CC BY
19
УДК 597.554.3-135:597-12/.14
Ключевые слова: молодь леща, эпизоотическое состояние, морфофизиологическое состояние, ремнецы, загрязняющие вещества
Key words: bream juveniles, epizootic condition, morphophysiological condition, tapeworms, pollutants
Конькова А. В., Федорова Н. Н., Иванов В. П.
ОЦЕНКА ЭПИЗООТИЧЕСКОГО И МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ МОЛОДИ ЛЕЩА ABRAMIS BRAMA (LINNAEUS, 1758) В ВОЛГО-КАСПИЙСКОМ РЕГИОНЕ
THE ESTIMATION OF EPIZOOTIC AND MORPHOPHYSIOLOGICAL CONDITION OF BREAM JUVENILES ABRAMIS BRAMA (LINNAEUS, 1758) IN THE VOLGA-CASPIAN REGION
'ФГБНУ «Каспийский научно-исследовательский институт рыбного хозяйства» Адрес: 414056, Россия, Астраханская область, г. Астрахань, ул. Савушкина, 1
1FSUE Caspian Fisheries Research Institute Address: 414056, Russia, Astrakhan region, Astrakhan, Savushkin str., 1 2ГОУВПО «Астраханский государственный технический университет» Адрес: 414056, Россия, Астраханская область, г. Астрахань, ул. Татищева, 16
2Astrakhan State Technical University Address: 414056, Russia, Astrakhan region, Astrakhan, Tatishchev str., 16
Конькова Анна Владимировна, научн. сотрудник1 / Konkova Anna V., Research Scientist1 Федорова Надежда Николаевна, д. м. н., проф.2 / Federova Nadezhda N., Doctor of Medicine, Professor2 Иванов Владимир Прокофьевич, д. б. н., заслуж. работник сельского хозяйства РФ, проф.2
Ivanov Vladimir P., Doctor of Biological Sciences, Honored Worker of Agriculture of the Russian Federation, Professor2
Аннотация. Дана неудовлетворительная оценка эпизоотического и морфофизиологического состояния годовиков и двухлетков леща Волго-Каспийского региона. Результаты гельминтологического обследования, гематологического и гистологического обследования выявили значительные патоморфологические изменения тканей и органов обследованных рыб. Обнаруженные нарушения в организме молоди леща были спровоцированы опасными загрязняющими веществами, находившимися в воде, и усугублены присутствием полостных паразитов - ремнецов.
Summary. The estimation of unsatisfactory of epizootic and morphophysiological condition of one- and two-year old bream in Volga-Caspian region is given. The results of helminthological, hematological and histological examination revealed the significant pathomorphological changes of tissues and organs of observedfish. Discovered abnormalities in the body of bream juveniles were induced by dangerous pollutants presenting in water and aggravated by the presence of abdominal parasites, namely tapeworms.
Введение
В дельте Волги и Каспийском море лещ Abramis brama (Linnaeus, 1758) является ценным промысловым объектом. С развитием в регионе промышленной деятельности, сопровождающейся загрязнением водоема высокотоксичными веществами [9], физиологический статус многих гидробионтов в последнее время считается неудовлетворительным [8, 3]. Ухудшение условий среды обитания не могло не сказаться на морфо-функциональном состоянии леща, уловы которого в последние десятилетия заметно сни-
жались [5]. В свою очередь, физиологическое состояние леща в регионе также находится под влиянием паразитических организмов, которые способны не только провоцировать развитие патологических нарушений в организме своих хозяев, но являться причиной их гибели. В Волго-Каспийском бассейне к таким высокопатогенным организмам для рыб относятся ремнецы сем. Ligulidae (Claus, 1885) - Ligula intestinalis (Linnaeus, 1758) и Digramma interrupta (Rudolphi, 1810), приводящие к неизбежному летальному исходу зараженных хозяев. Молодь рыб, по сравнению
с половозрелыми особями, наиболее уязвима действиям загрязняющих веществ и патогенных паразитических организмов (лигулид). Однако исследования по изучению морфо-физиологического состояния популяции леща в естественных условиях Волго-Каспия касались, главным образом, взрослых рыб. В связи с вышесказанным, целью настоящей работы являлась оценка морфофизиологи-ческого состояния молоди леща Волго-Ка-спийского региона в условиях хронического антропогенного и паразитарного прессинга. Для реализации поставленной цели были выбраны гистологические и гематологические индикаторы как наиболее показательные для оценки влияния различных загрязнителей на ткани и органы рыб [3].
