CC BY
74
______________
ФАРМАКОЛОГИЯ
Оценка иммунокорригирующей активности производных бензимидазола на фоне циклофосфановой иммуносупрессии
М.А.Самотруева*, Д.Ш.Дубина*, С.А.Лужнова**
* Астраханская государственная медицинская академия Росздрава, Астрахань ** НИИ по изучению лепры Росздрава, Астрахань
В эксперименте на мышах линии СВА исследовали иммунокорригирующую активность конденсированных производных бензимидазола. Установлено, что применение соединений этого химического класса приводит не только к отмене ингибирующего действия цикло-фосфана на активность Т- и В-лимфоцитов, но и к стимулирующему действию этих веществ на процессы формирования и кооперации клеточного и гуморального звена иммунного ответа.
Ключевые слова: производные бензимидазола, иммунокоррекция, циклофосфан.
Возможность регуляции иммунологической реактивности фармакологическими средствами делает актуальным создание веществ, позволяющих воздействовать на отдельные звенья иммуногенеза. В прикладном аспекте это означает, что необходимо разрабатывать лекарственные препараты, пригодные для иммунокоррекции многочисленных заболеваний, при которых нарушения иммунного статуса являются либо причиной патологии, либо очень существенным звеном патогенеза. Учитывая, что многие факторы окружающей среды (климатические, сезонные), пищевые факторы, стрессорные, профессиональные воздействия, возрастные изменения приводят к неблагоприятным влияниям на иммунную систему, можно предположить, что иммунотропные препараты, обладающие корригирующей активностью, необходимы не только для лечения многих патологических состояний, но, очевидно, их нужно включать также и в «фармакологию здорового человека» [10].
Перспективными в данном направлении могут являться конденсированные
производные имидазо(1,2а)бензимидазо-ла, обладающие широким спектром биологической активности и низкой токсичностью [6]. Вещества данной химической группы проявляют антиоксидантные, гипогли-кемические, антиагрегантные, гепатопро-текторные, церебропротекторные, актопротекторные и антиаритмические свойства [2, 3, 4, 5, 7, 9, 11].
Целью нашего исследования явилось экспериментальное изучение возможной коррекции клеточного и гуморального звена иммуногенеза соединениями под лабораторными шифрами РУ-185, РУ-254, РУ-284 и РУ-355 на фоне циклофосфановой иммуносупрессии.
Материалы и методы. Исследования проведены на 120 мышах линии СВА обоего пола 3-4 месячного возраста, массой 1820 г, содержащихся в стандартных условиях вивария ФГУ «НИИ по изучению лепры Росздрава» (г. Астрахань).
Изучаемые производные бензимидазола вводили внутрибрюшинно в течение семи дней, начиная за три дня до иммунизации, в дозах, соответствующих 1/20 ЛД50. Подав-
ление иммуногенеза вызывали применением циклофосфана в дозе 100 мг/кг в день иммунизации.
Контролем I служили иммунизированные мыши, получавшие циклофосфан. В качестве контроля II — иммунизированные животные, получавшие вместо препаратов 0,5 мл дистиллированной воды.
В первой серии изучали возможность коррекции производными бензимидазола «циклофосфановой» депрессии клеточного звена иммунного ответа на ЭБ в реакции гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ); во второй — гуморального звена иммуногенеза в реакции прямой гемаг-глютинации (РПГА).
Для иммунизации при постановке РГЗТ использовали оптимальную дозу ЭБ — 2 х 108 в 0,2 мл, разрешающую дозу — 108 ЭБ в 0,05 мл физиологического раствора. Антигенную стимуляцию при постановке РПГА проводили подкожным введением субоптимальной дозы ЭБ 2 х 10 в 0,2 мл дистиллированной воды [8].
Все манипуляции с животными проводили, соблюдая международные принципы Хельсинской декларации [1]. Результаты были обработаны статистически с использованием программы 81аЮгарИ с применением ^-критерия Стьюдента.
Результаты. Результаты исследования иммунокорригирующей активности про-
изводных бензимидазола представлены в таблицах 1 и 2.
