CC BY
41
КЛИНИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА
УДК 577.1.083.3+ 577.12.05+ 612.017.1:57.052+616-002.2
ОСОБЕННОСТИ СОДЕРЖАНИЯ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ У ЖЕНЩИН С ХРОНИЧЕСКИМ САЛЬПИНГООФОРИТОМ И БЕСПЛОДИЕМ
, Игорь Олегович МАРИНКИН2, Александр Николаевич ТРУНОВ12, Виталий Михайлович КУЛЕШОВ2, Ольга Олеговна ОБУХОВА1, Ольга Михайловна ГОРБЕНКО1, Аля Петровна ШВАЮК1
1 НИИ экспериментальной и клинической медицины 630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
2 Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава России 630091, г. Новосибирск, Красный просп., 52
Целью настоящего исследования было изучение содержания некоторых цитокинов в сыворотке крови и перито-неальной жидкости женщин с бесплодием на фоне хронического воспалительного заболевания органов малого таза (ХВЗОМТ). Обследовано 50 пациенток с установленным диагнозом бесплодия трубно-перитонеального ге-неза на фоне ХВЗОМТ в стадии клинической ремиссии и 15 женщин аналогичного возраста. У пациенток обследованных групп в сыворотке крови и перитонеальной жидкости проведено определение концентраций ФНО-а, ИЛ-4, ИЛ-6, ИНФ-у, моноцитарного хемотаксического белка-1 (МСР-1) и растворимой молекулы межклеточной адгезии sVCAM-1. Установлено, что в патогенезе бесплодия, возникшего на фоне ХВЗОМТ, значимую роль играет сохранение активности местного воспалительного процесса и активация иммунного реагирования в период клинической ремиссии патологического процесса. Указанное подтверждается повышением в сыворотке крови и перитонеальной жидкости концентраций цитокинов, обладающих провоспалительной активностью (ИЛ-6, МСР-1, sVCAM-1), и индукторов, способных активировать иммунное реагирование по ТЫ- (ИНФ-у) и Т1й-пути (ИЛ-4). Отличием в содержании цитокинов в исследованных биологических жидкостях являются нормативные значения концентраций ФНО-а в сыворотке крови пациенток основной группы. Результаты исследования свидетельствуют о роли хронического воспаления репродуктивной сферы и вызванного им дисбаланса цитокинов в механизмах развития бесплодия трубно-перитонеального генеза.
Ключевые слова: цитокины, хроническое воспаление, бесплодие, иммунное реагирование.
Лилия Алексеевна ТРУНОВА1
Не вызывает сомнения, что широкая распространенность женского бесплодия является одной из самых актуальных и социально значимых проблем в современном акушерстве и гинекологии. В настоящее время, несмотря на значительные успехи в развитии новых медицинских технологий, направленных на совершенствование диагностики и лечения патологии женской репродуктивной сферы, приходится констатировать как отсутствие тенденции к снижению частоты встречаемости женского бесплодия различной
этиологии, так и неудовлетворенность врачей практического здравоохранения результатами лечения [10, 15, 19, 22, 23].
Данные научной литературы, а также анализ результатов собственных исследований позволяют сделать заключение, что, зачастую, в патогенезе женского бесплодия и многих других нарушений процессов гестации лежит высокая распространенность инфекционно-воспалитель-ных заболеваний органов репродуктивной сферы у женщин [7-9, 12, 20, 21].
\Трунова Л.А\ - д.м.н., проф., член-кор. РАН, главный научный сотрудник лаборатории иммунологии Маринкин И.О. - д.м.н., проф., зав. кафедрой акушерства и гинекологии, e-mail. [email protected] Трунов А.Н. - д.м.н., проф., рук. лаборатории иммунологии репродукции, e-mail: [email protected] Кулешов В.М. - д.м.н., проф., проф. кафедры акушерства и гинекологии, e-mail. [email protected] Обухова О.О. - д.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории иммунологии, e-mail: [email protected]
Горбенко О.М. - к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории иммунологии, e-mail: [email protected]
Шваюк А.П. - к.м.н., старший научный сотрудник лаборатории иммунологии, e-mail: [email protected]
В научной литературе имеется достаточно большой массив информации о нарушениях функционального состояния иммунной системы, включая данные об изменении содержания и дисбалансе различных классов цитокинов, являющихся регуляторами межклеточных взаимоотношений, в механизмах развития острых и обострений хронических воспалительных заболеваний органов малого таза (ХВЗОМТ) у женщин. Кроме того, существуют данные о том, что дисбаланс продукции цитокинов и факторов роста различной функциональной направленности влияет на синтез половых гормонов, играющих значимую роль в процессах репродукции. Показано, что длительный дисбаланс цитокинов с нарастанием синтеза провоспалительных интер-лейкинов приводит к нарушениям иммуноэндо-кринной регуляции и возникновению бесплодия [1, 3-6, 11, 14, 15, 18].
