CC BY
40
© Е. С. михайлин, Т. Э. Иващенко, ОцЕНКА ЧАСТОТы ВСТРЕЧАЕмОСТИ «НуЛЕВЬ1Х» В. С. Баранов, Э. К. Айламазян АЛЛЕЛЕй ГЕНОВ GST T1 И GST M1 ПРИ ГЕСТОЗЕ
ГУ НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН, Санкт-Петербург
УДК: 618.3-008.6:575
■ Целью настоящей работы было определить частоту встречаемости функционально ослабленных «нулевых» генотипов генов GST TI и GST Ml у беременной и ее плода при гестозе. Методом полиме-разной цепной реакции исследована частота нулевого генотипа по генам GST TI и GSTМ1. Обследовано 76 женщин и их новорожденных детей с чистым гестозом различной степени тяжести. Группу сравнения составили 69 здоровых женщин и их новорожденных. Было выявлено достоверное снижение частоты сочетаний «нулевых» генотипов в группе с гестозом в целом (3,4 %) по отношению к группе сравнения (19,7 %). Частота сочетаний «нулевых» генотипов между матерями и плодами была достоверно выше у плодов, по сравнению с их матерями, для группы с гестозом (16,4 % у плодов и 3,4 % у матерей), тогда как в группе сравнения подобных отличий выявлено не было. Среди детей, родившихся массой меньше 2500 грамм, или оцененных по шкале Апгар меньше 7 баллов, частота встречаемости сочетаний «нулевых» генотипов была выше (33,3 % в обоих случаях), чем среди детей, родившихся с массой больше 2500 грамм (15,5 %) или оцененных по шкале Апгар выше 7 баллов (14,3 %). Таким образом, анализ частоты функционально ослабленных «нулевых» генотипов генов GST TI и GST MI у беременной
и ее плода подтверждает вклад свободно-радикального окисления в патогенез гестоза и указывает на значительно большую подверженность организма плода при гестозе неблагоприятному воздействию ксенобиотиков.
■ Ключевые слова: гестоз; оксидативный стресс; гены плода; GST T1; GSTМ1.
Введение
Гестоз является одной из основных причин материнской и перинатальной заболеваемости и смертности, по-прежнему оставаясь актуальной проблемой современного акушерства.
Вопросы этиологии, патогенеза, а также диагностики и терапии этого заболевания до сих пор остаются недостаточно изученными.
Существует более 40 теорий гестоза, однако природа данной патологии до последнего времени продолжает оставаться неясной.
Большинство ученых пришли к выводу, что ключевым звеном патогенеза гестоза, определяющим его клинические проявления, является эндотелиальная дисфункция [1, 6].
Не вызывает сомнений роль оксидативного стресса в возникновении дисфункции эндотелия при гестозе. Для защиты от активных форм кислорода, азота и других радикалов особенно важен кофермент глутатион, низкомолекулярный трипептид, водорастворимый антиоксидант, находящийся почти во всех клетках, а также вне клеток, в высокой концентрации [3].
Глутатион^-трансферазы (GST) катализируют взаимодействие глутамата с электрофильными атомами углерода (С), азота (N), серы (S) и кислорода (О) и относятся к ферментам фазы 2 системы детоксикации ксенобиотиков. Функционально GST отвечают за ферментную конъюгацию сульфгидрильной (SH2) группы с органическими электрофильными молекулами. GST катализирует реакцию глутамата с различными радикалами экзогенных ксенобиотиков, в результате чего образуются водорастворимые, биологически менее активные нетоксичные продукты, которые легко подвергаются экскреции через легкие, почки, кишечник.
Глутатионопосредованная детоксикация также играет существенную роль в обеспечении устойчивости клеток к пере-кисному окислению липидов и свободно-радикальному окислению. GST восстанавливают органические гидроперикиси и спирты, изомеризуют некоторые стероиды и простагландины, участвуют в обезвреживании пероксидов ДНК и в метаболизме эйкозаноидов [3].