Материалы и методы
Материалом для данной работы послужили результаты исследований, проведенных в западной акватории северной части Каспийского моря в июне 2014 г. Объектом исследований явились годовики и двухлетки леща в количестве 533 экз., выловленные 4,5-метровым тралом. Неполное гельминтологическое вскрытие, устанавливающее в полости тела молоди леща плероцеркоидов ремнецов, выполнено согласно общепринятым паразитологическим методикам [10, 1]. Для определения гематологических показателей использованы мазки периферической крови (окраска по Паппенгейму), изготовленные в соответствии с утвержденными методиками [10, 6]. Патоморфологическое состояние тканей и органов (жабр, печени, почек, селезенки, сердца, кишечника, поджелудочной железы и мышечной ткани) определялось по общепринятым гистологическим методикам: фиксация 10%-м нейтральным формалином, окраска гематоксилин-эозином [2].
Микроскопирование окрашенных препаратов осуществлено с помощью микроскопа «БИОМЕД-6 LED». Микрофотосъемка срезов органов произведена с помощью фотонасадки DCM 510. Статистическая обработка полученных данных проведена с помощью пакета программ Microsoft Excel и разработанной ФГУП «КаспНИРХ» программы Dstat.
Результаты исследований
В результате проведенных исследований у 6,19 % выловленных во время экспедиции лещей диагностирована лигулидозная инвазия. Паразиты, инициировавшие выявленное заболевание, были представлены значительными по размеру плероцеркоида-ми Б. 1Меттир1а (рис. 1а) и молодыми недиф-ференцируемыми лигулидами без зачатков половых желез, что является основным признаком идентификации представителей сем. Ligulidae. Средняя длина и масса паразитов составляли 17,78±2,00 см и 1,35±0,82 г и 8,29±0,90 см и 0,08±0,01 г - соответственно указанным группам. В 90,01 % случаях заражение отмечалось у двухлетков леща. Паразиты обладали ярко выраженной эластичностью, сжимаясь до половины своей длины, что позволяло им обвивать все внутренние органы зараженных хозяев. Интенсивность инвазии не превышала одного паразита на рыбу; смешанная инвазия не зарегистрирована. Толщина гельминта варьировала от 0,1 до 1,3 см. Ремнецы Б. Шеггир1а, согласно своим размерно-весовым показателям, в большинстве случаев считались инвазионными.
Визуально лигулидозное заболевание проявлялось у 63,00 % зараженных двухлетков леща, при препарировании брюшной полости тела которых обнаружены крупные плероцеркоиды Б. 1Меттир1а. Клинически заболевание у больных рыб проявлялось в увеличении и уплотнение брюшка, деформации брюшной стенки. При патологоана-томическом вскрытии молоди леща как с клиническими признаками заражения, так и визуально здоровых (но при обследовании которых зарегистрированы мелкие по размеру паразиты) отмечены локальные кровоизлияния на брюшной стенке и брыжейке, значительное сдавливание внутренних органов, перекручивание и истончение кишечника, дистрофия печени (рис. 1б). Выявленные изменения внутренних органов и тканей молоди леща, инициированные паразитировани-ем ремнецов, в скором времени могли стать причиной гибели зараженных рыб.
Таким образом, присутствие в полости тела плероцеркоидов ремнецов вызывало у молоди (главным образом двухлетков)
Рис. 1. Лигулидозы молоди леща: а - изолированный из брюшной полости двухлетки леща плероцеркоид Б. Меггир(а; б - плероцеркоид Б. 1Меггир(а (1), кровоизлияния на брюшной стенке и брыжейке (2), сдавливание внутренних органов (3), перекручивание кишечника (4).
т,
Рис. 2. Патоморфологические изменения форменных элементов периферической крови молоди леща (ОК 16 ОБ 100, окраска по Паппенгейму): а - амитоз, пойкилоцитоз, гемолиз; б - образование шистоцита, гемолиз, ядерные тени; в - четырехъядерный лимфоцит.
Рис. 3. Фрагменты гистологических срезов внутренних органов молоди леща, инвазированного плероцеркоида-ми ремнецов (ОК 16 ОБ 40, гематоксилин-эозин): а - деформация гиалинового хряща, разрастания многослойного неороговевающего и респираторного эпителиев (ОК 16 ОБ 10); б - отек паренхимы печени; в - скопления гемосидерина и отек паренхимы селезенки.
