CC BY
31Б И О Л О Г И Ч Е С К И Е
НАУКИ
УДК 579:579.62
Т. О. Мазуркова
ОСНОВЫ ДИАГНОСТИКИ ЛЕПТОСПИРОЗА ЖИВОТНЫХ
Лептоспироз - острое инфекционное заболевание с природной очаговостью диких, домашних животных и человека, возбудителем которой служит бактерия рода Leptospira, входящего в семейство Spirochaeta-ceae. На сегодняшний день для постановки диагноза используются такие методы в серологии как: реакция микроагглютинации и иммунофер-ментный анализ.
Ключевые слова: лептоспироз, патогенез, реакция микроагглютинации.
В настоящий момент патогенных лептоспир L. interrogans известно более 300 сероваров, объединенных по степени антигенного родства в 25 серогрупп.
Резервуаром патогенных лептоспир в природе служат различные животные, особенно грызуны. Крысы при заражении не заболевают, но остаются пожизненными лептоспироносителями и выделяют лептоспир во внешнюю среду с 8 дня после заражения. Дополнительным резервуаром могут быть сельскохозяйственные и домашние животные, а также пушные звери клеточного содержания. Сроки лепто-спироносительства у разных животных представлен в таблице 1.
© Мазуркова Т.О., 2018.
ISSN 2223-4047
Вестник магистратуры. 2018. № 8(83)
Таблица 1
Срок лептоспироносительства у животных_
№ п/п Животные-лептоспироносители Срок лептоспироносительства
1 КРС до 6 месяцев
2 МРС до 9 месяцев
3 Свиньи до 2 лет
4 Собаки до 3 лет
5 Кошки до 4 месяцев
6 Лисицы до 1,5 лет
7 Крысы и другие грызуны пожизненно
На территории Российской Федерации возбудителями лептоспироза сельскохозяйственных животных и собак являются лептоспиры серогрупп Icterohaemorrhagiae, Canicola, Pomona, Tarassovi, Grip-potyphosa, Hebdomadis; в природных очагах в нашей стране установлена циркуляция серогрупп Icterohaemorrhagiae, Pomona, Grippotyphosa, Sejroe, Yavanica, Bataviae, Australis, Autumnalis.
Лептоспирозом болеют животные всех возрастов, но у молодняка болезнь протекает тяжелее. Благодаря многочисленным многолетним исследованиям определена выраженная видовая чувствительность животных к определенным серогруппам и сероварам L. interrogans. Основные возбудители заболевания у животных приведены в таблице 2.
Таблица 2
Основные возбудители лептоспироза животных_
№ п/п Основные восприимчивые животные Основные серогруппы лептоспир
1 Свиньи Pomona;
Tarassovi
Hebdomadis;
2 КРС Pomona;
Grippotyphosa; Tarassovi
3 МРС Grippotyphosa; Pomona; Tarassovi
4 Лошади Icterohaemorrhagiae; Grippotyphosa; Tarassovi; Pomona
5 Собаки Canicola;
Icterohaemorrhagiae
6 Серые крысы Icterohaemorrhagiae
При экспериментальном воспроизведении заболевания наиболее чувствительны золотистые хомячки, крольчата-сосуны, морские свинки до 10 дней, щенки собак, котята, белые и серые мыши и др.
Основные пути инфицирования животных лептоспирами: водный, контактный, алиментарный, внутриутробный и половой. Воротами инфекции являются повреждения кожи и слизистые оболочки полости рта, носа, глаз, ЖКТ и мочеполового тракта.
Лептоспироз может иметь несколько форм проявления, как острую (иногда молниеносную, при которой гибель животного наступает обычно через 12-24 ч), подострую и хроническую. Болезнь может проявляться характерными симптомами (типичная форма) и атипично. Инкубационный период длится 3 -20 дней.
Острое течение болезни наблюдается чаще у молодняка в возрасте до 1,5 года и длится 3-10 дней. Летальность достигает 50-70%.
Подострое течение лептоспироза длительнее и нередко заканчивается выздоровлением.
Хроническое течение лептоспироза встречается редко.
При атипичной (абортивной) форме животные выздоравливают через несколько дней.
Диагноз устанавливают на основании микроскопических, бактериологических, серологических и гистологических исследований с учетом эпизоотологических, эпидемиологических, клинических и пато-логоанатомических данных.