В процессе метаболизма и трансформации многие ксенобиотики могут взаимодействовать друг с другом, при этом образуются биологически активные продукты, отрицательно влияющие на обмен веществ в тканях плаценты и плода.
цель исследования
Определить частоту встречаемости функционально ослабленных «нулевых» генотипов генов GST T1 и GST M1 у беременной и ее плода при гестозе.
Таблица 1
Частоты генотипов по генам GST T1 и GST M1 в группе беременных с чистым гестозом различной степени тяжести и в группе сравнения
Группы Частоты, %
GST T1 + GST T1 0/0 GST M1 + GST M1 0/0
Гестоз в целом Мать 74,6 25,4 72,9 27,1
Плод 68,7 31,3 68,7 31,3
Тяжелая степень Мать 88,9 11,1 88,9 11,1
Плод 90,9 9,1 72,7 27,3
Средняя степень Мать 75,0 25,0 83,3 16,7
Плод 57,2 42,8 50 50
Легкая степень Мать 71,1 28,9 65,8 34,2
Плод 66,7 33,3 73,8 26,2
Группа сравнения Мать 62,3 37,7 57,4 42,6
Плод 63,1 36,9 50,8 49,2
Материалы и методы исследования
Анализ частот полиморфных вариантов генов GST T1 и GSTМ1 проведен у 76 беременных с чистым гестозом различной степени тяжести и их родившихся детей. Все пациентки были разделены на 3 группы: легкую, среднюю и тяжелую степени тяжести по баллам в зависимости от распространенности отеков, уровня артериального давления и про-теинурии, а также от времени появления симптомов (классификация Савельевой и соавт., 2005).
Было обследовано 17 пациенток с наличием чистого гестоза тяжелой степени, 16 пациенток с гестозом средней степени и 43 женщины с гестозом легкой степени тяжести. Группу сравнения составили 69 здоровых беременных женщин и их новорожденные дети.
Работа выполнена на образцах ДНК, выделенных из лейкоцитов периферической крови матери и пуповинной крови новорожденного.
Методом полимеразной цепной реакции исследована частота нулевого генотипа по генам GST T1 и GST М1.
Смесь для амплификации, объемом 25 мкл включала 15 нМ каждого праймера, 67 мМ трис-HCl, рН 8,8, 16,6 мМ сульфата аммония, 6,7 мМ MgCl2, 6,7 мкМ ЭДТА, 10 мМ меркаптоэтанола, 170 мкг BSA, 1,0 мМ каждого dNTP и 1U Taq-ДНК-полимеразы (производства «Бион», Москва).
Для амплификации фрагментов генов GST M1 (GST M1 F GAA CTC CCT GAA AAG CTA AAG C; GSTM1 R GTT GGG CTC AAA TAT ACG GTG G) и GST T1 (GST T1 F TTC CTT ACT GGT CCT CAC ATC TC; GST T1 R TCA CCG GAT CAT GGC CAG CA) использовали следующие условия ПЦР: после денатурации (94 ° С, 7 мин.) проводили 32 цикла амплификации в режиме 94 ° С — 1 мин; 53 ° С — 1 мин; 72 ° С — 1 мин 20 сек. После амплификации анализировали продукты реакции
в 7,0 % полиакриламидном геле с последующей окраской этидиумбромидом и визуализацией в проходящем УФ-свете.
Гомозиготы по нормальному аллелю «+» определяли по наличию на электрофореграм-мах продукта амплификации размером 315 п. о. для GST Т1 и фрагмента 271 п.о. для GST M1. Отсутствие соответствующих фрагментов указывало на гомозиготность индивидуума по делеции соответствующего гена. В качестве внутреннего контроля использовали амплификацию фрагмента гена CYPA1 (192 п. о.). Гетерозиготные особи 0/+ не дискриминировались.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерной программы «STATISTICA 6.0». При сравнении частот генотипов использовали стандартный критерий %2.
