CC BY
18
КЛ1НИЧНА ТА ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНА МЕДИЦИНА
© Бурега I. Ю.
УДК 612.111.3.063:615.451.16:612.111]-047.37:599.323.4 Бурега I. Ю.
ОСОБЛИВОСТ1 ДИНАМ1КИ ПОКАЗНИК1В Р1ВНЯ ЗАЛ1ЗА КРОВ1 ЩУР1В ПРИ ВВЕДЕНН1 БЕЗБ1ЛКОВОГО ЕКСТРАКТУ СИРОВАТКИ КРОВ1 П1СЛЯ СТИМУЛЯЦЙ" ЕРИТРОПОЕЗУ
Запорiзький державний медичний ушверситет (м. Запорiжжя)
burega.iu@gmail.com
Робота е фрагментом НДР кафедри нормально! фiзюлогN Запорiзького державного медичного уыверситету «До^дження механiзмiв метаболiз-му залiза в умовах стимуляци i пригнiчення ери-тропоезу», (2012-2017, № державно! реестраци 0107и005121).
Вступ. В органiзмi доросло! людини мютиться 4 г залiза. 2,5 г з ^е! кiлькостi знаходяться в гемо-глобiнi, 1 г - у гепатоцитах i макрофагах печшки i селезiнки, iнша частина - в мюглобш^ цитохромах та шших феропроте!нах [1]. З огляду на тривалють життя еритроцитiв, щодня потрiбно 20-25 мг залiза, щоб заповнити !х втрату. В нормальних умовах ор-ганiзм отримуе велику частину залiза шляхом реу-тилiзацi! у результат розпаду залiзовмiсних клiтин, що завершили свiй життевий цикл [6]. На всю систему гомеостазу залiза впливае гепсидин - гормон, що регулюе надходження залiза в оргаызм [5]. За останнi 10 роюв було вiдкрито велику ктькють гор-монiв маючих пряму дю а так само, гормони, не маючих безпосереднього впливу на експреЫю геп-сидина, але впливають на нього через еритропоез, що викликаеться дiею еритропоетину [4]. Одним з таких чинниюв е еритроферон, сполука бкового походження, що була вщнесена до гормонiв, який опосредковано впливае на пригычення гепсиди-на при посиленому еритропоезi [3]. Еритроферон продукуеться еритробластами у вщповщь на вплив еритропоетину, однак необхщна подальша робота по визначенню рецептора(iв) эритроферона, а так само шших ефекторiв контролюючих експресiю гепсидина [2]. У попередых наших дослiдженнях, у щурiв, як отримали сироватку еритропоетин сти-мульованих тварин, вщзначався пiдвищений транспорт i насичення залiзом, що можна пов'язати з появою в сироватц гуморального фактору неви-значено! хiмiчно! структури.
Аналiз опрацьовано! лiтератури вказуе на ви-вчення дi! чинниюв бткового походження, якi опо-середковано впливають на експреЫю гепсидина ^ як наслiдок, на регуляцiю метаболiзму залiза в ор-
raHi3Mi [2]. Роботою плануеться дослiдити вплив небткових сполук безбiлкового екстракту сиро-ватки кровi щурiв за умов стимульованого еритро-поезу, як чинника, що опосередковано впливае на змши показниюв вмiсту залiза в органiзмi.
Мета дослщження. Визначити особливостi динамiки показниюв рiвня залiза кровi щурiв при введены безбткового екстракту сироватки кровi пiсля стимуляцiI еритропоезу.
