CC BY
18УДК:619/087:615:599.323.4 DOI 10.33632/1998-698Х.2021-2-39-44
ОСТРАЯ ТОКСИЧНОСТЬ И КУМУЛЯТИВНЫЕ СВОЙСТВА ЦЕАПИТОКСА
К.В. Перфилова
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», 420075, г. Казань, Научный городок-2, e-mail: vnivi@mail ru
Микотоксикозы - извечная проблема человечества. Микотоксины вызывают заболевания, как у животных, птиц, так и человека, что связано с нарушением технологий переработки, заготовки, транспортировки и хранения кормов. На сегодняшний день наиболее распространенным на территории Российской Федерации является Т-2 токсин. Данный токсин вызывает иммунодепрессию, гематологические расстройства, поражение центральной нервной системы, а также имеет свойство трансмиссии в органы и ткани животных, птиц, и через продукцию животноводства. Существует вероятность возникновения опасности и для человека. Самой актуальной задачей на сегодняшний день остается поиск средств профилактики микотоксикозов. В связи с этим проведена оценка острой токсичности и кумулятивных свойств комплексного препарата Цеапитокс. Объектом исследования выступили белые нелинейные крысы, по принципу аналогов разделенные на контрольные и опытные группы. Исследование провели на базе ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности». В результате оценки острой токсичности Цеапитокса, установили 100 % выживаемость опытных и контрольной групп. Следовательно, появляется возможность утверждать, что ни одна из исследуемых доз Цеапитокса не вызывает гибель крыс. Таким образом, Цеапитокс не обладает токсическими свойствами, что дает основание отнести его с малоопасными веществами 4 класса ГОСТ 12.1.007-76.
Ключевые слова: микотоксины, Т-2 токсин, профилактика микотоксикозов, токсикологическая оценка, Цеапитокс, крысы.
Введение. В настоящее время человечество часто сталкивается с глобальной проблемой влияния опасных агентов на окружающую среду и на все живые организмы, включая самого человека. Особенно опасным является комбинированное воздействие загрязнителей биосферы многообразного происхождения, которое зачастую приводит к развитию и возникновению патологических процессов, возможно, даже ранее не изученных. Знание механизмов действия поллютантов важно для предвидения влияния опасных соединений на уровне биологического организма и усовершенствования терапии, а также профилактики незаразных болезней животных [8]. Одним из таких агентов являются микотоксины.
Микотоксины как вторичные токсичные метаболиты, продуцируются нитчатыми грибами. Они могут вызывать у сельскохозяйственных животных, которых кормили плесневелыми кормами, различные патоло-ЖУРНАЛ ДЛЯ ПРОФЕССИ
гические процессы, иногда приводящие к летальному исходу. Микотоксины также обладают способностью к трансмиссии в органы и ткани животных и птиц, и, как следствие, в продукцию животноводства (мясо, молоко, яйца), а также к снижению продуктивности и естественной сопротивляемости организма животных к различным факторам среды. Согласно недавним исследованиям 30-100 % пищевых продуктов и кормов во всем мире загрязнены микоток-синами, поэтому комбинированное загрязнение кормов микотоксинами представляется весьма вероятным [13].
Согласно результатам 10 летнего мико-токсикологического мониторинга полнорационных комбикормов Кононенко Г.П. (2020) часто встречающимся микотоксином (88,3 %) является наиболее токсичный яд, выделяемый трихотеценовыми грибами - Т-2 токсин [6]. Он продуцируется F. sporotrichioides, F. paoe и иными видами Fusarium. Существуют данные )В ОТ ПРОФЕССИОНАЛОВ
о патологическом влиянии Т-2 токсина на иммунную систему, гематологические показатели, репродуктивные функции и многие другие аспекты жизнедеятельности организма животных и человека [3, 9, 12].
Крайне важными и глобальными задачами современных животноводческих хозяйств являются адаптация иммунитета к влияющим на него факторам, повышение иммунного ответа животных и обеспечение химической и биологической безопасности сельскохозяйственных животных и птиц, а, следовательно, и человека [2]. Профилактика микотоксикозов требует определенного подхода. Одним из таких подходов является включение в корма животных сорбентов и адаптогенов. Отдельно сорбент создает комплекс с микотоксином, который не всасывается в кишечном тракте и выводится с калом из организма, что предотвращает его воздействие на организм животных и птиц [14]. Особенно эффективным при микоток-сикозах является цеолит - алюмосиликатный микропористый сорбент [10]. Адаптогены же обладают уникальными свойствами - безвредны, имеют широкий спектр стимулирующего действия на организм животных [5]. Пчелиный подмор (продукт пчеловодства) - это один из адаптогенов, который не имеет аналогов по набору биологически активных веществ среди других апипродуктов.