Результаты
Частоты генотипов по генам GST T1 и GST M1 у обследованных беременных женщин и их плодов представлены в таблице 1.
Сравнительный анализ частот генотипов выявил некоторое повышение частоты нулевых генотипов GST T1 0/0 и GSTM1 0/0 у матерей в группе сравнения (37,7 % и 42,6 %) по сравнению с группой с гестозом (25,4 % и 27,1 % соответственно). Среди плодов частоты нулевых генотипов GST T1 0/0 и GST M1 0/0 также была выше в группе сравнения (36,9 % и 49,2 %), чем в группе с гестозом (31,3 % и 31,3 %), хотя эти различия были недостоверны (p>0,05).
Наибольшие частоты встречаемости генотипов GST T1 0/0 и GST M1 0/0 у матерей зарегистрирована в группе сравнения, тогда как среди плодов — в подгруппе со средним гестозом (42,8 % и 50 %). В целом практически во всех группах отмечалась тенденция к более высокой частоте нуле-
80 70 60 50 40 30 20 10 0
66,67
66,67
52,54
22,03 :2,03
I
22,22
11,11 8
44,74
39,34
26,32
| 22 95 19,68 __-J-|8.03
__I _
^ I I Г
] T+M+ ] T+M-IT-M+ ] T-M-
Гестоз Тяжелый
Средний Легкий
в целом
гестоз
гестоз
гестоз
Группа сравнения
Рис. 1. Частоты сочетаний генотипов по генам GST T1 и GST M1 у беременных с гестозом различной степени тяжести и в группе сравнения
* — p < 0,05 по отношению к группе сравнения; ** — p < 0,01 по отношению к группе сравнения
80 70 60 50
40 — 30 — 20 — 10 J_ 0
72,73
49,25
7,91 16,42 16 42
47,62
35,71
28,57
42* 18,18 2143 р е-21^3 ^ ГП8
38,46
1 T+M+ ] T+M-IT-M+ ] T-M-
Гестоз Тяжелый Средний Легкий Группа в целом гестоз гестоз гестоз сравнения
Рис. 2. Частоты сочетаний генотипов по генам GST T1 и GSTM1 у плодов от беременностей с гестозом различной степени тяжести и в группе сравнения * — p < 0,01 по сравнению с матерями (рис. 1)
вых генотипов GST T1 0/0 и GSTM1 0/0 в группе плодов, по сравнению с группой их матерей, хотя различия были недостоверны (p>0,05).
Частоты сочетаний генотипов по генам GST T1 и GST M1 у беременных в различных подгруппах и их плодов представлены на рисунках 1 и 2.
В группе пациенток с гестозом частота функционально ослабленного генотипа GST T1 0/0 + GST M1 0/0 составила у матерей 3,4 %, а у плодов — 16,4 %, тогда как в группе сравнения у матерей данное сочетание встречалось в 19,7 %, у плодов — 23,1 %.
Таким образом, при сравнительном анализе частот сочетаний генотипов по генам GST T1 и GST M1 у беременных женщин было выявлено достоверное снижение частоты сочетаний нулевых генотипов в группах с гестозом в целом
(3,4 %) по отношению к группе сравнения (19,7 %) (р < 0,05). У плодов также отмечалась тенденция к снижению частоты сочетаний нулевых генотипов в группе с гестозом (16,4 %) по отношению к группе сравнения (23,1 %), однако данные отличия были незначимы (р > 0,05).
При тяжелой форме гестоза сочетание генотипов GST Т1 0/0 + GST М1 0/0 у матерей не встречалось, у плодов данное сочетание идентифицировано в 9,1 % случаев. При гестозе средней степени тяжести частота сочетания GST Т1 0/0 + GST М1 0/0 составила у матерей 8,3 %, у плодов — 28,6 %. При гестозе легкой степени частота сочетания GST Т1 0/0 + GST М1 0/0 составила у матерей 2,6 %, у плодов — 14,3 %.