леща развитие патологических изменений органов.
Результаты проведенных гематологических исследований выявили нарушения форменных элементов белой и красной крови обследованных лещей.
В мазках годовиков и двухлетков леща количество патологически измененных эритроцитов от всего числа клеток красной крови в среднем составило 8,10±1,93 %. По характеру и степени проявления нарушения были условно распределены на 4 группы:
Таблица.
Лейкограмма периферической крови годовиков и двухлетков леща (%)
Группа рыб гранулоциты, % всего грануло-цитов, % агранулоциты, % всего агрануло-цитов, %
нейтрофилы псевдо-эозинофилы псевдо-базофилы моноциты лимфоциты
Лещи без плероцеркоидов ремнецов 3,01±0,77 3,43±0,57 0,02±0,02 6,46±1,36 2,13±0,44 88,69±1,44 90,82±1,36
Лещи с плероцеркоидами ремнецов 9,10±3,46* 2,37±0,78 0,00 11,47±4,24 1,06±0,92 84,10±3,78 85,16±4,71
Примечание: * - достоверность различий относительно группы рыб без паразита.
1 - изменения формы, окраски и размера клеток: пойкилоцитоз (2,97±1,49 %), аниза-цитоз (0,11±0,04 %), агглютинация (0,33± 0,12 %), гипохромазия (0,64±0,33 %), нарушение осморезистенции (0,30± 0,15 %); рис. 2а;
2 - нарушения, связанные с изменениями ядра: смещение ядер к периферии (0,15± 0,04 %), инвагинация ядра (0,003±0,001 %), микроядра (0,003±0,001 %), пикноз (0,010± 0,006 %), хроматинолиз (0,09±0,03 %), ка-риорексис (0,05±0,03 %), кариолиз (0,013± 0,006%);
3 - нарушения, связанные с делением клетки: амитоз (0,18±0,06 %) и образование шистоцитов (0,006±0,004 %); рис. 2а, 2б;
4 - дегенеративные изменения клетки вакуолизация цитоплазмы (1,32±0,99 %), гемолиз (0,04±0,02 %) и ядерные тени (1,89± 0,31 %); рис. 2а.
Наличие в кровотоке эритроцитов с вышеперечисленными изменениями указывало на неудовлетворительное физиологическое состояние обследованных рыб, так как подобные изменения являются результатом воздействия на организм различных вредоносных факторов и токсикозов, вызванных химическими веществами, отмеченными в воде [4, 7], в нашем случае - неблагоприятными токсикологическими условиями региона. У обследованных двухлеток и годовиках леща присутствие полосных паразитов (лигулид) значительно усиливало степень проявления цитологических трансформаций красной крови. Так, среднее количество патологически измененных клеток у зараженных рыб, в отличие от лещей аналогичных возрастных групп, свободных от гельмин-
тов, было достоверно превышено в 6,17 раз. При этом в мазках численность морфологически поврежденных клеток у отдельно взятых особей без паразита находилась в пределах 0,20-11,30 % от общего числа эритроцитов, а у инвазированных особей она составила уже 3,40-44,40 %, достигнув своего максимума.
Было отмечено, что частота встречаемости измененных эритроцитов у лещей, в брюшной полости которых были отмечены плероциркоиды лигулид, была выше. Так, эритроциты рыб с паразитом были чаще подвержены пойклоцитозу, гипохромазии и вакуолизации цитоплазмы.
В некоторых случаях процент лещей без паразитов, эритроциты которых подвергались хроматинолизу, амитозу и образованию ядерных теней, был несколько больше, по сравнению с зараженными особями, но интенсивность проявлений перечисленных изменений эритроцитов у инвази-рованных рыб была существенно выше. Так, количество эритроцитов, подверженных хроматинолизу, у незараженных рыб колебалось от 1 до 2 клеток, у зараженных - от 3 до 7, амитоз встречали у 1-9 против 2-14 клеток, ядерные тени составляли 3-40 против 45-60 клеток соответственно группам рыб.
Лейкоциты исследованных годовиков и двухлетков леща были представлены гра-нулоцитами и агрунолоцитами. Процентное соотношение лейкоцитов представлено в таблице.
У лейкоцитов так же, как и у эритроцитов, выявлены глубокие патологические изменения. Нарушения, связанные со снижением
числа лейкоцитов (лейкопения), выявлены у 35,48 % исследованных годовиков и двухлетков леща. Лейкопения отмечена как у рыб, инвазированных лигулидами, так и у рыб, свободных от ремнецов. В мазках у 9,68 % обследованных рыб отмечен карио-лизис и полиядерность лимфоцитов (рис. 2в).
