Особенности функциональной активности лёгочных макрофагов при лёгкой бронхиальной астме у детей Текст научной статьи по специальности «Науки о здоровье»

ОРИГИНАЛЬННЫЕ СТАТЬИ

ОСОБЕННОСТИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЁГОЧНЫХ МАКРОФАГОВ ПРИ ЛЁГКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЕ У ДЕТЕЙ

Бабайлов М.С., Брюхин Г.В., Жаков Я.И., Минина Е.Е. ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России

Актуальность. Бронхиальная астма (БА) является хроническим воспалительным заболеванием дыхательных путей, в котором принимают участие многие клетки и клеточные элементы [1]. Одна из популяций клеток - легочные макрофаги (ЛМ) - также участвует в развитии воспаления дыхательных путей и, более того, являются доминирующими иммунными клетками - эффекторами альвеолярного пространства и воздухо-проводящих дыхательных путей [2, 3]. Тем не менее, принимая во внимание важную роль в осуществлении метаболической и дренажной функций легких, а также участие в регуляции иммунного ответа, легочные макрофаги до сих пор остаются малоизученными, «теневыми» клетками в патогенезе бронхиальной астмы.

Цель исследования: комплексная оценка фагоцитарной активности легочных макрофагов, полученных из индуцированной мокроты детей с легкой персистирующей бронхиальной астмой.

Материалы и методы исследования: в исследование было включено 30 детей в возрасте от 5 до 15 лет:

- 1-я группа (п=10) - дети с контролируемым течением легкой персистирующей БА;

- 2-я группа (п=10) - дети с неконтролируемым течением легкой персистирующей БА;

- 3-я группа (п=10)- сравнения (дети без аллергических заболеваний).

Оценка контролируемости проводилась согласно критериям, изложенным в GINA пересмотра 2007 года [1].

Средний возраст обследованных детей (Ме) составил - 11,2±3,1 года; продолжительность заболевания в группах БА - 4,1±2,6 года.

Индукция мокроты проводилась с использованием гипертонического раствора хлорида натрия. Легочные макрофаги (ЛМ) из полученной мокроты выделялись общепринятым методом в нашей модификации (Пат. РФ № 2430362).

Фагоцитоз включает прежде всего поглощение и переваривание частиц. В связи с этим, фагоцитарную функцию ЛМ мы изучали по их способности к захвату сфер латекса. Определяли фагоцитарный показатель, отражающий процент ЛМ, содержащих частицы латекса, а также фагоцитарный индекс (количество частиц латекса в 100 макрофагах в перерасчете на 1 клетку), а также фагоцитарную активность.

Функционально-метаболическую активность ЛМ, отражающую бактерицидный потенциал, оценивали с помощью спонтанного и стимулированного НСТ-теста. Стимуляцию проводили с помощью инертных микросфер латекса. Для оценки лизосомальной активности использовался метод, основанный на инкубации мононукле-арных фагоцитов в среде, содержащей флюоресцирующий краситель акридиновый оранжевый, который вызывает избирательное свечение лизо-сом. О лизосомальной активности ЛМ судили на основании анализа числа акридинпозитивных клеток и индекса лизосомальной активности, отражающего среднюю активность лизосомальных энзимов.

Результаты исследования. Анализ полученных результатов позволяет сделать заключение, что у детей с БА изменяется функциональное состояние ЛМ.

Показатель Группа 1 Группа 2 Группа сравнения

Фагоцитарный индекс 16,15±5,21 13,43±5,24* 24,85±5,47

Фагоцитарный показатель 94,5% 94,5% 93,9%

Таблица 1.

Показатели фагоцитарной активности лёгочных макрофагов

П р и м е ч а н и е: * - значимость различий (р<0,05) с группой сравнения.

ПЕДИАТРИЧЕСКИЙ ВЕСТНИК ЮЖНОГО УРАЛА

49

Как видно из табл. 1, у детей 1-й группы (контролируемое течение БА) число фагоцитов (фагоцитарный показатель) практически не отличалось от группы сравнения. В то же время фагоцитарный индекс ЛМ у данной группы детей был ниже относительно группы сравнения.

У детей 2-й группы (неконтролируемое течение БА) фагоцитарный показатель так же практически не отличался от такового у детей группы сравнения. Наряду с этим у детей с неконтролируемым течением БА выявлено достоверное снижение фагоцитарного индекса от-

носительно группы сравнения. Обращает на себя внимание то, что у детей с контролируемым течением БА фагоцитарный индекс оказался ниже относительно группы сравнения на 35%, а у детей с неконтролируемым течением - на 46%.

Изучение способности ЛМ у детей с БА восстанавливать нитросиний тетразолий позволило выявить ту же закономерность. Как видно на рис. 1, интенсивность спонтанного НСТ-теста у детей с БА снижена относительно группы сравнения.

1,25 1,2 1,15 1,1

ж

1,19?

1,24«

Группа 1 Группа 2 Группа

сравнения

Рис. 1. Интенсивность спонтанного НСТ-теста (у.е.)