Целью данного исследования является оценка свойств острой токсичности и кумуляции комплексного препарата Цеапитокс.
Материалы и методы. Работа выполнена на базе лаборатории микотоксинов отделения токсикологии ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» (г. Казань). Исследования по определению острой токсичности и кумулятивных свойств Цеапитокса проведены согласно классическим методическим рекомендациям [4, 7, 11].
Определение перорального общетоксического действия Цеапитокса при однократном введении (острой токсичности) провели на белых нелинейных крысах живой массой 190210 г. До введения в опыт животных содержали на карантине в течение 14 суток в условиях вивария. Для постановки эксперимента из 30 крыс было сформировано по принципу аналогов с учетом породы, возраста, пола и массы тела пять групп: четыре опытные и одна группа биологического контроля.
ЖУРНАЛ ДЛЯ ПРОФЕССШ
Животным опытных групп вводили Цеапитокс в специально рассчитанных и подобранных дозировках: 3000, 4000, 5000, 6000 мг/кг живой массы животных, последняя доза - максимально вводимая. Композицию вводили однократно, интрагастрально в виде суспензии в объеме 5 мл с помощью атравма-тического зонда после выдержки на 12-и часовой диете со свободным доступом к воде. Следующее кормление производили спустя 6 ч после введения испытываемого препарата. Животным из группы биологического контроля вводили дистиллированную воду. На протяжении 14 суток после введения препарата за животными вели наблюдение, в ходе которого регистрировали общее состояние животных, изменения в поведенческих реакциях, двигательную активность, потребление корма и воды, состояние шерстного покрова и слизистых оболочек, массу тела.
Эксперимент по изучению кумулятивных свойств (накопление или эффект от повторного воздействия) проводили методом хронической токсичности. В эксперименте задействовано 20 белых нелинейных крыс обоего пола, которым внутрижелудочно в течение 24 суток вводили Цеапитокс. Начальная доза составила 1/10 от максимально вводимой, которую в последующие каждые 4 суток увеличивали в 1,5 раза. Контрольная группа внутрижелудочно получала дистил-лированную воду.
Результаты исследований. При определении острой токсичности в течение 20-30 мин после введения Цеапитокса отмечалось тревожное состояние опытных крыс, шерстный покров взъерошенный, крысы забивались в угол клетки. В последующие три часа отмечалось постепенное улучшение общей клинической картины. При осуществлении кормления отмечено, что крысы потребляют корм и воду умеренно, в пределах нормы. Отказа от корма или воды не наблюдалось. Далее в течение 21 часа отмечалось полное восстановление общего состояния животных.
После введения Цеапитокса в вышеуказанных дозировках по истечении 7 суток эксперимента, отмечалось незначительное угнетение общего состояния крыс опытных групп. Пищевое поведение не угнетено. Наблюдение осуществлялось на протяжении 14 суток, в ходе которых отклонения не регистрировались. Также в конце эксперимента отмечена 100 % выживаемость особей всех опытных групп. Следовательно, ни одна )В ОТ ПРОФЕССИОНАЛОВ
из исследуемых доз Цеапитокса не вызывает гибель крыс.
По завершении исследований, крыс выводили из эксперимента в соответствии с «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием лабораторных животных». Впоследствии проводилось паталогоанато-мическое вскрытие для описания картины воздействия препарата на внутренние органы животных. В рамках вскрытия крыс установлено, что органы и ткани не имеют видимых паталогоанатомических изменений практически во всех группах.
Таким образом, однократное перо-ральное введение суспензии Цеапитокса крысам в диапазоне доз от 3000 до 6000 мг/кг живой массы не оказало отрицательного влияния на клинические и патологоанатомические пока-
затели животных. Поведенческие реакции крыс изменялись в сторону угнетения, однако данные модификации имели обратимый характер. Вследствие проведенного эксперимента не зарегистрировано ни одного случая гибели крыс. Расчет дозы Цеапитокса ЛД50 не произведен, поскольку вследствие проведенного эксперимента не выявлено ни одного случая гибели крыс, что дает основание соотнести его с малоопасными веществами 4 класса ГОСТ 12.1.007-76 [1].
