CC BY
20
свиней / О.А. Тарасенко, Е.Н. Головко, С.И. ных животных. - 2009. - № 1. - С. 49-57.
Кононенко // Проблемы биологии продуктив-
ВЛИЯНИЕ ВИТАМИННО-ФЕРМЕНТНЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ПОРОСЯТ
Манохин А. А., Резниченко Л.В., Карайченцев В.Н.
Резюме
В статье рассматривается возможность замены в рационах поросят известных ферментных препаратов (Агроцелл и Агрофит) на новые витаминно-ферментные комплексы. В опытах на поросятах установлена высокая фармакологическая эффективность витаминно-ферментного комплекса, основой ферментов которых было сырье из желез сельскохозяйственной птицы. После его применения среднесуточные приросты поросят повысились на 2,4% по сравнению с контролем. В сыворотке крови уровень белка увеличился на 13,9 %, активность аспартатаминотрансферазы и щелочной фосфатазы до физиологической нормы снизилась на 22,2 и 17,9% соответственно. На основании проведённых исследований мы рекомендуем вводить в рационы поросят-отъёмышей разработанный нами витаминно-ферментный комплекс из расчёта 1,0 кг/т комбикорма, заменяя им стандартные ферментные добавки.
INFLUENCE OF VITAMIN-ENZYMATIC DRUGS ON PIGLET'S PHYSIOLOGICAL
CONDITION
Manokhin А.А., Reznichenko L. V., Karaichenzev V. N.
Summary
Replacement opportunity in piglet's diets of famous enzymatic drugs (Agrotsell and Agrofit) on new vitamin-enzymatic drugs is discussed in the article. Experiments on piglets have defined high pharmacological effectiveness of vitamin-enzymatic complex, based on enzyme, which consist of poultry glands. After its using an average daily gain of piglets have increased on 13,0% and the amount of aspartate aminotransferase and alkaline phosphatase decreased to physiological standard (on 22,2 and 17,9 respectively). Based on the results conducted, we recommended to add diets our developed vitamin-enzymatic complex in piglets according to 1,0 kg/t of mixed fodder and replace standard enzyme additives by our one.
УДК 599.733.1
ОСОБЕННОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КУЛЬТУР P. MULTOCIDA ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ
Полковниченко А.П. - к.б.н., доцент, Полковниченко П. А. - аспирант, Воробьев Д. В. - д.б.н., профессор, Воробьев В. И. - д.б.н. ФГБОУ ВО «Астраханский государственный университет»
Ключевые слова: пастереллез, культура, серотип, вирулентность, бактерионосители.
Key words: pasteurellosis, culture, serotype, virulence, carriers.
Пастереллез - инфекционное заболевание, поражающее домашних и диких животных. Оно характеризуется септицимией и геморрагическим воспалением слизистых оболочек кишечника и респираторного тракта. Наиболее частый путь заражения - алиментарный и аэрогенный. Болезнь протекает обычно сверхостро, остро, подостро и хронически. Период инкубации у животных может длится от нескольких часов до трех суток. По статистике летальность колеблется от 10 до 80 % [6]. Наиболее часто
заболевание поражает ягнят и мышей. При сверхостром течении гибель животных может наступить даже без проявления признаков болезни. В острых случаях заболевание характеризуется лихорадкой и катарально-фибринозным воспалением дыхательных путей, кашлем, насморком и геморрагическим энтеритом. Болезнь зачастую принимает и хроническое течение, при этом наблюдается исхудание, анемия и поражение суставов [6]. Пастереллез является недостаточно изученной патологией, которая
часто встречается в Астраханской области и поэтому исследование этого заболевания актуально для животноводства Нижней Волги. В фермерских хозяйствах области, где используется в основном замкнутая схема разведения животных наиболее часто имеет место хроническая форма болезни. Эта форма заболевания характеризуется в основном поражением респираторного тракта, гибелью ягнят, а так же снижением их продуктивности. При этом большое количество ягнят при бонитировке отбраковывается. Основным источником возбудителя инфекции в данных предприятиях являются животные -бактерионосители. Главной причиной респираторного пастереллеза в овцеводческих хозяйствах Астраханской области являются различные серологические варианты культур P. multo-cida. По данным В.Т. Котова (1974) [6], Колычева Н.М., Кисленко В.Н. (2010) [5], известно, что основная роль в этиологии заболевания у ягнят принадлежит P. multocida серотипов А и Д. Анализ данных, полученные сотрудниками кафедры ветеринарной медицины Астраханского государственного университета за 2012- 2017 годы, показывает, что пастереллы серотипа А выделяются гораздо чаще, чем серотипа Д.
