CC BY
16
V.K. Kanierin, AA. Sveshnikov, N.J. Gordievskikh, LA. Smotrova
reparative regeneration and circulation in distraction osteosynthesis under conditions of crus bone defect substitution in experiment
Analysis of direct and remote results of studying circulation and bone formation indices in outbred dogs while substituting postresection diaphyseal defects with Ilizarov's transosseous osteosynthesis was fulfilled. It was found that compensation of primary microcirculatory disorders after operative trauma is completed mainly by the 14'" - 21st day of distraction, but vascular
system of regenerate is restored at the expense of opening numerous available capillaries and newly formed vessels. Intensity of metabolic processes in bone tissue, mineralization of distraction regenerate and circulation grow several times more during distraction. They remain at relatively high values at the beginning of next fixation of apparatus and return to initial values after removal of apparatus (by the 8-9th month after the surgery).
Keywords: defect, compression, distraction, fixation, blood supply, diastasis, regenerate.
Ф1УРНЦ «ВТО» им. акад. ГА. Илшарова Росмедтехнологий», г. Курган
Материал поступил в редакцию 08.07.07
© Камерин В.К., Свешников АЛ., Гордиевских Н.И., Смотрова JIA, 2007
УДК б 18.2+618.3]:612.017
ОСОБЕННОСТИ КООПЕРАТИВНЫХ ВЗАИМООТНОШЕНИЙ В СИСТЕМЕ ИММУНОГЕНЕЗА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ТИПАХ ГЕСТАЦИИ
ЕАЛевкова, МА.Фролова, Г.В. Чижова, ОА.Гребетк
Здоровье нации - приоритетная проблема здравоохранения любого государства. В последние годы из-за резкого сокращения рождаемости, достаточно высоких показателей перинатальной, младенческой и материнской смертности в отдельных регионах России указанная проблема не только привлекает к себе пристальное внимание со стороны руководящих структур, но и требует принятия активных решений [1, 5]. Дальневосточный регион имеет сложную социогеографическую характеристику, низкую плотность населения, высокую миграционную активность, негативные изменения экологии [3]. В этой связи изучение тонких механизмов вынашивания беременности является особо актуальным. Доминирующая роль в
процессах гестации отводится иммунной системе. Именно от ее состояния зависит успех в достижении конечной цели - рождение здорового доношенного ребенка [2,6,4].
Цель исследования - изучение изменений параметров клеточного звена иммунитета и цитокинового профиля у женщин с различными типами течения гестационных процессов в 3-м триместре беременности.
Материалы и методы
Для реализации поставленной цели была обследована 171 беременная женщина. Физиологическое течение беременности было зарегистрировано у 60 женщин, 111 имели ослож-
91
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ И ТЕХНОЛОГИИ
пенное течение беременности. У 57 женщин течение беременности осложнилось угрозой её прерывания. 54 имели среднетяжелые формы гестоза.
В нашем исследовании оценка клеточных параметров проводилась с использованием отечественных моноклональных антител (МКА) серии ИКО в соответствии с номенклатурой антигенов CD.
Основными популяциями лимфоцитов являются общие Т-клетки (маркируются антигеном CD3), Т-хелперы/индукторы (антиген CD4), Т-супрессоры/цитотоксические клетки (антиген CD8), натуральные киллеры (антиген CD 16), Т-активированиые лимфоциты, - рецептор к ИЛ-2 (антиген CD25). Определение цитокинов, интерферонов, факгора некроза опухоли - альфа проводили у 105 беременных женщин в 3-м триместре беременности. В работе использовали наборы реагентов «ИЛ - 1, 2, 4, 6, 8 - ИФА - БЕСТ», «альфа - ФИО - ИФА - БЕСТ», «альфа, гамма - ИНФ - ИФА - БЕСТ», представляющие собой наборы, основными реагентами которых являются моноклональ-ные антитела к интерлейкинам, фактору некроза опухоли альфа (ФИО), интерферонам (альфа, гамма), сорбированные на поверхности лунок разборного полистирольного планшета.
Функциональные параметры оценивали в реакции торможения миграции лейкоцитов с ФГА и плацентарными антигенами («материнская» и «детская» части) (собственная модификация).
Учет результатов осуществляли по клеточным параметрам в реакции непрямой имму-нофлюоресценции на стекле с помощью люминесцентного микроскопа «Люмам» (Россия), по цитокиновым параметрам с использованием ридера «Мультискан-Мультисофт» (Финляндия).
Результаты и обсуждение
В настоящее время в отечественной и зарубежной литературе достаточно широко представлены клеточные и цитокиновые ха-
рактеристики при беременности [1, 6, 8, 10, 11,]. При этом стоит отметить, что исследований, посвященных отдельным субпопуляциям и популяциям клеток во взаимосвязи с цито-киновыми значениями, крайне мало [7, 8, 9]. Так, публикаций, посвященных представлению клеток цитолитической направленности -CD16 и CD25 у беременных в 3-м триместре и концентрации изучаемых цитокинов - в доступной нам литературе мы не встретили.