Как видно из данных табл. 1, применение алкилирующего соединения из группы хлорэтиламинов — циклофосфана — в дозе 100 мг/кг в день антигенной стимуляции привело к значительному нарушению формирования РГЗТ, что проявилось в снижении индекса реакции по сравнению с контролем II, практически в 3 раза (р < 0,01). Кроме того, циклофосфан также вызывал угнетение и антителогенеза с 0,84 + 0,06 до
0,48 ± 0,03 (р < 0,001) (табл. 2).
Курсовое введение химических соединений, известных под лабораторными шифрами РУ-185, РУ-254, РУ-284 и РУ-355 (в дозах 11,3 мг/кг, 13,75 мг/кг, 9,75 мг/кг и 6,75 мг/кг соответственно), привело к выраженной стимуляции реакции гиперчувствительности замедленного типа (по сравнению с контролем I и II). При этом вещества РУ-185 и РУ-284 вызвали увеличение реакции местной сенсибилизации по сравнению с контролем II более чем в 2,5 раза (р < 0,01) и более чем в 6,5 раз по сравнению с группой животных, получавших только циклофосфан (р < 0,001).
Введение производного бензимидазола под шифром РУ-355 на фоне экспериментальной иммуносупрессии также привело к значительной стимуляции клеточной инфильтрации. Индекс реакции ГЗТ
Таблица 1
Корригирующее влияние производных бензимидазола на показатели РГЗТ у мышей
Шифр соединения Индекс реакции ГЗТ (%) Статистические показатели при сравнении с контролем I Статистические показатели при сравнении с контролем II
t Р t Р
РУ-185 39 ± 4,3 7,4 < 0,001 5,3 < 0,001
РУ-254 27 ± 2,8 7,1 < 0,001 3,9 < 0,01
РУ-284 37,4 ± 5,8 5,4 < 0,001 3,8 < 0,01
РУ-355 40 ± 4,2 8,0 < 0,001 5,7 < 0,001
Контроль I (циклофосфан) 5,6 ± 1,2 4,1 0,01
Контроль II (Н2О) 14,2 ± 1,8
Таблица 2
Корригирующее влияние производных бензимидазола на показатели РПГА у мышей
Шифр соединения Титры антител в РПГА (^) Статистические показатели при сравнении с контролем I Статистические показатели при сравнении с контролем II
t Р t Р
РУ-185 1,5 ± 0,16 6,3 < 0,001 3,8 < 0,01
РУ-254 1,1 ± 0,09 6,8 < 0,001 2,7 < 0,05
РУ-284 1,53 ± 0,09 11,6 < 0,001 6,9 < 0,001
РУ-355 0,93 ± 0,09 5,0 < 0,001 0,9 > 0,05
Контроль I (циклофосфан) 0,48 ± 0,03 6,0 < 0,001
Контроль II (Н2О) 0,84 ± 0,06
увеличился почти в 3 раза, если сравнивать с группой мышей, не получавших препараты (р < 0,001) и более чем в 7 раз по сравнению с экспериментальной моделью иммунодепрессии (р < 0,001).
В условиях лекарственной иммунодепрессии химическое соединение РУ-254 также стимулировало клеточное звено иммуногенеза: иммунный ответ не только достигал уровня контроля II, но и превышал его в 2 раза (р < 0,001).
О влиянии исследуемых производных бензимидазола на функционирование гуморального звена иммунного ответа у мышей с индуцированной иммунодепрессией судили по их способности к формированию в крови антиэритроцитарных антител (табл. 2).
Установлено, что всем исследуемым веществам присущ иммунокорригирующий эффект. Максимальное воздействие наблюдалось при использовании РУ-185 и РУ-284, когда уровень титра антител повысился более чем в 3 раза по сравнению с циклофос-фановой иммунодепрессией (р < 0,001), что свидетельствовало не только о корригирующем, но и о активирующем влиянии на процесс антителообразования.
Аналогичная направленность наблюдалась в действии и другого исследуемого вещества, известного под лабораторным шифром РУ-254: количество антиэритроциар-
ных антител при использовании этого соединения достоверно увеличилось по сравнению с контролем II в 1,4 раза (р < 0,05), а по сравнению с экспериментальной моделью иммунодепрессии — в 2,3 раза.