Целью работы являлось изучение особенностей биологических свойств и серовари-антной принадлежности культур P. Multocida, полученных от заболевших ягнят с хроническими проявлениями респираторного тракта в условиях небольшого частного хозяйства.
Материалы и методы исследований. Работа выполнялась в условиях личного подсобного хозяйства «Дед Щукарь» Камызякско-го района Астраханской области. Поголовье овец на момент проведения исследования составляло 250 голов. При проведении общеклинического исследования поголовья овец было выделено 38 голов с клиникой хронического поражения дыхательных путей. В целях подтверждения диагноза, был проведен диагностический забой 5 голов овец. Для получения культуры P. Multocida, использовался биологический способ, в ходе которого из изьятых кусочков легких была приготовлена суспензия на физиологическом растворе в соотношении 1:5. Полученной суспензией в дозе 0,3см3, внутри-брюшинно было заражено 3 головы белых мышей. За подопытными животными велось наблюдение в течении пяти суток. С целью получения по возможности чистой культуры па-стерелл, был проведен забор крови из сердца клинически больных зараженных белых мышей и посев в МПБ, который инкубировали в термостате при температуре 37°С. Для того, чтобы подробнее изучить тинкториальные свойства
выделенных культур пастерелл, провели окраску мазков по Романовскому-Гимза, приготовленных из крови павших зараженных мышей. Суточные бульонные культуры были окрашены по Граму. Биохимические свойства полученных культур исследовали согласно общепринятым методикам [3]. В качестве изучения способности полученных микроорганизмов расщеплять сахара, в виде тест-обьектов были использованы углеводы: сахароза, глюкоза, мальтоза, ксилоза, галактоза, арабиноза и др.
Углеводы добавлялись в специальную среду, которая состояла из пептона 10гр., NaCl-5 гр., вода дистилированная 1000 см3 и индикатор Андреде 10 см3. Приготовленную таким образом питательную среду стерилизовали автокла-вированием при температуре 121°С - 15 минут, после чего добавлялись углеводы до 1 %. Перед этим углеводы были простерилизованы текучим паром в виде 10 % растворов по 30 минут, два дня - дробно [3]. Также было проведено определение сероводорода, индола, ферментов жела-тиназы, каталазы и уреазы - с целью изучения протеолитических свойств полученных культур. В ходе работы была проведена идентификация выделенных пастерелл несерологическим методом типирования, с использованием гиалурони-дазы стафилокка и акрифлавина. Для чего на поверхность кровяного агара в чашки Петри высевали суточную полученную культуру - для идентификации P. multocida серовара А. Затем перпендикулярно штриху посева засевалась суточная бульонная культура Staphilococcus aureus. Засеянные чашки Петри помещались в термостат для инкубации на 24 часа при температуре 37°С с целью проведения учета роста культур. Для идентификации P. multocida серо-вара Д, полученную культуру пастерелл высевали также на кровяной агар. При этом, инкубацию проводили 24 часа при температуре 37°С, после чего делался пересев в пробирки в которых содержался бульон Хоттингера в объеме 3 см3. В дальнейшем проводили инкубацию 18 часов, при 37°С. После чего полученные бульонные культуры помещались в центрифужные пробирки и центрифугировались 20 минут при 3000 оборот/мин. После центрифугирования сливали 2,5 см3 надосадочной жидкости, в осадок (осевшие клетки) добавляли свежеприготовленный водный раствор нейтрального акрифлавина 1:500 в объеме 0,5 см3. Затем раствор перемешивали и его оставляли при комнатной температуре на 20 минут, после этого проводили чтение реакции. Путем биологической пробы на белых мышах изучалась патоген-ность эпизоотических культур пастерелл. С этой целью использовалась 24 часовая бульонная
культура. Полученную культуру разводили физиологическим раствором 1:1, которую вводили подкожно в объеме 0,2 см3 трем белым мышам. За подопытными мышами велось наблюдение в течение 14 суток [5].
