и имплантат располагается за центральным нижним резцом не травмируя зуб, что полностью подтверждено данными КЛКТ. Данная модель соответствует реальным клиническим условиям проведения отсроченной дентальной имплантации внутриротовым способом. Использование КЛКТ для оценки непосредственных и отдаленных результатов оперативного вмешательства также соответствует основным принципам диагностики и динамического наблюдения пациентов, в послеоперационном периоде использующих ортопедические конструкции с опорой на дентальные имплантаты. Все указанное создает условия для экстраполяции полученных результатов экспериментальных исследований в клинику и соответствует основным принципам доказательной медицины при проведении научных исследований по проблемам дентальной имплантации.
Заключение
Таким образом, применение конусно-лучевой компьютерной томографии в эксперименте позволяет дать научное обоснование разработке новых способов дентальной имплантации и апробации предложенных имплантационных систем на этапе медико-биологических испытаний.
Список литературы
1. Агазаде А.Р., Гасанов И.А., Агазаде Р.Р. Ги-стоморфометрический и количественный гистохимический анализ периимплантатной зоны у больных с различной минеральной плотностью костной ткани при дентальной имплантации // Вестник Российской академии медицинских наук. 2014. № 3-4. С. 19-23.
2. Денисов С.Д., Морозкина Т.С. Требования к научному эксперименту с использованием животных // Здравоохранение. 2001. № 4. С. 40-42.
3. Походенько-Чудакова И.О., Шевела Т.Л., Евтухов В.Л. Возможность создания экспериментальной модели отсроченной эндостальной дентальной имплантации. Внутриротовой метод // Су-часна стоматолопя та щелепно-лицева х1рурпя: материалы международ. науч.-практ. конф., посвящ. 100-летию со дня рождения проф. Ю.И. Бернадского (1915-2006). Киев, 2015. С. 119-120.
4. Cheng G. et al. A novel animal model treated with tooth extraction to repair the full-thickness defects in the mandible of rabbits // Journal Surg. Res. 2015. Vol. 194, № 2. P. 706-716.
5. Morra M. et al. Adherent endotoxin on dental implant surfaces: a reappraisal // J. Oral Implantol. 2015. Vol. 41, № 1. P. 10-6.
6. Mehdikhani-Nahrkhalaji M. et al. Biodegradable nanocomposite coatings accelerate bone healing: In vivo evaluation // Dent Res. J (Isfahan). 2015. Vol. 12, № 1. P. 89-99.
7. Reiz S.D. et al Cerec meets Galileos-integrated implantology for completely virtual implant planning // Int. J. Comput. Dent. 2014. Vol. 17, № 2. P. 145-157.
8. Petzold C. et al. Effect of proline-rich synthetic peptide-coated titanium implants on bone healing in a rabbit model // Int. J. Oral Maxillofac. Implants. 2013. Vol. 28, № 6. P. 547-555.
9. Derks J. et al. Effectiveness of implant therapy analyzed in a Swedish population: early and late implant
loss // J. Dent. Res. 2015. Vol. 94, № 3. P. 44-51.
10. Gonzalez Sh.M Interpretation basics of cone beam computed tomography // Pondicherry, India: John Wiley & Sons, Inc., 2014. 210 p.
11. Mello L.A. et al Impact of cone-beam computed tomography on implant planning and on prediction of implant size // Braz. Oral Res. 2014. Vol. 28, № 1. P. 46-53.
12 Khojastepour L., Mirhadi S., Mesbahi S.A. Anatomical variation of ostiomeatal complex in CBCT of patients seeking rhinoplasty // J. Dent. (Shiraz). 2015. Vol. 16, № 1. P. 42-48.
13. Li L., Zhan F.L., Jin Y.W. Preliminary study on root canal morphology of maxillary second molars // Shanghai Kou Qiang Yi Xue. 2014. Vol. 23, № 2. P. 179-183.
14. Liang Y. et al. Strontium coating by electrochemical deposition improves implant osseointegration in osteopenic models // Exp. Ther. Med. 2015. Vol. 9, № 1. P. 172-176.
15. Tal H Animal experimentation, animal welfare and scientific research // Refuat. Hapeh .Vehashinayim. 2013. Vol. 30, № 4. P. 16-22.
Сведения об авторах
Походенько-Чудакова Ирина Олеговна -
д.м.н., профессор, зав. кафедрой хирургической стоматологии УО «Белорусский государственный медицинский университет». E-mail: [email protected].