В то же время в период зачатия воспалительные заболевания репродуктивной сферы основной части женщин находятся в стадии клинической ремиссии, и они в этот период не предъявляют жалоб и не обращаются за медицинской помощью. Указанное приводит к тому, что данные об активности воспаления в этой стадии, во многом определяющей дальнейшее развитие заболевания и его исходы, представлены единичными работами и требуют углубленного изучения для понимания их роли в механизмах развития бесплодия [6, 7, 20].
Значимым для понимания механизмов развития местного процесса воспаления представляется изучение изменений содержания различных биологически активных молекул не только в системном кровотоке, но и в других биологических жидкостях, имеющих непосредственный контакт с очагом воспаления.
Вышеизложенное определяет актуальность и научно-практическую значимость исследований, посвященных углубленному изучению возможной роли активности воспалительного процесса в механизмах развития бесплодия у женщин репродуктивного возраста.
Цель исследования - изучить особенности содержания некоторых цитокинов в сыворотке крови и перитонеальной жидкости женщин с бесплодием на фоне ХВЗОМТ в стадии клинической ремиссии.
материал и методы
В соответствии с целью исследования на базе ГБУЗ НСО «Центр планирования семьи и репродукции» г. Новосибирска за период с 2013 по 2015 г. было обследовано 65 женщин репро-
дуктивного возраста. Все женщины дали информированное согласие на участие в исследовании, которое соответствовало этическим стандартам, разработанным в соответствии с Хельсинкской декларацией. Кроме того, было получено согласие этического комитета НИИ экспериментальной и клинической медицины на проведение исследования, протокол № 23 от 9 ноября 2012 г.
Основную группу составили 50 пациенток в возрасте 23-36 лет (средний возраст - 28,5 года) с верифицированным диагнозом бесплодия труб-но-перитонеального генеза на фоне хронических воспалительных заболеваний репродуктивной сферы в стадии клинической ремиссии. Длительность бесплодия в группе составила от 4 до 13 лет (в среднем 9,7 года). Критерием включения в исследование являлось наличие диагноза бесплодия трубно-перитонеального генеза и хронического заболевания органов малого таза инфекционно-воспалительного генеза в стадии ремиссии, а также отсутствие субъективных жалоб, повышения температуры тела и нормативные значения показателей периферической крови (содержание лейкоцитов, лейкоцитарная формула, уровень СОЭ). У пациенток основной группы был проведен забор венозной крови и, во время плановой хирургической лапароскопии с целью коррекции причин бесплодия, забор перитонеальной жидкости.
Группу сравнения составили 15 женщин в возрасте 25-37 лет (средний возраст 29,5 года). Критерием включения в контрольную группу было отсутствие у пациенток в анамнезе хронических инфекционно-воспалительных заболеваний органов малого таза, признаков хронических воспалительных заболеваний придатков матки при лапароскопии, а также отсутствие субъективных жалоб, повышения температуры тела и нормативные значения показателей периферической крови (содержание лейкоцитов, лейкоцитарная формула, СОЭ). У пациенток группы сравнения был проведен забор венозной крови и, во время диагностической лапароскопии с целью исключения женского фактора бесплодия, забор перито-неальной жидкости.
Критерием включения для обеих групп являлось отсутствие в течение трех месяцев до обследования острых и обострений хронических воспалительных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии любой локализации, критерием исключения - наличие эндокринных нарушений, способных влиять на синтез половых гормонов и оказывать влияние на функциональное состояние иммунной системы, а также аутоиммунных и злокачественных опухолевых процессов любой локализации.
