CC BY
35
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
взаимодействие которых запускает ряд механизмов, приводящих в конечном итоге к развитию воспалительного процесса и формированию псориатических поражений кожи. Особое внимание уделяется участию в патогенезе псориаза клеткам-супрессорам миелоидного происхождения (MDSCs) и регуляторным Т-клеткам (Teg). MDSCs относятся к гемопоэтической линии и представляют собой гетерогенную популяцию ранних миелоид-ных клеток-предшественников. Результаты исследования MDSCs у взрослых, больных псориазом, и здоровых пациентов показали, что MDSCs значительно увеличиваются в крови пациентов с псориазом по сравнению со здоровыми лицами. MDSCs участвуют в привлечении и поддержке Treg.
Цель. Оценить количество MDSCs, Treg, act-Th и ТЫ7-лимфоцитов (ТЫ7-лф) периферической крови у детей с псориазом в зависимости от возраста и длительности заболевания.
Материалы и методы. Обследовано 54 пациента с тяжелым течением псориаза. Степень тяжести псориаза оценивали с помощью индекса PASI(> 12 баллов). Группа сравнения (гр. ср.) составила 32 человека. Возраст пациентов составил 2-17 лет. Всем детям провели количественную оценку популяций MDSCs (CD11b+CD33+HLA-DR-), ТЫ7-лф. (CD3+CD4+CD161+CD45+), Treg (CD3+CD4+ CD127low+CD45+), act-Th (CD3+CD4+CD127h+CD45+) на проточном цитометре BD FACSCanto™ (США) и CYTOMICS FC500 (Beckman Coulter, США). Статистическая обработка полученных результатов была выполнена с помощью пакета Statistica 6.0, критерий Манна—Уитни, данные представлены в виде медиана [верх.; ниж. квартиль].
Результаты. Количество MDSCs у детей с псориазом находилось в диапазоне от 18 до 211 кл/мкл и было достоверно больше, чем в группе сравнения (пациенты с псориазом — 65 [92; 43] кл/мкл; гр. ср. - 50 [61; 35] кл/мкл; р = 0,013), что согласуется с данными у взрослых пациентов с псориазом. Проведенный анализ не выявил зависимости количества MDSCs от возраста пациентов как в группе детей с псориазом, так и в группе сравнения. Получено, что количество MDSCs зависит от длительности заболевания. Максимальное количество MDSCs наблюдалось у детей, болеющих менее 3-х лет, и составляло 75 [121; 43] кл/мкл. При длительности заболевания более 6 лет, количество MDSCs уменьшалось на 40%. Корреляционный анализ выявил обратную зависимость между количеством MDSCs и содержанием ТЫ7-лф и act-Th (% CD4), при этом зависимости между MDSCs и Treg-лф обнаружено не было. Анализ абсолютного количества супрессорных клеток (MDSCs + Treg) показал, что с увеличением длительности заболевания количество этих клеток уменьшается (r = -0.39). Динамическое наблюдение детей с псориазом, не отвечающих на терапию, показало увеличение количества MDSCs.
Выводы. Таким образом, анализ количества клеток-су-прессоров у детей с тяжелым течением псориаза показал, что в первые годы заболевания иммунная система активно отвечает на патологический процесс увеличением количества MDSCs в циркуляции. Длительное течение заболевания приводит к снижению ответной реакции, что выражается в уменьшении количества MDSCs на фоне повышения содержания аутоагрессивных ТЫ7-лф и активированных Т-хелперов, что сопровождается утяжелением состояния пациентов. Дальнейшее изучение клеток-супрессоров мие-лоидного происхождения должно быть направлено на оценку их функциональной и метаболической активности.
ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО СТАТУСА ЖЕНЩИН СТАРШЕЙ ВОЗРАСТНОЙ ГРУППЫ С ОСТЕОАРТРОЗОМ, СОПРОВОЖДАЮЩИМСЯ ОСТЕОПЕНИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ
Гладкова Е.В., Карякина Е.В., Бабушкина И.В., Белова С.В., Царева Е.Е., Персова Е.А.