Сущностью бактериологического метода является обнаружение лептоспир в исследуемом материале путем микроскопии с конденсором «темного поля», иммунофлуоресцентным методом, выделение
культур лептоспир на питательных средах, постановка биологических проб на лабораторных животных, идентификация и дифференциация выделенных культур.
Для выделения культур материал засевают по 1-3 капли в 3-5 пробирок с питательной средой и инкубируют при температуре 28-30 °С в течение 3 месяцев. Наличие роста определяют при помощи тем-нопольной микроскопии. При обнаружении лептоспир делают пересев в 3-5 пробирок со свежей средой. Но выделить культуру не всегда удается.
Биологическая проба более чувствительный метод, чем культуральный. Его применяют для выделения и очистки патогенных лептоспир, определения их вирулентности и дифференциации от сапрофитных. Заражают золотистых хомячков 20-30-дневного возраста и крольчат-сосунов. На каждую пробу берут двух животных; на 4-5-й день убивают первого, на 14-16-й день - второго, если оно не погибло раньше. Из сердца, печени и почек убитых или павших животных проводят посевы. Сыворотку крови убитого животного исследуют в РМА через 14-16 дней. Положительная РМА в титрах 1:10 и более говорит о наличии патогенных лептоспир в исследуемом материале.
Серологический метод основывается на обнаружении специфических антител в крови животных реакцией микроагглютинации (РМА), которая считается «золотым стандартом», не только в России, но и за рубежом, а также на реакции иммуноадсорбции (РИА).
Для постановки РМА сыворотку вносят в агглютинационные пластины. После добавления антигенов пластины выдерживают при 30-37 °С в течение часа. Контроль - смесь культуры лептоспир с физиологическим раствором. Реакцию учитывают микроскопией в темном поле. Результаты реакции оценивают в крестах: 4 креста - агглютинированы 100% лептоспир; 3 креста - 75% лептоспир; 2 креста - 50% лептоспир; 1 крест - 25% лептоспир; отрицательная реакция - агглютинация отсутствует. РМА считают положительной, оцененную не менее чем на два креста, при отсутствии агглютинации в контроле. Диагноз устанавливают на основании полученных титров: для невакцинированных животных с 1:50, а для вакцинированных - с 1:100.
В РИА исследуют сыворотки животных, агглютинирующие лептоспиры нескольких серологических групп в различных титрах или имеющие наиболее высокий титр по отношению к лептоспирам, ранее не известным в качестве возбудителя лептоспироза у сельскохозяйственных животных. В процессе адсорбции лептоспиры - возбудители инфекции у данной особи, извлекают из сыворотки антитела к леп-тоспирам всех серологических групп, в то время как антитела к возбудителю болезни не адсорбируются из сыворотки гетерологичными типами лептоспир. Возбудителями инфекции являются лептоспиры той серогруппы, антигены которой извлекают из сыворотки антитела к лептоспирам всех серологических групп.
Гистологический метод (метод Левадити) основан на обнаружении лептоспир в гистосрезах им-прегнированных серебром.
Заболевшие животных подлежат изоляции и лечению. У выздоровевших животных формируется длительный и напряженный иммунитет, характеризующийся серовариантной специфичностью, что может приводить к реинфекциям.
Для активной иммунизации животных используют поливалентную депонированную вакцину ВГНКИ против лептоспироза, выпускаемую с двумя различными составами серогрупп.
Для пассивной иммунизации и лечения животных применяют поливалентную сыворотку, полученную из крови волов-продуцентов, гипериммунизированных культурами лептоспир. И сыворотка, и вакцина, не избавляют животных от лептоспироносительства и не профилактируют аборты у зараженных животных.
Лептоспироз заболевание глобальное и широко распространенное в мире, где проводят данные исследования. Лептоспирозом болеют более 8 видов домашних животных, 13 видов диких зверей и 40 видов грызунов и насекомоядных. Лептоспиры обнаружены у 160 видов млекопитающих. L. interrogans выделены также от земноводных, рыб, клещей, птиц и других представителей живой природы. Лепто-спирозом заражаются и люди.
Из-за широкого распространения в различных ландшафтно-географических зонах мира лептоспи-роз приносит колоссальный экономический ущерб и имеет социальное значение.
Следует отметить, что наиболее серьезным и значительным тормозом в профилактике и борьбе с лептоспирозом сельскохозяйственных животных является сложность и трудоемкость диагностики данного заболевания.
МАЗУРКОВА ТАТЬЯНА ОЛЕГОВНА - магистрант, Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина, Россия.