Об'ект i методи досл1дження. Дослiдження проводилось на 72 бтих лабораторних щурах-сам-цях. Тварини були роздтеы на 4 групи: 1 група - ш-тактн щури (I); 2 група - щури-донори сироватки кровi (Д), яким введено 0,4 мл розчину Epobiocrin з розрахунку 150МО/кг пщшюрно; 3 група - щу-ри-рецитенти сироватки кровi (Р), яким введено 2мл безбткового екстракту сироватки кровi тварин групи Д внутршньом'язово; 4 група - контрольна (К), тваринам яко1 буде введено 0,4 мл ф^ зюлопчного розчину. Приготування безбткового екстракту здмснювали шляхом додаванням 20% трихлороцтово! кислоти до сироватки кровi в про-порцiI 1:1, з послiдуючим центрифугуванням (1500 обертiв, 10 хвилин) та вирiвнюванням PH до 7,4 0,5 молярним розчином бкарбонату натрiю. Щури ви-водились з експерименту на 1-шу, 3-тю, 5-ту добу для груп Д, Р, К. При робот з тваринами керувались «бвропейською конвен^ею про захист тварин, що використовуються в експериментах та шших на-укових цiлях» (Страсбург 18.03.1986р.), «Загаль-них етичних принципiв експериментв на тваринах» ухвалених Першим нацюнальним конгресом з бю-етики (Ки!в 2001р.) У тварин всiх тддослщних груп вивчали наступнi показники: ктькють ретикуло-цитiв (%о) стандартний набiр РетикулоФарб «Фи-лисит» (Укра!на), ктькють еритроцитiв (х1012/л), гемоглобiну (г/л), гематокрит (%) визначали за до-помогою гематологiчного аналiзатору MYTHIC 18 (Франтя), сироваткове залiзо (мкмоль/л) визна-чалось з використанням набору «Залiзо» (Prestige 24i «CORMEY», Польща), загальну залiзозв'язуючу
здатнiсть сироватки KpoBi (мкмоль/л) (ЗЗЗЗ), ненасичену залiзозв'язуючу здатнiсть сироватки KpoBi (мкмоль/л) (НЗЗЗ), вщсоток насичення трансферину (%) визначали за допомогою набору «Залiзoзв'язуюча здатнiсть» (Prestige 24i «CORMEY», Польща) на автоматичному бioхiмiчнo-му аналiзатopi PRESTIGE 24i (Япoнiя) на базi кгмыч-но! дiагнoстичнoI лаборатори ННМЦ «Уыверситет-ська клiнiка» Запopiзькoгo державного медичного унiвеpситету.
Статистичне опрацювання отриманих результа-тiв проводилось з використанням метoдiв ваpiацiй-но! статистики i oцiнкoю вipoгiднoстi вiдмiннoстей за кpитеpieм Стьюдента-Фiшеpа, та використанням програми STATISTICA® for Windows 6.1 (StatSoft Inc., США, № лщензи AXXR712D833214FAN5). Ре-зультати вважали дoстoвipними при p<0,05.
Результати дослiдження та Ух обговорен-ня. В штактнм гpупi тварин дослщжуваы показ-ники складали: ретикулоцити 18,2±07, еритро-цити 7,74±0,4, гемoглoбiн 156,1 ±8,7, гематокрит 43,2±0,8, сироваткове залiзo 32,4±0,9, загальна залiзoзв'язуюча здатнiсть сироватки кpoвi 47,6±1, ненасичена залiзoзв'язуюча здатнiсть сироватки кpoвi 15,2±0,8, насичення трансферину 68,8±2,6.
На 1-шу добу пiсля введення 0,4 мл фiзioлo-гiчнoгo розчину щурам групи К юлькють ретику-лоци^в, еpитpoцитiв, гемoглoбiну, гематокриту, сироваткового залiза, ЗЗЗЗ, НЗЗЗ та насичення трансферину дoстoвipнo не вiдpiзняeться вiд по-казникiв тварин iнтактнoI групи та групи К на 3-тю та 5-ту доби (табл. 1), тому надалi по тексту цi термши вживатимуться як синoнiми. На 1-шу добу
пюля введення тваринам 0,4 мл рекомбшантно-го еритропоетину (рЕПО), кiлькiсть pетикулoцитiв вища (24,2±0,8) в пopiвняннi з iнтактнoю групою (18,2±0,7). Кiлькiсть еpитpoцитiв, гемoглoбiну, гематокрит не вiдpiзняються вiд даних штактно! групи (табл. 1). Кiлькiсть сироваткового залiза досто-вipнo зменшуеться до 22,7±0,8 вiднoснo 32,4±0,9 для групи I. Не мае piзницi показник загально! залiзoзв'язуючo! здатнoстi сироватки кpoвi щуpiв групи Д в пopiвняннi з iнтактнoю групою (табл. 1). Ненасичена залiзoзв'язуюча здатнiсть сироватки кpoвi зростае (23,2±1,3) в пopiвняннi з групою контролю, де вона становить 15,2±0,8. Дoстoвipне зменшення мае показник насичення трансферину (48,3±2,5) вщносно (68,6±2,6) групи I. На 3-тю добу у тварин групи Д юлькють ретикулоци^в зростае до 43,3±0,7 вiднoснo 24,2±0,8 1-о! доби групи Д та 18,2±0,7 для Ытактно! групи. Кiлькiсть еpитpoцитiв, гемoглoбiну та гематокриту не вiдpiзняються вiд показниюв 1-о! доби групи Д та групи I (табл. 1). Ктьюсть загального залiза складае 49,2±0,5 вщносно 1-! доби групи Д (22,7±0,5) та штактно! групи (32,4±0,9). ЗЗЗЗ зростае до 87,3±1,4 в по-piвняннi з попередньою добою групи Д (46,8±1,2) та групою I (47,6±1). Збiльшення мае показник НЗЗЗ (37,6±0,9) по вiднoшенню до 1-о! доби групи Д (23,2± 1,3) та групи I (15,2±0,8). Показник насичення трансферину (55,7±2,2) дoстoвipнo менший вiд показника в груп I (68,6±2,6), але в пopiвняннi з 1-ою добою групи Д (48,3±2,5) збiльшуеться.
