CC BY
46
наблюдалась выраженное замещение дефектов по сравнению с контрольной группой. В результате проведенного исследования установлено, что применение белковой фракции приводит к увеличению скорости репаративных процессов при восстановлении костных дефектов.
Литература
1. Сорокин, А.Н. Сравнительный анализ биологических и синтетических костно-пластических материалов по литературным данным / А.Н. Сорокин, О.А. Тетерин, И.А. Кирилова, В.Т. // Инновационные технологии в трансплантологии органов, тканей и клеток. Материалы Всероссийской конференции с международным участием.- Самара.- 2008.- С. 108-110.
2. Талашова, И.А. Лабораторное выделение кальцийфос-фатных соединений из костной ткани крупного рогатого скота и определение их состава методом электронно-зондового микро-
анализа / И.А.Талашова, Т.А. Силантьева // Гений ортопедии.-2007.- № 4.- С. 71-75.
3. Талашова, И. A. Возмещение дефектов губчатой кости животных / И.А. Талашова, Н.А. Кононович, Т.А. Силантьева // Ветеринария.- 2009.- №8.- С. 51-54.
4. Филиппович, Ю. Б. Практикум по общей биохимии / Ю.Б. Филиппович, Т.А. Егорова, Г.А. Севастьянова.- М. Просвещение, 1982.- 311 с.
5. Derek le Roith Insulin-like growth factors. // The New England Journal of Medicine.- 1997.- №336(9).- P. 633-640.
6. Solomon, A. Kaplan, Pinchas Cohen Review: the somatomedin hypothesis 2007: and 50 years later / A. Solomon // The journal of clinical endocrinology & metabolism.- 2007.- №92(12).- P. 4529-4535.
УДК 616.155.392
ОСОБЕННОСТИ КРИСТАЛЛОГЕННОГО ПОТЕНЦИАЛА КРОВИ МЫШЕЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ЛИМФОЛЕЙКОЗЕ
А.К. МАРТУСЕВИЧ, Л.К. КОВАЛЕВА, А.А. КОСТЯЕВ
ФГБУ «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», ул. Красноармейская, 72, г. Киров, 610027 ФГБУ «Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии» Минздравсоцразвития России Ассоциация российских озонотерапевтов, Верхне-Волжская набережная, 18, г. Н.Новгород, 603155
Аннотация: цель исследования - уточнение «паттерна» дегидратационной структуризации плазмы крови мышей с учетом их предрасположенности к формированию спонтанного лимфолейкоза (линия AKR). Изучали кристаллогенные свойства плазмы крови 15 мышей линии Black и 20 мышей линии AKR (на стадии формирования лимфолейкоза). Для оценки собственного и инициированного кристаллообразования биосреды использовали систему полуколичественных параметров. Установлено, что формирование у мышей экспериментального лимфолейкоза способствует существенному сдвигу качественно-количественного состава их крови, что, в свою очередь, приводит к трансформации кристаллогенной активности последней.
Ключевые слова: лимфолейкоз, кристаллизация, кровь, биокристалломика.
THE PARTICULAR FEATURES OF CRYSTALLOGENOUS POTENTIAL OF THE BLOOD OF MOUSES AT EXPERIMENTAL LYMPHOID
LEUCOSIS
A.K. MARTUSEVICH, L.R. KOVALEVA, А.А. KOSTYAEV
Kirov Research Institute of Hematology and Blood Transfusion Nizhny Novgorod Research Institute of Traumatology and Orthopaedics
Association of Russian Ozone Therapeutists
Abstract: the aim of this work is the estimation of dehydrational structurization the blood serum in mouses takin into account the conditions of formation the lynphoid leucosis (AKR line). The authors studied crystallogenous properties of the blood plasma of mouses AKR (n=20) and Black (n=15) lines. For biological fluids own and initiated crystallogenesous the authors used special semiquantitive criterias. It was established, that experimental lymphoid leucosis allows to change the blood composition and transformation of its crystallogenous potential.
Key words: lymphoid leucosis, crystallization, blood, biocrystallomics.
