактом горечавки бородатой, содержание гликогена в печеди выше (табл. 3), а содержание жира и гранул липофусцина гораздо меньше, чем у нелеченных крыс и животных, леченных аллохолом.
Таблица 3
Условия опыта Сутки исследования
7-е 14-е 21-е 28-е
Интактные животные 2,4±0,004 2,3±0,05 2,3±0,04 2,4±0,02
СС14 (контроль) 1,7±0,06 1,4±0,07 1,6±0,04 1,9±0,03
СС14 + аллохол 1,8±0,05 1,9±0,04 2,4±0,04 2,3±0,04
СС14 + экстракт горечавки бородатой 1,8±0,04 1,9±0,04 1,8±0,03 2,0±0,03
Примечание. Достоверность разницы между опытом Результаты исследований хемилюминес-ценции липидов печени подопытных крыс приведены в табл. 4. В случаях введения животным масляного раствора четыреххлори-стого углерода (контроль 1) в изучаемые сроки наблюдается достоверное увеличение интенсивности свечения липидов печени по сравнению с таковой у интактных животных (Р2 <0,001), что свидетельствует об активации свободнорадикального окисления липидов в печени, о повышении концентрации перекис-
и контролем во всех случаях < 0,05. ных радикалов, т.е. характеризует степень повреждения паренхимы печени (табл. 4). Об усилении перекисного окисления липидов печени свидетельствовало наличие в ней гранул липофусцина. В случаях введения крысам с токсическим гепатитом экстракта горечавки бородатой выявлено достоверное по сравнению с контролем 1 снижение скорости сво-боднорадикальных реакций (Р3 -2 <0,001,
табл. 4), а также уменьшение содержания липофусцина в печени.
Таблица 4
Влияние фитопрепаратов на уровни слабого свечения липидов печени белых крыс при остром токсическом ге-
№ п/п Условия опыта Интенсивность хемилюминесценции по суткам исследования, имп/с
7-е 15-е 21-е
1 Интакгный контроль 34,0±4,0 40,0±3,9 37,0±5,0
2 СС14 (контроль) 187,0±6,8 184,0±9,8 170,0±6,5
Р2-1 <0,001 <0,001 <0,001
3 СС14+экстракт горечавки бородатой 125,0±8,4 96,6±7,7 75,0±6,5
Рз-2 <0,001 <0,001 <0,001
4 СС14 (контроль) 153,6±15,4 168,2±6,2 75,0±9,0
5 СС14 + сумма фенольных соединений 101,0±9,5 96,7±12,1 67,2±3,1
Р5-4 <0,05 <0,001 <0,05
Примечание: достоверность разницы между опытом и контролем в соответствии с № п/п.
Таким образом, данные исследований влияния экстракта горечавки бородатой на модели ССЦ-гепатита у белых крыс отчетливо показывают его гепатозащитный эффект, который следует объяснить угнетением пере-кисного окисления липидов, обусловливающего снижения интенсивности слабого свечения липидов и содержания липофусцина, появление в значительном количестве гипертрофированных и двуядерных клеток, нормализацию окислительно-восстановительных процессов и обмена веществ, которые в комплексе создают позитивные условия для ускорения регенераторных процессов в поврежденной печени испытуемых животных.
Основным в механизме гепагозащитного действия экстракта горечавки бородатой следует считать способность полифенольных соединений, содержащихся в нем, оказывать адаптогенное, антиоксидантное и мембрано-стабилизирующее влияние.
Литература
1. Крылов В.Г. Растения здоровья / В.Г. Крылов, Н.Ф. Козакова, А.А. Лагерь. - Новосибирск, 1989. -303 с.
2. Меркулов Г А. Курс патологогистологической тех-
ники / Г.А. Меркулов. - М., 1969. - 423 с.
3. Монцевичюте-Эрингене ЕВ. Упрощенные матема-
тико-статистические методы в медицинской исследовательской работе / Е.В. Монцевичюте-Эрингене // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1964. - № 4. - С. 71-78.
4. Николаева Г.Г. Поиск биологически активных со-
единений, производных у-пирона в растениях рода
горечавка: дис. ... канд фарм. наук/Г.Г. Николаева. -М., 1982.-174 с.
5. Николаева Г.Г. Флавоноиды Gentiana barbata / Г.Г. Николаева, В.И Глызин, Д.А. Фесенко // Химия природных соединений. - 1979. - № 6. - С.859.
6. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная / Э. Пирс. -М., 1962.-962 с.
7. Плоханский Н А. Алгоритмы биометрии / Н А. Пло-ханский. - М., 1980. - 281 с.
8. Соколовский В.В. Гистохимические исследования в токсикологии / В В. Соколовский. - Л., 1971 - 171 с.
9. Телятьев В.В. Целебные клады / В.В. Телятьев. -Иркутск, 1991. - 400 с.
10. Турова А.Д. Лекарственные растения СССР и их применение / А.Д. Турова. - М., 1974. -423 с.
1. Krylov V.G., Kozakova N.F., Lager А.А. Plants of Health. - Novosibirsk, 1989. - 303 p.
2. Merkulov G.A. The Course of Pathohistological Techniques. -Moscow, 1989. - 423 p.
3. Montsevichyute-Eringene E.V. Simplified Mathematic-Statistical Methods in the Medical researches // Pathological Physiology and Experimental Therapy. - 1964. -N4.-P.71-78.
