CC BY
26
Особенности клеточного энергообмена, иммунологические и нейробиохимические критерии диагностики перинатальных гипоксических поражений центральной нервной системы у новорожденных детей
О.П. Ковтун, Н.Е. Громада
Уральская государственная медицинская академия, Екатеринбург
The specific features of cell energy metabolism, the immunological and neurobiochemical criteria for the diagnosis of perinatal hypoxic damage to the central nervous system in newborn infants
O.P. Kovtun, КЕ. Gromada
Ural State Medical Academy, Yekaterinburg
Проведено динамическое клиническое и комплексное исследование клеточного энергообмена лимфоцитов периферической крови, содержания ДНК в ядрах лимфоцитов методом кариометрии, уровня интерлейкинов, фактора некроза опухоли-а, концентрации нейронспецифической енолазы, кортизола в сыворотке крови и спинномозговой жидкости у 50 доношенных новорожденных детей с тяжелым гипоксическим перинатальным поражением центральной нервной системы. Определено значение взаимосвязи исследуемых показателей в патогенезе заболевания. Установлены диагностические и прогностические критерии перинатальных гипоксических поражений ЦНС у новорожденных детей на различных возрастных этапах.
Ключевые слова: новорожденные, клеточный энергообмен, кариометрия, интерлейкины, ФНО-а, кортизол, нейронспецифи-ческая енолаза, перинатальное гипоксическое поражение центральной нервной системы.
The authors conducted follow-up clinical and comprehensive studies of cell energy metabolism in peripheral blood lymphocytes, the content of DNA in the nuclei of lymphocytes by karyometry, the levels of interleukins, tumor necrosis factor-а, the concentrations of neuron-specific enolase and cortisol in the serum and cerebrospinal fluid of 50 full-term newborn infants with severe perinatal hypoxic damage to the central nervous system (CNS). The importance of a relationship between the parameters under study in the pathogenesis of disease was defined. Diagnostic and prognostic criteria for perinatal hypoxic CNS lesions were ascertained in neonatal infants at different ages.
Key words: newborns, cell energy metabolism, karyometry, interleukins, tumor necrosis factor-a, cortisol, neuron-specific enolase, perinatal hypoxic damage to the central nervous system.
Современное развитие педиатрии и перинатальной неврологии характеризуется определенными успехами в изучении критериев ранней диагностики и оценки тяжести гипоксического поражения ЦНС [1, 2]. Перинатальная гипоксия является пусковым механизмом в цепи патологических реакций, приводящих к широкому спектру нейросоматических отклонений в последующие возрастные периоды [3—5].
Частота диссоциаций морфологического дефекта и его клинических проявлений обусловливает необходимость проведения исследований с определением диагностических маркеров степени тяжести, особенностей формирования патологического процесса и отдаленных последствий гипоксического поражения ЦНС у доношенных детей [6—10]. Все это диктует необходимость бо-
© О.П. Ковтун, Н.Е. Громада, 2012
Ros Vestn Perinatal Pediat 2012; 4 (2):26-32
Адрес для корреспонденции: Ковтун Ольга Петровна — д.м.н., проф., зав. каф. педиатрии и неонатологии, проректор по науке Уральской государственной медицинской академии
Громада Наталья Евгеньевна — д.м.н., доц. той же кафедры 620219 Екатеринбург, ул. Репина, д. 3
лее углубленного изучения механизмов церебральных расстройств у новорожденных, особенно в период обратимых изменений в головном мозге, с выделением диагностических и прогностических критериев структурных дефектов ЦНС и разработкой тактики ведения таких детей [11—15].
Новые возможности в данном направлении открывает комплексное определение активности ферментов клеточного энергообмена, количества ДНК в ядрах лимфоцитов, исследование цитокининдуцированных и цитокин-гормональных реакций, субпопуляционного состава лимфоцитов, нейронспецифической енолазы. Лимфоцит как интегративная, информационная, мигрирующая, иммунокомпетентная клетка является универсальной моделью для исследования механизмов взаимодействия клеточного энергообмена, иммунной, нервной, эндокринной систем при гипоксическом поражении ЦНС у детей [16—22].
ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕТЕЙ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Исследование проводили на базе отделения ново-
рожденных родильного дома городской клинической больницы №14 и отделений патологии новорожденных № 1 и 2 городской детской больницы № 5 Екатеринбурга, специальные исследования — в ЦНИЛ Уральской государственной медицинской академии.
Обследованы 50 доношенных новорожденных (26 мальчиков и 24 девочки) в раннем неонатальном периоде с тяжелой степенью гипоксического поражения ЦНС, не осложненного инфекционно-воспали-тельным процессом. Контрольную группу составили 45 здоровых новорожденных без поражения ЦНС. Критериями исключения явилось наличие у новорожденных врожденных пороков развития, недоношенности и травматических поражений ЦНС. Все дети были обследованы по общим клиническим и нейрофизиологическим методикам согласно рекомендательным стандартам. Диагноз устанавливали на основании данных анамнеза, оценки неврологического статуса в соответствии с классификацией перинатальных поражений нервной системы у новорожденных [23].
Активность дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови выявляли количественным цитохимическим методом по Р. П. Нарциссову (1969, 1997). Цитохимическое определение активности ферментов энергообмена (сукцинат-, а-глицерофосфат-, глута-мат-, лактат-, малатдегидрогеназы) в лимфоцитах периферической крови проводили наборами реактивов фирмы ООО МНПК «Химтехмаш», ГосНИИ «ИРЕА». Использовалась визуальная модификация метода.
Количественное определение ДНК в ядрах лимфоцитов периферической крови (кариометрия) проводили с помощью компьютерных микротелефотометрических автоматизированных систем, с математическим моделированием гистопатологического процесса. Количество ДНК в ядрах лимфоцитов периферической крови вычислялось по плотности окрашивания ядер с построением гистограмм в относительных единицах — пикселях. В каждом препарате вычисления производились не менее чем по 25 ядрам. Число единиц наблюдения в выборках определялось по таблице Г. Г. Автандилова, автора методологии медицинской морфометрии — пло-идометрии лимфоцитов (1990, 2002).
Количественное определение субпопуляций лимфоцитов осуществляли методом непрямой иммуно-флюоресценции с использованием моноклональных антител. Концентрацию интерлейкинов (ИЛ) в сыворотке крови и спинномозговой жидкости определяли на тест-системах ELISA-IL-4, ELISA-IL-6, ELГSA-TNFа, Ш-1р производства ООО «Протеиновый контур» (Санкт-Петербург), методом твердофазного им-муноферментного анализа.
Для исследования концентрации кортизола в сыворотке крови и ликворе использовали метод имму-ноферментного анализа и наборы реактивов тест-системы HUMANELISA (Германия). Количественное определение нейронспецифической енолазы в сыво-
ротке крови и ликворе проводили, используя тест ив ШAGГWELtmNEURONSPECIFICENOLASEQUAN TITATIVECM-901, основанный на принципе твердофазного иммуноферментного анализа.
Исследование состояло из трех этапов. На первом этапе обследование детей проводили в раннем неонатальном периоде (1—3—5—7-е сутки жизни), на втором — в возрасте 28 дней — 1 мес, на третьем — в возрасте 3—6 и 12 мес.
Статистическая обработка материала проводилась методом вариационной статистики с использованием программ М1сго80ЙЕхсе1. Достоверность полученных результатов оценивалась парным методом по ^кри-терию Стьюдента, также использовался непараметрический критерий Манна — Уитни и метод Фишера (различия считались достоверными при р<0,05). Для анализа данных применялись методы суммарных статистик, корреляционного, множественного регрессионного анализа. Для построения решающего правила прогноза по предложенной выборке были использованы математические методы распознавания образов, реализованные в пакетах STATGRAPH, КВАЗАР, КВАЗАР-ПЛЮС (разработанные Институтом механики и математики УрО РАН).