Результаты исследований. В ходе общеклинического обследования животных данного хозяйства мы констатировали хроническое поражение респираторного тракта. Клиника заболевания выражалась в угнетении животных, снижении аппетита, отставанием в росте, суб-фебрильной температурой тела порядка 39°С -39,5°С. У отдельных животных регистрировался серозно - катаральный коньюнктивит, а иногда и двусторонний гнойный ринит. При аускультации регистрировали жесткое везикулярное дыхание и мелкопузырчатые хрипы. Картина вскрытия показала увеличение медиа-стинальных и заглоточных лимфатических узлов, селезенки. На вскрытии отдельных трупов отмечалось скопление серозно-фибринозного эксудата в плевральной полости и очаги гнойно - фибринозного воспаления в легких. От заболевших ягнят было выделено 14 культур пастерелл. Полученные культуры микроорганизмов выглядели как мелкие коккобактерии. Их расположение разное, от одиночных, парных до коротких цепочек. При просмотре мазков крови из сердца убитых мышей, при окраске по Романовскому-Гимза - отмечалась биполяр-ность. Изучая мазки суточных бульонных культур, мы отмечали мелкие Грам(-) овоидные палочки. Изучая рост культуры в МПБ через 9 часов, мы отметили легкую опалесценцию, и «муаровые волны» при встряхивании, 8 - форма роста. Анализируя рост культур на вторые сутки, можно отметить нарастание помутнения бульона, осадок, который поднимался вверх в виде косички. В дальнейшем бульон просветлялся -3-4 сутки.
Таким образом, мы наблюдали переход культуры в М - форму. Изучая рост культур на МПА, можно отметить, что в течении трех суток разрастались мелкие и росинчатые колонии возбудителя, 8 - формы колоний. Затем колонии мутнели (4 - 5 день) и увеличивались в размерах. Таким образом, данная культура переходила в М - форму. В качестве эксперимента мы добавили к МПА 5 % дефибринированной крови, что резко повысило интенсивность роста. При этом колонии микроорганизмов сразу формировались в М-форму. Полученные колонии были слизистыми, непрозрачными, красно-коричневого цвета. Зоны гемолиза мы не 1. наблюдали.
Заключение. У полученных культур па-стерелл биохимические свойства различались.
Но при этом все культуры разлагали глюкозу, сахарозу, декстрозу, фруктозу, маннозу, галактозу до образования кислоты без газа. Полученные культуры микроорганизмов не сбраживали мальтозу, арабинозу, рамнозу, лактозу, рафино-зу, не расщепляли дульцит и инулин, глицерин, салицин, не свертывали молоко и не разжижали желатин. Все выделенные нами культуры пасте-релл были каталазоположительные, востанавли-вали нитраты до нитритов и были отрицательные реакции Фогеса - Проскауэра и с метиловым красным. Обобщив полученные результаты, мы идентифицировали выделенные культуры как Р. шико^а. Изучая полученные микроорганизмы пастерелл, мы провели их типизацию с использованием гиалуронидазы стафилококка. При этом, у 10 культур мы отметили уменьшение размера и полное отсутствие флюоресценции у колоний культур которые примыкали к линии роста стафилококков. Мы отметили это как признак Р. multocida серовара А. В результате типизации с использованием водного раствора акрифлавина, было установлено, что 4 полученные культуры выглядели как крупнохлопчатый флокулят - это признак Р. шиЬо-cida серовара Д. Выделенные нами культуры оказались патогенными для белых мышей. При этом 10 культур пастерелл убивали в разведении 1:1 большую част мышей за 4 - 5 суток. Остальные культуры пастерелл были менее патогенными, белых мышей убивали только на-тивные бульонные культуры в течении 6 - 7 суток, что характерно для Р. multocida серовара Д. Десятикратное разведение исследуемых культур микроорганизмов не вызывало гибель мышей.
