CC BY
32
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
РАЗРАБОТКА ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ОСОБО ОПАСНЫХ МИКОЗОВ
М.А. Гришина, Е.Н. Кочубеева, А.В. Липницкий, Н.В. Вьючнова, Г.А. Ткаченко, С.С. Савченко, В.А. Антонов
ФКУЗ Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, г. Волгоград
Эндемические очаги особо опасных микозов (кокцидиоидомикоза, гистоплазмоза, бластомикоза, паракокцидиоидомикоза) расположены во многих странах мира. Ежегодная инфицированность ими населения составляет в среднем более 500 тысяч человек. Хронические и диссеминированные формы особо опасных микозов приводят к летальному исходу, поэтому необходима ранняя лабораторная диагностика с целью своевременного начала лечения. Хотя на территории России эти заболевания не зарегистрированы, возможно появление больных, прибывших из эндемичных регионов. Вероятность обнаружения завозных случаев существенно увеличивается в связи с предстоящими массовыми мероприятиями (Всемирная Универсиада 2013 г. в Казани, зимние Олимпийские игры 2014 г. в Сочи и др.).
В целях диагностики особо опасных микозов, а также для предупреждения их завоза и распространения на территории РФ на базе ФКУЗ Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора создан Референс-центр по мониторингу за возбудителями глубоких микозов. К числу задач Референс-центра относится разработка и совершенствование диагностических препаратов и методов лабораторной диагностики глубоких микозов. В настоящее время ряд диагностических тест-систем проходят приемочно-технические испытания. Так, в 2012 г. запланированы государственные испытания для иммунологического препарата (иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие кокцидиоидомикозные сухие) и набора реагентов для выявления и дифференциации ДНК возбудителей кокцидиоидомикоза (Coccidioides immitis и C. posadasii) методом полимеразной цепной реакции, предназначенный для обнаружения возбудителей кокцидиоидомикоза в выделенных культурах, биологическом материале и объектах окружающей среды. Успешно завершился этап лабораторных испытаний амплификационной тест-системы для выявления возбудителя гистоплазмоза (Histoplasma capsulatum) и в 2013 г. планируется проведение государственных испытаний препарата. Продолжаются разработки амплификационных тест-систем для идентификации возбудителей особо опасных микозов с гибридизационно-флуоресцентной детекцией результатов.
ПОЛУЧЕНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ СЕКРЕТИРУЕМЫХ БЕЛОКСОДЕРЖАЩИХ СОЕДИНЕНИЙ СТАФИЛОКОККА
И.М. Грубер1, Ф.В. Доненко2, М.В. Киселевский2, О.М. Игнатова1, Е.А. Асташкина1, О.Е. Тарасова1, Л.С. Черкасова1, И.Б. Семенова1, Н.Б. Егорова1, Е.А. Курбатова1
ФГБУ НИИ вакцин и сывороток им.И.И. Мечникова» РАМН, Москва; ФГБУ РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН, Москва
Изучение секретируемых протективных антигенов условно-патогенных микроорганизмов в рамках вакцинологии началось сравнительно недавно
и активно развивается. Цель работы: получение секретируемых белоксодержащих фракций S. aureus и изучение их протективных свойств. Методами ионообменной хроматографии и ультрафильтрации разных по молекулярной массе фракций белоксодержащих соединений, секретируемых в культу-ральную среду в конце фазы экспоненциального роста S. aureus № 6 при периодическом культивировании, получали фракции с молекулярной массой 30-50кДа.
Для изучения протективного эффекта секре-тируемых белоксодержащих фракций разработана экспериментальная модель стафилококковой инфекции на мышах линии BALB/c, как наиболее чувствительной из доступных. При этом мышей иммунизировали двукратно подкожно с интервалом 14 дней и заражали через 12—14 дней внутривенно. Для определения интенсивности инфекционного процесса заражали сублетальной дозой (2 х 107 м.к.) и проводили высевы из крови, селезенки и почки. Выживаемость мышей оценивали при заражении тремя кратными дозами и наблюдали в течение 10 суток после заражения.