Линия мышей АКЯ выделена и уже на протяжении длительного времени используется для различных исследовательских задач (изучение механизмов развития патологии легких [10], заболеваний эндокринного и офтальмологического профиля [4,11], паразитарных инвазий и др. [1,5,9,13], а также апробации вариантов их экспериментальной терапии [3,12]). В то же время основной характерной чертой линии является формирование на 7-9 месяце жизни спонтанного лимфолейкоза [2,3,5,9]. Это свойство предопределяет наиболее значимую область применения животных линии АКЯ - детальное раскрытие патогенеза лимфо-лейкоза и отработка способов химиотерапевтической и лучевой коррекции указанного патологического состояния. Однако, несмотря на многолетние изыскания [1, 2-5, 8-11], подробному изучению подверглись далеко не все анатомо-физиологические и морфологические параметры рассматриваемой линии. Так, практически отсутствует информация об одном из интегральных показателей физико-химического гомеостаза жидких сред организма животного - их кристаллогенной активности. Оценка последнего, в свою очередь, может быть полезна как критерий функционально-метаболического статуса и индикатор эффективности экспериментальной терапии [6,7,12].
В связи с этим, целью данного исследования служила сравнительная характеристика «паттерна» дегидратационной структуризации плазмы крови мышей с учетом их предрасположенности к формированию спонтанного лимфолейкоза (линия АКЯ).
Материал и методы исследования. Объектом данного экспериментального исследования служила плазма крови 15 мы-
шей линии Black и 20 мышей линии AKR (на стадии формирования лимфолейкоза). Забор крови производили без умерщвления животных. Содержание животных осуществлялось в соответствии с правилами, принятыми Европейской Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей. План исследования соответствовал положениям Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации последнего пересмотра [8].
Дегидратацию производили без термической стимуляции кристаллогенеза в условиях лаборатории.
Оценку результатов структуризации осуществляли с применением собственной системы полуколичественных параметров для кристаллоскопических и тезиграфических фаций [7]. Базисным веществом при тезиграфии служил 10% раствор хлорида натрия. Изучали общие морфологические особенности образцов высушенной плазмы крови животных обеих групп. В качестве основных визуаметрических показателей при описании кристаллоскопических фаций использовали кристаллизуемость (Кр), индекс структурности (ИС), степень деструкции фации (СДФ) и выраженность ее краевой зоны (Кз), для тезиграфических фаций -тезиграфический индекс (ТИ), коэффициент поясности (Р), кристалличность (К), а также, аналогично кристаллограммам, степень деструкции фации (СДФ) и выраженность ее краевой зоны (Кз). Статистическая обработка полученных данных осуществлялась с помощью электронных таблиц Microsoft Excel 2003, а также программных пакетов Primer of biostatistics 4.03 и SPSS 11.0.
Результаты и их обсуждение. Анализ кристаллогенной и инициирующей активности плазмы крови мышей двух участвовавших в исследовании линий позволил верифицировать их вариабельность по рассматриваемым параметрам гомеостаза биологической жидкости. Так, высушенные образцы биосреды животных, генетически не предрасположенных к развитию лимфолей-коза, демонстрируют умеренную кристаллогенную активность и сформированы преимущественно дендритными элементами со средней степенью ветвления. Для этих образцов также характерно присутствие единичных одиночно-кристаллических структур, причем все компоненты имеют начальные признаки деструкции, асимметрично сгруппированы по текстуре фации. Краевая зона относительно неширокая, но четко различима по всему диаметру микропрепарата.
Оценка кристаллогенных свойств плазмы крови мышей линии AKR позволила установить выраженное снижение потенциала структуризации данной биологической жидкости при развитии спонтанного лимфолейкоза, что нашло морфологическое отражение в форме «опустошения» фации в сочетании с сменой превалирующего типа структурных элементов с дендритного на одиночнокристаллический. Другой четко просматриваемой особенностью является формирование многочисленных, хаотично расположенных по текстуре образца «разломов», пронизывающих практически весь диаметр образца. Краевая зона микропрепаратов плазмы крови мышей исследуемой группы была различима достаточно слабо для при микроскопии, тогда как у животных без предрасположенности к лимфолейкозу просматривалась даже без нее.