Определение концентраций тестируемых биологически активных молекул в сыворотке крови и перитонеальной жидкости выполняли с использованием коммерческих тест-систем для иммуноферментного анализа по инструкции производителя, при исследовании содержания моноцитарного хемотаксического белка-1 (MCP-1) применяли тест-системы производства «Вектор-Бест» (Россия), ФНО-а, ИЛ-4, ИЛ-6, ИНФ-у - ООО «Цитокин» (Россия), растворимой молекулы межклеточной адгезии 1 (sVCAM-1) -«Bender MedSystems GmbH» (Австрия). Результаты иммуноферментного анализа регистрировали на вертикальном фотометре «Униплан» при длине волны 450 нм.
Полученные цифровые данные были подвергнуты статистическому анализу и представлены в виде таблицы и графиков. Значимость различий вариационных рядов в несвязанных выборках оценивали с помощью критерия Манна-Уитни, Данные в таблицах представлены в виде M ± m, где M - среднее арифметическое, m - ошибка среднего. Достоверным считали различие между сравниваемыми рядами с уровнем достоверной вероятности 95 % (р < 0,05).
результаты и их обсуждение
В результате проведенных исследований были получены данные, представленные в таблице.
В сыворотке крови пациенток основной группы не выявлено достоверного повышения концентрации провоспалительного цитокина ФНО-а, нарастание содержания которого характерно для острой стадии воспалительного процесса. Указанное подтверждает данные кли-нико-лабораторного обследования пациенток, свидетельствующего об отсутствии у них острого воспалительного процесса. Однако в перитоне-
альной жидкости пациенток основной группы его содержание было достоверно выше (в 1,72 раза), это позволяет сделать заключение о том, что при ремиссии патологического процесса, несмотря на отсутствие клинико-лабораторных признаков воспалительного процесса, определяется активность местного воспалительного процесса. Кроме того, известно, что высокие концентрации ФНО-а наблюдаются при многих осложнениях физиологического течения беременности, что позволяет рассматривать его повышение на местном уровне как неблагоприятный фактор для процессов зачатия и гестации [4, 5, 11, 16].
У пациенток основной группы в сыворотке крови выявлено достоверное - в 2,82 раза - повышение концентрации ИНФ-у относительно данных, полученных в группе сравнения, аналогичное, но более выраженное увеличение содержания этого цитокина было выявлено в их пе-ритонеальной жидкости (в 4,52 раза). Учитывая, что ИНФ-у является одним из важнейших эндогенных модуляторов, необходимых для развития как индуцибельной фазы иммунного реагирования, так и специфических иммунных реакций, полученные результаты свидетельствуют о том, что при ремиссии изучаемого патологического процесса определяется активация индуцибель-ной фазы иммунного реагирования в ответ на антигенную стимуляцию из очага хронического воспаления. Данные научной литературы свидетельствуют об увеличении содержания ИНФ-у при многих осложнениях физиологического течения беременности, что связано с активацией ТЫ-пути иммунного реагирования и развитием воспаления. Это также позволяет рассматривать установленное повышение его концентраций как один из возможных факторов, участвующих в механизмах развития бесплодия у обследованных женщин [4, 5, 16].
Таблица
Содержание изучаемых цитокинов и молекул адгезии в перитонеальной жидкости и сыворотке крови
пациенток обследованных групп (М ± т)
Показатель Перитонеальная жидкость Сыворотка крови
Группа сравнения, n = 15 Основная группа, n = 50 Группа сравнения, n = 15 Основная группа, n = 50
ФНО-а, пг/мл 13,7 ± 1,1 23,6 ± 0,9* 26,8 ± 5,3 34,4 ± 5,9
ИЛ-4, пг/мл 15,7 ± 0,8 23,7 ± 1,6* 38,5 ± 9,1 84,9 ± 12,5*
ИЛ-6, пг/мл 19,3 ± 1,3 68,1 ± 10,9* 28,8 ± 4,3 47,0 ± 4,2*
ИНФ-g, пг/мл 20,8 ± 1,9 94,2 ± 8,1* 32,8 ± 6,8 93,4 ± 9,7*
MCP-1, пг/мл 148,2 ± 3,1 394,6 ± 42,1* 126,7 ± 7,2 190,8 ± 21,1*
sVCAM-1 нг/мл 117,8 ± 5,1 352,8 ± 47,3* 491,3 ± 24,6 992,6 ± 109,3*
Примечание. * - отличие от величины соответствующего показателя группы сравнения статистически значимо при р < 0,05.