Так как при определении острой токсичности гибель животных не зарегистрирована, предположительной ЛД50 препарата выбрали 6000 мг/кг. Соответственно при определении кумулятивных свойств Цеапитокса начальной дозой является 1/10 от ЛД50 - 600 мг/кг, которая увеличивалась в 1,5 раза каждые 4 суток в течение всего опыта (таблица 1).
Таблица 1 - Оценка кумулятивных свойств Цеапитокса
Дни введения Цеапитокса Суточная доза Цеапитокса, мг/кг
1-4 600
5-8 900
9-12 1350
13-16 2025
17-20 3037,5
21-24 4556,25
После завершения эксперимента, для та, производили вычисление коэффициента
количественной оценки кумулятивного эффек- кумуляции по следующей формуле:
ЛД50 суммарная
Ккум= ЛД^ , (1)
однократная
где ЛД50 суммарная - сумма доз за все дни проведения эксперимента, г;
ЛД50 однократная - средняя доза вещества, при которой погибает половина исследуемых особей, г.
49,875
К
кум=
= 8,31
(2)
6
При проведении эксперимента в течение 24 суток никаких изменений общего состояния крыс не установлено. Отмечалась сохранность
пищевой возбудимости. По данным паталогоанатомического вскрытия какие-либо изменения в органах и тканях крыс не выявлены.
ЖУРНАЛ ДЛЯ ПРОФЕССИОНАЛОВ ОТ ПРОФЕССИОНАЛОВ
Анализируя полный период проведенного исследования, можно заключить, что у препарата Цеапитокс отсутствуют кумулятивные свойства.
Заключение. В соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 Цеапитокс относится к 4 классу
опасности - малоопасные вещества. Также у препарата отсутствуют кумулятивные свойства. Таким образом, полученные данные свидетельствуют об отсутствии у Цеапитокса токсического действия на организм крыс.
Литература
1. ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. - М.: Стандартинформ, 2007. - 7 с.
2. Бутко, М.П. Ветеринарно-санитарные мероприятия - основа ветеринарного благополучия животноводства и обеспечения безопасности продукции животного происхождения / М.П. Бутко // Российский журнал «Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии». - 2016. - №3 (19). -С. 6.
3. Герунова, Л.К. Профилактика микотоксикозов в животноводстве / Л.К. Герунова,
B.И. Герунов, Д.В. Корнейчук // Вестник Омского Государственного аграрного университета. - 2018.
- № 3 (31). - С. 36.
4. Директива 2010/63 / ЕС Европейского парламента и Совета от 22 сентября 2010 г. о защите животных, используемых в научных целях (текст, имеющий отношение к ЕЭЗ).- Текст: электронный.
- URL: https://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/ LexUriServ.do?uri=OJ:L:2010:276:0033:0079:en:PDF (дата обращения 29.03.2021).
5. Кадиков, И.Р. Применение адаптогенов в сочетании с бентонитом при совместном отравлении микотоксином Т-2 и диоксином / И.Р. Кадиков, К.Х. Папуниди, М.Я. Тремасов, A.A. Корчемкин // Материалы VI Всероссийского конгресса по медицинской микологии. - М., 2014. -
C. 328.
6. Кононенко, Г.П. Микотоксикологический мониторинг. Сообщение № 1. Полнорационные комбикорма для свиней и птицы (2009-2018 гг.) / Г.П. Кононенко, A.A. Буркин, Е.В. Зотова // Ветеринария сегодня. - 2020. - №1 (32). - С. 60-65.
7. Миронов, A.H. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / под ред. A.H.Mироновa. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с. - ISBN 978-5-812517667-0.
8. Сальникова, М.М. Электронная микроскопия клеток печени крыс при влиянии гамма-лучей и 2,3,7,8-TCDD / М.М. Сальникова, К.В. Перфилова, В.Р. Саитов [и др.] // Вестник Aлтaйского государственного аграрного университета. - 2020. - №10. - С. 99.
9. Семенов Э.И. Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечения микотоксикозов животных / Э.И. Семенов [и др.]. - М: ФГБИУ «Росинформагротех», 2017. - 68 с.
10. Тарасова Е.Ю. Поиск эффективных адсорбентов Т-2 токсина / Е.Ю. Тарасова, Э.И. Семенов, A^. Валиев, Л.Е. Матросова // Вестник Марийского государственного университета. Серия: Сельскохозяйственные науки. Экономические науки. - 2019. - Т. 5. - № 3 (19). - С. 322.
11. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриев. - М.: Медицина. - 2005. - 832 с. - ISBN 5-225-04219-8.