На 5-ту добу юлькють ретикулоци^в в груп Д зменшуеться до 31,2±0,8 по вщношенню до 3-о! доби групи Д (43,3±0,7), але значно вище за юль-
Таблиця 1
Показники перифершно'Г кров1 та зал1зотранспортно'Г функцм сироватки кров1 щур1в
(донори) (п=10*, n=6)
х т * га 1-_х Контроль донори Експеримент донори
1 доба 3 доба 5 доба 1 доба 3 доба 5 доба
ретикулоцити (%.) 18,2±0,7 18,3±0,6 18,1 ±0,7 18,7±0,8 24,2±0,8* 43,3±0,7*# 31,2±0,8*#
еритроцити (х1012/л) 7,74±0,4 7,69±0,7 7,25±0,8 7,52±0,6 7,67±0,8 7,83±0,8 8,32±0,9
гемoглoбiн (г/л) 156,1 ±8,7 156,2±8,2 156,3±8,7 154,6±8,3 156,9±7,8 157,2±8,8 157,4±8,3
гематокрит (%) 43,2±0,8 43,7±0,7 42,3±0,5 43,6±0,7 42,7±0,7 42,8±0,8 43,3±0,6
залiзo (мкмоль/л) 32,4±0,9 32,7±0,6 34,2±0,8 32,5±0,7 22,7±0,8* 49,2±0,5*# 41,3±0,6*#
ЗЗЗЗ (мкмоль/л) 47,6± 1 48,2±0,6 47,3±1,2 47,7±0,8 46,8±1,2 87,3±1,4*# 67,4±1,3*#
НЗЗЗ (мкмоль/л) 15,2±0,8 15,3±0,6 15,6±0,8 15,8±0,7 23,2±1,3* 37,6±0,9*# 25,3±0,7*#
насичення трансферину (%) 68,6±2,6 67,6±2,2 66,3±2,3 66,8±2,5 48,3±2,5* 55,7±2,2*# 62,3±2,3*#
Примггка: * - результат достов1рний при пор1внянн1 з штактною групою (р < 0,05); # - результат достов1рний при пор1внянн1 з попередн1м терм1ном спостереження (р < 0,05); * - для ¡нтактноТ групи
кiсть ретикулоцитв в групi I (18,2±0,7). Ктыюсты еритроцитiв, гемоглобiну та гематокриту не вщрiз-няються вiд показникiв 3-о1 доби групи Д та групи I (табл. 1). Сироваткове залiзо мае менше значен-ня по вщношенню до 3-оТ доби групи Д (49,2±0,5) та дещо бтыше значення (41,3±0,6) по вщношен-ню до 32,4±0,9 групи I. ЗЗЗЗ становиты 67,4± 1,3, що менше в порiвняннi з 3-ою добою групи Д (87,3±1,4), але бтыше вщ показника ЗЗЗЗ в груп I (47,6± 1). НЗЗЗ зменшуетыся до 25,3±0,7 в по-рiвняннi з показником 3-о1 доби групи Д, який становиты 37,6±0,9 та мае бтыше значення вщносно показника в груп I (15,2±0,8). Збiлышене значення мае вiдсоток насичення трансферину (62,3±2,3) в порiвняннi з показником на 3-тю добу (55,7±2,2) групи Д, але зменшуетыся в порiвняннi з показником групи I (68,6±2,6).