□ здоровые мыши
□ мыши линии AKR
Кр ИС СДФ Кз
Рис. 1. Результаты визуаметрической оценки кристаллоскопических фаций плазмы крови мышей в норме и при экспериментельном лимфолейкозе (Кр - кристаллизуемость, ИС - индекс структурности, СДФ - степень деструкции фаций, Кз - выраженность краевой зоны); * - статистическая значимость различий значений параметра между группами р<0,05
Выявленные тенденции морфологических различий кристаллоскопических фаций мышей линий В1аск и АКЯ были полностью подтверждены при визуаметрическом анализе микропрепаратов (рис. 1). На это указывает тот факт, что по всем основным оценочным параметрам кристаллограмм биологической жидкости здоровых и имеющих лимфолейкоз животных зарегистрированы статистически значимые различия (р<0,05). В частности, кристаллизуемость плазмы крови у мышей линии АКЯ в 3,13 раза ниже, чем у здоровых животных другой линии (р<0,05), а индекс структурности - в 3,80 раза ниже (р<0,05). Данная вариация количественно отображает ингибирование собственного кристаллогенеза у мышей со сформированным лимфолейкозом. Патологический характер изменений кристаллогенных свойств биосреды дополнительно подчеркивает отчетливая тенденция к нарастанию степени деструкции фации, характеризующей «правильность» структуропостроения элементов.
Рассмотрение результатов тезиграфического исследования плазмы крови мышей также позволило продемонстрировать различия инициирующей активности изучаемой биологической жидкости (рис. 2). Так, в тезиграммах здоровых мышей наблюдается тенденция к умеренному ингибированию структуризации базисного вещества, что находит отражение в уровне тезиграфи-ческого индекса, не превышающего у всех животных 2,5 усл. ед. Высокая степень дендритизации фации проявляется в значениях параметра «кристалличность», у большинства здоровых мышей превышающего 2 усл. ед. Физиологический характер структуро-
Г*1 Нл
Г1! *
* *
1 1 L L
построения фации подтверждается минимальной степенью выраженности деструкции элементов образца, представленной уровнем соответствующего оценочного визуаметрического критерия. Следует отметить, что в тезиграммах плазмы крови здоровых мышей присутствует четко контурируемая краевая зона.
Рис. 2. Визуаметрия тезиграфических фаций плазмы крови здоровых и имеющих лимфолейкоз мышей (ТИ тезиграфический индекс, Р - коэффициент поясности, К - кристалличность, СДФ - степень деструкции фации, Кз - выраженность краевой зоны);
* - статистическая значимость различий значений параметра между группами p<0,05
Анализ инициирующей активности плазмы крови мышей линии AKR указал на выраженное ингибирующее действие данной биосреды на кристаллогенез базисного вещества (10% раствора хлорида натрия), что проявилось в существенном снижении уровня тезиграфического индекса относительно здоровых животных (p<0,05) на фоне сохранности кристалличности (индикатора соотношения «одиночные кристаллы - дендритные структуры» в образце) микропрепаратов (p>0,05). Об уменьшении количества функционально нативных белков в плазме крови мышей с лимфо-лейкозом свидетельствует значимое падение уровня коэффициента поясности фации и выраженности ее краевой зоны по сравнению с образцами, полученными от здоровых животных (p<0,05). Также при лимфолейкозе отмечена значительная выраженность деструктивных процессов в структурных элементах фации.
Выводы. Таким образом, формирование у мышей экспериментального лимфолейкоза способствует существенному сдвигу качественно-количественного состава их крови, что, в свою очередь, приводит к трансформации кристаллогенной активности последней.
Литература
1. Влияние переноса фрагмента хромосомы 13, содержащего ген Mst, на показатели температурного гомеостаза у мышей / И.П. Воронова [и др.]// Медицинская экспертиза и право.- 2012.-№1.- С. 45-53.
2. Зиновьев, Ю.В. Влияние динамической электронейростимуляции (ДЭНС) зоны Е-36 на продолжительность жизни мышей высоколейкозной линии AKR / Ю.В. Зиновьев, С.А. Козлов // В кн.: Актуальные вопросы трансфузиологии и клинической медицины.- 2005.- С. 317-320.
3. Зиновьев, Ю.В. ДЭНС и проблема продления жизни / Ю.В. Зиновьев, В.В. Малахов, С.А. Козлов // Рефлексотерапия.-2005.- № 1.- С. 28-30.