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Анализ анамнестических данных показал, что наибольшую значимость в развитии тяжелых церебральных нарушений у новорожденных имели отягощенный акушерско-гинекологический анамнез матерей, патологическое течение анте- и интрана-тального периодов: поздние гестозы, хроническая фетоплацентарная недостаточность, артериальная гипертензия, слабость родовой деятельности, длительный безводный период, экстренное кесарево сечение, обвитие пуповины вокруг шеи (р<0,05). Тяжесть гипоксического поражения ЦНС у этих детей была сопряжена с интранатальной асфиксией тяжелой степени (74,5%) и синдромом дыхательных расстройств, что обусловило необходимость расширения объема первичных и реанимационных мероприятий в родильном зале, в том числе проведение искусственной вентиляции легких.
У доношенных новорожденных данной группы наблюдали обширный спектр неврологических расстройств: прогрессирующую потерю церебральной активности (85,2%) вплоть до комы — у 10,4%, повторные судороги — у 12,1%, наличие стволовой симптоматики — у 41,6%, прогрессирующей внутричерепной гипертензии — у 44,2%, выраженных вегетативно-висцеральных нарушений — у 35,6% детей. Изменения ишемического характера выявлены у 97,9% детей. Частота внутрижелудочковых кровоизлияний II степени составила 31,6%, кровоизлияний III степени — 4,02%.
Анализ показателей активности дегидроге-наз в лимфоцитах показал, что в остром периоде заболевания (1—3-и сутки жизни) у новорожденных с тяжелой церебральной гипоксией отмечалось повышение активности сукцинат-и а-глицерофосфатдегидрогеназы, лактат- и глута-матдегидрогеназы (р<0,001). Тогда как к концу первого месяца жизни наблюдалось снижение активности сукцинат-, а-глицерофосфат-, лактатдегидрогеназы (р<0,001) с «депрессией» клеточного энергообмена на фоне лимфоцитопении (г=0,92, г=0,84, г=0,71) и повышение активности малат- и глутаматдегидро-геназы по сравнению с группой контроля (рис. 1, 2). Возможно, это отражает угнетение аэробного и анаэробного путей метаболизма и является для клетки энергетической «катастрофой» [24]. Не исключено, что повышение активности малат- и глутаматдеги-дрогеназы в условиях гипоксии свидетельствовало о компенсаторной «попытке» активизировать функционирование других путей метаболизма (р<0,001).
В возрасте 1 мес у детей с тяжелой церебральной гипоксией определялась корреляционная прямая связь между нарушением энергетического клеточного метаболизма (по показателям а- глицерофосфат-, сук-цинатдегидрогеназы) и снижением уровня кортизола в крови (г=0,78; г=0,82). На следующих этапах иссле-
Рис. 2. Динамика показателей цитохимической активности клеточного фермента лактатдегидрогеназы в лимфоцитах у детей с тяжелым перинатальным гипоксическим поражением ЦНС.
дования в течение первого года у детей данной группы состояние энергообмена характеризовалось дефицитом активности митохондриальных ферментов сукци-нат-, а-глицерофосфатдегидрогеназы и повышением активности глутаматдегидрогеназы (р<0,001).
Результаты кариометрии констатировали, что показатели оптической плотности ядер лимфоцитов периферической крови новорожденных являются маркерами степени тяжести церебральных нарушений. У новорожденных с тяжелой церебральной гипоксией в первые 3 сут жизни определялось снижение в 3 раза (р<0,001) среднего количества ДНК в ядрах лимфоцитов по сравнению с группой здоровых детей. Восстановление показателей наблюдалось только к 1 году жизни (рис. 3). По-видимому, повреждение ядер клеток с нарушением репликации ДНК в результате окислительного стресса можно рассматривать как один из пусковых механизмов апоптоза при тяжелом гипоксическом поражении ЦНС.
Количество ДНК в ядрах лимфоцитов коррелировало с показателями активности митохондриальных фер-
Рис. 1. Динамика показателей цитохимической активности митохондриальных ферментов сукцинатдегидрогеназы (а) и а-глицерофосфатдегидрогеназы (б) в лимфоцитах у детей с тяжелым перинатальным гипоксическим поражением ЦНС.