На 1-шу добу пюля введення безбiлкового екс-тракту сироватки кровi тварин групи Д, у щурiв групи Р значно! рiзницi в показниках кiлыкостi ре-тикулоцитiв, еритроцитiв, гемоглобiну, гематокриту по вщношенню до штактно! групи не виявлено (табл. 2). Вмют сироваткового залiза 48,6±0,9, що вище вiдносно 32,4±0,9 групи I. Показники ЗЗЗЗ (69,7±0,7) та НЗЗЗ (19,5±0,7) збiлышуютыся в по-рiвняннi з штактною групою (47,6±1) i (15,2±0,8) вiдповiдно. Вiдсоток насичення трансферину становиты 73,3±2,5, що вiрогiдно бтыше вщносно показника в груп I (68,6±2,6). На 3-тю добу ктыюсты ретикулоцитiв, еритроцитiв, гемоглобiну, гематокриту вiрогiдно не вiдрiзняетыся по вщношенню до ЫтактноТ групи та 1-оТ доби групи Р (табл. 2). Кiлыкiсты загалыного залiза пiдвищуетыся до 83,2±0,7, що вдвiчi бiлыше вiдносно 1-оТ доби групи
Р (48,6±0,9) та iнтактноI групи (32,4±0,9). ЗЗЗЗ становиты 118,3± 1,4, що майже вдвiчi бiлыше в по-рiвняннi з попередныою добою групи Р (69,7±0,7) та втричi вiдносно групи I (47,6±1).
Зростае показник НЗЗЗ i становиты 35,1 ±1,4 по вщношенню до 19,5±0,7 1-оТ доби групи Р та до 15,2±0,8 групи I. Показник насичення трансферину 73,7±2,4 не вiдрiзняетыся вщ показника 1-оТ доби групи Д (73,3±2,5), проте бiлыший вiд показника в груш I (68,6±2,6). На 5-ту добу кiлыкiсты ретикуло-цитв, еритроцитiв, гемоглобiну та гематокриту не вiдрiзняютыся вiд показникiв 3-оТ доби групи Р та групи I (табл. 2). Зменшуетыся ктыюсты сироваткового залiза до 56,3±0,6 по вщношенню до 3-оТ доби групи Р, але мае бтыше значення по вщношенню до групи I (32,4±0,9). До 79,1±0,6 зменшуетыся показник ЗЗЗЗ, вщносно 3-оТ доби групи Р, але бтыше за показник ЗЗЗЗ в груш I, в яюй вш становиты 47,6±1. До 23,3 ±0,8 зменшуетыся вмют НЗЗЗ вщ показника 3-оТ доби групи Р (35,1±1,4) та пщвищуетыся вщносно показника в груш I (15,2±0,8). Вщсоток насичення трансферину не вiдрiзняетыся вщ показника групи I та показника групи Р на 3-тю добу.
Таким чином, у тварин, яким вводилася сиро-ватка кров^ що не мютила еритропоетину, (перюд нашввиведення ЕПО складае 1,5-2 години [8]) та не мютила бтково! фракцм, кiлыкiсты ретикулоци-тiв протягом 5-ти дiб не вiдрiзняласы вiд показника групи контролю. Ктыюсты еритроци^в, гемоглобшу та гематокрит в групi Р протягом 5-ти дiб не зм^ нювалисы, вiдносно показникiв групи I, проте вмют сироваткового залiза достовiрно збiлышувався вже на 1-шу добу, сягав максимуму на 3-тю, та на 5-ту добу зменшувався до показниюв фiзiологiчноI
Таблиця 2.