Следует отметить, что при сравнении частот сочетаний нулевых генотипов между матерями и
плодами в различных группах с гестозом, данные величины были выше у плодов, по сравнению с их матерями, причем для группы с гестозом в целом (16,4 % у плодов и 3,4 % у матерей) и группы с тяжелым гестозом (9,1 % у плодов и 0 % у матерей) эти различия были статистически достоверны (p < 0,05), тогда как достоверных отличий между частотами сочетаний нулевых генотипов между матерями и плодами в группе сравнения выявлено не было (р>0,05).
Нами проанализированы частоты встречаемости некоторых клинических характеристик гесто-за в зависимости от генотипа матери по исследуемым генам.
Согласно полученным результатам в подгруппе с физиологической прибавкой в весе частота генотипа GST M1 0/0 была достоверно выше (40,0 %), чем в подгруппе с патологической прибавкой (2,4 %) (p < 0,05). В группе, где СДО в артерии пуповины было меньше 3,0, частота генотипа GSTM1 0/0 была выше (15,8 %), чем в группе, в которой данный показатель превышал 3,0 (0 %). В группе, где показатель СДО в правой маточной артерии во всех случаях превышал 2,0, частота генотипа GSTM1 0/0 была выше (20,83 %), чем в группе, в которой данный показатель был меньше 2,0 (0 %). В группе с уровнем АД при беременности больше 95 мм рт. ст. частота нулевого генотипа по гену GST T1 у плодов была достоверно меньше (9,09 %), чем в группе с уровнем диасто-лического АД ниже указанного уровня (36,36 %) (p < 0,05). Кроме того, в тех случаях, когда артериальная гипертензия у матери проявлялась до 30 недель, плоды в 100 % случаев имели генотип GST T1 + .
В группе с уровнем систолического АД у матери при гестозе выше 150 мм рт. ст., частота генотипа плода GST M1 0/0 была достоверно выше (57,2 %), чем в группе, когда данный показатель не превышал 150 мм рт. ст. (28,9 %) (p < 0,05).
В подгруппе, где СДО в правой маточной артерии был больше 2,0, частота встречаемости сочетаний нулевых генотипов по генам GST T1 и GST M1 у плодов была несколько выше (27,3 %), чем в подгруппе, где данный показатель не достигал 2,0 (8,0 %). В подгруппе, где СДО в левой маточной артерии был больше 2,0, частота сочетаний нулевых генотипов по генам GST T1 и GST M1 у плодов была также выше (23,8 %), чем в подгруппе, где данный показатель не достигал 2,0 (0 %). Интересно отметить, что среди детей, родившихся массой меньше 2500 грамм, частота встречаемости сочетаний нулевых генотипов по генам GST T1 и GSTM1 была выше (33,3 %), чем среди детей, родившихся с массой больше 2 500 грамм (15,5 %). Среди детей, рост которых
при рождении превышал 45 см, частота встречаемости сочетаний нулевых генотипов по генам GST T1 и GST M1 была выше (17,5 %), чем среди детей, рост которых при рождении не достигал 45 см (0 %). Также среди детей, родившихся с оценкой по шкале Апгар меньше 7 баллов, частота встречаемости сочетаний нулевых генотипов по генам GST T1 и GSTM1 была выше (33,3 %), чем среди детей, родившихся с оценкой по шкале Апгар больше 7 баллов (14,3 %).
Обсуждение
Накопленные факты указывают на то, что ге-стоз является мультифакторной патологией, однако этиология заболевания до сих пор неясна. Не вызывает, однако, сомнения, что ключевым звеном патогенеза гестоза, определяющим его клинические проявления, является эндотелиальная дисфункция [1, 6]. До сих пор в литературе нет единого мнения о том, почему при данном заболевании происходит повреждение эндотелиальных клеток. Ряд авторов полагает, что существует две различных причины возникновения гестоза [1, 4, 7]. Эти причины могут быть охарактеризованы как плацентарная, возникающая вследствие сниженной плацентарной перфузии в результате неполной инвазии трофобласта в спиральные артерии, и материнская — вследствие существующих до беременности нарушений функции эндотелия у матери. Однако, безусловно, вклад генетических составляющих в семейные формы гестоза играет важную роль в развитии заболевания.