Рис. 3. Динамика средних величин оптической плотности ядер лимфоцитов (кариометрия) у детей с тяжелым перинатальным гипоксическим поражением ЦНС.
Рис. 4. Динамика показателей ИЛ-1р (а), фактора некроза опухоли-а (б), ИЛ-4 (в), ИЛ-6 (г), CD95+ (д) в крови у детей с тяжелым перинатальным гипоксическим поражением ЦНС на первом году жизни.
ментов сукцинат- и а-глицерофосфатдегидрогеназы (г=0,67; г=0,69) и уровнем кортизола в крови и лик-воре (г=0,82). Корреляционный анализ выявил наличие обратной связи между параметрами кариометрии и уровнем фактора некроза опухоли-а, ИЛ-1р, СD95+, нейронспецифической енолазы (г = —0,84; г = —0,76; г = —0,85; г = —0,75) в остром периоде заболевания.
Исследования иммунного профиля у новорожденных в раннем неонатальном периоде с тяжелым гипоксическим поражением ЦНС достоверно показали увеличение количества субпопуляций лимфоцитов СD8+, СD16+, СD25+, СD20+, СD25+, СD95+, моноцитов на фоне высоких значений концентрации ИЛ-1р, фактора некроза опухоли-а, ИЛ-4, ИЛ-6 в сыворотке крови и спинномозговой жидкости (р<0,001) и формирование «иммунологической декомпенсации» с дефицитом моноцитов и субпопуляций лимфоцитов СD8+, СD20+, СD3+, СD4+ у новорожденных в возрасте 1 мес (рис. 4). Высокие значения коэффициента корреляции зарегистрированы между уровнем фактора некроза опухоли-а, ИЛ-1р, СD95+ и показателями сукцинат- и а-глицерофосфатдегидрогеназы соответственно: г = —0,82; г = —0,78; г = —0,88; г = —0,79; г= —0,89; г= —0,91. Изменения концентрации ИЛ-1р, фактора некроза опухоли-а, ИЛ-4, наблюдаемые в не-онатальном периоде, носили стойкий характер, а достижение уровня возрастных нормативных значений отмечалось после 6-месячного возраста (р<0,05).
При анализе изменения активности нейронспеци-фической енолазы в течение 1 года установлено, что ее высокие показатели в крови и спинномозговой жидкости в раннем неонатальном периоде являются диагностическими и прогностическими критериями развития тяжелых неврологических нарушений (табл. 1). Значительное проникновение нейронспецифической енолазы через поврежденные плазматические мембраны клеток мозга и гематоэнцефалический барьер в спинномозговую жидкость и кровь при перинатальных поражениях ЦНС может свидетельствовать о глубине и интенсивности структурно-функциональных и деструктивных нарушений цитомембран мозга.