НИИТОН ФГБОУВО «Саратовский МУ им В.И. Разумовского» Министерства здравоохранения РФ, Саратов, Россия
Введение. Остеоартроз (ОА) крупных суставов — распространенная группа полиэтиологических заболеваний с широкой распространенностью (до 20% населения) и высокой степенью инвалидизации пациентов, что формирует существенную медико-экономическую нагрузку на общество. Значительная доля пациентов — женщины старшей возрастной группы, у которых течение ОА сопровождается выраженными нарушениями ремоделиро-вания костной ткани, что в значительной степени усугубляет течение основного заболевания, поражающего все суставные структуры, усложняет лечение и ухудшает прогноз. Особенности патофизиологических механизмов прогрессирования поражения суставов обусловлены как местными, так и системными клеточными реакциями, действием гуморальных факторов в условиях выраженных воспалительно-дегенеративных изменений, что требует дополнительного изучения.
Цель. Изучение особенностей иммунных реакций у женщин с остеоартрозом, сопровождающимся остеопе-ническим синдромом.
Материалы и методы. В исследовании принимали участие 32 пациентки с остеоартрозом (ОА) в возрасте 6472 лет (с интерквартальной широтой — 69 лет), осложненным постменопаузальным остеопорозом (ОП) — опытная группа и 20 добровольцев — доноров без заболеваний опорно-двигательного аппарата (группа контроля). Всем участникам исследования в сыворотке крови проведено определение содержания цитокинов (TNFa, IL-1, IL-4, IL-6, IL-10), иммуноглобулинов основных классов (А, М, G) и показателей состояния костного метаболизма (уровня 25-гидроксивитамина D [25 (ОН) D], основного неколлагенового белка матрикса кости — остеокальцина и SerumCross Laps — фрагментов коллагена I типа) методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием спектрофотометра многофункционального Epochtm. Определение компонентов комплемента С3 и С4 проводили турбидиметрическим методом с использованием наборов CORMAY COMPLEMENT С 3 и CORMAY COMPLEMENT C4 и автоматического биохимического анализатора Sapphire 400. Статистическая обработка полученных результатов осуществлена с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.0.
Результаты. У пациенток опытной группы отмечено повышение (р < 0,05) уровня SerumCross Laps (0,56±0,04 нг/мл) по сравнению с показателями контрольной группы (0,39±0,03 нг/мл), снижение уровня остеокальцина (22,25±1,32 нг/мл) и (14,48±1,65 нг/мл) и сывороточного D [25 (ОН) D] — 25,6±7,3 и 52,7±9,2 нг/мл соответственно. Несмотря на выраженные воспалительные и дегенеративные процессы в пораженных суставах, определяющих аутоиммунный компонент, у пациенток с ОА выявляли лишь незначительное повышение С3, не достигавшее существенных отличий от аналогичных значений в контрольной группе, а также разнонаправленные колебания уровня С4, не
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Аутоиммунные заболевания Autoimmune diseases
выходящие за пределы нормальных значений, характерных для данной возрастной группы. Вместе с тем, при изучении провоспалительных сывороточных цитокинов обнаружено существенное повышение их содержания у пациенток опытной группы по сравнению с контрольными значениями: TNFa (4,24±0,69 и 8,94±0,91 пг/мл) и IL-1 (6,4±0,3 и 4,8±0,1 пг/мл) соответственно. В содержании противовоспалительных цитокинов у женщин с ОА и ОП констатированы разнонаправленные изменения. В опытной группе на фоне увеличения (р < 0,05) содержания IL-10 отмечалось некоторое угнетение синтеза и накопления в биологических жидкостях IL-6, что в определенной степени связано с ограничением в реализации стимулированного иммунного ответа и подавлением выработки Т-клетками медиаторов про-воспалительного звена. Кроме того, у пациенток опытной группы отмечали повышенное содержание (19,8±0,22 г/л) IgG. Проведенный корреляционный анализ выявил наличие значимых взаимосвязей между изученными показателями ремоделирования костной ткани и концентрацией провоспалительных цитокинов в сыворотке крови.
Заключение. Особенности иммунного статуса пациенток старшей возрастной группы с ОА и остеопеническим синдромом характеризуются наличием неспецифических иммуновоспалительных изменений и выраженным дисбалансом про- и противовспалительных цитокинов, что поддерживает и усугубляет нарушения ремоделирования костной ткани. Выявленные нарушения должны являться предметом направленной медикаментозной коррекции.