Оксидативный стресс, имеющий место при гестозе, определяется как дисбаланс между про-оксидантными и антиоксидантными силами в сторону превалирования прооксидантов, приводящий к потенциальному повреждению клеток или тканей [11]. Оксидативный стресс является одной из главных причин повреждения эндотелия, возникающий вследствие истощения анти-оксидантной системы организма на фоне тканевой ишемии. Так del Carmen Terrones Saldívar et al. (2004) [9] обнаружили сниженную активность общей GST в плацентах больных с тяжелым и средним гестозом, что может ослаблять защиту плода от ксенобиотиков при беременностях, протекающих с гестозом.
Известно, что глутатионопосредованная деток-сикация играет существенную роль в обеспечении устойчивости клеток к перекисному окислению липидов и свободно-радикальному окислению.
Синтез глутатион^-трансфераз контролируется генами, расположенными на различных хромосомах, для каждого из них описан ряд полиморфизмов, которые влияют на функциональную активность ферментов.
Важная роль генетического полиморфизма генов суперсемейства глутатион^-трансфераз установлена для многих онкологических и неонкологических заболеваний. Исследований посвященных роли глутатион^-трансфераз в патогенезе гестоза достаточно мало и в основном они посвящены плацентарной глутатион-S-трансферазе Р1 [2, 5].
Интересно отметить, что распределение частот сочетаний нулевых генотипов между матерями и плодами в группе сравнения практически не отличалось, тогда как в группе пациенток с гесто-зом как в целом, так и отдельно по подгруппам частота функционально ослабленного генотипа GST T1 0/0 + GST M1 0/0 была достоверно выше у плодов.
Как известно, при снижении или отсутствии активности ферментов фазы 2 системы деток-сикации, к которым относятся глутатион-S-трансферазы, нарушается баланс между ферментами первой и второй фаз системы детоксикации, следствием чего может быть накопление активных метаболитов, что способствует развитию ок-сидативного стресса — одного из ключевых компонентов повреждения ткани.
Плацента при гестозе является дополнительным источником свободных радикалов. Свободные радикалы образуются в результате метаболизма арахидоновой кислоты двумя путями: липооксигеназным и циклооксигеназным, но в результате циклооксигеназного пути производится в 1000 раз большее количество супероксидов, чем при липооксигеназном [10]. Свободные радикалы снижают продукцию оксида азота эндотели-альными клетками и ингибируют индуцибельную NO синтазу [13, 12]. Липидные пероксиды повреждают капиллярную проницаемость для белков [8] и могут таким образом быть вовлечены в механизм образования отеков и протеинурии [14]. Таким образом, увеличение липопротеинов низкой плотности и оксидативный стресс при гестозе тесно связаны между собой, а также с гипоксией, вызываемой ишемией плаценты и иммунной дезадаптацией.
В терапии гестоза, особенно тяжелых его форм, применяется большое количество лекарственных препаратов — ксенобиотиков, многие из которых обезвреживаются путем глютатион-опосредованной детоксикации в печени матери. Матери детей с генотипом GST T1 0/0 + GST M1 0/0 являются либо гетерозиготами либо «нулевыми» гомозиготами по изучаемым генам. Правомочно предположение, что частота нулевых генотипов генов GST T1 и GST M1, а также их комбинации, и, как следствие, дефицит в системе детоксикации, среди женщин, дети
которых имеют генотип GST T1 0/0 + GST M1 0/0, будет превышать аналогичный показатель в популяционной выборке. При этом ксенобиотики могут представлять существенную опасность уже для организма матери. Учитывая, что ферментные системы печени плода крайне незрелые, плод в значительной мере не способен обезвреживать ксенобиотики и их активные метаболиты. В условиях, когда детоксикационная функция плаценты нарушена в результате генетически обусловленной неполноценной глю-татионопосредованной детоксикации, многие лекарственные препараты проникают через плаценту к плоду в неизмененном виде или в виде активных метаболитов, оказывая неблагоприятное воздействие на процессы метаболизма и повреждающее действие на ткани. В дальнейшем, ксенобиотики могут либо накапливаться в организме плода, либо проникать в амниотическую жидкость и обратно в кровоток матери через плацентарный барьер, имеющий повышенную проницаемость при гестозе. Подобным образом ослабленный организм матери вынужден обезвреживать не только вредные вещества, поступающие извне, но и циркулирующие в системе мать-плацента-плод.