В условиях тяжелой гипоксии цитокины оказывают стимулирующее и подавляющее влияние на продукцию гормональных медиаторов, в том числе кортизола. В остром периоде заболевания между концентрацией ИЛ-1р, фактора некроза опухоли-а, ИЛ-6 и уровнем кортизола в обеих средах существуют обратные корреляционные связи (г = —0,85; г= —0,79; г= —0,67; р<0,05). У детей с тяжелым поражением ЦНС определялось значительное увеличение уровня кортизола в крови и спинномозговой жидкости (р<0,001) в первые 3 сут жизни, снижение к 5—7-му дню жизни (р<0,05), сохранение низких значений в течение 1 мес с нормализацией показателей к 6-му месяцу жизни (табл. 2). У новорожденных данной группы уровень кортизола в спинномозговой
Таблица 1. Показатели концентрации нейронспецифической енолазы в крови (в мкг/л) в динамике у детей с гипоксическим поражением ЦНС тяжелой степени
Возраст детей Основная группа (n=50) Группа контроля (n=45) Достоверность различий, р
1—3 дня (а) 71,6+2,86 18,5+0,05 <0,001
5—7 дней (б) 70,82+2,9 18,81+0,05 <0,001
1 мес (в) 60,7+2,78 15,91+0,04 <0,001
3—6 мес (г) 41,49+1,42 14,02+0,04 <0,001
1 год (д) 32,75+1,32 12,48+0,05 <0,0016
Достоверность различий, р<0,05 а:г, а:д, б:г, б:д, в:д, г:д n<0,05
Таблица 2. Динамика показателей уровня кортизола в крови (в нмоль/л) у детей с тяжелым гипоксическим поражением ЦНС
Возраст детей Основная группа (n=50) Группа контроля (n=45) Достоверность отличий, р
1—3 дня (а) 1100+19,52 303,8+8,52 <0,001
5—7 дней (б) 86,25+9,15 275,6+1,18 <0,001
14 дней (в) 127,6+1,58 267,8+2,96 <0,002
1 мес (г) 109,1+2,48 239,4+7,8 <0,003
3—6 мес (д) 230,5+5,82 232,5+6,7 >0,05
Достоверность различий, р<0,001 а:б, а:в, а:г, а:д, б:в, б:г, б:д, в:г, в:д, г:д — р<0,018 а:б, а:в, а:г, а:д, б:в, б:г, б:д, в:г, в:д — р<0,016
жидкости в остром периоде заболевания и в конце неонатального периода не имел достоверных отличий от аналогичных показателей в сыворотке крови (p>0,05). Наличие представленных корреляционных связей между продукцией кортизола и уровнем ци-токинов в крови и спинномозговой жидкости указывает на связующее звено цитокиновой регуляторной сети в механизмах реализации нейроиммуно-эндо-кринного модулирования и деструктивных процессов при церебральной гипоксии у новорожденных.
Результаты исследования показателей цитохимической активности ферментов энергообмена лимфоцитов, определения количества ДНК в ядрах лимфоцитов, иммунологических, цитокин-гормональных реакций, нейробиохимических маркеров позволили установить наличие их взаимосвязи в неонаталь-ном периоде и продемонстрировать их диагностическое и прогностическое значение у доношенных детей с тяжелым гипоксическим поражением ЦНС. Применение статистических методов анализа, выявление парных и множественных корреляций вышеописанных результатов исследований стало основанием для определения значимых информативных признаков неонатального периода в формировании патологических деструктивных процессов и дало возможность представить вероятность прогноза на всех этапах наблюдения.
Проспективное динамическое наблюдение детей с тяжелым перинатальным гипоксическим поражением ЦНС показало, что в возрасте 1 года выздоровление наступило почти у Уз детей (29,1%), функцио-
нальные нарушения составили 22,8%, органические - 48,1%. Функциональные расстройства у всех наблюдавшихся детей были представлены симптомами дисфункции вегетативной нервной системы (более чем у Уз детей) и диссомний (у большинства). В структуре неблагоприятных исходов церебральная органическая недостаточность отмечалась в виде сочетания синдромов двигательных нарушений, задержки психомоторного развития (более чем у половины детей). У 11,4% детей с тяжелым поражением ЦНС сформировалась инвалидность, которая включала следующую патологию: детский церебральный паралич, эпилепсию и окклюзионную гидроцефалию. Основными структурными повреждениями головного мозга у детей в возрасте 1 года, по данным ней-ровизуализации, были расширение межполушарной щели и вентрикуломегалия (почти у половины больных), перивентрикулярная лейкомаляция, субкортикальная лейкомаляция и атрофия коры (в отдельных случаях).