Активация макрофагов, связанная с процес- восстановлением его в диформазан, что положе-сом фагоцитоза, сопровождается существенным но в основу индуцированного НСТ-теста (см. рис. усилением поглощения нитросинего тетразолия и 2).

1,7 1,65 1,6 1,55 1,5

Группа 1 Группа 2 Группа сравнения

Рис. 2. Интенсивность индуцированного НСТ-теста (у.е).

Группа 1 Группа 2 Группа

сравнения

Рис. 3. Оценка лизосомальной активности ЛМ. П р и м е ч а н и е. Значимость различий (р<0,05): * - с группой сравнения, ** - с 1-й группой.

Как видно из рисунка, метаболическая ак- детельствуют более низкие показатели интенсив-тивность индуцированных ЛМ у детей с БА сни- ности НСТ-теста. Обращает на себя внимание тот жена относительно группы сравнения, о чем сви- факт, что у детей группы сравнения коэффициент

стимуляции НСТ-теста в ЛМ составил 1,47±0,34, в то же время у детей с контролируемым течением БА данный коэффициент оказался несколько выше и составил 1,49±0,47, а у детей с неконтролируемым течением - 1,38±0,32.

Киллинговая функция ЛМ во многом определяется уровнем активности лизосомальных энзимов, для оценки которой использован метод флюоресцентного зондирования [5]. Полученные результаты отражены на рис. 3.

Как видно из рисунка, число акридиноранж-позитивных клеток среди ЛМ у детей с БА ниже такового в группе сравнения. Обращает на себя внимание, что наименьшее число акридинпози-тивных ЛМ выявлено при неконтролируемом течении БА.

Наиболее важным индикатором лизосо-мальной активности является индекс, отражающий средний уровень лизосомальной активности из расчета на одну макрофагальную клетку (индекс лизосомальной активности). Установлено, что

индекс лизосомальной активности ЛМ детей с БА снижен относительно группы сравнения (1,59±0,32 в 1 -й группе и 1,48±0,22 во 2-й группе соответственно против 1,99±0,1).

Выводы.

1. У детей с БА имеет место снижение поглотительной способности ЛМ, о чем свидетельствует уменьшение фагоцитарного индекса.

2. При БА характерно угнетение киллинго-вой активности ЛМ, на что указывает, с одной стороны, снижение кислородозависимых бактерицидных механизмов (снижение интенсивности гистохимической реакции НСТ-теста), а с другой - угнетение лизосомальной активности (уменьшение числа акридинпозитивных клеток и индекса лизосомальной активности).

3. Нарушение фагоцитарной активности ЛМ можно рассматривать как одно из патогенетических звеньев, определяющих течение БА у детей.

Литература

1. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы. Пересмотр 2007 г. / под ред. А.Г. Чучалина - М.: Атмосфера, 2008. - 108 с.

2. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика». - 3-е изд., испр. и доп. - М.: Атмосфера, 2008. - 108 с.

3. Peters-Golden, M. The alveolar macrophage: the forgotten cell in asthma / M. Peters-Golden // Am J. Respir Cell Mol Biol, 2004. - Vol. 31. - № 1. - P. 3-7.

РОЛЬ СТАБИЛЬНЫХ КОНЕЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ ОКСИДА АЗОТА В ПАТОГЕНЕЗЕ АЛЛЕРГИЧЕСКОЙ РИНОПАТОЛОГИИ

Белобородов Д.Д. ГБОУ ВПО ЧелГМА Минздравсоцразвития России

Актуальность. Данные многочисленных эпидемиологических исследований позволяют судить о широкой распространенности аллергических заболеваний в различных регионах России, ими страдают в среднем до 25-35% населения (Богорад А.Е., 2000; Гуров А.В., 2008; Коче-това Ю.Н., 2003). Однако на территории Российской Федерации выявлены большие различия по общей заболеваемости аллергическими ринитами: 11,9% - в Москве (Здитовецкая Н.А., 1998), 25,5% - в Иркутске (Шевелюк И.М., 2001), в других регионах России - 12-24% (Ильина Н.И., Польнер С.В., 2001). Елкина Т.Н. (2000) констатирует, что распространенность аллергических ринитов в разных регионах нашей страны колеблется от 9,8 до 34%. По данным международного исследования астмы и аллергии у детей (The

International Study of Asthma and Allergies in Childhood (ISAAC)), эпидемиологическая картина аллергических заболеваний, включая аллергические риниты, в Российской Федерации за период с 1993 по 2000 год составила от 3,3 до 35% (в среднем 16,5%). При этом отмечается выраженная тенденция к ежегодному увеличению частоты аллергических заболеваний. Исследования, проведенные в России, свидетельствуют о том, что заболеваемость аллергическими ринитами возросла в 4-6 раз и пик ее приходится на молодой возраст - 18-24 года (Баранов А.А., Богомильский М.Р, 2002; Масюк В.С., Хурцилава О.Г., 2008). Как показали исследования, более всего подвержены воздействию неблагоприятных условий дети, ведь ряд физиологических особенностей предопределяет ограниченную защищённость