Шевела Татьяна Леонидовна - к.м.н., доцент кафедры хирургической стоматологии УО «Белорусский государственный медицинский университет». E-mail: [email protected].
УДК 616.316-008.8 О.В. Шушпанова1, В.Ю. Никольский2, Е.П. Колеватых1
ОЦЕНКА ЧАСТОТЫ РАСПРОСТРАНЕНИЯ HELICOBACTER PYLORI В РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ
1Кировская государственная медицинская академия (Киров, Россия) 2ГБУЗ Севастополя «Стоматологическая поликлиника № 1» (Севастополь, Россия)
O.V Shushpanovai, V.Yu. Nikolskj E.P. Kolevatykh
EVALUATION OF THE FREQUENCY OF HELICOBACTER PYLORI DISTRIBUTION IN THE ORAL FLUID
1 Kirov State Medical Academy (Kirov, Russia) 2Sevastopol State budget institution of health care «Dental Clinic № 1» (Sevastopol, Russia)
В статье представлены результаты микробиологического исследования нестимулированной ро-
товой жидкости 80 человек с целью обнаружения Helicobacter pylori носительства. Жизнеспособность H. pylori оценивали в культуральном методе путем посева на элективные среды. Некультивируемые формы H. pylori определяли с помощью полимеразной цепной реакции. Выявлено 37 больных с разными формами инфицирования Helicobacter pylori, у которых чаще выделялась патология со стороны полости рта, желудочно-кишечного тракта и сердечно-сосудистой системы. Установлено, что частота персистенции H. pylori в ротовой жидкости снижена при наличии лактобацилл и увеличивается с возрастом.
Ключевые слова: ротовая жидкость, Helicobacter pylori.
The article presents the results of microbiological studies of unstimulated oral liquid on Helicobacter pylori presence in 80 people. The viability of H. pylori was evaluated in the culture method by plating on selected medium environments. Uncultivated H. pylori forms were determined by polymerase chain reaction. It identified 37 patients having various forms of Helicobacter pylori, whose pathology was often outstanding in the mouth, gastrointestinal tract, and cardiovascular system. It has been determined that frequency of persistence of H. pylori in the oral fluid is reduced in the presence of lactobacilli and increases with age.
Key words: oral fluid, Helicobacter pylori.
Введение
Открытие Helicobacter pylori (Н. pylori), сделанное австралийскими учеными B. Marshall и I. Warren в 1983 году, явилось революционным [8] во взглядах на этиологию и патогенез основных нозологических форм гастродуоденальной патологии [3].
Инфекция Н. pylori является одной из наиболее распространенных в мире (Graham, 1997) [1, 2].
В последние годы внимание исследователей в области стоматологии и гастроэнтерологии привлечено к проблеме участия микрофлоры полости рта в развитии ряда заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). Предполагается, что ротовая полость является резервуаром микроорганизма Н. pylori - одного из главных этиологических факторов хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки [4-6].
B. Marshall и I. Warren в клинических исследованиях H. pylori пришли к выводу, что бактерии могут передаваться от человека к человеку через грязную посуду и поцелуи [7].
H. pylori присутствует на слизистых всего пищеварительного тракта: в соскобе эпителия щек, пищевода, желудка, в тонком, толстом кишечнике, слюне, зубном камне, зубодесневой борозде и в фекалиях [10, 11]. Обнаруживается H. pylori и на слизистой влагалища женщин [12]. При этом считают, что полость рта и влагалище являются резервуарными станциями H. pylori в организме человека. Микроорганизм может пребывать в питьевой и промышленной воде городских и сельских населенных пунктов, что свидетельствует о его сапрофитизме. Колонизация H.pylori ротовой полости и желудка людей увеличивается с возрастом [9].
В 1991 г. впервые была продемонстрирована связь между инфекцией H. pylori и развитием рака желудка [15]. Международное агентство по исследо-
ванию рака (МАИР) при ВОЗ, пересмотрев имеющиеся доказательства, заявило, что H. Pylori - канцероген для человека [13, 14].
Известно, что H. pylori-инфекция носит перси-стентный характер. Типичные формы клинических проявлений хеликобактериоза развиваются редко и зависят от факторов резистентности организма человека.
По данным исследований, проведенных в Российской Федерации в 2008-2010 годах, инфициро-ванность населения H. pylori находится на уровне 56-88 % [17]. Изучение динамики распространенности хеликобактериоза среди различных возрастных групп в различных регионах РФ представляет большой научно-практический интерес [16].