Патологические изменения у моноцитов проявлялись в вакуолизации, затрагивавшей цитоплазму и в редких случаях ядро. В среднем их количество составило 3,05±1,04 % от общего количества всех лейкоцитов.
Результаты статистической обработки лейкограммы рыб, пораженных ремнецами и свободных от паразитов, выявили достоверность различий в группе гранулоцитов, а именно среди нейтрофилов. У инвазиро-ванных лещей процентное соотношение нейтрофилов было заметно выше (нейтро-филез), по сравнению с незараженными рыбами (табл.). Увеличение числа нейтро-филов у больных рыб вполне закономерно, т. к. они обладают основной защитной функцией. Среди нейтрофилов отмечены цито-патологические изменения, проявившиеся в незначительной вакуолизации цитоплазмы. Выявленные альтерации были обнаружены единично в мазках крови рыб, подвергшихся внедрению ремнецов.
Кроме изменений клеток крови, проведенный гистологический анализ показал неспецифические патоморфологические изменения внутренних органов обследованных годовиков и двухлетков леща. Так, во всех внутренних органах, в том числе оболочках сердца, оболочках кишечника, паренхимах печени, селезенке, поджелудочной железе, скелетной ткани - обнаружены значительный отек и мелкие некрозы, расстройства микроциркуляции. Значительные патоморфологические изменения отмечены в жабрах: из-за интенсивной пролиферации многослойного неоро-говевающего эпителия филаменты превращались в сплошные эпителиальные пластинки с полной атрофией ламелл, отмечен некроз или разрастание респираторного эпителия на верхушках ламелл. В почках были выявлены мелкие многочисленные кровоизлияния межканальной ткани, отслоение эпителия от базальных мембран в извитых почечных
канальцах. В большинстве случаев повреждения носили средний характер тяжести, при которых рыбы могут выжить, но появление дополнительных неблагоприятных факторов способно вызвать их гибель. У зараженных ремнецами лещей отмечены более серьезные патологические изменения, по сравнению с рыбами, свободными от паразитарной инвазии. Например, в жабрах практически у всех зараженных плероцеркоидами лигулид лещей отмечалась значительная деформация гиалинового хряща, что влекло за собой дугообразное изменение филамента (рис. 3а). Наблюдались более обширные разрастания многослойного неороговевающего эпителия филаментов: расширение площади образования эпителиальных пластинок до 40,00 % от общей площади жаберного лепестка (против 5,00-10,00 % - у незараженных рыб). При небольшом разрастании многослойного эпителия (в некоторых местах филаментов многослойный эпителий полностью отсутствовал) наблюдалось значительное разрастание дыхательного эпителия, увеличение количества участков ламелл, имеющих сросшиеся боковые поверхности. Размеры гепа-тоцитов печени инвазированных ремнецами двухлеток и годовиков леща, в отличие от рыб аналогичных возрастных групп, свободных от гельминтов, были достоверно выше: размер клетки был превышен на 9,9817,72 %, диаметр ядра - на 32,99 %. Увеличение размеров клеток свидетельствовало о наличии более значительного отека паренхимы органа (рис. 3б). Это подтверждает и тот факт, что у зараженных рыб печень имела заметно больше участков паренхимы с некрозами, которые достигали значительных размеров. У рыб, инвазированных Б. 1Мвггир1а, в селезенке отмечено присутствие больших скоплений гемосидерина (рис. 3в), отека паренхимы, кровоизлияний при резко расширенных сосудах.
Наиболее поврежденными органами у обеих групп рыб были печень и кишечник, у рыб с паразитами - жабры и почки. В целом количество потенциально нежизнеспособных лещей составило: в группе зараженных рыб - до 60,00 % рыб, в группе свободных от паразитарной инвазии - до 20,00 % рыб.