В заключении можно отметить, что от 38 голов ягнят с хроническим респираторным синдромом мы выделили 14 культур Р. шиЬо^а. Полученные микроорганизмы представляли два серологических варианта. Десять выделенных культур мы отнесли к серовару А, а четыре культуры были типизированы как Р. шиЬо^а серовара Д.
При хроническом респираторном синдроме у ягнят частного хозяйства «Дед Щу-карь» выделено 14 культур Р. Multocida. При этом 10 полученных культур были нами отнесены к серологическому варианту А, оставшиеся 4 культуры были представлены сероваром Д. Отличия биохимических свойств и вирулентность полученных культур пастерелл совпадают с их серовариантной принадлежностью.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях.- Л. : Медгиз, 1962. - 178с.
2. 2. Геведзе В.И. Пастереллез крупного рогатого. 5.
- Минск, Урожай, 1989. - 135с.
3. 3. Орлов Ф.М. Общие микробиологические методы исследования. - М.., Сельхозиздат, 6. 1963.- 567с.
4. 4. Определитель бактерий Берджи. В 2-х т. Т.1: Пер. с анг./Под ред. Дж. Хоула. - М.: Мир, 1997.
- 289 с.
5. Руководство по микробиологии и иммунологии / Н.М. Колычев и др. - Новосибирск: Арта, 2010. - 256 с.
6. Эпизоотология. Под ред. Проф.Р.Ф. Сосова. 2-е, испр. и доп. М., Колос, 1974. - 536с.
ОСОБЕННОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КУЛЬТУР P. MULTOCIDA ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ АСТРАХАНСКОЙ ОБЛАСТИ
Полковниченко А.П., Полковниченко П.А., Воробьев Д.В., Воробьев В.И.
Резюме
Пастереллез (Pasteurellosis) — геморрагическая септицемия — инфекционная болезнь многих видов млекопитающих и птиц, характеризующаяся при остром течении симптомами септицемии, при подостром и хроническом — преимущественным поражением легких. Пастереллез является актуальной проблемой для современного овцеводства. Пастереллез широко распространен во всех странах мира. Обычно он отмечается спорадически и протекает хронически, но в условиях, способствующих его распространению, проявляется как эпизоотия. Заболевание характеризуется высокой летальностью, от 10 до 80 %. В небольших овцеводческих хозяйствах, где используется замкнутая система воспроизводства животных, распространена хроническая форма болезни, которая характеризуется преимущественным поражением респираторного тракта и сопровождается гибелью животных и снижением их продуктивности. Значительное количество ягнят бракуется при бонитировке. Данное заболевание является большой проблемой овцеводства Астраханской области, при этом оно недостаточно изучено применительно к условиям региона. В данной статье описаны особенности биологических свойств культур P. multocida, которые были выделены от больных ягнят с преимущественным поражением респираторного тракта в условия небольшого фермерского хозяйства Астраханской области. Установлено, что среди овцепоголовья превалирует хроническое течение заболевания. В ходе исследования было выделено 14 культур пастерелл с их типизацией, используя гиалуронидазу стафилококка. Установлено, что выделенные микроорганизмы представляют два серологических варианта. Всего выделено 14 культур пастерелл, десять из которых были отнесены в сероварианту А, а четыре культуры были типизированы как P. multo-cida серовара Д. Отличия биохимических свойств и вирулентность полученных культур пастерелл совпадают с их серовариантной принадлежностью.
ESPECIALLY THE BIOLOGICAL PROPERTIES OF CULTURES OF P. MULTOCIDA ISOLATED FROM ANIMALS IN THE CONDITIONS OF ASTRAKHAN REGION
Polkovnichenko A.P., Polkovnichenko P.A., Vorob'ev D.V., Vorob'ev V.I.