Таким образом, комплексное исследование активности ферментов клеточного энергообмена, количества ДНК в ядрах лимфоцитов, цитокининдуцирован-ных и цитокин-гормональных реакций, определение субпопуляционного состава лимфоцитов при гипок-сическом поражении ЦНС открывает новые возможности для понимания патогенеза перинатальных поражений ЦНС. Дальнейшее исследование основных закономерностей динамики этих показателей будет способствовать оптимизации мероприятий по терапии и реабилитации детей с данной патологией.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Можно полагать, что качественные изменения энзиматической активности на уровне популяций иммунных клеток могут изменить пути реализации нейроиммунного ответа при тяжелом гипоксическом перинатальном поражении ЦНС. Изменения уровня энергетического метаболизма, с одной стороны, увеличивают вероятность одного из путей (диффе-ренцировки), по которому может пойти иммуно-компетентная клетка, с другой — модифицируют ее функциональную активность. Это согласуется с предположениями других авторов о том, что при церебральной гипоксии количественные изменения в по-пуляционном составе лимфоцитов не являются первичными, гораздо раньше патологические изменения возникают на клеточном и субклеточном энергетическом уровнях [15, 16].
У доношенных детей в остром периоде перинатальной церебральной гипоксии информативными признаками, позволяющими прогнозировать с чувствительностью 86,1% и специфичностью 95,4% формирование органического поражения ЦНС, являются: длительность безводного периода (более 12 ч), слабость родовой деятельности, проведение незапланированной (экстренной) операции кесарева сечения, наличие ишемии III степени и вну-трижелудочкового кровоизлияния III степени, продолжительность искусственной вентиляции легких
более 7 дней, снижение активности ферментов сук-цинат-, a-глицерофосфат-, лактатдегидрогеназы, содержания кортизола в крови, низкие параметры кариометрии, повышение уровня ИЛ-lß, фактора некроза опухоли-а, ИЛ-4, концентрации нейронспецифической енолазы в крови и ликворе, увеличение количества субпопуляций лимфоцитов CD95+, CD16+ по сравнению с показателями у здоровых детей.
Установлено, что снижение цитохимической активности указанных ферментов в лимфоцитах периферической крови соответствует уменьшению количества ДНК в ядрах лимфоцитов и является маркером степени тяжести церебральных нарушений. Недостаточность энергообеспечения иммунокомпетентных клеток, по-видимому, лимитирует восстановление их функций. Не исключено, что цитокины, обладающие высокой биологической активностью, оказывают регулирующее влияние на процессы репарации и повреждения ДНК иммунокомпетентных клеток и включают механизмы формирования иммунной недостаточности. Возможно, опосредованное цито-кинами и нарушением энергообмена количественное снижение ДНК в ядрах лимфоцитов в условиях гипоксии сопровождается нарушением трансформации пролимфоцитов в полноценные лимфоциты, которые участвуют в иммунных реакциях и процессах клеточного энергетического метаболизма центральной нервной системы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Володин Н.Н. Перинатальная неврология — проблемы и пути решения. Общие вопросы неврологии и психиатрии 2009; 10: 4—8.
2. Володин Н.Н, Дегтярева М.В., Симбирцев А.С. и др. Роль про- и противовоспалительных цитокинов в иммунной адаптации новорожденных детей. Int J Immunorehabil 2000; 2: 1: 176—184.
3. Воробьева Е.А., Филькина О.М., Долотова Н.В. и др. Особенности развития детей раннего возраста с перинатальными поражениями центральной нервной системы. Конгресс педиатров России «Актуальные проблемы педиатрии», 11-й: Сборник материалов. М 2007; 142.
4. Пиянзин А.И., Федоров А.В., Акинина З.Ф. и др. Физическое развитие новорожденных с различными клиническими формами перинатального поражения центральной нервной системы. Рос педиат журн 2008; 1: 14—16.
5. Сигова Ю.А., Рогаткин С.О., Володин Н.Н. и др. Влияние перенесенной гипоксии-ишемии на частоту развития ВЖК у детей различного гестационного возраста. Ежегодный Конгресс специалистов перинатальной медицины «Современная перинатология: организация, технологии и качество», 5-й: Материалы (Москва, 27—29 сентября 2010 г.). Вопр практич педиат 2010; 1: 75—76.
6. Ковтун О.П., Гуляева С.П. Иммунологические аспекты течения перинатального повреждения головного мозга гипоксического генеза у доношенных детей на первом году жизни. Вопр соврем педиат 2006; 1: 269.