При определении ИЛ-6 - провоспалительного цитокина, участвующего в процессах хронизации воспалительных процессов, активации синтеза специфических антител во второй фазе иммунного ответа при инфекционно-воспалительных заболеваниях, развитии аутоиммунного реагирования, установлено достоверное нарастание его концентрации в сыворотке крови (в 1,6 раза) и в перитонеальной жидкости (в 3,5 раза) обследованных пациенток основной группы. Полученные данные свидетельствуют о хроническом течении и активности местного воспалительного процесса, а также об активации гуморального звена иммунной системы в ответ на постоянную антигенную стимуляцию из очага хронического воспаления.
Определение содержания индуктора гуморального звена иммунной системы ИЛ-4, активация которого характерна для инфекций бактериальной этиологии, у обследованных пациенток основной группы выявило его достоверное увеличение в сыворотке крови (в 2,2 раза) и в пери-тонеальной жидкости (в 1,5 раза) относительно значений изучаемого показателя в группе сравнения. Выявленную закономерность можно трактовать как реакцию иммунной системы, направленную на стимуляцию синтеза антител и развитие гуморального иммунного ответа в ответ на перси-стенцию возбудителей патологического процесса из очага хронического воспаления. Кроме того, высокие концентрации ИЛ-4 в сыворотке крови свидетельствуют о роли этого цитокина в развитии фибропластических и спаечных процессов, играющих значимую роль в развитии бесплодия трубно-перитонеального генеза на фоне хронических воспалительных заболеваний, что согласуется с данными, представленными в литературе о значимости ИЛ-4 в этих процессах [13, 17].
Несомненный интерес представляют данные, полученные при определении содержания МСР-1, являющегося мощным хемотаксиче-ским и активирующим белком для клеток ма-крофагально-моноцитарного ряда, способным рекрутировать макрофаги в места развития деструктивно-воспалительного процесса, которые в зависимости от микроокружения становятся способными продуцировать различные стимулы [2]. В результате проведенного исследования показано, что содержание МСР-1 в сыворотке крови (в 1,5 раза) и в перитонеальной жидкости пациенток основной группы было достоверно выше (в 1,5 и 2,6 раза соответственно), чем у женщин группы сравнения. Выявленную закономерность можно расценивать как факт, подтверждающий предположение о наличии активности местного деструктивно-воспалительного процесса у паци-
енток основной группы и его роли в патогенезе повреждения органов репродуктивной системы, приводящего к развитию бесплодия.
Следующим этапом настоящего исследования было определение концентрации растворимой молекулы межклеточной адгезии 1 в исследуемых биологических жидкостях пациенток обследованных групп. Установлено, что при бесплодии на фоне ХВЗОМТ у пациенток основной группы происходит достоверное, более чем 2-кратное, повышение содержания sVCAM-1 в сыворотке крови и почти 3-кратное - в перитонеальной жидкости, относительно величин, полученных в группе сравнения. Полученные данные подтверждают сделанное выше заключение о роли активности местного воспалительного процесса в механизмах развития бесплодия, поскольку нарастание концентраций этой биологически активной молекулы отражает степень выраженности деструктивно-воспалительного процесса и эндотелиальной дисфункции.
заключение
Проведенное исследование показало, что, несмотря на отсутствие клинических проявлений хронического воспаления и нормативные значения общелабораторных показателей, у женщин репродуктивного возраста с бесплодием на фоне ХВЗОМТ в стадии клинической ремиссии наблюдается активность местного деструктивно-воспалительного процесса, а также определяется дисбаланс про-, противовоспалительных и регу-ляторных цитокинов. Указанное подтверждается достоверным повышением в сыворотке крови пациенток основной группы концентраций биологически активных веществ, являющихся маркерами активности воспаления (ИЛ-6, МСР-1, sVCAM-1), и ФНО-а, ИЛ-6, МСР-1, sVCAM-1 в перитонеальной жидкости. Развитие воспалительного процесса у пациенток основной группы сопровождается активацией иммунного реагирования на постоянную антигенную стимуляцию из очага хронического воспаления, о чем свидетельствует достоверное повышение в сыворотке крови и перитонеальной жидкости содержания индукторов гуморального (ИЛ-4) и клеточного иммунитета (ИНФ-у). Кроме того, можно предполагать, что процессы аутореактивности в свою очередь могут быть пусковым механизмом в формировании «порочного круга» развития деструктивно-воспалительного процесса в условиях клинической ремиссии хронического воспаления.