ОЦЕНКА ЛОКАЛЬНЫХ УРОВНЕЙ ЦИТОКИНОВ У ПАЦИЕНТОВ С ПАРОДОНТИТОМ НА ФОНЕ САХАРНОГО ДИАБЕТА II ТИПА
Голицына А.А., Югай Ю.В., Чагина Е.А.
ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, Владивосток, Россия
Введение. Воспалительные заболевания пародонта являются актуальной и нерешенной проблемой совре-
менной стоматологии. Сахарный диабет значительно повышает риск возникновения пародонтита, а также влияет на степень деструкции и интенсивность воспалительного процесса тканей пародонта (Зырянов Б.Н., 2014).
Цель. Оценка локальных уровней TNFa, IL-4, IL-17 и IFNy у пациентов с пародонтитом при нарушении углеводного обмена (сахарный диабет II типа) и без него.
Материалы и методы. Проведено обследование 65 больных в возрасте от 30 до 60 лет, распределенных на 2 группы: I группа — пациенты, страдающие сахарным диабетом II типа и пародонтитом различной степени тяжести, 30 человек; II группа — пациенты, страдающие пародонтитом различной степени тяжести без выявленной сопутствующей патологии, 35 человек. Контрольную группу составили практически здоровые добровольцы аналогичного возраста (20 человек). В качестве материала исследования использовались слюна и кровь, полученная из микроциркуляторного русла (МЦР) десны пациентов. Уровни TNFa, IL-4, IL-17 и IFNy определяли иммуно-ферментным методом с применением специфических реактивов R&D Diagnostics Inc (США) методом сэндвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. Учет результатов производили с помощью иммунофер-ментного анализатора Multiscan (Финляндия). Расчеты количества TNFa, IL-4, IL-17 и IFNy проводили путем построения калибровочной кривой с помощью компьютерной программы. Количество выражали в пг/мл. Статистическая обработка материала проведена с использованием программы SPSS v16.
Результаты. В таблице представлены локальные уровни исследованных цитокинов у пациентов с пародонти-том и сопутствующим сахарным диабетом II типа (1 группа) и больных пародонтитом без соматической патологии (2 группа).
В обеих исследуемых группах больных установлено увеличение TNFa, IL-4, IL-17 и IFNy в сравнении с контролем (р < 0,001). Анализ показателей между исследованными группами позволил установить более выраженное увеличение IL-4 у больных с пародонтитом на фоне сахарного диабета II типа в сравнении с пациента-
ТАБЛИЦА. ЛОКАЛЬНЫЕ УРОВНИ ЦИТОКИНОВ ПРИ ПАРОДОНТИТЕ У ПАЦИЕНТОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ II ТИПА И БЕЗ НЕГО (К ТЕЗИСАМ ГОЛИЦЫНОЙ А.А. И ДР.)
Показатели M±m пг/мл Контр. группа n = 20 1 группа Больные с пародонтитом и сахарным диабетом 2-го типа n = 30 2 группа Больные с пародонтитом n = 35
TNFa МЦР десны 8,15±0,3 73,5±1,8*** 98,75±2,5*** р1 < 0,01
Слюна 2,82±1,5 18,87±1,6*** 25,68±2,41***
IL-17 МЦР десны 4,61±0,7 99,26±3,6*** 103,23±2,6***
Слюна 10,93±0,1 74,93±3,5*** 88,4±2,3***
IFNy МЦР десны 15,31 ±0,3 133,9±2,13*** 180,4±1,3*** Р1 < 0,01
Слюна 12,41 ±1,5 223,9±3,3*** 225,4±4,5***
IL-4 МЦР десны 6,34±0,6 60,5±2,14*** 56,8±1,3***
Слюна 1,13±0,12 55,2±2,3*** 15,7±1,13*** < 0,001
Примечание. Статистическая достоверность различий с контрольной группой: * — р < 0,05, ** — р < 0,01, *** — р < 0,001; р1 — статистическая достоверность различий между группами пациентов.