Цель работы: оценка вегетации Helicobacter pylori в ротовой жидкости у взрослых жителей города Кирова.
Материалы и методы
Проведено одноцентровое сравнительное исследование, в котором обследовано 80 человек, из них 58 женщин и 22 мужчины. По результатам исследования все больные разделены на 2 группы. В первую группу определены 37 человек, в ротовой жидкости (РЖ) которых обнаружена H. pylori. Во вторую (контрольную)
- 43 человека, у которых в РЖ H. pylori не определялась. Первую группу разделили на две подгруппы: а) 27 человек - H. pylori в активной форме, б) 10 человек
- H. pylori в некультивируемой форме. Средний возраст больных первой группы составил: а) 55 (21-65) лет, б) 26,5 (22-61); второй - 36 (20-59) лет.
Нестимулированную РЖ получали натощак в утренние часы, путем сбора в градуированные стерильные пробирки.
Жизнеспособность H. pylori оценивали в куль-туральном методе путем посева на элективные среды в микроаэрофильных условиях с применением газогенераторных пакетов производства HiMedia (Индия) и анаэростата. Определяли число колоние-образующих единиц (КОЕ) методом серийных разведений. Идентификацию выделенных хеликобактерий осуществляли общепринятыми методами с учетом морфологических, культуральных и биохимических свойств при помощи API-системы bioMerieux (Франция). Некультивируемые формы H. pylori выявляли в полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Для определения характера распределения полученных данных использовали критерий Шапиро-Уилка. Количественные данные представлены медианой и межквартильным размахом Me (Q1-Q3) для распределения, отличного от нормального. Корреляционные связи между количественными показателями выявляли с применением рангового коэффициента Спирмена. Статистическая значимость различий для количественных переменных между группами оценивалась по критерию Краскела-Уоллиса. В качестве критического уровня статистической значимости различий выборочных показателей (р) установлено значение р<0,05. Статистическая обработка проведена с использованием программы Microsoft Excel и пакета прикладных программ Statistica 10.
Результаты исследования
Из обследованных 80 человек у 27 (33,8%) куль-туральным методом обнаружено наличие H. pylori в концентрации 102 (27,5%) - 103 (6,3%). Среди ин-
тактных лиц методом ПЦР зафиксированы сигналы в исследуемом материале 10 человек (12,5%), т.е. выявлены некультивируемые формы H. pylori.
Установлены статистически значимые различия количественных показателей: одного из резидентов микрофлоры полости рта - Lactobacillus spp. и представителя условно-патогенной флоры - Candida spp. У пациентов с хеликобактер-носительством в биотопе полости рта обнаружено увеличение количества и частоты выделения грибов рода Candida и более низкие показатели Lactobacillus spp. в сравнении с подгруппой «б» и контрольной группой. Результаты исследования количественного состава микробной флоры ротовой жидкости у больных в сравнении с контрольной группой представлены в таблице.
Обсуждение результатов
Снижение резидентной флоры и рост условно-патогенной в группе H. pylori «+» свидетельствует о дисбиозе полости рта. Следовательно, можно предположить, что при выраженных дисбиозах полости рта происходит хеликобактер-инфицирование или же хеликобактер-носительство является причиной развития дисбиотических состояний полости рта.
Анализируя данные методом ранговой корреляции Спирмена, отмечена слабая обратная корреляционная связь (р= -0,25) частоты распространения H. pylori совместно с бактериями рода Lactobacillus и прямая (р= 0,22) с дрожжевыми грибами рода Candida.
Прослеживается средняя обратная корреляционная связь (р= -0,4) персистенции Lactobacillus spp. с возрастным признаком и дрожжевидными грибами рода Candida.
Установлено, что среди H. pylori-положительных пациентов чаще выявлялась патология со стороны полости рта: кариес (85%), заболевания пародонта (40%), полное и частичное отсутствие зубов (59%); также установлены заболевания желудочно-кишечного тракта (18,5%) и сердечно-сосудистой системы (7,4%).
Выводы
1. Helicobacter pylori выявлена в ротовой жидкости у 37 человек (46,3%), причем культуральным методом - 27 (33,8%), с помощью полимеразной цепной реакции - 10 (12,5%).
2. H. pylori чаще вегетируют в полости рта у лиц с патологией зубов, наличием заболеваний ЖКТ, сердечно-сосудистой системы.
3. Частота персистенции H. pylori в ротовой жидкости снижена при наличии лактобацилл и увеличивается с возрастом.