Показники перифершно'Г кровi та залiзотранспортноT функцм сироватки кровi у щурiв групи Р пюля введення сироватки кровi тварин групи Д (п=10*, п=6)
х 1* а т _х Контроль рецип1енти Експеримент рецип1енти тху 20%
1 доба 3 доба 5 доба 1 доба 3 доба 5 доба
ретикулоцити (%.) 18,2±0,7 17,9±0,6 18,4±0,8 18,2±0,6 18,4±0,7 17,6±0,8 18,3±0,7
еритроцити (х1012/л) 7,74±0,4 7,56±0,6 7,43±0,7 7,48±0,8 7,61 ±0,6 7,58±0,7 7,52±0,8
гемоглобш (г/л) 156,1 ±8,7 156,7±8,4 155,8±8,3 156,4±8,6 156,3±8,2 156,6±8,4 156,8±8,3
гематокрит (%) 43,2±0,8 43,8±0,6 43,3±0,7 42,4±0,9 43,5±0,6 43,7±0,8 43,4±0,8
залiзо (мкмолы/л) 32,4±0,9 33,1 ±0,7 32,8±0,7 33,6±0,8 48,6±0,9* 83,2±0,7*# 56,3±0,6*#
ЗЗЗЗ (мкмолы/л) 47,6±1 46,9±0,7 47,8±0,6 46,8±0,8 69,7±0,7* 118,3±1,4*# 79,1 ±0,6*#
НЗЗЗ (мкмолы/л) 15,2±0,8 15,1 ±0,6 15,8±0,9 15,6±0,7 19,5±0,7* 35,1 ± 1,4*# 23,3±0,8*#
насичення трансферину (%) 68,6±2,6 66,9±2,4 67,1 ±2,2 67,3±2,3 73,3±2,5* 73,7±2,4* 74,5±2,3*
Примiтка: * - резулытат достов1рний при пор1внянн1 з 1нтактною групою (р < 0,05); # - резулытат достов1рний при пор1внянн1 з попереднлм терм1ном спостереження (р < 0,05); * - для ¡нтактноТ групи
норми. Показники ЗЗЗЗ та НЗЗЗ збтышувалися з 1-Ï до 3-Ï доби, та поступово зменшувалися на 5-ту добу, в порiвняннi з iнтактною групою. Показник насичення трансферину протягом експерименту вiрогiдно зростав вщносно групи I. Ствставлення, отриманих нами в робот^ даних про достовiрне збiлышення насичення залiзом транспортних бт-кiв, при введены штактним тваринам безбiлкового екстракту, з даними лтератури [2,3,7], вказуе на наявнiсты фактору тонкоÏ гуморалыно'| регуляцiÏ, що опосередковано дie на систему гепсидин - рiвены залiза i, як наслiдок, на метаболiзм залiза в орга-нiзмi. Незважаючи на схожу дiю з еритрофероном, який е чинником бiлковоÏ природи [2], даы, отри-манi нами в експерименту вказуюты на небтко-ве походження даного чинника, який мютитыся в безбiлковому екстрактi сироватки кровi отримано'| пiсля стимуляцiÏ еритропоезу, що дозволяе з висо-ким ступенем вiрогiдностi припустити, що цей чин-ник не е еритрофероном.
Висновки.
1. Пюля стимуляци еритропоезу у тварин експе-рименталыноÏ групи вiдмiчаетыся достовiрне збты-
шення ктыкост ретикулоцитiв, сироваткового зал^ за, ЗЗЗЗ, НЗЗЗ та насичення трасферину.
2. Пюля введення штактним тваринам безбт-кового екстракту сироватки кровi щурiв отримано'| пiсля стимуляцiÏ еритропоезу вiдмiчаетыся збты-шення показникiв сироваткового залiза, ЗЗЗЗ, НЗЗЗ та насичення трасферину.
3. Чинник, який мютитыся в безбтковому екс-трактi сироватки кровi щурiв отриманоÏ пiсля стимуляци еритропоезу, опосередковано впливае на рiвены залiза iнтактних тварин не е еритрофероном.
Перспективи подальших дослiджень. Плану-етыся вивчення динамiки змш показникiв рiвня зал^ за кровi пiсля введення iнтактним тваринам безбт-кового екстракту сироватки кровi щурiв отримано'| пiсля моделювання пригнiчення еритропоезу.
Подяка. Автори висловлююты подяку Св^лаы Василiвнi Горбачовiй та колективу кл^чно'| дiагнос-тичноÏ лабораторiÏ ННМЦ «Уыверситетсыка клiнiка» Запорiзыкого державного медичного уыверситету за допомогу в проведеннi цыого експерименту.
^ÎTepaTypa
1. Finch C. Regulators of iron balance in humans. / C. Finch // Blood. - 1994. -№ 84, Vol.6. - P. 1697-1702.
2. Kautz L. Identification of erythroferrone as an erythroid regulator of iron metabolism / L. Kautz, G. Jung, Erika V. Valore, et al. // Nat Genet. - 2014. - № 46, Vol. 7. - P. 678-684. doi:10.1038/ng.2996.