7. Bracci R, Perrone S., Buonocore G. The timing of neonatal brain damage. Biol Neonate 2006; 90: 3: 145—155.
8. Зубарева О.Е., Федотова Е.Б., Симбирцев А.С. и др. Повышение уровня провоспалительных цитокинов в крови в раннем постнатальном онтогенезе вызывает отдаленные нарушения гомеостатических и когнитивных функций. Рос иммунол журн 2008; 2—3: 154.
9. Попова И.Г., Чаша Т.В., Кузьменко Т.Н. и др. Клинико-ла-бораторная оценка функции эндотелия при развитии перинатальных поражений ЦНС у новорожденных от матерей с гестозом. Рос вестн перинатол и педиат 2010; 4: 18—22.
10. Futrakul S., Praisuwanna P., Thaitumyanon P. Risk factors for hypoxic-ischemic encephalopathy in asphyxiated newborn infants. J Med Assoc Thai 2006; 89: 3: 322—328.
11. Гончарова О.В., Баканов М.И., Муталов А.Г. и др. Современные биохимические критерии диагностики перинатальных гипоксических поражений ЦНС у новорожденных детей. Рос педиат журн 2007; 4: 13—18.
12. Софронов В.В., Туаева Н.О., Винтер В.Г. и др. Изменение содержания ядерной и внеклеточной ДНК у новорожденных с клиническими проявлениями нарушения адаптации в раннем неонатальном периоде. Вопр соврем педиат 2006; 6: 28—31.
13. Suzuki M., Hayakawa F., Okumura A. et al. High incidence of fatal cytokine-related disease among children with seguelae of perinatal hypoxic-ischemic encephalopathy. No ToHat-tatsu 2006; 38: 6: 439—442.
14. Radaelli T. Maternal interleukin-6: marker of fetal growth and adiposity. J Soc Gynecol Investig 2006; 13: 1: 53—57.
15. Znamenska T.K., Pokhylko V.I, Kovalova O.M. Peculiarity of cell energy metabolism in newborns with hypoxic-ischemic encephalopathy caused by asphyxia. Lik Sprava 2007; 8: 40—44.
16. Aly H, KhashabaM.T., El-Ayouty M. etal. IL-lbeta, IL-6 and TNF-alpha and outcomes of neonatal hypoxic ischemic encephalopathy. Brain Dev 2006; 28: 3: 178—182.
17. Quiniou C, Kooli E, Joyal J.S. et al. Interleukin-1 and ischemic brain injury in the newborn: development of a small molecule inhibitor of IL-1 receptor. Semin Perinatol 2008; 32: 5: 325—333.
18. Воеводин Д.А., Розанова Т.Н. Цитокиногормональные взаимодействия: положение об иммуноэндокринной ре-гуляторной системе. Педиатрия 2006; 1: 95—102.
19. Царегородцев А.Д., Сухорукое В.С. Актуальные проблемы и перспективы развития диагностических технологий в педиатрии. Рос вестн перинатол и педиатр 2006; 1: 3—9.
20. Сухорукое В.С. Нарушение клеточного энергообмена у детей. Рос вестн перинатол и педиатр 2002; 5: 44—50.
21. Николаева Е.А., Сухоруков В.С. Современная диагностика митохондриальных болезней у детей. Рос вестн перинатол и педиат 2007; 4: 11—21.
22. Salih M.A., Abdel-Gader A.G., Zahraa J.N. et al. Stroke due to mitochondrial disorders in Saudi children. Saudi Med J 2006; 27: 1: 81—90.
23. Классификация перинатальных поражений нервной системы новорожденных: метод. рекомендации. ВУНМЦ МЗ РФ. М 2000; 40.
24. Чугуноеа О.Л., Сухоруков В.С., Казанцева И.А. и др. Метаболическая коррекция нарушений клеточного энергообмена у детей с задержкой внутриутробного развития в неонатальном периоде. Рос вестн перинатол и педиат 2008; 2: 13—18.
Поступила 13.05.12