Таким образом, анализ частоты функционально ослабленных «нулевых» генотипов генов GST T1 и GST M1 у беременной и ее плода подтверждает вклад свободно-радикального окисления в патогенез гестоза и указывает на значительно большую подверженность организма плода при гестозе неблагоприятному воздействию ксенобиотиков.
Литература
1. Айламазян Э. К., Мозговая Е. В. Гестоз: теория и практика. — М.: МЕДпресс информ, 2008. — 272 с.
2. Демин Г. С. Анализ ассоциации полиморфизма генов «сосудистой системы» и «эндотелиальной дисфункции» с развитием преэклампсии: автореф. дис. ... канд. мед. наук. — СПб., 2008.
3. Кольман Я., Рем К. Наглядная биохимия: пер. с нем. — М.: Мир, 2000. — 469 с.
4. Кулаков В. И., Мурашко Л. Е. Введение // Актуальные вопросы диагностики, профилактики и лечения гестоза: материалы междунар. симп. — М.,1998. — С. 5-7.
5. Мозговая Е. В. Диагностика и медикаментозная коррекция эндотелиальной дисфункции при гестозе: автореф. дис. ... д-ра. мед. наук. — СПб., 2004.
6. Супряга О. М. Роль эндотелиальной дисфункции в гене-зе гипертензивных состояний у беременных // Акушерство и гинекология. — 1995. — № 6. — С. 5-9.
7. Arngrimsson R., Bjornsson Н., Geirsson R. T. Genetic and familial predisposition to eclampsia and pre-eclampsia in a
defined population // Br. J. Obstet. Gynaecol. — 1990. — Vol. 97. — P. 762-769.
8. Endothelial cell killing by neutrophils: synergistic interaction of oxygen products and proteases / Varani J., Ginsburg I., Schuger L. [et al.] // Am. J. Pathol. — 1989. — Vol. 135. — P. 435-438.
9. Glutathione S-transferases and esterases in placenta after normal and pre-eclamptic pregnancies / del Carmen Terrones Saldívar M., Juárez F. J., Viramontes J. L. [et al.] // Placenta. — 2004. — Vol. 25, № 4. — P. 331-336.
10. Higgs G. A. Inhibition of cyclooxygenase and lipoxygenase / Higgs G. A., Vane J. R. // Br. Med. Bull. — 1983. — Vol.39. — P. 265-270.
11. Holley A. E., Cheeseman K. H. Measuring free radical reactions in vivo // Br. Med. Bull. — 1993. — Vol. 49. — P. 494505.
12. Inhibition of inducible nitric oxide synthase in macrophages by oxidized low-density lipoproteins / Yang X., Cai B., Sciacca R. R. [et al.] // Circ. Res. — 1994. — Vol. 74. — P. 318-328.
13. Katusic Z. S., Vanhoutte P. J. M. Superoxide anion and en-dothelial regulation of arterial tone // Semin. Perinatol. — 1991. — Vol. 15. — P. 30-33.
