ОЦЕНКА БИОСОВМЕСТИМОСТИ МАТЕРИАЛА НА ОСНОВЕ ДЕРМЫ ДЛЯ ГЕРНИОПЛАСТИКИ Текст научной статьи по специальности «Биотехнологии в медицине»

150

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

ОЦЕНКА БИОСОВМЕСТИМОСТИ

МАТЕРИАЛА НА ОСНОВЕ ДЕРМЫ

ДЛЯ ГЕРНИОПЛАСТИКИ

К.И. Мелконян1, Т.В. Русинова1, Е.А. Солоп1 2,

С.Б. Базлов1, И.И. Карташевский1

1 ФГБОУ ВО Кубанский государственный медицинский университет Минздрава России, Краснодар, Россия

2 ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет, Краснодар, Россия

e-mail: cnil.ksma@Yandex.ru

Ключевые слова: герниопластика, ацеллюлярный дермаль-

ный матрикс, иммуногистохимия.

Герниопластика, на сегодняшний день, является одной из самых частых хирургических операций в мировой практике. Однако использование натяжной пластики приводит к негативным последствиям таким как рецидивы, свищи и хронические боли, в связи с этим актуален поиск оптимальных поддерживающих материалов [1, 2]. На данный момент существуют различные хирургические материалы как синтетического, так и природного происхождения, основными требованиями к которым являются неиммуногенность, отсутствие токсичности и прочность. Целью данного исследования была оценка биосовместимости ацеллюлярного дер-мального матрикса (АДМ) на основе дермы свиньи, применяемого в качестве поддерживающего материала для проведения герниопластики.

Исследование выполнялось в лаборатории фундаментальных исследований в области регенеративной медицины ЦНИЛ ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России. Основой для создания материала была нативная дерма поросёнка породы Ландрас возрастом 4 месяца, которая подвергалась детергентно-энзиматической обработке. Экспериментальная герниопластика проводилась на свинье-грыженосителе породы Ландрас, размер грыжевых ворот составлял 8x3 см.

При определении иммуногенности полученного материала проводился количественный анализ ДНК, его содержание составило не более 50 нг /мкг ткани, что соответствует критерию качества децеллюляризации [3]. На 60-й день, после первичной герниопластики с применением АДМ, отсутствовала воспалительная реакция в тканях, вокруг имплантированного АДМ не образовалась соединительнотканная капсула. Биопсийный материал, взятый из области послеоперационного шва, исследовался при помощи иммуногистохиических маркеров CD3, CD31, CD68 и было установлено присутствие большого количества коллагена I типа, фибробластов и эндотелиоцитов, характерных для плотной соединительной ткани.

В результате проведенного эксперимента было отмечено, что разработанный нами АДМ может применятся в качестве поддерживающего материала для герниопластики.

Исследование выполнено при поддержке гранта Российского научного фонда № 22-25-00199.

Литература:

1. Gavriilidis P., Davies R.J., Wheeler J. et al. Hernia. 2019. V. 23.

№ . 6. P. 1093.

2. Buenafe A.A., Lee-Ong A. Ann Laparosc Endosc Surg. 2019. V.

4. С. 24.

3. Bühler N.E., Schulze-Osthoff K., Königsrainer A. et al. J Biosci

Bioeng. 2015. V. 119. № 5. P. 609.

ОЦЕНКА ЦИТОТОКСИЧНОСТИ РЕПАРАТИВНОГО

ГИДРОГЕЛЯ НА ОСНОВЕ ДЕРМЫ СВИНЬИ

К.И. Мелконян1, Т.В. Русинова1, И.В. Супрун1, 2,

А.С. Асякина1, Я.А. Козмай1, А.А. Козлова1

1 ФГБОУ ВО Кубанский государственный медицинский университет Минздрава России, Краснодар, Россия

2 ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет, Краснодар, Россия

e-mail: cnil.ksma@yandex.ru

Ключевые слова: цитотоксичность, гидрогель, коллаген,

дерма свиньи, дермальные фибробласты.

На данный момент коллагеновые гидрогели представляют собой перспективные биоматериалы, которые могут быть прим. мы в различных направлениях биомедицины, клеточных технологиях и тканевой инженерии [1]. Основной проблемой, связанной с использованием разработанных биоматериалов in vivo, является их потенциальная токсичность для живого организма [2]. Если в процессе гелеобразования используется химическая обработка исходного материала, то необходимо учитывать цитотоксичность полученного образца в отношение животных клеток [3]. Целью нашего исследования являлась оценка цитотоксичности разработанного нами репаративного гидрогеля на основе дермы свиньи.

Исследование выполнялось в лаборатории фундаментальных исследований в области регенеративной медицины ЦНИЛ ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России. Для оценки цитотоксических свойств был произведен анализ жизнеспособности клеточной линии дермальных фибробластов DF-1, совместно с коллагеновым гидрогелем в разных соотношениях, с последующей оценкой пролиферации и жизнеспособности методом Live/Dead через 24 и 72 часа инкубации согласно инструкции производителя. В качестве контроля использовалась лунка с полной питательной средой без добавления гидрогеля.

Анализ результатов оценки жизнеспособности продемонстрировал отсутствие токсических эффектов гидрогеля на культуру дермальных фибробластов. На первые сутки инкубации наибольшая жизнеспособность клеток отмечалась в контрольных лунках, однако через 72 часа культивирования количество жизнеспособных клеток увеличилось в присутствии гидрогеля для всех исследуемых соотношений, что свидетельствовало о хорошей пролиферационной способности клеток в отношении исследуемого биоматериала. Во всех исследуемых концентрациях гидрогеля не наблюдалось снижения процента жизнеспособности клеточной культуры ниже 72%. При этом материалы считаются биосовместимыми при проценте жизнеспособности более 70% в соответствии с критериями стандарта IS010993-5 [4].

Таким образом, полученные результаты показали, что клетки в биодермальном гидрогеле оставались жизнеспособными, исследуемый материал не был цитотоксичен и может быть использован для дальнейших исследований.

Литература:

1. Sharifzadeh G., Hosseinkhani H. Adv Healthc Mater. 2017. V. 6.

№ 24. С. 1700801.

2. Yang X., Bakaic E., Hoare T. et al. Biomacromolecules. 2013.

V. 14. № 12. Р. 4447.

3. Mironi-Harpaz I., Wang D.Y., Venkatraman S. et al. Acta bioma-

terialia. 2012. V. 8. № 5. Р. 1838.

4. Sunthornpan N., Watanabe S., Moolsradoo N. J Phys. 2018.

V. 1144. № 1. Р. 012013.

Гены & Клетки XVII, №3, 2022