Выявленный дисбаланс цитокинов в исследуемых биологических жидкостях, вероятно, может являться значимым фактором, участвующим в
механизмах развития бесплодия, поскольку наличие очага хронического воспаления в органах репродуктивной системы приводит к развитию пролиферативных и спаечных процессов, препятствующих возникновению беременности, а также создает неблагоприятный для возникновения и развития беременности цитокиновый фон [3, 4, 8, 11, 13, 16-18, 21].
список литературы
1. Каграманова Ж.А., Сускова B.C., Гусева Т.С. и др. Клинико-иммунологическое обоснование иммунотерапии больных с острыми воспалительными заболеваниями придатков матки // Рос. вестн. акушера-гинеколога. 2006. 6. (5). 29-33.
2. Оноприенко Л.В. Молекулярные механизмы регуляции активности макрофагов (обзорная статья) // Биоорган. химия. 2011. 37. (4). 437-451.
3. Радзинский В.Е., Запертова Е.Ю. Прогесте-ронобусловленные изменения провоспалительных цитокинов при привычном невынашивании беременности // Рус. мед. журн. 2004. (13). 25-28.
4. Сотникова Н.Ю., Кудряшова A.B., Крошки-на H.B. и др. Роль ранних нарушений продукции цитокинов в формировании патологии беременности // Рос. иммунол. журн. 2007. 1. (3-4). 258265.
5. Сухих Г.Т. Ванько Л.В. Иммунология беременности. М., 2003. 106 с.
6. Трунов А.Н., Ефремов А.В., Трунов Л.А. Принципы патогенетически обоснованной диагностики при иммуномодулирующей терапии хронических инфекционно-воспалительных заболеваний // Ал-лергол. иммунология. 2002. 3. (1). 117-122.
7. Трунова Л.А., Горбенко О.М., Шваюк А.П. и др. Активность иммуновоспалительного процесса у женщин репродуктивного возраста с хроническими инфекционно-воспалительными заболеваниями придатков матки в стадии клинической ремиссии // Бюл. СО РАМН. 2008. 28. (1). 80-83.
8. Трунова Л.А., Горбенко О.М., Шваюк А.П. и др. Особенности иммунного реагирования у девушек пубертатного возраста с хроническими инфекцион-но-воспалительными заболеваниями органов малого таза в стадии ремиссии // Int. J. Immunorehabil. 2010. 12. (2). 93-96.
9. Устинов Т.А., Артымук Н.В., Власов В.В., Пыжов А.Ю. Бесплодие в Кемеровской области // Мать и дитя в Кузбассе. 2010. (1). 37-39.
10. ФроловМ.В., Халим X. Оценка репродуктивной функции женщин при острых и хронических воспалительных заболеваниях придатков матки //
Вест. Воронежского гос. техн. ун-та. 2006. 2. (7). 21-26.
11. Das C., Kumar V.S., Gupta S., Kumar S. Network of cytokines, integrins and hormones in human trophoblast cells // J. Reprod. Immunol. 2002. 53. (1-2). 257-268.
12. GencM.R., FordC.E. The clinical use of inflammatory markers during pregnancy // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 2010. 22. (2). 116-121.
13. Kanellakis P., Ditiatkovski M., Kostolias G., BobikA. A pro-fibrotic role for interleukin-4 in cardiac pressure overload // Cardiovasc. Res. 2012. 95. (1). 77-85.
14. Lee S.A., Tsai H.T., Ou H.C. et al. Plasma interleukin-1beta, -6, -8 and tumor necrosis factor-alpha as highly informative markers of pelvic inflammatory disease // Clin. Chem. Lab. Med. 2008. 46. (7). 9971003.
15. Milewski R., Milewska A.J., Czerniecki J. et al. Analysis of the demographic profile of patients treated for infertility using assisted reproductive techniques in 2005-2010 // Ginekol. Pol. 2013. 84. (7). 609-614.
16. Ng S.C., Gilman-Sachs A., Thaker P. Expression of intracellular Th1 and Th2 cytokines in women with recurrent spontaneous abortion, implantation failures after IVF/ET or normal pregnancy // Am. J. Reprod. Immunol. 2002. 48. (2). 77-86.