4. Идова, Г.В. Характер иммунного ответа у мышей новой линии ASC (antidepressants sensitive catalepsy) / Г.В. Идова, Н.К. Попова, А.В. Куликов, Е.Л. Альперина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 2007.- Т.143.- №8.-С. 188-190.
5. Куликов, А.В. Развитие амнезии у мышей разных линий / А. В. Куликов, Н. И. Дубровина, Д. Р. Зиновьев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 2009.- №5.- С. 484-486.
6. Мартусевич, А.К. Биокристалломика в молекулярной медицине / А.К. Мартусевич.- СПб.: Издательство СПбГМУ; Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2011.- 112 с.
7. Мартусевич, А.К. Новый алгоритм визуаметрического анализа кристаллогенных и инициирующих свойств биологических субстратов / А.К. Мартусевич, Н.Ф. Камакин // Клиниколабораторный консилиум.- 2011.- №2.- С. 23-26.
8. Перетягин, С.П. Лабораторные животные в экспериментальной медицине / С.П. Перетягин, А.К. Мартусевич, А.А. Гришина с соавт.- Нижний Новгород: ФГУ «ННИИТО» МЗСР РФ, 2011.- 300 с.
9. Влияние генотипа и эмоционального стресса на гигиеническое поведение мышей / Н.К. Попова [и др.]// Журнал высшей нервной деятельности им. И.П. Павлова.- 2010.- №5.- С. 632-637.
10. Эффект трансплантации клеток костного мозга при экспериментальном туберкулезе / Л.Е. Поспелов [и др.]// Туберкулез и болезни легких.- 2011.- №7.- С. 65-67.
11. Selective breeding for catalepsy changes the distribution of microsatellite D13Mit76 alleles linked to the 5-HT1A serotonin recep-
tor gene in mice / E.M. Kondaurova [et al.]// Genes, Brain and Behavior.- 2006.- Vol. 5.- P. 596-601.
12. Martusevich, A.K. Crystallodiagnostics of some animals’ helmintosis / A.K. Martusevich, A.A. Grishina, A.V.Bochkareva // Asian Pacific Journal of Tropical Medicine.- 2010.- Vol. 3.- №3.-P. 176-179.
13. Effects of chronic fluoxetine treatment on catalepsy and the immune response in mice with a genetic predisposition to freezing reactions: The roles of types 1A and 2A serotonin receptors and the tph2 and SERT genes / M.A. Tikhonova [et al.]// Neuroscience and Behavioral Physiology.- 2010.- Vol. 40.- №5.- P. 489-494.
УДК 616.36-004+615.242.3
ОСОБЕННОСТИ ПАТОГЕНЕЗА И КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ ПЕЧЕНОЧНОЙ ЭНЦЕФАЛОПАТИИ ПРИ АЛКОГОЛЬНОМ ЦИРРОЗЕ
ПЕЧЕНИ
С.П.СМОЛИНА, М.М.ПЕТРОВА, В.И.ШАРОБАРО, Д.А.ЯКУБОВ
Смоленская государственная медицинская академияул, Крупской, 28, Смоленск, 214000, тел.: +7 (4812) 559-223,
e-mail: st-mous(@rambler.ru
Аннотация: печеночная энцефалопатия характеризуется высокой частотой встречаемости при хронических заболеваниях печени, потенциальной обратимостью и наибольшим из всех осложнений цирроза печени влиянием на трудоспособность и социальную адаптацию, что обуславливает актуальность проблемы. Патогенез печеночной энцефалопатии окончательно не установлен. Заслуживают внимания теории астроглии, ложных нейротрансмиттеров и ГАМК-эргическая. Печеночная энцефалопатия как осложнение алкогольного цирроза печени развивается на фоне алкогольной болезни, имеющей единый патоморфогенез.
Ключевые слова: печеночная энцефалопатия, патогенез, алкогольная болезнь.
THE FEATURES OF PATHOGENESIS AND CLINICAL EVOLUTION OF HEPATIC ENCEPHALOPATHY WITH ALCOHOLIC CIRRHOSIS
OF THE LIVER
S.P. SMOLINA, M.M. PETROVA, V.I. SHAROBARO, D.A.YAKUBOV
Smolensk State Medical Academy, Smolensk, tel.: +7(4812) 55-92-23, e-mail: stmous@rambler. ru.