12. Штыров, ИЛ. Минимизация матричного эффекта при индикации Т-2 токсина методом in-elisa в растительных пробах / ИЛ. Штыров [и др.] // Ветеринарный врач. - 2021. - №1 - С. 56.
13. Palumbo, R. Occurrence and co-occurrence of mycotoxins in cereal-based feed and food Microorganisms / R. Palumbo, A. Crisci, A. Venancio, J. Cortiñas Abrahantes, J.-L. Dorne, P. Battilani, P. Toscano.: 2020. - P. 74
14. Vila-Donat, P. A review of the mycotoxin adsorbing agents, with an emphasis on their multi-binding capacity, for animal feed decontamination / P. Vila-Donat S. Marín, V. Sanchis, A.J. Ramos // Food Chem. Toxicol. 114. - 2018. - P. 246.
ЖУРШ.Л ДЛЯ ПРОФЕССИОШЛОВ ОТ ПРОФЕССИОШЛОВ
TOXICOLOGICAL EVALUATION OF ACUTE TOXICITY AND CUMULATIVE PROPERTIES OF ZEAPITOX
K.V. Perfilova
FSBSI «Federal Center for Toxicological, radiation and biological safety», 420075, Kazan, Nauchny gorodok-2, e-mail: vnivi@mail.ru
Mycotoxicosis is an eternal problem of mankind. Mycotoxins cause diseases of animals and birds, as well as humans, which is associated with the violation of technologies for processing, procurement, transportation and storage of feed. Today, the most common in the Russian Federation is T-2 toxin. This toxin causes immunosuppression, hematological disorders, damage to the central nervous system, and also has the property of transmission to organs and tissues of animals, birds, and through livestock products, and is dangerous for humans. The most relevant objective today is the search for means for the prevention of mycotoxicosis. In this regard, a toxicological assessment of acute toxicity and cumulative properties of the complex preparation Zeapitox was carried out. The objects of the study were white nonlinear rats that were divided into control and experimental groups according to the principle of analogs. The study was carried out at the location of Federal State Budgetary Scientific Institution "Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety". As a result of the assessment of the acute toxicity of Zeapitox, a 100% survival rate of the experimental and control groups was established, which gives grounds to assert that none of the studied doses of Zeopitox causes the death of rats. Thus, Zeapitox does not possess toxic properties, which gives grounds to classify it with class 4 low-hazard substances of the state standard 12.1. 007-76.
Keywords: mycotoxins, T-2 toxin, prevention of mycotoxicosis, toxicological assessment, Zeapitox,
rats.
Reference
1. GOST 12.1.007-76 Occupational safety standards system (SSBT). Harmful substances. Classification and general safety requirements Interstate standard. Official edition. - M.: Standartinform, 2007. - 7 p.
2. Butko, M.P. Veterinary and sanitary measures are the basis for the veterinary welfare of animal husbandry and ensuring the safety of products of animal origin / Butko M.P. // Russian journal «Problems of Veterinary Sanitation, Hygiene and Ecology» 2016. - №3 (19). - P. 6.
3. Gerunova, L.K. Prevention of mycotoxicosis in animal husbandry / L.K. Gerunova, V.I. Gerunov, D.V. Korneichuk // Bulletin of Omsk State Agrarian University 2018. - №3 (31) - P. 36.
4. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes (Text with EEA relevance) / European Commission: Brussels, Belgium, 2010. URL - https://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/LexUriServ.do?uri= OJ:L:2010:276:0033:0079:en:PDF (date of the application 29.03.2021).
5. Kadikov, I.R. The use of adaptogens in combination with bentonite in case of joint poisoning with mycotoxin T-2 and dioxin / I.R. Kadikov, K.Kh. Papunidi, M. Ya. Tremasov, A.A. Korchemkin // Materials of the VI All-Russian Congress on Medical Mycology. M.: 2014. - P. 328.
6. Kononenko, G.P. Mycotoxicological monitoring. Communication No. 1. Complete feed for pigs and poultry (2009-2018) / G.P. Kononenko, A.A. Burkin, E.V. Zotova // Veterinary today, Vladimir: 2020. -№1 (32). - P. 60.
7. Mironov, A.N. Guidelines for conducting preclinical studies of drugs. Part one. - M.: Grif & K, 2012. - 944 p. - ISBN 978-5-8125-17667-0.
8. Perfilova, K.V. Electron microscopy of rat liver cells under the influence of gamma rays and 2,3,7,8-TCDD / K.V. Perfilova, M.M. Salnikova, V.R. Saitov, F.Z. Baymukhametov, V.V. Ivanov // Bulletin of the Altai State Agrarian University. 2020. - №10. - P. 99.
