CC BY
4
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
213
Цитотоксические CD8+ Т-лимфоциты определяют противоопухолевый иммунный ответ при раке легкого, в том числе при мелкоклеточном раке легкого (МКРЛ). Однако опухоль и ее микроокружение оказывают негативное действие на иммунные клетки. Восстановление утраченных CD8+ Т-лимфоцитов и их свойств рассматривается как одно из направлений клеточной терапии опухоли. Для повышения активности лимфоцитарного звена противоопухолевого ответа нами был предложен подход к репрограмми-рованию CD8+ Т-лимфоцитов, основанный на применении ингибитора MEK1/2 и блокатора контрольной точки PD-1. Избирательная элиминация мишени обеспечивалась предварительным «обучением» CD8+ Т-лимфоцитов анти-ген-презентирующей смесью, содержащей лизат опухолевых клеток и стволовых опухолевых клеток (СОК).
Целью настоящего исследования явилось изучение противоопухолевой активности репрограммированых CD8+ Т-лимфоцитов при раке легкого.
Объектом исследования выступали репрограмми-рованые CD8+ Т-лимфоциты человека (рчТлимф) и мышей линии C57BL/6 (рмТлимф). Эффекты рчТлимф и рмТлимф были оценены в культуре клеток карциномы легкого Льюис (LLC) и культуре опухолевых клеток и СОК пациентов с МКРЛ; а также в условиях целостного организма у мышей линии C57BL/6 на ортотопической модели LLC и модели спонтанного метастазирования LLC. В исследовании использовались морфометрический и гистологический методы, проточная цитометрия, куль-туральные методы, клеточный имиджинг, методы исследования митохондриального дыхания и др.
Репрограммирование увеличивало активность мито-хондриального дыхания и устойчивость к апоптозу CD8+ Т-лимфоцитов в культуре клеток LLC и культуре опухолевых клеток и СОК пациента с МКРЛ. При этом репрограмми-рованые клетки приобретали способность мигрировать в легкие мышей при внутривенном введении. На ортотопи-ческой модели LLC и на модели спонтанного метастазиро-вания LLC рмТлимф и рчТлимф демонстрировали антиметастатическую и противоопухолевую активности. Мишенью рмТлимф и рчТлимф выступали опухолевые клетки и СОК.
Таким образом, репрограммирование CD8+ Т-лимфоцитов ингибированием MAPK/ERK сигналинга через MEK1/2i и блокадой PD-1/PD-L1 сигналинга человеческим моноклональным антителом ниволумабом с целевой направленностью на элиминацию опухолевые клетки и СОК представляет собой перспективный путь повышения эффективности иммунотерапии МКРЛ. Целевым «обучением» CD8+ Т-лимфоцитов опухолевыми клетками и СОК пациента с МКРЛ достигается пер-сонализация лечения. Исследование выполнено за счет гранта Министерства науки и высшего образования Российской Федерации № 075-15-2020-773.
ОСОБЕННОСТИ ПЛАЗМАЛЕММЫ ЛИМФОЦИТОВ ПРИ МИТОГЕННОЙ СТИМУЛЯЦИИ
Е.А. Сладкова, С.В. Заболотная, Т.А. Михайлик
Белгородский государственный национальный исследовательский университет, Белгород, Россия
e-mail: sladkova@bsu.edu.ru
Ключевые слова: лимфоциты, лейкоз, митогены, плазма-лемм, атомно-силовая микроскопия.
Основной задачей современной медицины является поиск прогностических критериев, позволяющих
выявить ранние признаки активации патологического процесса. Одним из методов, имеющих прогностическое значение при лейкозах, является цитогенетиче-ский анализ, требующий присутствия соответствующих митогенов [1]. Кроме того, реакция бласттрансформа-ции на митогены широко применяется для комплексной оценки иммунного статуса больного. Ввиду чего, целью нашего исследования явилось — изучить особенности плазмалеммы лимфоцитов здоровых доноров и больных острым лимфолейкозом (ОЛЛр) в ремиссии при митоген-ной стимуляции.
Объектом исследования служили лимфоциты больных ОЛЛ в ремиссии, контроль — клетки здоровых доноров. Митогенную стимуляцию осуществляли ФГА. Рельеф клеточной поверхности и её жесткость исследовали на атомно-силовом микроскопе (АСМ).
В лейкосуспензиях здоровых доноров при стимуляции ФГА наблюдали появление субпопуляций микро-цитов, нормоцитов и бластов. В состоянии ремиссии у больных ОЛЛ под влиянием ФГА микроцитов не обнаружено. Для нормоцитов больных ОЛЛр характерно снижение жесткости клеточной поверхности на 27% (р<0,05) по сравнению с контролем. Рельеф поверхности нормоцитов представлен глобулами и инвагинациями. Высота и ширина глобулярных выступов нормоци-тов больных ОЛЛр снизились на 39% и 85% (р<0,05) по сравнению с клетками доноров. Жесткость плаз-малеммы лимфобластов в группе пациентов с ОЛЛр снижена на 45% (р<0,05). На поверхности клеток наблюдали мелкие остроконечные глобулярные выступы, высота и количество которых снизились на 37% и 23% (р<0,05) по сравнению с бластами доноров.
Установленное в нашем исследовании разнонаправленное влияние ФГА на морфологию и жесткость лимфоцитов, вероятно, связано с разной специфичностью ре-цепторных комплексов на поверхности клеток здоровых доноров и больных ОЛЛ в ремиссии. Преобразования клеточной поверхности лимфоцитов больных ОЛЛр на фоне снижения её жесткости по сравнению с контролем при воздействии ФГА указывает на различия в работе актиновых и тубулиновых сетей цитоскелета [2].
Полученные результаты расширяют имеющиеся научные данные о морфофизиологических особенностях трансформированных лимфоцитов и наводят на мысль о необходимости дальнейшего изучения влияния митогенов на лимфоциты здоровых доноров и больных лимфопролиферативными заболеваниями с целью получить надежные данные прогностического значения о регенеративных возможностях в процессе лимфопоэза.
Литература:
1. Panagiotis B., Blanca E., Mellink C. et al. HemeSpere. J. 2022.
V. 6. P. 707.
2. Ymazaki D. Cancer Sci. 2005. V. 96. P. 379-386.
ВЛИЯНИЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ММСК И ФУКОКСАНТИНА НА ФИБРОЗ ПЕЧЕНИ
В.Н. Слаутин1, Д.Ю. Гребнев1 2, И.Ю. Маклакова1, 2, К.В. Конышев1, 2
1 ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России, Екатеринбург, Россия
2 ГАУЗ СО ИМКТ, Екатеринбург, Россия e-mail: dr-grebnev77@mail.ru
Ключевые слова: фиброз печени, фукоксантин, ММСК.
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