3. Kautz L. Erythroferrone contributes to recovery from anemia of inflammation. / L. Kautz, G. Jung, E. Nemeth, T. Ganz // Blood. -2014. - № 124, Vol.16. - P. 2569-2574. doi: 10.1182/blood-2014-06-584607.
4. Mastrogiannaki M. HIF-2alpha, but not HIF-1alpha, promotes iron absorption in mice. / M. Mastrogiannaki, P. Matak, B. Keith et al. // J Clin Invest. - 2009. - № 119, Vol. 5. - P. 1159-1166. doi: 10.1172/JCI38499.
5. Pigeon C. A new mouse liver-specific gene, encoding a protein homologous to human antimicrobial peptide hepcidin, is overex-pressed during iron overload. / C. Pigeon, G. Ilyin, B. Courselaud, P. Leroyer et al. // J Biol Chem. - 2001. - № 276, Vol. 11. - P. 78117819.
6. Poss KD. Heme oxygenase 1 is required for mammalian iron reutilization. / KD Poss, S. Tonegawa // Proc Natl Acad Sci USA. -1997. - № 94, Vol. 20. - P. 10919-10924.
7. Wei-Na Kong. Effect of erythropoietin on hepcidin, DMT1 with IRE, and hephaestin gene expression in duodenum of rats. / Wei-Na Kong, Yan-Zhong Chang, Shu-Min Wang et al. // J Gastroenterol. - 2008. - № 43. - P. 136-143. doi 10.1007/s00535-007-2138-5.
8. Wieczorek L. Molecular biology of Erythropoietin. / L. Wieczorek, P. Hirth, KB. Schope // Prod. Develop. Pharmac. - 1991. - № 2. -P. 13-16.
УДК 612.111.3.063:615.451.16:612.111]-047.37:599.323.4
ОСОБЛИВОСТ1 ДИНАМ1КИ ПОКАЗНИК1В Р1ВНЯ ЗАЛ1ЗА КРОВ1 ЩУР1В ПРИ ВВЕДЕНН1 БЕЗБ1ЛКОВО-ГО ЕКСТРАКТУ СИРОВАТКИ КРОВ1 П1СЛЯ СТИМУЛЯЦИ ЕРИТРОПОЕЗУ
Бурега I. Ю.
Резюме. Метою роботи було визначити особливост динамки показниюв рiвня залiза кровi щурiв при введены безбткового екстракту сироватки кровi пюля стимуляци еритропоезу. Пюля введення штактним тваринам безбткового екстракту сироватки кровi щурiв, отримано'| пюля стимуляци еритропоезу, в^^чаетыся збтышення показниюв сироваткового залiза, загалыно! залiзозв'язуючоÏ здатност сироватки кров^ ненаси-чено'| залiзозв'язуючоÏ здатност сироватки кровi та насичення трасферину. Це вказуе на наявнюты в безбтковому екстракт сироватки кровi щурiв, отримано'| пюля стимуляци еритропоезу, фактору тонко'| гуморалыно'| регуляци, що опосередковано дiе на систему гепсидин - рiвены залiза i, як наслщок, на метаболiзм залiза в ор-гаызмг Данi, отримаы нами в експериментi, вказуюты на небткове походження даного чинника, що дозволяе з високим ступенем вiрогiдностi припустити, що цей чинник не е еритрофероном.
Ключовi слова: еритропоез, еритропоетин, кров, залiзо, щури.
УДК 612.111.3.063:615.451.16:612.111]-047.37:599.323.4
ОСОБЕННОСТИ ДИНАМИКИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ УРОВНЯ ЖЕЛЕЗА КРОВИ КРЫС ПРИ ВВЕДЕНИИ БЕЗБЕЛКОВОГО ЭКСТРАКТА СЫВОРОТКИ КРОВИ ПОСЛЕ СТИМУЛЯЦИИ ЭРИТРОПОЭЗА
Бурега И. Ю.
Резюме. Целыю работы было определиты особенности динамики показателей уровня железа крови крыс при введении безбелкового экстракта сыворотки крови после стимуляции эритропоэза. После введения
интактным животным безбелкового экстракта сыворотки крови крыс, полученной после стимуляции эритро-поэза, отмечается увеличение показателей сывороточного железа, общей железосвязывающей способности сыворотки крови, ненасыщенной железосвязывающей способности сыворотки крови и насыщения трасфер-рина. Это указывает на наличие в безбелковом экстракте сыворотки крови крыс, полученной после стимуляции эритропоэза, фактора тонкой гуморальной регуляции, который косвенно действует на систему геп-сидин - уровень железа и, как следствие, на метаболизм железа в организме. Данные, полученные нами в эксперименте, указывают на небелковое происхождение данного фактора, что позволяет с высокой степенью вероятности предположить, что этот фактор не является еритроферроном.