Summary
Pasteurellosis (Pasteurellosis) - hemorrhagic septicemia is an infectious disease of many species of mammals and birds, characterized by acute symptoms of septicemia, with subacute and chronic - predominant lung involvement. Pasterella is an actual problem for modern sheep breeding. Pasteurellosis is widespread in all countries of the world. Usually it is noted sporadically and proceeds chronically, but in conditions conducive to its spreading, it manifests as an epizootic. The disease is characterized by high lethality, from 10 to 80%. In small sheep farms, where a closed system of reproduction of animals is used, the chronic form of the disease is widespread, which is characterized by a primary lesion of the respiratory tract and is accompanied by the death of animals and a decrease in their productivity. A significant number of lambs are rejected at a bonitization. This disease is a big problem of sheep breeding in the Astrakhan region, and it has not been sufficiently studied in relation to the conditions of the region. This article describes the features of the biological properties of P. Multocida cultures, which were isolated from lambs with primary lesions of the respiratory tract in conditions of a small farm in the Astrakhan region. It was found that chronic disease prevails among the sheep head. In the study, 14 cultures of pasterel were
isolated with their typing using staphylococcal hyaluronidase. It was established that the isolated microorganisms represent two serological variants. A total of 14 pasterel cultures were isolated, ten of which were assigned to serovariant A, and four cultures were typified as P. Multocida serovar D. Differences in the biochemical properties and virulence of the resulting pasteurell cultures coincide with their serovari-ant affiliation.
УДК 619:591.111.057:636.92
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ПРЕПАРАТА «ЯНТОВЕТ» НА БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЕПАТИТЕ КРОЛИКОВ
Пугатина А.Е. - аспирант, Грачева О.А. - к.в.н., доцент ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: токсический гепатит, кролики, печень, янтарная кислота, общий белок, глюкоза, холестерин
Key words: toxic gepatitis, rabbits, liver, succinic acid, total protein, glucose, cholesterol
В последнее время ведется активный поиск средств, повышающих устойчивость печени к патологическим воздействиям, усиливающих ее обезвреживающие функции путем повышения активности ее ферментных систем, а также способствующих восстановлению ее функций при различных повреждениях. Гепатопротекторный эффект в той или иной степени могут оказывать различные фармакологические средства, улучшающие метаболические процессы в организме, в том числе витамины, средства, ингибирующие перекисное окисление липидов, а также обладающие антигипоксической активностью. Показаниями для назначения антигипоксан-тов, в частности янтарной кислоты, в комплексной терапии больных с гепатитами служат наличие цитолитического синдрома, проявления мезенхимально-воспалительной реакции, недостаточности гепатоцитов, ферментативного и неферментативного звеньев системы антиоксидантной защиты, выраженность процессов липопероксидации [6,7,8,] .
Цель настоящих исследований - изучить влияние препарата, разработанного на кафедре терапии и клинической диагностики с рентгенологией ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ, содержащего янтарную кислоту и органическое соединение фосфора, на функциональное состояние печени на модели экспериментального гепатита кроликов [4].
Материалы и методы исследований. В качестве объекта для моделирования токсического поражения печени использовались кролики весом 2,5 -2,7 кг в возрасте 3 месяцев породы Белый великан. Животные содержались в условиях вивария с естественным световым режимом на стандартной диете [ГОСТ Р 50258-92], с соблюдением «Евро-
пейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» [5] и правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ.
Моделирование острого поражения печени проводили путем внутрибрюшинного введения 50 % раствора СС14 (тетрахлорме-тан) на оливковом масле из расчета 1 мл на кг массы тела два раза в неделю. Перед началом эксперимента у кроликов проводился гематологический анализ крови. Далее в ходе эксперимента забор крови для анализа выполнялся на 5-е, 15-е, 30-е сутки.
Для изучения гепатозащитного действия препарата кроликов с экспериментальным токсическим поражением печени разделили на 3 группы по принципу аналогов: первая группа - не леченные, второй -начиная с 5 дня эксперимента трехкратно каждые 3 дня внутримышечно вводили исследуемый препарат в дозе 1 мл/животное, третьей - препарат вводили за час до токсического воздействия и параллельно с тет-рахлометаном по аналогичной второй группе схеме. Четвертая группа была интактной и служила контролем.
Функциональную оценку эффективности гепатопротекторного действия исследуемого препарата проводили по степени нормализации биохимических показателей, характеризующих состояние печени: в сыворотке крови определяли показатели белкового (содержание общего белка, альбуминов и глобулинов), углеводного (содержание глюкозы) и липидного (содержание триглицери-дов и холестерина) обменов на биохимическом анализаторе «ВюЛеш 8А» на базе лаборатории ветеринарного клинико-