Полученные нами значения по клеточным характеристикам у женщин с различными типами гестации имеют существенные отличия между собой (табл. 1).
Иммунотип при физиологическом течении беременности укладывается в физиологический вариант иммуносупрессии. Стоит отметить равномерность снижения иммунорегуля-торных субпопуляций (CD4 и CD8) (рис. 1). Существенным отличием является резкое снижение клеток с маркерами CD 16 и CD25. Указанные клоны клеток участвуют в презентации антигена от макрофага Т-лимфоциту (CD25) и реакциях цитолитического типа, в том числе и схожих с феноменом РТПХ (CD16). Соотнося полученные значения с таковыми при физиологическом течении беременности, доказанные комплексным клинико-инструментальным обследованием женщин, необходимо признать обоснованность данных показателей в свете физиологического вынашивания плода как аллотрансплантата. Необходимо отметить и разницу в полученных цифровых значениях по общей популяции Т-лимфоцитов у женщин с физиологическим течением беременности по сравнению с представленными в литературе. Достаточно низкие значения объясняются региональными особенностями Дальнего Востока. Ранее проведенные исследования [1] и другие публикации [3] убедительно доказывают, что такие особенности существуют.
повышению уровней ИЛ-2, ИНФ у ИНФ а и ФИО а (р<0,05).
Дополнительным подтверждением полученных изменений являются значения РТМЛ с ФГА и «плацентарными» антигенами (рис. 2, 3)- Процес-
сы, характерные для аутосенсибилизации, в том числе и специфического характера к «детской» части плаценты, свидетельствуют об аутоиммунных изменениях в системе иммуногенеза у женщин с угрозой прерывания беременности.
Угроза ОПГ-гестоз Физиологическое небеременные прерывания течение
беременности беременности
женщины
Рис. 3. Значения РТМЛ с ФГА у беременных в зависимости от особенностей течения гестационного процесса и небеременных женщин
Иммунотип женщин с гестозом характеризовался выраженными супрессорными изменениями (см. табл. 1). В литературе достаточно подробно описано соотношение осложненного течения беременности в виде гестоза и высокой частотой инфекционных поражений, как у женщины, так и у рожденного ребенка [2,6]. Указанные изменения являются, на наш взгляд, закономерными, так как выраженная степень супрессии приводит к патологическому реагированию иммунной системы с увеличением контаминации организма различными инфектами. Именно при гестозах описана самая высокая частота внутриутробного инфицирования плода и летальные исходы от внутриутробной инфекции в перинатальном и постнатальном периодах [6, 7]. В нашем исследовании существенные изменения претерпели клетки с маркерами CD3, CD4, CD8. В результате субпопуляционных изменений ИРИ снизился до 1,1 ±0,1 Об (см. рис. 1). Необходимо отметить достоверное увеличение CD25+ и CD16 клеток При этом уровня, характерного для
угрозы прерывания беременности, они не достигали и достоверного различия по процентному представлению указанных клеток получено не было.
Закономерными являются, на наш взгляд, и изменения цитокинового профиля у женщин с гестозами (см. табл. 2). Существенных различий по ИЛ-1 получено не было в силу, видимо, невысокой иммуногенности антигенной нагрузки. Количество ИЛ-2, ИНФу, ИНФа достоверно отличалось от такового в группе женщин с физиологическим течением беременности как доказательство задействования цито-литических механизмов. При этом стоит отметить тенденцию в изменении ключевого цито-кина ИЛ-4 в переключении клеток хелперов (ТЫ-'ГЬ2) как представителя воспалительных цитокинов и ИЛ-б, который, хотя и относится к доминирующему семейству провоспалитель-ных цитокинов, схож по некоторым функциям с ИЛ-4 [10]. Именно при гестозах намечаются более существенные изменения в переключении ТЫ-ТЪ2. Достоверные отличия были по-
95
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ И ТЕХНОЛОГИИ
лучены по концентрации ИЛ-8 и ФНО а. За указанными цитокинами закреплена функция противоинфекционной защиты. Именно в условиях высокой инфекционной нагрузки концентрации ФНО а и ИЛ-8 увеличиваются. Максимально высокие значения нами были получены именно в группе женщин с гестозами. Полученные выраженные супрессорные изменения, соотносящиеся с процессами ремоду-ляции в системе 'Ш1-ТЬ2, перенапряжением противоинфекционной защиты (ИЛ-8, ФНО а), находят свое отражение и в значениях РТМЛ с ФГА (см. рис. 2). Как видно из рисунка, у женщин с гестозами отмечаются резкие изменения функциональной полноценности по типу клеточной некомпетентности. Специфической сенсибилизации зафиксировано не было (см. рис. 2).
Таким образом, проведенные исследования позволяют рекомендовать практическому здравоохранению детальные исследования клеточно-цитокиновых параметров при различных типах гестации для более точной диагностики гестационных осложнений.
Выводы
1. Иммунологические сопоставления у женщин с различными типами гестации выявили наличие иммунного, в том числе и ци-токинового, дисбаланса при осложненной беременности- угрозе прерывания беременности и гестозе.