Заключение
Обобщая вышесказанное, можно сделать вывод о том, что в настоящее время молодь леща (годовики, двухлетки) в дельте Волги и Северном Каспии подвергается негативному влиянию загрязняющих веществ, присутствующих в окружающей водной среде, и полостных паразитов сем. Ligulidae. У обследованных рыб выявленные изменения тканей и органов являются результатом непосредственного токсикологического воздействия на организм рыб, что подтверждается данными предшествующих исследований, и свидетельствуют о нагрузке, которую в современных экологических условиях испытывает развивающийся организм рыбы (большинство изменений носило необратимый характер). В том числе, физиологическое состояние молоди леща усугубляется присутствием высокопатогенных для молоди рыб паразитов -плероцеркоидов ремнецов. Выявлены достоверные различия цитопатологических изменений в сторону увеличения частоты встречаемости и интенсивности проявления патологий у годовиков и двухлетков леща, инвазирован-ных ремнецами. В целом эпизоотическое и морфофизиологическое состояние годовиков и двухлетков леща Волго-Каспийского региона оценивается как неудовлетворительное.
Список литературы
1. Быховская-Павловская, И. Е. Паразиты рыб : руководство по изучению / И. Е. Быховская-Павлов-ская. - Л., 1985. - 121 с.
2. Волкова, О. В. Основы гистологии с гистологической техникой / О. В. Волкова, Ю. К. Елецкий. -М. : Медицина, 1982. - 304 с.
3. Володина, В. В. Морфофункциональное состояние органов и тканей каспийского тюленя (Phoca caspica, Gmelin, 1788) в современных экологических условиях : автореферат на соискание ... канд. биол. наук / В. В. Володина. - Астрахань, 2014. - 24 с.
4. Житенева, Л. Д. Атлас нормальных и патологически измененных клеток крови рыб / Л. Д. Житенева, Т. Г. Полтавцева, О. А. Рудницкая. - Ростов-на-Дону : Кн. изд-во, 1989. - 112 с.
5. Иванов, В. П. Промысловое использование популяции леща (Abramis brama Linnaeus, 1758) в Волго-Каспийском районе / В. П. Иванов, Н. В. Левашина // Вестник Астраханского государственного технического университета. Рыбное хозяйство. - 2014. -№ 2. - С. 37-49.
6. Иванова, Н. Т. Атлас клеток крови рыб (сравнительная морфололгия и классификация форменных элеентов крови рыб) / Н. Т. Иванова. - М. : Легкая и пищевая пром-сть, 1982 . - 184 с.
7. Каниева, Н. А. Влияние каспийской нефти на рыб (физиология, биохимия и морфология) / Н. А. Каниева, В. И. Воробьев. - Астрахань : Изд-во АГТУ 2006. - 180 с.
8. Карыгина, Н. В. Нефтяное загрязнение и эпизоотическое состояние экосистемы Среднего Каспия / Н. В. Карыгина, Е. А.Воронина // Проблемы сохранения экосистемы Каспия в условиях освоения нефтегазовых месторождений : материалы V международной науч.-практич. конф. - Астрахань, 2013. -С. 97-100.
9. Карыгина, Н. В. Абиотические и биотические факторы, формирующие условия обитания биоресурсов Каспийского моря / Н. В. Карыгина,
B. В. Проскурина, Е. Г. Лардыгина и др. // Сохранение биологических ресурсов Каспия. Международная научно-практическая конференция (Астрахань, 18-19 сентября 2014 г.) : материалы и доклады. - Астрахань : Изд-во АГТУ, 2014. -
C. 210-214.
10. Лабораторный практикум по болезням рыб / В. А. Муссселиус, В. Ф. Ванятинский, А. А. Вихман и др. : под ред. В. А. Мусселиус. - М. : Легкая и пищевая пром-сть, 1983. - 296 с.
МОСКОВСКИМ ВЕТЕРИНЯРНЫИ BEB-LLEHTP
webmvc .com
Заболел Ваш домашний питомец? Не отчаивайтесь - посетите наш веб-центр!
У нас Вы начете исчерпывающую информацию о бопезни Вашего друга, лечении, профилактике и других вопросах ветеринарии Также на нашем сайте Вы можете найти адрес ближайшей к Вам ветеринарной клиники, чтобы обратиться за помощью к специалистам.
за помощью
специалистам
Кроме этого, наш веб-центр располагает полным спектром информации по уходу за животными -будь то кошки или собаки, птицы и пи рыбы, черепахи или экзотические животные, Вы научитесь, как правильно разводить, кормить, дрессировать и вослитыаэть своих домашних питомцев, На страницах нашего сайта с Вами делятся опытом и советами признанные авторитеты в обласги ветеринарии и ухода за животными. К Вашим услугам - энциклопедические справочники и научные статьи о животном мире, фото и видеоматериалы, ежедневные новости и тематический форум.
Мы ждем Вас по адресу www.webmvc.com