9. Semenov, E.I. Methodical recommendations for the diagnosis, prevention and treatment of animal mycotoxicosis / E.I. Semenov [and others] / FGBNU "Rosinformagrotech". - Moscow, 2017. - 68 p.
ЖУРНАЛ ДЛЯ ПРОФЕССИОНАЛОВ ОТ ПРОФЕССИОНАЛОВ
10. Tarasova, E.U. Search for effective adsorbents of T-2 toxin / E.Yu. Tarasova, E.U. Semenov, A.R. Valiev, L.E. Matrosova // Bulletin of the Mari State University. Series: Agricultural Sciences. Economic sciences. - 2019. - T. 5. - № 3 (19). -P. 322.
11. Habriev, R.U. Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances / R.U. Khabriev // M.: JSC Publishing House "Medicine", 2005. - 832 p. - ISBN 5-225-04219-8.
12. Shtyrov, I.N. Minimization of the matrix effect in the indication of T-2 toxin by the in-elisa method in plant samples / I.N. Shtyrov [and others] // Veterinarian. Kazan: 2021. - №. 1 - P. 56.
13. Palumbo, R. Occurrence and co-occurrence of mycotoxins in cereal-based feed and food Microorganisms / R. Palumbo, A. Crisci, A. Venancio, J. Cortinas Abrahantes, J.-L. Dorne, P. Battilani, P. Toscano.: 2020. - P. 74
14. Vila-Donat, P. A review of the mycotoxin adsorbing agents, with an emphasis on their multi-binding capacity, for animal feed decontamination / P. Vila-Donat S. Marin, V. Sanchis, A.J. Ramos // Food Chem. Toxicol. 114. - 2018. - P. 246.
УДК 619:582.281.21:636.085:636.2 DOI 10.33632/1998-698Х.2021-2- 44-50
ПЛЕСНЕВЫЕ ГРИБЫ И ПИОГЕННЫЕ БАКТЕРИИ - ПРИЧИНЫ БОЛЕЗНЕЙ
ПАЛЬЦЕВ И КОПЫТЕЦ У КОРОВ
Р.М. Потехина - кандидат биологических наук, Д.А. Хузин - доктор биологических наук, В.Ю. Титова - кандидат биологических наук, Ю.М. Тремасов - кандидат биологических наук,
И.И. Идиятов - кандидат биологических наук
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», 420075, г. Казань, Научный городок-2, e-mail: vnivi@mail ru
В статье представлен микологический анализ почвы, кормов и результаты бактериологических исследований пораженных участков дистального отдела конечностей у коров в ряде сельхозпредприятий Республики Татарстан, Чувашии и Нижегородской области. Микологические исследования проб почвы, кормов из обследованных сельхозпредприятий свидетельствуют о широком распространении токсичных плесневых грибов (Fusarium, Rhizopus, Mucor, Aspergillum, Penicillium и Trichoderma.) с ОЧГ (общее число грибов) 3,5х103 КОЕ/г корма и 5,2х5х103 КОЕ/г почвы. В 3 пробах плесневые грибы имели выраженную токсичность для простейших и лабораторных животных, в 11 пробах - слабую. Обсемененность грибов на кожные покровы дистального отдела конечностей крупного рогатого скота и воздействие сырости, способствуют мацерации - увеличению числа микротравм и возникновению инфекционных болезней пальцев и копытец. Из большого многообразия бактерий, обнаруживаемых в патологическом материале, чаще всего встречаются патогенные штаммы F. necrophorum, Clostridium spp., Staphilococcus spp. и Streptococcus spp. Чистые культуры этих бактерий получены постановкой биопробы и последующей их реизоляцией на элективных питательных средах.
Ключевые слова: микологический анализ, бактериологические исследования, грибы, бактерии.
Введение. В ряде сельхозпредприятий дистального отдела конечностей могут дости-
Российской Федерации с интенсивным веде- гать до 70 % поголовья [8].
нием молочного скотоводства получили широ- Болезнь пальцев и копытец у коров,
кое распространение болезни пальцев и копы- наряду с незаразной этиологией, может иметь
тец у коров. В основном болеют первотелки и бактериальную, грибковую и вирусную этио-
новотельные коровы, среди которых болезни логию [11, 12]. Это значительно повышает
инцидентность заболевания, экономические ЖУРНАЛ ДЛЯ ПРОФЕССИОНАЛОВ ОТ ПРОФЕССИОНАЛОВ