2. У беременных женщин угроза прерывания беременности ассоциировалась с аутоиммунными изменениями в системе иммунитета, с достоверным увеличение общей популяции С03+ лимфоцитов, СБ4+ клеток, с резким увеличением клеток СО 16+ и СБ25+, уровней цитокинов ИЛ-2, ИНФ у и резким уменьшением РТМЛ с ФГА и плацентарными антигенами по сравнению с группой контроля (/КО,05).
3. Гестозы развивались у женщин с имму-носупрессорными изменениями в системе иммуногенеза; снижение общей популяции CD3+ лимфоцитов, равномерного снижения CD4+ клеток и CD8+ клеток (ИРИ 1,1+0,106), увеличением Т-активированпых лимфоцитов (CD25+) и натуральных киллеров (CD 16+) (р>0,05), выраженным увеличением концентрации ИЛ-8, ФНО а, (р>0.05) резким увеличением РТМЛ с ФГА (р<0,05) по сравнению с группой с физиологическим течением беременности 0*0,05).
4. Неосложненное течение беременности характеризовалось состоянием «физиологической иммуносупрессии» с резким снижением концентрации клеток CD16+ и CD25+.
Библиографический список
1. Ганъчева, ЕА Клинико-иммунологические сопоставления в системе «мать-дитя» в условиях высокой пренатальной отягощен-ности (клинико-экспериментальное исследование): дис.... канд. мед. наук. / ЕЛ. Ганъчева. - Хабаровск, 1999- - 168 с.
2. Горленко, АВ. Анализ иммунологических показателей у беременных с ВИЧ-инфек-цией / АВ. Горленко, OA. Белых // Иммунология. - 2005. - Т.26. - № 3. - С. 36-45.
3. Козлов, ВК. Региональные аспекты перинатальной медицины / ВК. Козлов. - Хабаровск, 1993. - 164 с.
4. Нестерова, ИВ. Пептидная регуляция продукции интерлейкина-8 нейтрофиль-ными гранулоцитами в эксперименте in vitro / ИВ. Нестерова, ЕЮ. Синельникова, ИН.Швыдченко // Иммунология. - 2006. - Т. 27. - № 5. - С. 274-278.
5. Ниязметов, РЭ. Провоспалительные цито-кины и иммунотип лимфоцитов у беременных при остром жировом гепатозе /
РЭ. Ниязметов // Мед. иммунология. -2004. -Т. 6. -№1-2. -С. 137-139.
6. Окислительный метаболизм нейтрофилов и уровень противовоспалительных цито-кинов в амниотической жидкости при нормальной и осложненной урогениталь-ной инфекцией беременности / АВ. Ко-вальчук, АВ. Ганковская, А.С. Долгина и др. // Иммунология. - 2006. - Т. 26. - № 3. -С.163-168.
7. Особенности продукции цитокинов и характеристика моноцитов при осложненной гестозом беременности / НА Ханина, АВ. Дударева, НА. Тихонова и др. // Там же. -
C. 156-161.
8. Сиделъникова, АЛ. Актуальные проблемы невынашивания беременности / АЛ. Сиделъникова. - М., 2001. - 210 с.
9. Тетруашвили, ЛК Роль цитокинов в невынашивании беременности / ЛК Тетруашвили., ГТ Сухих // Мать и дитя: материалы V Рос. Форума. - М, 2003. - С. 231-232.
10. Фрейдлин, КС. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функции / И.С. Фрейдлин // Мед. иммунология. - 2005. - Т. 7. - № 4. - С. 347-355.
11. Lilic, D. New perspectives on the immunology of chronic mucocutaneous candidiasis /
D. Lilic // Curr. Opin. Lofect. Die. - 2002. -Vol. 15.-№2.-P. 143-147.
12. Witkin, SS. Polymorphism in intron 2 of the fetal interleukin-1 receptor antagonist genotype in fluencies mial trimester amniotic fluid concentrations of interleukin 1 beta and inter-
leukin 1 receptor antagonist and pregnancy outcome / SS. Witkin, S. Vardhana, M. Yih // Am. J. Obstetr. Gynecol. - 2003. - Vol. 183. -№5. -P. 1413-417.
E.A. Levkova, MA. Frolova, G.V. Chizhova, OA., Grebenyak
peculiarities of cooperative interrelations in system of immunogenesis with different gestation types
Cell-mediated mechanisms of immunologic interrelations in different types of gestation were considered, immunotypes typical for physical and pathologic course of gestation processes were demonstrated. Immune homeostasis disorders in complicated course of gestation varied from autoimmune disorder with threat of pregnancy interruption to marked immunosuppressive one in gestosis.
Keywords: cell-mediated mechanisms, course of gestation processes, homeostasis disorders.
ГУЗ«Перинатальный центр*, ГОУДПО«Институт повышения квалификации специалистов здравоохранения», г. Хабаровск
Материал поступил в редакцию 17.03.2007
© Левкова Е.А, Фролова М.А, Чижова Г.В., Гребегак OA, 2007
97