17. Postlethwaite A.E., Holness M.A., Katai H., Raghow R. Human fibroblasts synthesize elevated levels of extracellular matrix proteins in response to interleukin 4 // J. Clin. Invest. 1992. 90. (4). 1479-1485.
18. Romero R., Gotsch F., Pineles B., Kusano-vic J.P. Inflammation in pregnancy: its roles in reproductive physiology, obstetrical complications, and fetal injury // Nutr. Rev. 2007. 65. (12). 194-202.
19. Rouchou B. Consequences of infertility in developing countries // Perspect. Public Health. 2013. 133. (3). 174-179.
20. Smith M., Hagerty K.A., Skipper B., Bocklage T. Chronic endometritis: a combined histopathologic and clinical review of cases from 2002 to 2007 // Int. J. Gynecol. Pathol. 2010. 29. (1). 44-50.
21. Trunov A., Obukhova O., Gorbenko O. et al. Cytokines, estradiol and progesterone in the plasma of women of reproductive age with pelvic inflammatory disease in remission // Adv. Biosci. Biotechnol. 2013. 4. (6). 727-730.
22. Van Oostrum N., De Sutter P., Meys J., Verstraelen H. Risks associated with bacterial vaginosis in infertility patients: a systematic review and meta-analysis // Hum. Reprod. 2013. 28. (7) . 1809-1815.
23. Ziller V., Hadji P., Thielscher C. et al. Prevalence f female subfertility in German gynecological practices // Gynecol. Endocrinol. 2013. 29. (8). 767-770.
BLOOD SERUM AND PERITONEAL FLUID CYTOKINES CONCENTRATIONS IN WOMEN WITH INFERTILITY AND CHRONIC INFLAMMATION OF REPRODUCTIVE SYSTEM
Liliya Alekseevna TRUNOVA1 , Igor Olegovich MARINKIN2,
Aleksandr Nikolaevich TRUNOV12, Vitaliy Mikhailovich KULESHOV2,
Olga Olegovna OBUKHOVA1, Olga Mikhailovna GORBENKO1, Alya Petrovna SHVAYUK1
1 Research Institute of Experimental and Clinical Medicine 630117, Novosibirsk, Timakov str., 2
2 Novosibirsk State Medical University of Minzdrav of Russia 630091, Novosibirsk, Krasny av., 52
The purpose of the study was to investigate blood and peritoneal fluid concentrations of cytokines in women with infertility and chronic infectious inflammation (CII) of reproductive system. 65 patients were included in the study: 50 patients were diagnosed as tubal and peritoneal infertility and CII of reproductive system in remission; 15 patients were almost healthy women of comparable age. The concentrations of TNF-a, IL-4, IL-6, IFNy, MCP-1 and sVCAM-1 were measured in blood serum and peritoneal fluid. Permanent activation of local inflammation and immune reactions activation found in clinical remission of CII have been shown to play an important role in the pathogenesis of infertility associated with CII of reproductive system. It was proven by the increase of the concentrations of inflammatory cytokines (IL-6, MCP-1, and sVCAM-1) and inductors of Th1 and Th2 pathways. The concentration of TNF-a was increased in peritoneal fluid and was within normal range in blood serum in women of the study group. Based on the results of our study we believe that chronic inflammation of reproductive system and associated cytokines imbalance may play a role in tubal and peritoneal infertility pathogenesis.
Key words: cytokines, chronic inflammation, infertility, immune response.
| Trunova L.A.\- doctor of medical sciences, professor, corresponding member of RAS, chief researcher of the laboratory of immunology
Marinkin I.O. - doctor of medical sciences, professor, head of the department of obstetrics and gynecology, e-mail. [email protected]
Trunov A.N. - doctor of medical sciences, professor, head of the laboratory of immunology of reproduction, e-mail: [email protected]
Kuleshov V.M. - doctor of medical sciences, professor of department of obstetrics and gynecology, e-mail. [email protected]
Obukhova O.O. - doctor of medical sciences, leading researcher of the laboratory of immunology, e-mail: [email protected]
Gorbenko O.M. - candidate of medical sciences, senior researcher of the laboratory of immunology, e-mail: [email protected]
Shvayuk A.P. - candidate of medical sciences, senior researcher of the laboratory of immunology, e-mail: [email protected]