4. Nikolayeva G.G. The Search of Biologically Active Compounds, Derivatives of y-pyrone in the plants of Gentiana genera. - Moscow, 1982,- 174 p.
5. Nikolayeva G.G., Glyzin V.I., Fesenko D.A. et al Fla-vonoids of Gentiana barbata / Chemistry of Natural Compounds.- 1979.-N 6,- P. 859.
6. Pirs E. Theoretical and Applied Histochemistry. - Moscow, 1980. - 400 p.
7. Plokhansky N.A. Algoiythms of Biometry. - Moscow, 1980.-281 p.
8. Sokolovsky V.V. Histochemical studies in Toxicology. -Leningrad, 1971. - 171 p.
9. Telyalyev V.V. Medicinal treasures. - Irkutsk, 1991. -400 p.
10. Turova A.D. Medicinal plants of the USSR and their use. - Moscow, 1974. -421 p.
Убашеев Иннокентий Оширович-доктор медицинских наук, профессор Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, Улан-Удэ.
Бальхаев Илларион Митрофанович- кандидат медицинских наук, доцент, заместитель декана медицинского факультета Бурятского государственного университета, Улан-Удэ.
ВЕСТНИК БУРЯТСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА 2008/12
Г.В. Чехирова, Т.А. Асеева, З.Г. Самбуева. К вопросу об оптимизации способа получения гепатопротекторного средства, созданного на основе прописи тибетской медицины «7 драгоценных»
Лоншакова Клара Сергеевна - доктор биологических наук, профессор медицинского факультета Бурятского государственного университета, ведущий научный сотрудник Института общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, Улан-Удэ.
УДК 615.40:54+615.414 +616.36+633.88
К вопросу об оптимизации способа получения гепатопротекторного средства, созданного на основе прописи тибетской медицины «7 драгоценных»
Г.В. Чехирова, Т.А. Асеева, З.Г. Самбуева
В результате использования метода математического планирования эксперимента установлены оптимальные технологические параметры получения сухого экстракта гепатопротекторного, позволяющие усовершенствовать способ его производства.
To a question on optimization mode of production hepatopotective medical mean created on a basis of the tibetan medicine practice «7 precious» G.V. Chekhirova, T A. Aseeva, Z.G. Sambueva
Work out optimal technological parameters production of dry extract by the method mathematical planning an experiment. This makes it possible to update of technology of dry extract «hepatophyt».
Актуальность проблемы повреждений печени различной этиологии обусловливает поиск новых, а также обоснование применяемых в традиционной и народной медицине препаратов из лекарственных растений.
По данным тибетских классических источников и рецептурных справочников, многокомпонентный сбор «Семи драгоценностей отвар» («Нор бу дун тан»), известный в монгольской медицине под названием «Норов-7», применяется как противовоспалительное и «очищающее» средство, в том числе и при заболеваниях органов гепатобилиарной системы, что и послужило основанием для его изучения.
В процессе предварительных исследований пропись «Семь драгоценных» была частично модифицирована в плане ее адаптации к российской сырьевой базе, в результате получена композиция, состоящая из корневищ и корней Inula helenium L., Sanguisorba officinalis L , Sophora flavescens Soland., корневищ Zingiber officinale Roscoe, древесины Sambucus sibirica Nakai, плодов Crataegus sanguínea Pall и Malus baccata (L.) Borkh. Ha основе данной композиции получен сухой экстракт с использованием ресурсосберегающей технологии: путем кратной мацерации растительного сырья водным этанолом при щадящем режиме нагрева, позволяющем сохранить термолабильные соединения [3]. Ранее сообщалось о фитохимическом изучении и стандартизации исходной растительной композиции, являющейся основой для полу-
чения сухого экстракта (СЭ), условно названного «гепатофитом», а также о желчегонных, противовоспалительных свойствах СЭ и его гепатопротекторном действии при экспериментальном гепатите, вызванном этанолом, тетрациклином, тетрахлорметаном.
Целью настоящего исследования являлась оптимизация параметров технологии получения сухого экстракта с помощью метода математического планирования эксперимента, включающего регрессионный анализ с использованием части реплики от полного 6-факторного эксперимента [4].
В качестве независимых факторов, влияющих на процесс извлечения БАВ, выбрали следующие: концентрация спирта этилового, %; соотношение твердой и жидкой фаз, мл/г; температура экстракции, °С; время первого контакта фаз, мин; время второго и третьего контактов фаз, мин. В качестве выходных контролируемых параметров (параметров оптимизации) выбрали выход суммы фенолкарбоновых кислот и флавоноидов (ФКФ) в пересчете на кислоту коричную,% (по разработанной нами методике [1]); выход суммы экстрактивных веществ, % (по ГФ XI [2]).
Исследуемое пространство определяли путем установления пределов'варьирования независимых факторов. Для концентрации экстрагента нижним пределом выбрали 20%-ный спирт этиловый, так как при более низкой концентрации спирта конечный продукт получался в виде вязкой массы, что противоречит поставленной задаче (получение сухого