Иммунотропная активность производного бензимидазола РУ-355 несколько отличалась от действия выше описанных веществ. На фоне циклофосфановой иммуносупрессии соединение РУ-355 достоверно значимо увеличивало в крови количество антител к ЭБ (в 2 раза, при р < 0,001). Но, в отличие от соединений РУ-284 и РУ-254, вещество РУ-355 выраженного стимулирующего действия на процесс антитело-образования не оказывало (табл. 2): титр антител при этом увеличился всего на 0,09 (р < 0,1).
Выводы. Использование новых производных бензимидазола приводит не только к отмене ингибирующего действия цик-лофосфана на активность Т- и В-лимфо-цитов, но и проявляется как результат стимулирующего действия этих веществ на процесс формирования и кооперации клеточного и гуморального звена иммунного ответа.
Таким образом, изучаемые нами конденсированные производные имидазо(1,2а)-бензимидазола РУ-185, РУ-254, РУ-284 и РУ-355, обладающие иммуностимулирующими и иммунокорригирующими свой-
ствами, являются перспективными соединениями для создания на их основе высокоэффективных иммуномодуляторов.
Литература
1. Большаков О.П., Незнанов Н.Г., Бабаханян Р.В. Дидактические и этические аспекты проведения исследований на биомоделях и на лабораторных животных // Качественная клиническая практика, № 1, с. 24-28, 2002.
2. Дудченко Г.П. Противодиабетическая активность производных бензимидазола // Авто-реф.... д-ра мед. наук. — Волгоград, 35 с., 2001.
3. Островский О.В. Фармакология антиоксидантов - конденсированных производных бензимидазола: Aвтореф. ... д-ра мед. наук. — Волгоград, 38 с., 1996.
4. Салазникова О.А. Влияние гипогликемичес-ких средств на гемостаз и реологию крови: Aвтореф. ... канд. мед. наук. — Волгоград, 29 с, 2001.
5. Сеньчуков И.Д. Исследование влияния производного имидазо(1,2а)бензимидазола на систему мозгового кровообращения в условиях радиационного воздействия: Aвтореф. ... канд. фарм. наук. — Пятигорск, 23с., 2001.
6. Спасов A.A., Иёжица И.Н., Бугаева Л.И., Aнисимова В.А. Спектр фармакологической активности и токсикологические свойства производных бензимидазола // Хим.-фарм. журнал, № 5, с. 6-17,1999.
7. СтепановА.В. Фармакокинетика производных имидазобензимидазола, оказывающих антиаритмическое действие: Автореф. ... канд. мед. наук. — Волгоград, 25с., 2001.
8. Хаитов P.M., Гущин И.С, Пинегин Б.В. Методические указания по изучению иммуно-тропной активности фармакологических веществ: Руководство по экспериментальному изучению фармакологических веществ. — М. : Минздрав РФ, с.257-263, 2000.
9. Цибанев А.В. Поиск средств, повышающих работоспособность и процессы восстановления среди производных имидазо(1,2а)-бензимидазола, проявляющих антиоксидантную активность: Автореф.... канд. биол. наук. — Волгоград, 30с., 1991.
10. Черешнев В.А., Кеворков Н.Н., Бахметьев Б.А. и др. Физиология иммунной системы и экология // Иммунология, № 3, с. 12-16,2001.
11. Шипов А.А. Гепатопротекторные свойства новых конденсированных производных бензимидазола, проявляющих антиокси-дантное действие: Автореф. ... канд. мед. наук. — Волгоград, 26с., 1994.
THE ESTIMATION OF IMMUNOCORRECTING ACTIVITY OF BENZIMIDAZOL DERIVATIVES ON THE BASE OF CYCLOPHOSPHANE IMMUNOSUPRESSION
M.A.Samotrueva, D.SH.Dubina, S.A.Luzhnova
Astrakhan State Medical Aacademy, Russian Health Service FSM, Astrakhan SRI of Studing Lepra of RHS, Astrakhan
Immunocorrecting activity of benzimidazol condensed derivatives was investigated in experiments on CBA line mice. It was found out that compounds of such chemical class may lead not only to termination of inhibiting effect of cyclophosphane on T- and B-lymphocytes activity, but also to stimulating action of these substances on the processes of formation and cooperation of cellular and humoral parts of immune reaction.
Key words: benzimidazol derivatives, immunocorrection, cyclophosphane.