14. Walsh S. W. Lipid peroxidation in pregnancy // Hypertens. Pregn. — 1994. — Vol. 13. — P. 1-31.
Статья представлена М. А. Тарасовой, ГУ НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта,
Санкт-Петербург
■ Адреса авторов для переписки-
Михайлин Евгений Сергеевич — к. м. н., научный сотрудник. ГУ НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН. 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. E-mail: mihailin@mail.ru.
Иващенко Татьяна Эдуардовна — д. б. н., профессор, вед. науч. сотрудник лаборатории пренатальной диагностики наследственных заболеваний человека.
ГУ НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН. 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. E-mail: tiv@hosp.ru.
Баранов Владислав Сергеевич — член-корр. РАМН, з. д. н. РФ, д. м. н., профессор, руководитель лаборатории пренатальной диагностики наследственных заболеваний человека. ГУ НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН. 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. E-mail: baranov@VB2475.spb.edu.
Айламазян Эдуард Карпович — директор НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН, академик РАМН, з. д. н. РФ, д. м. н., профессор.
ГУ НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН. 199034, Россия, Санкт-Петербург, Менделеевская линия, д. 3. E-mail: iagmail@ott.ru.
THE ESTIMATION OF THE FREQUENCIES OF GST T1 AND GSTM1 0/0 GENOTYPE IN CASE OF GESTOSIS
Mikhailin E. S., Ivaschenko T. E., Baranov V. S., Ailamazyan E. K.
■ Summary: The goal of our study was to estimate frequencies of GST T1 and GSTM1 0/0 genotype of pregnant women wih gestosis and their fetuses. The frequencies of GST T1 and GST M1 0/0 genotype were studied by polymerase chain reaction. We examined 76 pregnant women and their newborns with different severity of pure gestosis. The healthy pregnant women (69 individuals) and their newborns were included in control group. The frequency analysis revealed decrease of genotype frequency GST T1 0/0+GST M1 0/0 in case of gestosis (3,4 %) in relation to control group (19,7 %). We have found the tendency of genotype frequency GST T1 0/0 + GST M1 0/0 to be higher in newborns in case of gestosis (16,4 %o) in comparison with their mothers (3,4 %o), whereas in control group there were no such differences. The frequency of newborn genotype GST T1 0/0 + GST M1 0/0 in case of gestosis was higher among children, born in weight less than 2500 gr. (33,3 %o against 15,5 %) and among children, estimated less than 7 points by Apgar score (33,3 % against 14,3 %). Thus, the frequency analysis of genotype GST T1 0/0 + GST M1 0/0 in pregnant women and their fetuses confirms the contribution of free-radical oxidation in the development of gestosis and specifies a big susceptibility of a fetus to be influenced by xenobiotics.
■ Key words: gestosis; oxidative stress; fetus genes; GST T1; GST M1.
Mikhailin Evgeny Sergeevich — the candidate of medical sciences, scientific researcher.
D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, RAMS. 199034 Russia, St. Petersburg, Mendeleyevskaya Line, 3. E-mail: mihailin@mail.ru.
Ivaschenko Tatyana Eduardovna — doctor of biological sciences, professor, main scientific researcher, Laboratory of prenatal diagnostics of human congenital diseases. D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, RAMS. 199034 Russia, St. Petersburg, Mendeleyevskaya Line, 3. E-mail: tiv@hosp.ru.
Baranov Vladislav Sergeevich — head of the Laboratory of prenatal diagnostics of human congenital diseases, D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, Russian Academy of Medical Sciences (RAMS), doctor of medical sciences, professor, corresponding member of the Russian Academy of Medical Sciences (RAMS). D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, RAMS. 199034 Russia, St. Petersburg, Mendeleyevskaya Line, 3. E-mail: baranov@VB2475.spb.edu.
Ailamazyan Edward Karpovich — director of the D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, Russian Academy of Medical Sciences (RAMS), doctor of medical sciences, professor, associate member of the Russian Academy of Medical Sciences (RAMS). 199034, Russia, St. Petersburg, Mendeleyevskaya Line, 3. E-mail: iagmail@ott.ru.