Abstract: the hepatic encephalopathy (HE) has a high frequency of occurrence in chronic liver diseases, potential trade roundtrip capability and most of all the complications of liver cirrhosis effects on employability and social inclusion, hence the urgency of the problem. The pathogenesis of HE was not established. The hepatic encephalopathy as complications of alcoholic liver cirrhosis is developed on the basis of alcoholic disease with single patomorphogenesis.
Key words: hepatic encephalopathy, pathogenesis, alcoholic disease.
По современным представлениям, печеночная энцефалопатия (ПЭ) - нервно-психический синдром, проявляющийся расстройством поведения, сознания, обусловленный метаболическими расстройствами вследствие острой печеночно-клеточной недостаточности, хронических заболеваний печени или портосистемного шунтирования крови. ПЭ характеризуется многообразием клинических проявлений, варьирующих от психомоторного возбуждения до комы и потенциальной обратимостью при условии устранения триггерных факторов и проведения патогенетической терапии [1,3,5,6]. Установлено, что из всех осложнений цирроза печени именно ПЭ наиболее серьезно ограничивает трудоспособность больных и их социальную адаптацию, являясь независимым и самостоятельным фактором, оказывающим негативное влияние на качество жизни [10,11,12]. Проблема ПЭ приобретает все большую социальную значимость ввиду широкой распространенности заболеваний печени на фоне неуклонного роста потребления алкоголя и заболеваемости вирусными гепатитами [4]. ПЭ при циррозе печени встречается в 20-85% случаев, относится к хронической рецидивирующей и в зависимости от выраженности нейропсихических симптомов колеблется от латентной (минимальной) до глубокой комы [1,3,5,6,11]. Симптомы ПЭ определяются клинически и охватывают изменения сознания, интеллекта, поведения и нейромышечные нарушения (табл.).
Единой патогенетической модели ПЭ не существует, хотя изучено множество патогенетических механизмов ее развития. Считается, что при циррозе печени ПЭ обусловлена как портосистемным шунтированием крови, так и печеночноклеточной недостаточностью [1,3,5,6,9,11]. Повреждение нейронов может быть прямым (воздействие эндогенных токсинов, естественная дезактивация которых нарушена вследствие несостоятельности детоксикационной функции печени) либо опосредованным через астроглию. В настоящее время наиболее распространенной патогенетической теорией ПЭ
является «гипотеза глии» [1,3,11]. Аминокислотный дисбаланс и увеличение содержания в крови эндогенных нейротоксинов вызывает отек и функциональные нарушения астроглии: повышение проницаемости гематоэнцефалического барьера, изменение активности ионных каналов, нарушение процессов нейротрансмиссии и обеспечения нейронов энергией АТФ, что клинически проявляется симптомами ПЭ.
Таблица
Стадии печеночной энцефалопатии
0 стадия. Субклиническая (латентная, минимальная) печеночная энцефалопатия Характеризуется минимальной симптоматикой: легкие нарушения памяти, концентрации внимания, когнитивных функций, координации движений. «Хлопающий» тремор (астериксис) отсутствует.
1 стадия. Расстройства сна, нарушение ритма сна, эйфория, раздражительность. Замедлена способность к выполнению интеллектуальных заданий. Снижение внимания, нарушение счета (сложения). Может выявляться астериксис.
2 стадия. Летаргия или апатия. Дезориентация, неадекватное поведение, невнятная речь. Астериксис. Головокружение. Атаксия. Нарушение счета (вычитания). Легкая дезориентация во времени и в пространстве.
3 стадия. Сопор. Значительная дезориентация во времени и в пространстве. Амнезия, приступы гнева. Дизартрия.
4 стадия. Кома. Может отсутствовать реакция на болевые раздражители.
Среди эндогенных нейротоксинов основным является аммиак. Он синтезируется толстокишечной бактериальной флорой из белка и мочевины, так же образуется в скелетных мышцах, в тонкой кишке при распаде глутамина и в печени. Для обезвреживания аммиака в организме существуют два механизма: синтез мочевины в печени (орнитиновый цикл) и образование глутамина в печени, мышцах и головном мозге (в астроцитах). При печёночной энцефалопатии основные механизмы действия аммиака