Список литературы
1. Graham D.Y. // Gastroenterology. 1997. Vol. 113. P. 113-117.
2. Абдулхаков Р.А. Распространенность Helicobacter pylori. // Казанский медицинский журнал. 2002. № 5. С. 365-367.
3. Муравьева Н.Г. Этнические аспекты инфекции Helicobacter pylori у взрослого и детского населения // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. 2014. № 3. С. 122-127.
4. Dowsett S.A. , Kowollk M.J. Oral Helicobacter pylori: Can we stomach it? // Crit. Rev. Oral Biol. Med. 2003. № 14. Р. 226-233.
5. Desai H.G., Gill I.H., Shankaran K. et al. Dental plaque: a permanent reservoir of Helicobacter pylori? // Scand. J. Gastroenterol. 1998. 26 p.
6. Song O., Lange I., Spahr A. et.al. Characteristic distribution pattern of Helicobacter pylori in dental plague and saliva detected with nested PCR // J. Med. Microbial. Vol. 49. 2000. Р. 349-353.
7. Marshall B.J. History of the discovery of Campylobacter pylori. In: Blaser M.J. ed. Campylobacter pylori in gastritis and peptic ulcer disease. New York: Igaku Shoin Publishers, 1989. Р. 7-24.
8. Чернуцкая С.П., Гервазиева В.Б., Сухарева Г.В. Роль Helicobacter pylori в развитии аллергических заболеваний // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2008. № 4. С. 17-20.
9. Белова О.Л., Богословская С.И., Белова И.М. Критическая проблема клинической патогенности Helicobacter pylori в гастроэнтерологии (обзор) // Саратовский научно-медицинский журнал. 2014. 10(1). С. 96-102.
10. Navmar F., Roosendaal R., Kuiper E.J., et al. Present of Helicobacter pylori in the oral cavity, oesophagus, stomach and faeces of patients with gastritis. Eur J Clin Microbiol Inf Dis. 1995. 14 (3). Р. 234-237.
11. Oshowo A., Gillam D., Botha A., et al. Helicobacter pylori: the mouth, stomach, and gut axis // Ann Periodontal. 1998. №3 (1). Р. 276-280.
12. Eslik G.D. Helicobacter pylori infection transmited sexually via oral-genital contact: a hypothetical model. Sex Transmit Inf. 2000. 76 (6). Р. 489-492.
13. Correa P. Human gastric carcinogenesis: a multistep and multifactorial process -first American Cancer Society Award lecture on cancer epidemiology and prevention. Cancer Res. 1992. 52:6735. Р. 40.
14. Клименко А.А., Трофимова E.B. Helicobacter pylori: история открытия // Клиницист. 2006. № 3. С. 68-70.
Таблица
Сравнительная оценка количественного состава лактобацилл и грибов рода Candida
в зависимости от H. pylori статуса
Микроорганизмы Группы обследуемых р
1 группа «а» n=27 1 группа «б» n=10 2 группа n=43
H. pylori 102(102-102) * - 0,0001
Lactobacillus spp. 102(102-103) * 5.5*103(102-104) 103(102-104) 0,05
Candida spp. 103(102-104) 102(0-104) 102(102-103)
Примечание: * - различия статистически значимы (р<0,05).
15. Forman D., Newell D.G., Fullerton F.et al. Association between infection with Helicobacter pylori and risk of gastric cancer: evidence from a prospective investigation. Br. Med. J. 1991. 302:1302. 5 р.
16. Исаева Г.Ш., Бурханов Р.Р., Ефимова Н.Г., Селькова Е.П. Мониторинг Helicobacter pylori инфекции в Казани // Медицинские науки. Фундаментальные исследования. 2012. № 12. С. 270-273.
17. Reshetnikov O.V., Kurilovich S.A., Krotov S.A., Krotova V.A. // Journal of microbiology, epidemiology, immunobiology. 2008. № 1. Р. 99-100.
Сведения об авторах
Шушпанова Оксана Васильевна - ассистент кафедры стоматологии Кировской ГМА. Е-mail: shox. [email protected].
Никольский Вячеслав Юрьевич - д.м.н., профессор, главный врач ГБУЗ «Стоматологическая поликлиника № 1», г. Севастополь. Е-mail: nikolsky. [email protected].
Колеватых Екатерина Петровна - к.м.н., доцент, зав. кафедрой микробиологии и вирусологии Кировской ГМА. E-mail: [email protected]; hibica@ rambler.ru.