Секретируемая белоксодержащая фракция S. ашеш при электрофорезе в ПААГ содержала мажорную полосу с молекулярной массой около 40 кДа и несколько минорных полос, обладала антигенной активностью — индуцировала синтез специфических IgG антител, определенный в ИФА. Установлена протективная активность этой фракции в тесте активной защиты мышей. Показано, что наибольшая высеваемость из крови отмечается через сутки после заражения и к 4 суткам она снижается. К этому периоду высеваемость из селезенки иммунизированных мышей значимо снижается по сравнению с контрольными мышами, у которых она остается на высоком уровне (lg КОЕ/г 2,0—2,85 по сравнению с 4,9—5,7 в контроле); выявлены также статистически значимые различия по высевам из почек у опытных и контрольных мышей. У иммунизированных мышей после заражения отмечены менее выраженные морфогистологические изменениям структуры тканей легких, селезенки и почек, чем у контрольных.
ОСОБЕННОСТИ ПРОФИЛАКТИКИ ЛЕГИОНЕЛЛЕЗА В УСЛОВИЯХ МЕГАПОЛИСА
О.А. Груздева1, И.С. Тартаковский2
'Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва; 2ФГБУНИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи Минздравсоцразвития, Москва
Ежегодно в мире регистрируются случаи легио-неллеза, связанные с путешествиями, а также связанные с пребыванием в ЛПУ. Риск возникновения легионеллезной инфекции обусловлен высокой вероятностью контакта с потенциально опасными водными системами, контаминированными легио-неллами (централизованные системы кондиционирования воздуха с водным охлаждением, системы горячего водоснабжения с температурой воды менее 50°С) в гостиницах и зданиях ЛПУ Особенную актуальность проблема безопасности туристов и гостей в мегаполисе приобретает в период проведения международных форумов, спортивных мероприятий. Для пациентов ЛПУ риски увеличиваются при снижении иммунитета.
2012, Т. 2, № 1-2
Современное лабораторное обеспечение.
Цель работы: провести обследование общественных зданий мегаполиса с изучением уровней контаминации воды легионеллами для разработки профилактических мероприятий.
Методы: образцы воды, биопленок, смывов из систем горячего водоснабжения исследовали с помощью бактериологического метода и ПЦР в реальном времени.
Результаты. Выявлен высокий уровень контаминации Legionella pneumophila системы горячего водоснабжения (68%) при обследовании 16 корпусов 5 ЛПУ. Среди штаммов Legionella pneumophila, циркулирующих в системе горячего водоснабжения ЛПУ, преобладали штаммы серогрупп 6, 5 и 1. При обследовании зданий 6 гостиниц выявлена контаминация легионеллами системы горячего водоснабжения в 5 гостиницах, из них в одном здании уровень контаминации достигал эпидемически значимой концентрации. Проведенное обследование зданий позволило установить, что при эксплуатации систем горячего водоснабжения нарушаются требования, регламентированные СанПиН. Температура горячей воды в местах водо-разбора была ниже 60°.
Выводы. Снижение температуры горячей воды приводит к накоплению микроорганизмов, в том числе до эпидемически значимых концентраций, что является фактором риска возникновения очагов легионеллезной инфекции. Для профилактики заболеваемости в мегаполисе необходимо разрабатывать планы по обеспечению безопасности воды уполномоченными на эксплуатацию водораспределительных сетей организациями. План должен предусматривать систематическую и детальную оценку и определение приоритетных опасностей, проведение эксплуатационного мониторинга и контрольных измерений. Обязательным разделом плана должно быть описание действий, то есть профилактических мероприятий, как в период получения неудовлетворительных результатов исследований, так и в период регистрации очагов заболеваний.