Ключевые слова: эритропоэз, эритропоэтин, кровь, железо, крысы.
UDC 612.111.3.063:615.451.16:612.111]-047.37:599.323.4
FEATURE OF DYNAMICS OF INDICATORS OF RATS BLOOD IRON LEVEL AT INJECTION OF BLOOD PROTEIN FREE SERUM EXTRACT AFTER ERYTHROPOIESIS' STIMULATION
Burega I.
Abstract. Over the past ten years was discovered a large number of the hormones which have a direct effect as well as hormones that did not have a direct effect on the hepcidin expression, but affect it through erythropoiesis that is caused by the action of erythropoietin. In our previous studies, in rats, which received the serum of erythropoietin -stimulated animals, determined the increased transport and iron saturation that can connecting with appearance in serum a humoral factor of indeterminate chemical structure. Analysis of processed literature is showing on the studying the action of factors of protein origin that indirectly effect on the hepcidin expression and as a consequence, on the regulation of iron metabolism in organism. In the study is planning to investigate the influence of non-proteinaceous compounds of rats' blood serum protein-free extract in conditions of erythropoiesis' stimulation, as a factor that indirectly effect on the indicators' changes of iron content in organism. The study aimed to determine the dynamics features of indicators of rats' blood iron level due to injection of blood serum protein - free extract after erythropoiesis' stimulation. Studies carried out on 72 laboratory male rats. The animals were divide into 4 groups: the 1st group - intact rats (I); the 2nd - group of the rats - donors of blood serum (D), after injection of 0,4 ml of Epobiocrin solution (the rate of 150IU/kg) subcutaneous; the 3rd group-rats-recipients of blood serum (R), after intraperitoneal administration of 2 ml protein - free extract of animal blood serum from group D; the 4nd group - control (C), after injection of 0,4 ml of physiological solution subcutaneous. Preparation of protein - free extract implemented by addition of 20% trichloroacetic acid aligned to pH 7.4. The rats were remove from the experiment on the 1st, the 2nd and 5th day. In all animals group were study the following indicators: reticulocytes quantity (%o);erythrocytes quantity (x1012/L); hemoglobin (g/L), hematocrit (%), iron serum (цМ /L), total iron binding capacity (цМ /L) (TIBC), unsaturated iron binding capacity (цМ /L) (UIBC), a percent of transferrin saturation (%) were determined in an automatic biochemical analyzer PRESTIGE 24i (Japan) in Clinical Diagnostic Laboratory of Scientifically - Educational Medical Center «University Clinic» Zaporozhye state medical university. In animals, which were administrate of erythropoietin - free and protein - free blood serum (the half-life of Epobiocrin is 1,5 - 2 hours), the reticulocytes quantity during the 5 days does not differ from indicator of control group. Quantity of erythrocytes, hemoglobin and hematocrit in the group R did not change during the 5 days relatively the indicators of group I, however the serum iron capacity significantly increased on the 1st day, peaked on the 3rd day and decreased to indicators of physiological norm on the 5th day. Indicators of TIBC and UIBC increase from the 1st to the 3rd day and gradually decrease on the 5th day, in comparing with intact group. The indicator of transferrin saturation during the experiment was significantly increase relatively group I. Matching the data, that were received in our study with a published result of another studies concerning the significantly increase a saturation of iron of transport proteins at protein - free extract administration of intact rats indicates the presence of thin humoral regulation factor. This factor indirectly of effect on the hepcidin - iron level system and, as a consequence, on the iron metabolism in organism. Despite similar action with erythroferrone - the factor of protein origin our data indicate the non-proteinaceous origin of present factor, which contains in blood serum protein - free extract received after erythropoiesis' stimulation. The present study allows with a high probability to admit that this factor is not the erythroferrone.
Keywords: erythropoiesis, erythropoietin, blood, iron, rats.
Рецензент - проф. Мщенко I. В.
Стаття надшшла 09.10.2015 р.