ОПЫТ ЭКСПЛУАТАЦИИ АВТОМАТИЧЕСКОГО ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗАТОРА «EVOLIS TWIN PLUS»
В.В. Губернаторова, В.В. Булыгина, И.А. Зотова
ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Ивановской области», г. Иваново
В 2010 г. по национальному проекту «Здоровье» ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Ивановской области» был приобретен ИФА анализатор EVOLIS TWIN PLUS (BIO-RAD). Анализатор является полностью автоматизированной открытой системой на 2 микропланшета, в которой объединены дозатор образцов, инкубаторы, вошер, многоканальный фотометр и процессор обработки данных. В 2011 г. на анализаторе было проведено 3111 исследований на выявления HBsAg вируса гепатита В, 3089 исследований по определению иммуноглобулинов классов М и G к вирусу гепатита С, 2817 исследований на выявление антигена вируса клещевого энцефалита. Данные исследования проводились с помощью тест-систем фирмы «ВЕКТОР-БЕСТ».
Положительным качеством прибора является то, что программное обеспечение позволяет программи-
ровать протоколы различных тестов, использовать тест-системы любых фирм производителей. Во время работы максимально исключается человеческий фактор. С помощью устройства для считывания штрих-кодов осуществляется контроль за наличием реагентов, образцов и наконечников. В журналах текущих событий производится запись всех этапов работы системы по ходу их выполнения, что дает возможность быстро реагировать на любые возникающие проблемы. Протоколы исследований и результатов автоматически сохраняются. Имеется возможность контроля серии и срока годности тест-систем.
За время эксплуатации анализатор был точен в дозировании образцов и реагентов. Прибор прост в обращении, имеет понятный интерфейс. Позволяет проводить иммуноферментные реакции в одной постановке на 2 планшетах одновременно. EVOLIS Twin Plus удобен для исследования большого числа образцов. Система контроля качества, интегрированная в программное обеспечение, позволяет интерпретировать результаты количественно, качественно и полуколичественно. Однако, в работе могут быть использованы только проводящие одноразовые наконечники, поставленные BIO-RAD специально для системы EVOLIS Twin Plus. Количество сыворотки крови в пробирке должно быть не менее 250 мкл, что затрудняет постановку реакций на коллективный иммунитет к возбудителям эпидемического паротита, кори и краснухи у детей. К недостаткам можно отнести и дорогое техническое обслуживание, которое необходимо проводить 1 раз в год.
ДИНАМИКА ВЫСЕВАЕМОСТИ ШИГЕЛЛ ОТ ЛЮДЕЙ В ИВАНОВСКОЙ ОБЛАСТИ В 2009-2011 гг.
В.В. Губернаторова, В.В. Булыгина, Е.В. Тихонова, А.В. Цыганова
ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Ивановской области», г. Иваново
В 2009 г. в Ивановской области выделено 57 ши-гелл, в 2010 г. высеваемость шигелл снизилась на 15% (49 шигелл), а к 2011 г. уменьшилась почти в 7 раз (8 шигелл). В 2009—2011 гг. сохраняется преобладание выделения шигелл Зонне над шигеллами Флекснера. В 2009 г. выделено 49 культур Shigella sonnei (или 86% от общего числа высеенных культур) и 8 культур Shigella flexneri (что составляет 14% от общего числа). В 2010 г. выделено 34 культуры Shigella sonnei (или 70% от общего числа высеянных культур) и 15 культур Shigella flexneri (что составляет 30% от общего числа). В 2011 г. выделено 6 культур Shigella sonnei (или 75% от общего числа выделенных культур) и 2 культуры Shigella flexneri (что составляет 25% от общего числа). При этом отмечается некоторое уменьшение разницы в высеваемости этих возбудителей в процентном отношении (увеличилась доля шигелл Флекснера на 10—15%). Отмечается так же неизменное преобладание Shigella sonnei тип IIe над другими типами шигелл Зонне с тенденцией к увеличению процента высеваемости этого микроорганизма. В 2009 г. высевалось 27 культур Shigella sonnei тип Ile (55,1% от общего числа), 21 культура Shigella sonnei тип IIg (42,8%) и 1 культура Shigella sonnei тип IIIc (2,1%). В 2010 г. высевалось 27 культур Shigella sonnei тип IIe (79,4% от общего числа), 4 культуры Shigella sonnei тип IIg (11,8%) и 3 культуры Shigella sonnei тип !а (8,8%). В 2011 г. высевалось 5 культур Shigella sonnei тип IIe (83,3% от общего числа), 1 культура Shigella sonnei тип
